Yöntem makalesi

Murine Modelinde Miyokard İnfarktüsünden Sonra MSC Yüklemeli Enjekte Edilebilir Hidrojellerin intramiyokardiyal Transplantasyonu

DOI:

10.3791/61752

⸱

20 Eylül 2020

 ,  ,  ,  ,  , 
1Cardiovascular Research Institute for Intractable Disease, College of Medicine, The Catholic University of Korea, 2Division of Cardiology, Department of Internal Medicine, Seoul St. Mary's Hospital, College of Medicine, The Catholic University of Korea, 3Division of Cardiology, Department of Internal Medicine, Uijeongbu St. Mary's Hospital, College of Medicine, The Catholic University of Korea

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kök hücre bazlı tedavi, miyokard enfarktüsünden sonra yaralı kalp dokularını onarmak için etkili bir strateji olarak ortaya çıkmıştır. Enzmatik olarak çapraz bağlanabilen jelatin hidrojelleri kullanarak kök hücre nakli için en uygun in vivo uygulamayı sağlıyoruz.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Postinfarkt kalp yetmezliğini önlemek için mevcut kardiyak kök hücre tedavilerinin karşılaştığı en önemli sorunlardan biri, yaralı miyokard içindeki nakledilen hücrelerin düşük tutma ve sağkalım oranlarıdır ve terapötik etkinliklerini sınırlar. Son zamanlarda, kök hücre tedavisini geliştirmek ve en üst düzeye çıkarmak için iskele biyomalzemelerinin kullanımı dikkat çekmektedir. Bu protokolün amacı, enjekte edilebilir hidroksifenil propiyonik asit (GH) hidrojelleri kullanarak kemik iliği türevi mezenkimal kök hücreleri (MSC' ler) nakletmek için basit ve basit bir teknik sunmaktır; hidrojeller, kardiyak doku mühendisliği uygulamaları için bir hücre dağıtım platformu olarak elverişlidir, çünkü çapraz in situ ve yüksek biyouyumluluk yeteneğine sahiptir. MSC yüklemeli GH hidrojellerini (MSC/hidrojeller) imal etmek ve hayatta kalmalarını ve çoğalmalarını üç boyutlu (3D) in vitro kültürde değerlendirmek için basit bir yöntem sunuyoruz. Ek olarak, farelerde MSC/hidrojellerin intramiyokardiyal nakli için bir teknik göstererek, sol ön alçalma (LAD) koroner arter ligasyonu ve daha sonra MSC/hidrojel nakli yoluyla miyokard infarktüsüne (MI) indükleyen cerrahi bir prosedürü tarif ediyoruz.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kardiyak kök hücre tedavisi miyokard onarımı ve yenilenmesi için potansiyel bir yaklaşım olarak ortaya çıkmıştır1,2. Hayvan modellerinde ve klinik çalışmalarda son olumlu sonuçlara rağmen, miyokard onarımı için kök hücre bazlı tedavi uygulaması, enfarktüslü kalp dokularında enjekte edilen hücrelerin düşük tutulması ve zayıf hayatta kalması nedeniyle sınırlıdır3,4. Sonuç olarak, enjekte edilebilir biyomalzemeler5, kardiyak yamalar6ve hücre sayfaları7dahil olmak üzere hücre bazlı doku mühendisliğinin kullanımı, konak miyokard içinde hücre tutulmasını ve entegrasyonunu iyileştirmek için yoğun bir şekilde çalışılmıştır.

Biyomühendislik kalp dokusu onarımına yönelik çeşitli potansiyel yaklaşımlar arasında, mezenkimal kök hücreler (MSC'ler), embriyonik kök hücreler (ESC'ler) ve indüklenmiş pluripotent kök hücreler (iPSC'ler) gibi uygun hücre tipleriyle birlikte enjekte edilebilir hidrojeller, hücreleri miyokard bölgelerine etkili bir şekilde ulaştırmak için cazip bir seçenektir8,9. Tanınmış bir doğal polimer olan jelatin, biyomedikal uygulamalarda kullanılan çok çeşitli biyomalzemelerle karşılaştırıldığında, büyük biyouyumluluğu, önemli ölçüde biyobozunurluğu ve azaltılmış immünojenikliği nedeniyle enjekte edilebilir bir matris olarak kullanılabilir. Jelatin bazlı enjekte edilebilir platformlar büyük bir potansiyele sahip olsa da, düşük mekanik sertliklerine ve fizyolojik ortamdaki kolay bozulmalarına bağlı olarak in vivo uygulanabilirlikleri sınırlı kalır.

