Burada: Ovo Tavuk Embriyolarında İntravasküler Enjeksiyon

Kai Jin; Jing Zhou; Gaoyuan Wu; Ziyi Lian; Zongyi Zhao; Shujian Zhou; Chen Chen; Hongyan Sun; Yingjie Niu; Qishenng Zuo; Yani Zhang; Jiuzhou Song; Guohong Chen; Bichun Li

doi:10.3791/63458

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Burada: Ovo Tavuk Embriyolarında İntravasküler Enjeksiyon

7.5K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/63458

⸱

3 Haziran 2022

Kai Jin¹^,² , Jing Zhou¹^,² , Gaoyuan Wu¹^,² , Ziyi Lian¹^,² , Zongyi Zhao¹^,² , Shujian Zhou¹^,² , Chen Chen¹^,² , Hongyan Sun¹^,² , Yingjie Niu¹^,² , Qishenng Zuo¹^,² , Yani Zhang¹^,² , Jiuzhou Song³ , Guohong Chen¹^,² , Bichun Li¹^,²^,⁴

¹Joint International Research Laboratory of Agriculture and Agri-Product Safety of Ministry of Education of China, Yangzhou University, ²Key Laboratory of Animal Breeding Reproduction and Molecular Design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, ³Animal & Avian Sciences, University of Maryland, College Park, ⁴College of Biotechnology, Jiangsu University of Science and Technology

Bu makalede

Özet

Bu makalenin genel amacı, tavuk embriyolarına eksojen materyallerin hücre içi enjeksiyonunda nasıl gerçekleştirileceğini tanımlamaktır. Bu yaklaşım, tavuk embriyolarının gelişimsel biyolojisini incelemek için çok yararlıdır.

Özet

Embriyo biyolojisinin klasik bir model sistemi olarak, tavuk embriyosu embriyonik gelişimi ve farklılaşmayı araştırmak için kullanılmıştır. Eksojen materyallerin tavuk embriyolarına verilmesi, embriyonik gelişim sırasında gen fonksiyonunu, transgenik ıslahı ve kimera preparatını incelemek için büyük bir avantaja sahiptir. Burada, plazmid vektörleri veya modifiye primordial germ hücreleri (PGC'ler) gibi eksojen materyallerin erken gelişim evrelerinde donör tavuk embriyolarına aktarılabildiği in ovo intravasküler enjeksiyon yöntemini gösteriyoruz. Sonuçlar, dorsal aort ve kafa yoluyla intravasküler enjeksiyonun, enjekte edilen materyallerin kan dolaşım sistemi yoluyla tüm embriyoya yayılmasına izin verdiğini göstermektedir. Sunulan protokolde, eksojen plazmid ve lentiviral vektör girişinin etkinliği ve alıcı gonadda enjekte edilen eksojen PGC'lerin kolonizasyonu, embriyolarda floresan gözlenerek belirlenmiştir. Bu makalede, bu yöntemin ayrıntılı prosedürleri açıklanmakta ve böylece gen fonksiyonu, embriyo ve gelişim biyolojisi ve gonad-kimerik tavuk üretimini incelemek için mükemmel bir yaklaşım sağlanmaktadır. Sonuç olarak, bu makale araştırmacıların tavuk embriyolarına eksojen materyallerin ovo intravasküler enjeksiyonunda büyük başarı ve tekrarlanabilirlik ile gerçekleştirmelerini sağlayacaktır.

Giriş

Tavuk embriyoları gelişimsel, immünolojik, patolojik ve diğer biyolojik uygulamalarda yüzyıllardır yaygın olarak kullanılmaktadır ^1,2,3. Toksikoloji ve hücre biyolojisi çalışmalarında diğer hayvan modellerine göre birçok doğal avantaja sahiptirler⁴. Tavuk embriyolarına kolayca erişilebilir ve in vitro olarak manipüle edilebilir ve kullanışlı bir embriyo araştırma modeli sistemi sağlayan herhangi bir gelişim aşamasında doğrudan gözlemlenebilir.

Genel olarak, elektrotransfeksiyon ve subgerminal kavite enjeksiyonu gibi....