Ağır yumurtalık disfonksiyonu olan hastalar için yumurtalık foliküllerinin ilaçsız in vitro aktivasyonu (IVA) için laboratuvar prosedürlerinin ayrıntılarını sunuyoruz. Bu yöntem yumurtalık hiperstimülasyonu başına alınabilir oosit sayısını artırabilir ve bu hastalar için doğurganlık korumasına fayda sağlayabilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Şiddetli Yumurtalık Disfonksiyonu Olan Hastalarda Doğurganlığın Korunması
Bu makalede
Özet
Özet
Yumurtalık fonksiyonu yaşlanma sırasında ve karyotip anormalliği, otoimmün hastalıklar, kemoterapi ve radyasyon terapileri ve yumurtalık ameliyatları da dahil olmak üzere bazı patofizyolojik durumlarda giderek azalır. Şiddetli yumurtalık disfonksiyonu olan evli olmayan kadınlarda, doğurganlık koruması gelecekteki gebelikler için önemlidir. Her ne kadar oosit kriyoprezervasyonu doğurganlığın korunması için yerleşik bir yöntem olsa da, bu hastalar yumurtalık hiperstimülasyonundan sonra bile sadece sınırlı sayıda oosit koruyabilir ve gelecekteki gebeliği garanti etmek için yeterli oosit sağlamak için tekrarlanan stimülasyonlara yol açabilir. Bu sorunu çözmek için, yakın zamanda yumurtalık foliküllerinin erken evrelerini preantral folikül aşamasına kadar geliştirmemizi sağlayan ilaçsız bir in vitro aktivasyon (IVA) prosedürü geliştirdik. Bu preantral foliküller gonadotropin stimülasyonunun benzersiz protokolüne yanıt verebilir, bu da kriyoprezervasyon için yumurtalık stimülasyonu başına alınan oosit sayısının artmasına neden olur. İlaçsız IVA cerrahi yaklaşım ve yumurtalık stimülasyonundan oluşuyordu. Laparoskopik cerrahi altındaki hastalardan bir veya her iki yumurtalıktan korteksin bir kısmını çıkardık. Yumurtalık kortikal dokuları, Hippo sinyal yolunu bozmak ve erken evre foliküllerin gelişimini teşvik etmek için küçük küpler halinde kesildi. Bu küpler ortotropik olarak kalan yumurtalıklara ve her iki Fallop tüpünün serosasının altına aşılandı. İlaçsız IVA'nın cerrahi prosedürünü ve sonraki yumurtalık stimülasyon protokolünü zaten yayınladık, ancak burada ilaçsız IVA için gerekli laboratuvar yöntemlerinin ayrıntılarını sunuyoruz.
Giriş
Yumurtalık fonksiyonu yaşlanma sırasında ve karyotip anormalliği, otoimmün hastalıklar, kemoterapi ve radyasyon tedavileri ve yumurtalık ameliyatları gibi bazı patofizyolojik durumlar sırasında giderek azalır. Doğurganlığın korunması, gelecekteki gebelik potansiyellerini korumak için şiddetli yumurtalık disfonksiyonu olan evli olmayan kadınlar için en iyi seçeneklerden biridir. Doğurganlığın korunması için, şu anda çoğunlukla onko-doğurganlık alanında iki yöntem mevcuttur. Oosit kriyoprezervasyonu, doğurganlığın korunması için iyi kurulmuş bir prosedürdür ve birçok başarılı vaka bildirilmiştir1,2. Öte yandan, ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
İlaçsız IVA tedavisine kaydolan yumurtalık rezervi azalan her POR hastasından yazılı bilgilendirilmiş onam alındı. Bu çalışma Uluslararası Sağlık ve Refah Üniversitesi etik komitesi (No. 17-S-21) tarafından onaylanmıştır. Klinik çalışma UMIN000034464 numarası altında kaydedilmiş ve Dünya Tabipler Birliği Etik Kuralları (Helsinki Bildirgesi) uyarınca gerçekleştirilmiştir.