Bu sınırlamaların üstesinden gelmek için, in vivo uygulamalar için hidroksifenil propiyonik asitten oluşan jelatin bazlı hidrojellerin yeni ve basit bir tasarımı önerilmiştir. Jelatin-hidroksifenil propiyonik asit (GH) konjugeleri bir enzim, yaban turpu peroksidaz (HRP) varlığında yerinde çapraz bağlanabilir ve daha sonra çeşitli ilaçları, biyomolekülleri veya hidrojel içindeki hücreleri kapsülleyebilir, bu da doku mühendisliği uygulamalarında büyük potansiyel olduğunu düşündürür10,11,12,13,14. Ek olarak, son zamanlarda kapsüllenmiş MSC'ler içeren GH hidrojellerinin terapötik etkilerini araştırdık ve bir murine modelinde MI'den sonra başarılı kardiyak onarım ve rejenerasyonda kullanımlarını gösterdik15. Bu protokolde, GH hidrojelleri içindeki MSC'lerin kapsüllenmesi ve in vitro üç boyutlu (3D) çoğalması için basit bir teknik açıklıyoruz. Ayrıca koroner arter ligasyonu ve MSC yüklemeli GH hidrojellerinin enfarktüslü kalbe intramiyokardiyal nakli yoluyla bir murine MI modeli oluşturmak için tasarlanmış cerrahi bir prosedür sunuyoruz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm hayvan araştırma prosedürleri, Kore Katolik Üniversitesi Tıp Fakültesi'nde Laboratuvar Hayvanları Refahı Yasası, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Rehberi ve Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından sağlanan Kemirgen Deneyleri Kılavuz ve Politikalarına uygun olarak sağlanmıştır.

1. MSC'lerin ve enjekte edilebilir jelatin hidrojellerinin hazırlanması

  1. 37 °C ve %5 CO2'de100 mm'lik bir kültür çanasında KÜLTÜR MSC'leri. MSC büyümesi% 80 izdihama ulaştığında, kabı DPBS ile iki kez yıkayın ve 3 dakika boyunca 37 °C'de 1 mL tripsin ikame ekleyin.
    NOT: MSC'ler geleneksel prosedürlerden sonra murine kemik iliğinden izole edildi16, Dulbecco'nun Modifiye Kartal Ortası'nda (DMEM) %10 fetal sığır serumu (FBS) ve %1 antibiyotik−antimykotik çözelti içeren kültürlendi ve bu çalışma için 7\u20129 geçişi arasında kullanıldı.
  2. 3 dakika boyunca 500 x g'da 9 mL kültür ortamı ve santrifüj ekleyin. Daha sonra, elde edilen süpernatant atın, hücreleri 1 mL PBS'de yeniden biriktirin ve hücre süspansiyonunun buzda tutulmasını sağlayın.
  3. 10 μL hücre süspansiyonu 10 μL Trypan mavisi ile seyreltin ve otomatik bir hücre sayacı kullanarak hücre konsantrasyonu elde edin.
  4. MSC'leri 1 x 107 hücre/mL yoğunlukta 1 mL'lik bir tüpe yeniden aktarın ve aktarın.
  5. PBS'de GH konjuge çözeltisinin %6,25'ini hazırlayın ve 2 şişeye ayırın. Ardından, GH çözümlerini 6 μg/mL HRP (GH çözeltisi A) veya H 2 O2'nin (GHçözümü B)%0,07 wt ile karıştırın.
    NOT: Yayınlanan protokollere göre jelatin-hidroksifenil propiyonik asit (GH) konjugeleri hazırlayın12,15.
    1. Sırasıyla GH konjuge çözümünün HRP (GH çözümü A) ve GH konjuge çözümünün H 2 O2'ye(GH çözümü B) 9:1 hacimsel oranını koruyun.
  6. MSC'leri GH çözeltisi A ile karıştırmadan önce, hücre süspansiyonu 1.000 x g'da kısa bir süre santrifüj edin ve elde eden süpernatantı dikkatlice emiş edin. Daha sonra, MSC'leri içeren peleti GH çözeltisi A ile karıştırın.

