Yüksek çözünürlüklü ultrason, hamilelik durumunu, gebelik yaşını ve gebelik kayıplarını belirleyerek zamanlanmış hamile fareler gerektiren deneyleri kolaylaştırmaya yardımcı olabilir. Burada sunulan, fare gebeliklerini ve hamileliği taklit edebilecek potansiyel tuzakları (görüntü yapıtları) değerlendirme yöntemlerini gösteren bir protokoldür.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Farem Hamile mi? Yüksek Frekanslı Ultrason Değerlendirmesi
Bu makalede
Özet
Özet
Fare, birçok insan hastalığı ve biyolojik süreç için tercih edilmiş memeli hayvan modelidir. Gelişimsel biyoloji genellikle çeşitli zaman noktalarında gelişen süreçleri belirlemek için aşamalı hamile fareler gerektirir. Ayrıca, model farelerin optimal ve verimli üremesi, zamanlanmış gebeliklerin değerlendirilmesini gerektirir. En yaygın olarak, fareler bir gecede çiftleşir ve vajinal bir fişin varlığı belirlenir; ancak, bu tekniğin pozitif tahmin değeri yetersizdir ve farenin gerçekten hamile olup olmadığını bilmek için beklemek gerekir. Yüksek çözünürlüklü ultrason biyomikroskop görüntüleme için etkili ve verimli bir araçtır: 1) Bir farenin hamile olup olmadığı; 2) Fare hangi gebelik aşamasına ulaştı; ve 3) rahim içi kayıpların olup olmadığı. Embriyolara ve fetüslere ek olarak, araştırmacı bunları gravid uterusla karıştırmamak için karın boşluğundaki ortak eserleri de tanımalıdır. Bu makalede, açıklayıcı örneklerle birlikte görüntüleme için bir protokol sağlanabilir.
Giriş
Fare, birçok insan hastalığı ve biyolojik süreçler için tercih edilen memeli modelidir1,2,3,4. Gelişimsel biyoloji alanındaki araştırmalar genellikle çeşitli zaman noktalarında gelişen süreçleri belirlemek için aşamalı-hamile fareler gerektirir5,6,7,8. Ayrıca, model farelerin optimal ve etkili üremesi, özellikle araştırmacılar bir gen mutasyonunun gelişim üzerindeki etkilerini incelerken, zamanlanmış gebeliklerin d....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu protokoldeki tüm adımlar, Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından yayınlanan Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'nu takip eder ve New York Üniversitesi Grossman Tıp Fakültesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. Zamanlanmış gebelikler için farelerin çiftleşmesi
- Bir kafesteki uygun dişi fareyi (genellikle bir heterozygote) gece çiftleşme için uygun erkek fare (genellikle bir heterozygote) ile eşleştirin.
- Ertesi sabah fareleri ayırın. Alternatif olarak, dişi ve erkek fareleri sürekli çiftleşir, böylece hamilelik şansını artırır.
NOT: Bununla birlikte, doğru zamanlanm....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bu protokol, bir araştırmacının erken aşamalar da dahil olmak üzere bir farenin hamile olup olmadığını güvenle belirlemesine ve hamile barajını feda etmeye gerek kalmadan doğum öncesi embriyonik veya fetal kayıpların olup olmadığını belirlemesine izin verecektir. Bu protokol özellikle genetik olarak tasarlanmış fareleri yetiştirirken yararlıdır; tipik olarak, homozigot yavrular elde etmek için heterozipöz x heterozipöz haçlar, doğum öncesi ölümcüllüğe neden olan uygun gelişimin başarısız olmasına yol açar.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Görüntülemenin en önemli ilk adımı vajinayı tanımlamak ve daha sonra rahim boynuzunun sola ve sağa çatallanmasını belirlemektir. Her rahim boynuzu takip ederek, görüntüleyicinin bağırsak döngülerini uterus olarak yanlış tanımlama olasılığı daha düşüktür. Ayrıca, bağırsak görünümündeki varyasyonları anlamak (dışkı maddesi olan / olmayan) bunları uterustan ayırt etmek önemlidir; bazen, bağırsak halkalarındaki dışkı "topları" gravid (hamile) uterusu taklit edebilir. Diğer yazarlar gebelik tanısını ve fare embriyonik gelişim.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.
Teşekkürler
hiç kimse.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Tüy dökücü krem | |||
| Etanol, % | |||
| Kürk makası | |||
| Gazlı bez veya KimWipes | |||
| İzofluran | |||
| Tıbbi oksijen (isteğe bağlı) | |||
| Tıbbi bant | |||
| Fare görüntüleme sistemi (anestezi kurulumu ve görüntüleme platformu dahil) | Fujifilm Visual Sonics | Çeşitli | 40 MHz merkez frekanslı ultrason dönüştürücü probu olan herhangi |
| bir sistem Jiletli (emniyetli tıraş bıçağı değil) | |||
| Tartı (fareyi tartmak için) | |||
| Ultrason jeli |
Kaynaklar
- Bogue, M. A., et al. Mouse Phenome Database: an integrative database and analysis suite for curated empirical phenotype data from laboratory mice. Nucleic Acids Research. 46, 843-850 (2018).
- Ito, R., Takahashi, T., Ito, M.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
