Farelerde Ağrı Davranışını Ölçmek için Mekanik Çatışmadan Kaçınma Testi

Özet

Mekanik çatışmadan kaçınma testi, farelerde ağrı duyarlılığının refleksif olmayan bir okuması olarak kullanılır ve çeşitli fare ağrısı modellerinde duygusal-motivasyonel tepkileri daha iyi anlamak için kullanılabilir.

Özet

Ağrı hem duyusal (nosiseptif) hem de duygusal (hoş olmayan) boyutlardan oluşur. Preklinik modellerde, ağrı geleneksel olarak ağrının nosiseptif bileşeni ile ilgili çıkarımlara izin veren, ancak ağrının duygusal veya motivasyonel bileşeni hakkında çok az bilgi sağlayan refleksif testler kullanılarak değerlendirilmiştir. Bu nedenle, ağrının bu bileşenlerini yakalayan testler geliştirmek translasyonel olarak önemlidir. Bu nedenle, araştırmacıların ağrı algısını bu düzeyde incelemek için refleksif olmayan davranışsal testler kullanmaları gerekir. Mekanik çatışmadan kaçınma (MCA), 3 odacıklı bir paradigmada zararlı bir mekanik uyarana motivasyonel tepkileri incelemek için kurulmuş gönüllü bir refleksif olmayan davranış testidir. Bir farenin konum tercihindeki bir değişiklik, rakip zararlı uyaranlarla karşı karşıya kaldığında, pençelerin dokunsal uyarımına karşı parlak ışığın algılanan tatsızlığını çıkarmak için kullanılır. Bu protokol, ağrı araştırmacılarının çeşitli fare ağrısı modellerinde duygusal-motivasyonel tepkileri anlamak için kullanabilecekleri MCA testinin değiştirilmiş bir versiyonunu özetlemektedir. Burada özel olarak tanımlanmamış olsa da, örnek MCA verilerimiz, MCA prosedürünü göstermek için ağrı modelleri olarak intraplantar tam Freund adjuvanını (CFA), korunmuş sinir hasarını (SNI) ve bir kırık / döküm modelini kullanır.

Giriş

Ağrı, duyusal ve duygusal bileşenlerle ilgili karmaşık bir deneyimdir. Ağrı algısı eşiğinde bir azalma ve termal ve / veya mekanik uyaranlara aşırı duyarlılık, uyaranla uyarılan ağrı davranış testlerinin yakalayabileceği bu deneyimin temel özellikleridir (Hargreaves'in ısı duyarlılığı testi ve von Frey mekanik duyarlılık testi gibi)^1,2. Bu tür testler sağlam ve tekrarlanabilir sonuçlar vermesine rağmen, algılanan zararlı bir uyarandan refleksif geri çekilmeye güvenmeleri ile sınırlıdır. Bu, yalnızca bu testlere devam eden ağrı araştırmalarına güvenmeyi sorgulamıştır. Bu amaçla, ağrı araştırmacıları birkaç yıld....

Protokol

Farelerin kullanımını içeren tüm deneyler ve burada izlenen prosedürler, MD Anderson Kanser Merkezi ve Stanford Üniversitesi'nin Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanım Komiteleri tarafından, Ulusal Sağlık Enstitüleri'nin Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'na sıkı sıkıya bağlı kalınarak onaylanmıştır.

1. MCA inşaatı

1. Aşağıdaki boyutlarda yapı haznesi 1: 125 mm x 125 mm x 125 mm (genişlik x derinlik x yükseklik) yan duvarlar, zemin, tavan için kullanılan opak beyazdan 3 mm kalınlığında akrilik. Öne bakan duvar için 3 mm kalınlığında şeffaf bir akrilik kullanın. Özel akrilik yapıştırıcı kullan....

Sonuçlar

MCA testi, mekanik olarak farklı birkaç fare ağrısı modeliyle başarıyla kullanılmıştır. Şekil 2, seçilen sonuç ölçüsünün oda 2'nin orta noktasını geçtiği verileri göstermektedir (Şekil 2A). Yarım nokta ve oda 3'e kaçış kullanılarak elde edilen veriler çok benzerdir, 5 mm prob yüksekliği¹³ olan nöropatik ağrının korunmuş sinir hasarı (SNI) modelinde oda 3 kaçışı için ~ 40 s, yarı yol için ~ 40 sn ve 45 s'dir.