2. Yerinde MSC yükleme ve üç boyutlu in vitro kültürü

  1. GH çözümü A 'yı (MSC'leri içeren) ve GH çözümü B'yi çift şırıngın her iki tarafına yükleyin. Sekiz kuyulu bir hazne slaydı üzerine 5 x 10 6 hücre/mL'lik son yoğunlukta MSC'lerle kombineGH çözeltilerinin plakası 300 μL.
  2. In situ hidrojel oluşumu ve daha sonra enzymatic çapraz bağlama ile MSC kapsüllemeden sonra, % 10 FBS ve% 1 antibiyotik−antimycotic çözelti içeren 700 μL DMEM ekleyin.
  3. Slaydı 37 °C ve %5 CO2'de kuluçkaya yatırın ve kültür ortamını her 2\u20123 günde bir değiştirin.

3. GH hidrojelleri içindeki MSC'lerin in vitro çoğalması ve hayatta kalmasının onaylanması

  1. GH hidrojelleri içinde 3D kültürlü MSC'lerin uygulanabilirliğini belirlemek için, önceden belirlenmiş kuluçka süresinden sonra canlı / ölü hücre boyama tahlilini kullanın.
  2. GH hidrojellerinde kapsüllenmiş MSC'lerin 3, 5, 7 veya 14 gün boyunca inkübasyonundan sonra, ortamı aspire edin ve kuyuyu PBS ile iki kez yıkayın.
  3. 10 mL DPBS'de 5 μL kalsein ve 20 μL ethidyum homodimer-1 (EthD-1) içeren bir boyama çözeltisi hazırlayın.
  4. Kuyuya 200 μL boyama çözeltisi ekleyin ve oda sıcaklığında karanlıkta 30 dakika kuluçkaya yatırın.
  5. Boyama çözeltisini epire edin ve kuyuyu PBS ile iki kez yıkayın.
  6. Odayı slayttan dikkatlice ayırın ve GH hidrojellerinin üzerine tam bir kapak yerleştirin. Kapsüllenmiş MSC'lerin çoğalma derecesini ve morfolojik değişikliklerini görselleştirmek için konfokal mikroskopi kullanın.
    NOT: Floresan görüntüler 200x büyütme altında elde edildi ve calcein için 470/540 nm ve EthD-1 için 516/607 nm uyarılma / emisyon dalga boylarında görüntülendi.

4. Farelerde miyokard enfarktüsü indüksiyonu

  1. 7 haftalık erkek C57BL/6 fareleri (20\u201222 g) salin içinde Zoletil (30 mg/kg) ve Rompun (10 mg/kg) karışımının intraperitoneal enjeksiyonu ile uyuşturun.
  2. Ameliyattan önce, epilasyon kremi kullanarak fare göğsünü depilate edin ve cildi iyotla sterilize edin.
  3. Fareyi bir ameliyat masasına yerleştirin ve mekanik havalandırma yoluyla ek oksijen sağlamak için nefes borusuna bir kateter takarak entübe edin.
  4. Cerrahi makas kullanarak cildi hafifçe kesin ve ardından mikro makasla interkostal kaslara nüfuz edin. Açık göğüs boşluğunu korumak için 5-0 ipek dikiş kullanarak 2. ve 3. sol kaburgaları ayırın.
  5. Sol ön alçalı (LAD) koroner arteri 8-0'lık bir iğne tutucu kullanarak dikkatlice lige edin polipropilen dikiş ve elektrokoter kullanarak dikişi kesin.
  6. Ön sol ventrikül duvarında hemen bir renk değişikliği gözlemleyin.

