Burada şiddetli akut pankreatit fare modeli açıklanmıştır. Burada sunulan prosedür çok hızlı, basit ve erişilebilirdir, böylece akut pankreatitteki moleküler mekanizmaların ve farklı terapötik müdahalelerin uygun bir şekilde incelenmesine izin verir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Biliopankreatik Kanala Sodyum Taurocholate Retrograd Enjeksiyonu Kullanılarak Fare Şiddetli Akut Pankreatit Modelinin Kurulması
Bu makalede
Özet
Özet
Akut pankreatit (AP), özellikle şiddetli akut pankreatit (SAP) prevalansı her yıl genç yaş gruplarında artmaktadır. Ancak mevcut klinik uygulamada etkili tedavi eksikliği vardır. Transgenik ve nakavt suşlarının kolay erişilebilirliği ve in vivo değerlendirme için gereken minimum dozda ilaç sağlayan küçük boyutları ile AP araştırmaları için farelerde köklü bir deneysel model tercih edilir. Ayrıca, sodyum taurocholate (TC) yoluyla indüklenen SAP şu anda en yaygın kullanılan ve en iyi karakterize edilen modellerden biridir. Bu model AP sürecinde yeni tedaviler ve olası moleküler olaylar için araştırılmıştır. Burada, sodyum taurocholate ve basit bir ev yapımı mikrosyringe kullanarak bir AP fare modelinin neslini sunuyoruz. Ayrıca, sonraki histoloji ve serolojik testler için metodoloji de sağlıyoruz.
Giriş
Akut pankreatit (AP), ana pankreasın tıkanması ve daha sonra düktal distansiyon ve pankreas otodijsiyonunun anormal şekilde aktive edilen enzimleri tarafından engellenmesi ile karakterize pankreasın akut iltihabıdır. Klinik bulguları lokal veya sistemik inflamasyon, karın ağrısı ve serum amilaz yüksekliği1,2'dir. Şiddet sınıflandırmasına göre3, AP hafif, orta ve şiddetli formlarda ortaya çıkabilir ve bunların arasında şiddetli akut pankreatit (SAP), % 30'dan fazla ölüm oranı nedeniyle en endişe verici durumdur 4.. Amerika Birleşik Devletleri'nde AP, 200.000'den f....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvanları içeren tüm deneyler Soochow Üniversitesi Hayvan Etik Kurulu tarafından onaylandı. Tüm cerrahi işlemler tam anestezi altında yapıldı. Analjezikler, önceki literatürlere göre hastalığın doğal seyrine müdahaleyi önlemek için kullanılmamıştır28,29. Analjezi eksikliği için onay, Soochow Üniversitesi Hayvan Etik Kurulu tarafından da verildi.
1. Hazırlık
- Ameliyattan önce C57BL/6 vahşi tip fareyi 8-12 saat hızlı kullanın.
- %0,9 sodyum klorüre seyreltilmiş %5 (w/v) TC çözeltisi (93 mM) hazırlayın. Çözeltiyi 0,22 μm filtreden filtreleyin. <....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Yukarıdaki talimatları dikkatle izleyerek, yaklaşık 40 dakikalık ortalama bir ameliyat süresi elde ettik. Fareler hafif hareketsizdi ve operasyon sonrası sırasıyla 24 saat, 48 saat ve 72 saat'te yaklaşık 0.5-1.75 g, 0.85-1.85 g ve 0.5-4.73 g ağırlık kaybetmişti (Şekil 2).
Ameliyat tamamlandığından ameliyat sonrası 24 saate kadar, hastalık geliştikçe fareler aktif hale geldi ve yavaş yanıtlar ve eylemler gösterdi.
Kontrol ve SAP fareleri.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
TC kaynaklı SAP modeli mükemmel bir araştırma aracıdır. Bu çalışmada gösterildiği gibi, bu model belirli cihazlar kullanmadan genel laboratuvarlarda çok kolay bir şekilde gerçekleştirilir. Histoloji ve biyokimyasal analiz ile birlikte kullanıldığında, AP'yi indükleme ve değerlendirme için maliyet -(ucuz reaktifler) ve zaman kazandıran (24 saat aralığı) bir yaklaşım sağlar. TC konsantrasyonunun ayarlanması aynı zamanda hafif ve ılımlı AP üretme imkanı da sunar. Perides ve diğerleri ayrıca farelerde SAP'yi teşvik etmek içi.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Hiç kimse.