CF.......

Tartışma

Tüm davranış testlerinde olduğu gibi, hayvanların tedavisine uygun kullanım, randomizasyon ve körleştirme baştan sona esastır. Karmaşık davranışlara ve karar vermeye yönelik çok faktörlü girdiler göz önüne alındığında, hayvanların sıkıntıyı en aza indirirken mümkün olduğunca tutarlı bir şekilde ele alınması, alışkanlık haline getirilmesi ve test edilmesi zorunludur. Fare yerleştirme zamanlamasını oda 1'e yeniden üretmek, LED ışıklarını açmak ve bariyeri kaldırmak için de özen gösterilmelidir, çünkü buradaki farklılıklar .......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
32.8ft 3000K-6000K Ayarlanabilir Beyaz LED Şerit Işıklar, 600 SMD 2835 LED'li Kısılabilir Süper Parlak LED Şerit Işıklar	Lepro	SKU: 410087-DWW-US	Aydınlatma odası için 1. https://www.lepro.com/32ft-dimmable-tunable-white-led-strip-lights.html
3D baskılı 'başak yatak' ve 'oda 2 kat'Shapeways		/A	İsteğe bağlı, körelmiş harita pimlerine alternatif olarak mekanik problar için.
% 70 etanol	Çeşitli	N / A	Fareler arasındaki MCA'yı temizlemek için.
Akrily-Hinge 2	TAP Plastics	N/A	hazne kapaklarını arka duvarlara takmak için. https://www.tapplastics.com/product/plastics/handles_hinges_latches/acryl_hinge_2/122
Chemcast Dökme Akrilik Levha, Şeffaf	TAP Plastik	Yok	3 mm kalınlığında. Oda 1'in ön duvarı için. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_cast_clear/510
Chemcast Döküm Şeffaf Renkli Akrilik, Şeffaf Koyu Kırmızı -% 50	TAP Plastik	Yok	3mm kalınlığında. % 50 ışık geçirgenliği. 2 ve 3 numaralı odaların duvarları ve kapakları için. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_transparent_colors/519
Chemcast Yarı Saydam & Opak Renkli Dökme Akrilik, İşaret Opak Beyaz -% 0.1	TAP Plastik	Yok	3mm kalınlığında. Yan duvarlar ve hazne 1'in kapağı için. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_color/341
Dezenfektan (örneğin Quatricide)	Pharmacal Research Laboratories, Inc.	65020F	Bir test oturumunun sonunda MCA'yı dezenfekte etmek için.
Kuru silinebilir işaretleyiciler ve pano	Çeşitli	Yok	Video çekimlerinin başına deneysel bilgiler eklemek için.
Harita pimleri	Çeşitli	N/A	Mekanik problar için isteğe bağlı. Kullanmadan önce keskin noktaları köreltmek için zımpara kağıdı kullanın. 3D baskılı parçaların yerine kullanılabilir.
Kağıt havlular	Çeşitli	N/A	MCA'yı temizlemek/dezenfekte etmek için.
SCIGRIP Weld-On # 3 Akrilik Çimento	TAP Plastics	N/A	Akrilik levhaları odalara monte etmek ve menteşeleri sabitlemek için. https://www.tapplastics.com/product/repair_products/plastic_adhesives/weld_on_3_cement/131
Kronometre	Çeşitli	N/A	Kaçış gecikmelerini/bekleme sürelerini gerçek zamanlı olarak veya kaydedilmiş videodan kaydetmek için.
Zamanlayıcı	Çeşitli N	/ A	LED'in açılmasını sağlamak için, bariyerin çıkarılması ve testin tamamlanması tutarlı bir şekilde zamanlanır.
Video kamera	Çeşitli	HDRCX405 Handycam Video Kamera	MCA cihazında fare davranışını kaydetmek için. 1080p çözünürlüğe sahip herhangi bir tüketici sınıfı video kamera ile değiştirilebilir.
Tripod	Famall	N/A	MCA çekimi kaydetmek için kamerayı tezgah yüksekliğinde tutabilen herhangi bir tripod kabul edilebilir.

N,