5. MSC yüklü GH hidrojellerinin intramiyokardiyal nakli

  1. LAD ligasyonu ile miyokard enfarktüsüne indükledikten sonra, 26G iğne ile donatılmış çift şırınga kullanarak enfarktüs sınır bölgesindeki iki farklı noktaya (toplam: 2 x10 5 MSC/20 μL) 10 μL MSC yüklemeli GH çözeltisi enjekte edin.
    1. Adım 1'de açıklanan prosedürü izleyerek, MSC yüklemeli GH çözümlerini hazırlayın ve çift şırınna aktarın.
      NOT: MSC yüklemeli GH hidrojellerinin enfarktüs alanı içindeki entrikalarını değerlendirmek için, MSC'ler ve GH konjugeleri sırasıyla PHK26 ve floresan izotiyosiyanat (FITC) ile önceden etiketlenmiştir.
  2. Açılan göğüs boşluğunu geri yükleyin ve 5-0 dikiş kullanarak kasları ve cildi kapatın.
    NOT: Göğüs kapatmadan önce kateter şırınnası kullanarak havayı çıkarın.
  3. Trakeal tüpü çıkarın ve kurtarma sırasında fareyi kızılötesi lambanın altındaki bir kafese yerleştirin.
  4. Ameliyat sonrası analjezi için, en az 72 saat boyunca deri altı Ketoprofen enjeksiyonları (günde 5 mg / kg) verin. Tüm fareler, yeterli ağrı tedavisinin yanı sıra cerrahi işlemlerden sonra uygun iyileşmeyi sağlamak için uygun bir süre için yakından izlenmelidir.

6. Ekokardiyografi

  1. Transplantasyondan dört hafta sonra, başlangıçta fareyi% 5 izofluran ile uyuşturun ve daha sonra izofluran konsantrasyonu% 1'e ayarlayın.
  2. Epilasyon kremi kullanarak göğsünü depilate edin ve fareyi bir ısıtma yastığına yerleştirin. Göğüse ultrason dönüştürücü jel uygulayın.
  3. İki boyutlu parasternal kısa eksen görünümleri elde edin ve papiller kas seviyesinde M modu izlemeleri kaydedin.
    NOT: Sol parasternal çizgiye doğrusal bir dizi dönüştürücü (7\u201215 MHz) yerleştirin ve anatomik yapıları görüntüleyin.
  4. Kardiyak duvar kalınlığı, oda boyutu ve fraksiyonel kısaltma elde etmek için LVAW, LVID ve LVPW için karşılık gelen çizgileri ölçün.
    NOT: Aynı anatomik konumda doğru değerlendirmeyi sağlamak için papiller kas seviyesinde ejeksiyon fraksiyonu (EF), fraksiyonel kısaltma (FS) ve son sistolik hacim (ESV) dahil olmak üzere kardiyak fonksiyonu karşılaştırın.

7. Histolojik değerlendirme

  1. MSC yüklemeli GH hidrojellerinin enfarktüslü kalbe naklinden sonra önceden belirlenmiş zamanda, fareyi bir CO2 odasında ötenazi yapın ve histolojik analiz için kalbi toplayın15.
  2. Hematoksilin ve eozin (H&E) ve Masson'un üç renkli (MT) lekeleri için, parçalanmış kalp dokularını% 4 paraformaldehitte (PFA) sabitlenin ve parafin içine gömün. Daha sonra, parafin gömülü kalp bloklarını bir mikrotom kullanarak 4 μm seri bölümlere kesin ve bölümleri standart protokollere göre MT lekesi ile lekele17.
  3. Slayt tarayıcısında 20x büyütme ile görüntü alın ve tedavi gruplarının enfarktüs boyutunu hesaplayın.
    Enfarktüs boyutu (%) = toplam enfarktüs çevresi / toplam LV çevresi x 100
  4. Orta çizgi uzunluğu ölçümüne göre her iki çevreyi de hesaplayın. LV orta hat çevreleri için endokardiyal ve epikardiyal yüzeyler arasındaki merkez çizgisi uzunluklarını ölçün. Orta hat enfarktüs çevreleri için, miyokard18'intüm kalınlığının% 50'sinden fazlası dahil olmak üzere enfarktüs uzunluklarını ölçün.
    NOT: Tüm görüntü analizleri ImageJ yazılımı kullanılarak gerçek gerçekleştirildi.
  5. Papiller kas seviyelerinde yara izinin duvar kalınlığını ölçün.
  6. Kollajen alanının fraksiyonunu hesaplayın.
    Kollajen alanı (%) = interstisyel fibrozis/miyosit alanının toplam alanı x 100