Teşekkürler
Aşağıdaki hibelerden gelen destek için minnettarız: NCRCH Çevirisel Araştırma Hibesi [2020WSA01], Suzhou Genç Alimler için Sağlık Komisyonu'ndan KJXW Bilimsel Hibesi [KJXW2020002], Suzhou Şehri Bilim ve Teknoloji Planı (SKY2021038 ve SKJY2021050), Jiangsu Yükseköğretim Kurumlarının Öncelikli Akademik Program Geliştirmesinden (PAPD) bir hibe ve Jiangsu Eyaleti Birincil Araştırma ve Sosyal Gelişim Planı (BE2018659).
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| % 0,5 iyodofor | Shanghai Likang Dezenfektan | 310102 | 4 mL / fare |
| % 0,9 sodyum klorür | Sinopharm Group Co., Ltd. | 10019318 | 0,8 mL/fare |
| %1 Pentobarbital sodyum | Sigma | P3761 | 0,2 -0,25 mL/fare |
| 25 μ L düz uçlu Mikrolitre şırınga | Gaoge, Şangay | A124019 | |
| % 4 Paraformaldehit | Beyotime, Nantong, Çin | P0099-500ml | |
| % 5 sodyum taurokolat (TC) | Aladdin | S100834-5g | 10 & mu; L/SAP fare |
| 6-0 Dişli iğneli steril naylon mikrosütür (1/2 daire) | Cheng-He | 20093 | |
| %75 alkol | Sinopharm Group Co., Ltd. | 10009218 | 4 mL/fare |
| 8-0 Dişli iğneli steril naylon mikrosütür (3/8 daire) | Cheng-He | 19064 | |
| ALT Aktivite Test Kiti | EPNK, Anhui, Çin | ALT0012 | |
| Amilaz Test Kiti | EPNK, Anhui, Çin | AMY0012 | |
| 12 mm çeneli açılı küçük bulldog kelepçesi (3 cm) | Cheng-He | HC-X022 | |
| kavak talaşı veya fare yatağı için parçalar | Beijing Vital River Laboratuvar Hayvanları Teknolojisi | VR03015 | |
| AST Aktivite Test Kiti | EPNK, Anhui, Çin | AST0012 | |
| Kan Üre Azotu (BUN) Test Kiti | EPNK, Anhui, Çin | BUN0011 | |
| C57BL/6 fare | Beijing Vital River Laboratuvar Hayvanları Teknolojisi | 213 | |
| Kreatin Test Kiti | EPNK, Anhui, Çin | ||
| Özellik mikrotom bıçağı | Beyotime, Nantong, Çin | E0994 | |
| Hemostatik Forseps (9,5 cm, Kavisli) | JZ, Shanghai Medical Instruments Co. Ltd. | JC3901 | |
| Lipaz Test Kiti | Jiancheng, Nanjing, Çin | A054-2-1 | |
| Mikrotom | Leica biyosistemi, Almanya | RM2245 | |
| Mindray biyokimya analizörü | Mindray, Shenzhen, Çin | BS-420 | |
| MPO Test Kiti | Jiancheng, Nanjing, Çin | A044-1-1 | |
| Normal fare yemeği | Trofik, Nantong, Çin | LAD 1000 | |
| Fosfat tamponlu tuzlu su | Beyotime, Nantong, Çin | C0221A | |
| 5 mm çeneli (1,5 cm) düz mikro bulldog kelepçesiJZ | , Shanghai Medical Instruments Co. Ltd. | W40130 | |
| Düz veya kavisli forseps (11,0 cm) | Cheng-He | HC-X091A veya HC-X090A | |
| Düz Makas (10,0 cm) | Cheng-He, Ningbo, Çin | HC-J039102 | |
| Thermo Scientific Santrifüj | Thermo Scientific, ABD | Multifuge X1R |
Kaynaklar
- Lee, P. J., Papachristou, G. I. New insights into acute pancreatitis. Nature Reviews Gastroenterology and Hepatology. 16 (8), 479-496 (2019).
- Mandalia, A., Wamsteker, E. J., DiMagno, M. J. Recent advances in understanding and managing acute pancreatitis. F1000Research.....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
