Bu makale, intranazal aşıların ve emziren tavşanlardan(Oryctolagus cuniculus)süt toplanmasının, dil bağışıklığını çeviriye uygun bir anne bağışıklama modelinde değerlendirmenin bir yolu olarak tanımlanmaktadır ve göstermektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Yeni Zelanda Beyaz Tavşanlarında Anne Bağışıklama Çalışmalarında İntranazal Bağışıklama ve Süt Toplama (Oryctolagus cuniculus)
Bu makalede
Özet
Özet
Plasentasyon ve insanlarla antikor transferinde benzerlikler nedeniyle, tavşanlar mükemmel bir anne bağışıklama modelidir. Bu araştırma modelinin ek avantajları üreme ve numune toplama kolaylığı, nispeten kısa gebelik süresi ve büyük çöp boyutlarıdır. Yaygın olarak değerlendirilen bağışıklama yolları deri altı, intramüsküler, intranazal ve intradermaldir. Bu bağışıklamalara verilen immünolojik yanıtların kronolojik olarak tespiti için nonterminal örnek toplama, hem barajlardan hem de kitlerden kan toplanması ve emzirmeden elde edilen sütü içerir. Bu yazıda, laboratuvarımızın Yeni Zelanda'da anne bağışıklama çalışmalarında kullandığı teknikleri göstereceğiz Beyaz tavşanlar (Oryctolagus cuniculus), intranazal bağışıklama ve süt toplama dahil.
Giriş
Anne bağışıklama ve antikor transferi çalışmaları, bağışıklık transferinin ilk yolu ve daha sonra yenidoğanlarda ve bebeklerde patojenlerden ve hastalıklardan korunma olduğu için birçok nedenden dolayı paha biçilmezdir. Maternal bağışıklama, bu hassas dönemde belirli patojenlerle ilişkili morbidite ve mortaliteyi azaltarak küresel düzeyde hem anne hem de bebek/çocuk sağlığını olumlu yönde etkileme potansiyeline sahiptir1. Bu stratejinin temel amacı, gebelik boyunca spesifik maternal antikor seviyelerini artırmaktır. Bu antikorlar daha sonra yenidoğan ve bebeğe, bağışıklık sistemleri zorluklara yeterince yanıt verebilecek kadar olgunlaşana kadar....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm prosedürler Duke Üniversitesi IACUC politikalarına uygun olarak onaylandı ve gerçekleştirildi.
NOT: İhtiyaç duyulan malzemeler Malzeme Tablosunda verilmiştir.
1. Tavşan Sedasyonu ve Anestezi
- Asepromazin intramüsküler (IM) 1 mg / kg dozda uygulayarak dişi tavşanı (cinsel olarak olgun; yaklaşık 5-30 aylık) yatıştırın. Hayvanın büyüklüğüne bağlı olarak, 25 G iğneli 1 veya 3 mL şırınga kullanın. Apolikal kaslar kas içi enjeksiyonun tercih edilen bölgesidir.
NOT: Asepromazin deri altı olarak da uygulanabilir, ancak daha hızlı hareket ettiği ve cilt lezyonlarının görülme sıklığını azal....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Tipik bir anne intranazal bağışıklama çalışması tasarımına genel bir bakış Şekil 1'de, bağışıklamalar, üreme, kindling, emzirme ve antikor transferini içeren bir şekilde tasvir edilir. Resimli olmasa da, temel ölçümler için ilk bağışıklamadan önce ve çalışmanın geri kalanı boyunca düzenli aralıklarla kan toplanmalıdır. Kan, hafif sedasyon ve topikal analjezik bir ajan (örneğin, lidokrin% 2.5 ve prilocaine% 2.5 krem) ile merkezi kulak atardamarı yoluyla kolayca elde edilir. Bu örneklerde anti.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Yukarıdaki protokolde açıklanmasa da, tavşanların başarılı bir şekilde yetiştirimesi bu anne modeli ve süt toplanmasına izin vermek için gereklidir. Tavşanlar, bir araştırma ortamında canlı kapakla kolayca yetiştirilir. Buck ile kendi kafeslerinde tutulursa bölgesel ve agresif olabileceği gibi, üreme için buck'ın kafesine aktarılması önerilir. Dişiler 15 dakika sonra alıcı değilse (ısırma veya seslendirmeden kaçma ile belirtildiği gibi), doe kendi kafesine geri yerleştirilmelidir. Tavşan yetiştiriciliği hakkında çevrimiç.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.
Teşekkürler
Yazarlar, Duke Üniversitesi Laboratuvar Hayvan Kaynakları Bölümü'nü ve hayvancılık ekibini hayvanlara sağladıkları yardım ve büyük bakım için kabul etmek istiyor. Ayrıca, yazarlar Makalenin ses ve video bölümleriyle ilgili yardımlarından dolayı Patoloji Bölümü bünyesindeki PhotoPath ekibini tanımak isterler. Bu çalışma Staats laboratuvarından isteğe bağlı araştırma fonları ile desteklendi.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Burun İçi Bağışıklama< / güçlü > | |||
| Anestezi Makinesi / Buharlaştırıcı | Veteriner Ekipman | 901807 | |
| Hipodermik İğne (25 g) | Terumo | 07-806-7584 | |
| İzofluran (250 mL Şişe) | Patterson Veteriner | 07-893-1389 | %2-4 |
| Luer Kilit Şırıngası (1 mL) | Air-Tite | 07-892-7410 | |
| Mukozal Aşı | N/A | N/A | Deneysel Aşı |
| Burun Konisi | McCulloch Medical | 07891-1097 | |
| Pipet Uçları | VWR | 53503-290 | |
| Pipetleyici | VWR | 89079-962 | |
| PromAce (Asepromazin maleat) | Boehringer Ingelheim | 07-893-5734 | 1mg/kg IM |
| Puralube Steril Oftalmik Merhem | Dechra | 07-888-2572 | |
| Süt Toplama | |||
| Alkol Hazırlama 2 katlı | Covidien | 07-839-8871 | |
| Anestezi Makinesi/Buharlaştırıcı | Veteriner Ekipmanları | 901807 | |
| Hipodermik İğneler (25 g) | Terumo | 07-806-7584 | |
| İzofluran (250 mL Şişe) | Patterson Veterinary | 07-893-1389 | 2-4% |
| Luer Kilit Şırınga (1 mL) | Air-Tite | 07-892-7410 | |
| Dokumasız Sünger (4x4) | Covidien | 07-891-5815 | |
| Burun Konisi | McCulloch Medical | 07891-1097 | |
| PromAce (Asepromazin Maleat) | Boehringer Ingelheim | 07-893-5734 | 1mg/kg IM |
| Puralube Steril Oftalmik Merhem | Dechra | 07-888-2572 | |
| Steril Konik Flakon (15 mL) | Falcon | 14-959-49B |
Kaynaklar
- Munoz, F. M. Current Challenges and Achievements in Maternal Immunization Research. Frontiers in Immunology. 9, 436(2018).
- Kachikis, A., Englund, J. A. Maternal immunization: Optimizing protection for the mother and infant. The Journal of Infect....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
Daha fazla makale keşfet
