Method Article

Üriner Biyobelirteç Araştırmaları için Toplama, İşleme ve Depolama Hususu

DOI:

10.3791/62453

⸱

October 21st, 2021

 , 
1Department of Pediatrics, University of Pittsburgh

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, idrar yolu enfeksiyonu biyobelirteç çalışmaları için idrar örneği toplama, işleme ve saklama ile ilgili hususları sağlamayı amaçlamaktadır.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İdrar yolu enfeksiyonlarının yeni belirteçleri olarak umut vaat eden birkaç idrar proteini vardır. Mevcut tanı yöntemlerine kıyasla daha fazla öngörücü doğruluğa sahip yeni bir biyobelirteçin tanımlanması, idrar yolu enfeksiyonu olan hastaları yönetme yeteneğini büyük ölçüde geliştirme potansiyeline sahiptir. Bununla birlikte, numune toplama, işleme ve depolama, biyobelirteç araştırmasının sonuçlarını potansiyel olarak etkileyebilir. Bu aşamaların her birinin biyobelirteç çalışmaları üzerindeki etkilerini anlamak, bu alandaki gelecekteki yüksek kaliteli araştırmaları bilgilendirmek ve bu alandaki diğer çalışmaları eleştirel olarak gözden geçirmek için gereklidir. Burada, çalışma, idrar örneği işlemenin her aşamasının etkilerine ilişkin literatürü gözden geçirmekte ve çeşitli durumların idrar proteinleri üzerindeki etkilerini bildirmektedir. Protokol, toplama tekniklerine, depolama süresi ve sıcaklığına, işleme tekniklerine, reaktiflerin kullanımına ve biyobelirteç stabilitesi üzerinde uzun süreli dondurmaya odaklanacaktır. Proteinlere odaklanacak, ancak biyobelirteç araştırmalarında kullanılabilecek diğer materyalleri kısaca tartışacaktır. Bunu yaparken, bu protokol gelecekteki araştırmacılara üriner biyobelirteç çalışmalarının tasarımına yardımcı olacak bir rehber sağlayacaktır.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İdrar yolu enfeksiyonları (İYE) hem çocuklarda hem de yetişkinlerde en sık görülen bakteriyel enfeksiyonlardan biridir1. Bazı popülasyonlarda İYE tanısı karmaşık olmayabilirken, nöropatik mesanesi olanlar gibi diğerlerinde daha karmaşık olabilir2. İYE'leri doğru bir şekilde teşhis etme yeteneği, gereksiz antibiyotik kullanımını azaltarak antibiyotik yönetim çabalarının iyileştirilmesine yardımcı olacak ve potansiyel olarak İYE'nin erken teşhisine yardımcı olacak ve böylece morbidite riskini azaltacaktır. İYE'lerin prevalansı göz önüne alındığında, bu yaygın enfeksiyonun yönetiminin iyile....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, kurumun insan araştırmaları etik komitesinin yönergelerini takip eder. Araştırma için biyolojik örneklerin toplanması ve kullanılmasından önce kurumsal inceleme kurulundan (IRB) onay alındığından emin olun.

1. Koleksiyon

  1. Steril bir numune kabında idrar örneği alın. Spesifik çalışma tasarımına dayalı olarak idrar örneğinin türüne ve ayrıca spesifik dahil etme ve dışlama kriterlerine karar verin. İYE çalışmaları için, perineal kontaminasyonu önlemek için temiz yakalama yöntemini veya kateterizasyonu kullanın.
  2. Temiz bir idrar örneği elde etmek için, katılımcılara periüretral ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Santrifüjlemenin NGAL seviyeleri üzerinde küçük bir etkisi oldu. -80 °C'de saklanan santrifüjlenmiş numuneler, santrifüjlenmemiş numunelere göre daha düşük NGAL seviyelerine sahipti (2.17 ng/mL ± 0.32 ng/mL, 2.77 ng/mL ± 0.21 ng/mL). Donma döngüleri, üçüncü donma-çözülme döngüsünden sonra NGAL seviyeleri üzerinde de bir etkiye sahipti. (Şekil 2). İncelenen koşullardan (santrifüjleme, donma-çözülme döngüleri ve depolama sıcaklığı), depolama sıcaklığı NGAL seviyeleri üzerinde en büyük etkiye s.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tutarlı ve tekrarlanabilir sonuçlar üretmenin önemi sadece bireysel çalışmaların başarısı ile sınırlı olmayıp, sonuçların literatür içinde daha iyi karşılaştırılmasını da sağlayacaktır9. Temel prosedür adımlarındaki çalışmalar arasındaki farklılıklar, biyobelirteç sinyallerini ve bunların yorumlanmasını etkileyebilecek geri dönüşü olmayan yanlılıklara neden olabilir ve bu da çeşitli çalışmalar arasındaki tutarsızlıklardan sorumlu olabilir10.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların hiçbirinin açıklanacak herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma için herhangi bir dış finansman sağlanmadı. Bu çalışmada verilerin elde edilmesi için kurumsal fonlar kullanılmıştır.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Borik asitSigma-AldrichB6768Hızlı işlenemeyen ve dondurulamayan numuneler için dikkate alınması gereken
Dondurucu kutularıFisher Scientific03-395-464
Mikrosantrifüj tüpleriThomas scientific1149X93
NGAL ELISA KitiR& D SystemsDLCN20Temsili sonuçlar oluşturmak için kullanılır
Pipet ve uçlarPipet boyutuna ve sıvı hacmine bağlıdır.
Sodyum azidSigma-AldrichS2002Hızlı işlenemeyen ve dondurulamayan numuneler için dikkate alınması gereken
İdrar toplama kaplarıThermo Scientific3122B03ORGDiğer çalışmalar için gerekmedikçe steril kaplar gerekli değildir

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Foxman, B. Epidemiology of urinary tract infections: Incidence, morbidity, and economic costs. American Journal of Medicine. 113, 1 SUPPL. 1 5-13 (2002).
  2. Forster, C. S., Pohl, H.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Urinary BiomarkersUrine Sample CollectionBiomarker StabilityUrinary Protein MarkersSample ProcessingSample StorageUrinary Tract InfectionsProtein StabilityCollection TechniquesBiomarker Research
Video Coming Soon

Related Articles