1. Yumurtalık korteksi ekstraksiyonu
- Yumurtalık korteksinin bir kısmını (10 x 10 mm, 2-3 mm kalınlık) daha önce açıklandığı gibi laparoskopik cerrahi ile genel anestezi altında bir veya her iki yumurtalıktan çıkarın19,
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
IVA yaklaşım15'inilk yayınında yumurtalık kortikal küplerini laparoskopik cerrahi altında aşılama bölgelerine tek tek naklettik (Şekil 1A). 100-150 yumurtalık küpü kullanıldığı için laparoskopik cerrahi altında doku nakli 3-4 saat sürdü. Ayrıca, aşılamadan önce bazı yumurtalık küpleri kaybedildi. Çünkü IVA canül bir seferde 20-30 küpü bir aşılama bölgesine aktarabiliyordu(Şekil 1B), ameliyat süresini 1-2 saate kısaltabiliyorduk. Ayrıca, I.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu yazıda, ilaçsız IVA için ayrıntılı bir laboratuvar protokolü gösterdik. İlaçsız IVA, ikincil folikül büyümesini teşvik etmek için yumurtalık rezervi azalan POR hastası için yeni bir kısırlık tedavisi yaklaşımıdır, yumurtalık stimülasyonundan sonra daha olgun oositler elde edilmesine ve başarılı gebelikte artmasına neden olur20. Yumurtalık rezervi azalan 15 POR hastasında, bu yaklaşım bir spontan gebelik elde etti, in vitro fertilizasyon-embriyo transferi, devam eden bir gebelik ile birlikte dör.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar çıkar çatışması olmadığını doğruluyorlar.
Teşekkürler
Tatsuji Ihana, Sachiyo Kurimoto, Kazuko Takahasih, Yuki Yoshizawa, Maho Arashi, Kentaro Fujita, Erina Kudo, Yuka Kurimoto ve Mayuko Wakatsuki'ye ilaçsız IVA prosedürünü desteklemiş oldukları için ve Prof. Aaron J.W. Hsueh'e (Stanford Üniversitesi Tıp Fakültesi, Stanford, CA) makalenin eleştirel okunması ve düzenlenmesi için teşekkür ederiz. Rebecca Truman ve Gregory Truman'a da İngilizce anlatım ekledikleri için teşekkür ederiz. Bu çalışma Japonya Bilimi Destekleme Derneği (JSPS), Bilimsel Araştırma B (19H03801) ve Zorlu Keşif Araştırmaları (18K19624) tarafından desteklendi.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 4.5 onz numune kabı | FALCON | 354013 | Diğer ürünler de uygun olabilir |
| 60mm çanak | FALCON | 351007 | Diğer ürünler de uygun olabilir |
| 50 x 50 cm steril örtü | HOGY Medical | SR-823 | Her türlü steril ürün de uygun olabilir |
| Tek kullanımlık pippete | FALCON | 357575 | Diğer ürünler de uygun olabilir |
| İnce makas, Kavisli | WPI | # 14224-G | Diğer ürünler de uygun olsa da, bu ürünleri kullanmanızı şiddetle tavsiye ederiz |
| Sıcak plaka | TOKAI HIT | TPiE-SP | Transplantasyondan önce yumurtalık dokusu içeren yemeklerin sıcaklığını korumak için ameliyathanede kullanın |
| İnsan Serumu Albümin Çözeltisi | Irvine Scientific | 9988 | Yumurtalık dokusunu işlemek için ortam |
| IVA kanülü | KITAZATO | 446030 IVA-6030E | Doku otogreftleme için özel kanül |
| KAI medikal Tek kullanımlık neşter | WPI | # 5 10-A | Diğer ürünler de uygun olsa da, bu ürünleri kullanmanızı şiddetle tavsiye ederiz |
| Mikro makas, Kavisli | WPI | #503364 | Diğer ürünler de uygun olsa da, bu ürünleri kullanmanızı şiddetle tavsiye ederiz |
| Modifiye HTF Orta-HEPES | Irvine Scientific | 90126 | Yumurtalık dokusunu işlemek için ortam |
| Steril gazlı bez | Osaki Medical | 15004 | Her türlü steril ürün de uygun olabilir |
| İsviçre Cımbızı, Kavisli Uçlar | KAI# | 504505 | Diğer ürünler de uygun olsa da, bu ürünleri kullanmanızı şiddetle tavsiye ederiz |
Kaynaklar
- Liang, T., Motan, T. Mature Oocyte Cryopreservation for Fertility Preservation. Advances in Experimental Medicine and Biology. 951, 155-161 (2016).
- Yoon, T. K., et al. Live births after vitrification of....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