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

MsC'leri enfarktüslü miyokardlara etkili bir şekilde ulaştırmak için, Şekil 1'de açıklanan MSC yüklemeli yerinde çapraz bağlanabilir hidrojeller bu protokolde kullanılmıştır. In vivo transplantasyondan önce, GH hidrojellerinde MSC'lerin çoğalması ve hayatta kalması 3D in vitro canlı / ölü hücre boyama tahlili ile doğrulandı (canlı: yeşil; ölü: kırmızı). Şekil 2'degösterildiği gibi, temsili görüntüler GH hidrojelleri içindeki dallı ağları gösteren yeterli MSC çoğ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Enjekte edilebilir GH hidrojelleri, çeşitli terapötik ajanları yerinde homojen bir şekilde dahil etme yetenekleri nedeniyle in vivo uygulamalar için büyük bir potansiyele sahiptir. Ayrıca, fiziksel ve biyokimyasal özellikleri hastalığa bağlı gereksinimlere göre kolayca manipüle edilebilir. Bu bakımdan, enjekte edilebilir hidrojeller, yaralı kalp19,20'dezayıf sağkalım ve hücre tutulması (yani, 24 saat içinde % 10) tarafından engellenen mevcut kardiyak kök hücre te...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların bu eserle beyan edecekleri bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu araştırma, Eğitim Bakanlığı (NRF-2018R1D1A1A02049346) tarafından finanse edilen Kore Ulusal Araştırma Vakfı (NRF) aracılığıyla Temel Bilim Araştırma Programı tarafından desteklenmektedir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
% 4 paraformaldehit (PFA)IntronIBS-BP031-2
5-0 ipek sütürAILEESK534
8-0 polipropilen sütürETHICONM8732H
8 oyuklu odacıklı sürgüNunc LAB-TEK154534
Angiocath Plus (22GA) kateterBD Angiocath PlusREF382423
Antibiyotik-antimiyokotikGibco15240-062
SantrifüjGYROGEN1582MGR
Konfokal mikroskopZeissLSM 510
Kapak astarıMARIENFELD101242
Deluxe Yüksek Sıcaklık Koter kitiBovieQTY1
DMEMGibco11995-065
DPBSGibco14040-133
Çift şırınga
EOSINSIGMA-ALDRICH
Etanol EMSUREK49350783 739
FBSGibco16000-044
Fechtner konjonktiva forseps titanyumDÜNYA HASSASİYET CİHAZLARIWP1820
Floresein izotiyosiyanat izomeri I (FITC)SIGMA-ALDRICHF7250
ForcepHEBUHB0458
Epilasyon kremiIldong İlaç
Isıtma yastığıÇalma50300Homeotermik Battaniye Sistemi
5030150300 (10 X 12.5cm)
HematoksilenSIGMA-ALDRICH için Yedek Isıtma YastığıHHS80
Yaban turpu peroksit (HRP; 250-330 U / mg)SIGMA-ALDRICHP8375
Hidrojen peroksit (H < alt > 2 < / alt > O < alt > 2 < / alt > ağırlıkça ><% 30 < / > O)SIGMA-ALDRICH216763
İyotYeşili İlaç
CANLI / ÖLÜ hücre boyama kitiThermo FisherR37601
Mekanik ventilatörHarvard Aparatı
Mikro santrifüjHANILMikro 12
Mikro iğne tutucuKASCO37-1452
Mikro makasHEBUHB7381
MikroskopOLYMPUSSZ61
MT boyama kitiSIGMA-ALDRICHHT1079-1SETWeigert & Öğr. S demir hematoksilen çözeltisi
HT15-1KTTrikrom Leke (Masson) Kiti
ParafinLK LABKOREAH06-660-107
PBS tamponuGibco10010-023
PHK26 boyama kitiSIGMA-ALDRICHMINI26
Slayt tarayıcıLeicaSCN400
Cerrahi makasHEBUHB7454
Cerrahi bant3M micopore1530-1
Doku kasetiScilab KoreCas3003
Dönüştürücü jelSUNGHEUNGSH102
Alabalık-Barrakör iğne tutucu kavisliKASCO50-3710c
Ultrason sistemiPhilipsAffiniti 50
KsilenJUNSEI25175-0430
HT110116

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jhund, P. S., McMurray, J. J. Heart failure after acute myocardial infarction: a lost battle in the war on heart failure. Circulation. 118 (20), 2019-2021 (2008).
  2. Cahill, T. J., Kharbanda, R. K. Heart failure after myocardial infarction in the era of primary percutaneous coronary intervention: Mechanisms, incidence and identification of patients at risk. World Journal of Cardiology. 9 (5), 407-415 (2017).
  3. Cambria, E., et al. Translational cardiac stem cell therapy: advancing from first-generation to next-generation cell types. npj Regenerative Medicine. 2, 17(2017).
  4. Lemcke, H., Voronina, N., Steinhoff, G., David, R. Recent Progress in Stem Cell Modification for Cardiac Regeneration. Stem Cells International. 2018, 1909346(2018).
  5. Alagarsamy, K. N., Yan, W., Srivastava, A., Desiderio, V., Dhingra, S. Application of injectable hydrogels for cardiac stem cell therapy and tissue engineering. Reviews in Cardiovascular Medicine. 20 (4), 221-230 (2019).
  6. Gaetani, R., et al. Epicardial application of cardiac progenitor cells in a 3D-printed gelatin/hyaluronic acid patch preserves cardiac function after myocardial infarction. Biomaterials. 61, 339-348 (2015).
  7. Gao, L., et al. Myocardial Tissue Engineering With Cells Derived From Human-Induced Pluripotent Stem Cells and a Native-Like, High-Resolution, 3-Dimensionally Printed Scaffold. Circualtion Research. 120 (8), 1318-1325 (2017).
  8. Hasan, A., et al. Injectable Hydrogels for Cardiac Tissue Repair after Myocardial Infarction. Advanced Science. 2 (11), 1500122(2015).
  9. Wu, R., Hu, X., Wang, J. Concise Review: Optimized Strategies for Stem Cell-Based Therapy in Myocardial Repair: Clinical Translatability and Potential Limitation. Stem Cells. 36 (4), 482-500 (2018).
  10. Lee, Y., et al. In situ forming gelatin-based tissue adhesives and their phenolic content-driven properties. Journal of Materials Chemistry B. 1 (18), 2407-2414 (2013).
  11. Lee, Y., Bae, J. W., Lee, J. W., Suh, W., Park, K. D. Enzyme-catalyzed in situ forming gelatin hydrogels as bioactive wound dressings: effects of fibroblast delivery on wound healing efficacy. Journal of Materials Chemistry B. 2 (44), 7712-7718 (2014).
  12. Lee, S. H., et al. In situ Crosslinkable Gelatin Hydrogels for Vasculogenic Induction and Delivery of Mesenchymal Stem Cells. Advanced Functional Materials. 24 (43), 6771-6781 (2014).
  13. Jung, B. K., et al. A hydrogel matrix prolongs persistence and promotes specific localization of an oncolytic adenovirus in a tumor by restricting nonspecific shedding and an antiviral immune response. Biomaterials. 147, 26-38 (2017).
  14. Kim, G., et al. Tonsil-derived mesenchymal stem cell-embedded in situ crosslinkable gelatin hydrogel therapy recovers postmenopausal osteoporosis through bone regeneration. PLoS One. 13 (7), 0200111(2018).
  15. Kim, C. W., et al. MSC-Encapsulating in situ Cross-Linkable Gelatin Hydrogels To Promote Myocardial Repair. ACS Applied Bio Materials. 3 (3), 1646-1655 (2020).
  16. Meirelles Lda, S., Nardi, N. B. Murine marrow-derived mesenchymal stem cell: isolation, in vitro expansion, and characterization. Br J Haematol. 123 (4), 702-711 (2003).
  17. Ojha, N., et al. Characterization of the structural and functional changes in the myocardium following focal ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 294 (6), 2435-2443 (2008).
  18. Takagawa, J., et al. Myocardial infarct size measurement in the mouse chronic infarction model: comparison of area- and length-based approaches. Journal of Applied Physiology. 102 (6), 2104-2111 (2007).
  19. Terrovitis, J., et al. Noninvasive Quantification and Optimization of Acute Cell Retention by In vivo Positron Emission Tomography After Intramyocardial Cardiac-Derived Stem Cell Delivery. Journal of the American College of Cardiology. 54 (17), 1619-1626 (2009).
  20. Dib, N., Khawaja, H., Varner, S., McCarthy, M., Campbell, A. Cell Therapy for Cardiovascular Disease: A Comparison of Methods of Delivery. Journal of Cardiovascular Translational Research. 4 (2), 177-181 (2011).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

MSC HidrojelleriKemik li i MSC leriHidrojel apraz Ba lanmasH cre Sa kal m AnaliziEkokardiyografi AnaliziHistolojik Analiz

İlgili makaleler