Yöntem makalesi

Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelitin İndüksiyonu ve Çeşitli Değerlendirme Göstergeleri

DOI:

10.3791/63866

⸱

9 Eylül 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Putuo People's Hospital, Shanghai Key Laboratory of Signaling and Disease Research, School of Life Sciences and Technology, Tongji University, 2National Laboratory of Biomacromolecules, CAS Center for Excellence in Biomacromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, 3Department of Infectious Diseases, Shanghai Key Laboratory of Infectious Diseases and Biosafety Emergency Response, National Medical Center for Infectious Diseases, Huashan Hospital, Fudan University

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, miyelin oligodendrosit glikoprotein kullanılarak bir fare modelinde deneysel otoimmün ensefalomiyelitin indüklenmesini ve klinik bir skorlama sistemi kullanılarak hastalık sürecinin izlenmesini açıklamaktadır. Deneysel otoimmün ensefalomiyelit ile ilişkili semptomlar, hastalık sürecini kapsamlı bir şekilde değerlendirmek için fare femur mikro-bilgisayarlı tomografi analizi ve açık alan testi kullanılarak analiz edilir.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Multipl skleroz (MS), inflamatuar infiltrasyon, demiyelinizasyon ve aksonal hasar ile karakterize tipik bir santral sinir sistemi (SSS) otoimmün hastalığıdır. Şu anda, MS'i tamamen tedavi etmek için herhangi bir önlem yoktur, ancak hastalığın ilerlemesini kontrol etmek ve hafifletmek için çoklu hastalık modifiye edici tedaviler (DMT) mevcuttur. Deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) ile MS hastalarının SSS patolojik özellikleri arasında anlamlı benzerlikler vardır. EAE, MS ilaçlarının etkinliğini belirlemek ve MS hastalığı için yeni tedavilerin geliştirilmesini araştırmak için temsili bir model olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. Farelerde EAE'nin aktif indüksiyonu stabil ve tekrarlanabilir bir etkiye sahiptir ve özellikle ilaçların veya genlerin otoimmün nöroinflamasyon üzerindeki etkilerini incelemek için uygundur. C57BL/6J farelerin miyelin oligodendrosit glikoprotein (MOG35-55) ile bağışıklanması yöntemi ve klinik skorlama sistemi kullanılarak hastalık semptomlarının günlük değerlendirilmesi esas olarak paylaşılmaktadır. MS'in çeşitli klinik bulgularla karmaşık etiyolojisi göz önüne alındığında, mevcut klinik skorlama sistemi hastalık tedavisinin değerlendirilmesini karşılayamamaktadır. Tek bir müdahalenin eksikliklerini önlemek için, MS hastalarında anksiyete benzeri ruh hallerinin ve osteoporozun klinik belirtilerine dayanarak EAE'yi değerlendirmek için yeni göstergeler, MS tedavisinin daha kapsamlı bir değerlendirmesini sağlamak için oluşturulmuştur.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Otoimmün hastalıklar, bağışıklık sisteminin kendi antijenlerine karşı bağışıklık tepkisinin neden olduğu, doku hasarı veya işlev bozukluğu ile sonuçlanan bir bozukluk spektrumudur1. Multipl skleroz (MS), santral sinir sisteminde (SSS) polinöropatinin kronik otoimmün bir hastalığı olup, inflamatuar infiltrasyon, demiyelinizasyon ve nöronal aksonal dejenerasyon ilekarakterizedir 2,3. Şu anda, MS dünya çapında 2,5 milyon kadar insanı, çoğunlukla ailelerinin ve toplumun bel kemiği olan 20-40 yaş arası genç ve orta yaşlı insanları etkilemiştir. Bu durum aileler ve toplum üzerinde önemli etki ve zararlara yol açmıştır 2,4.

MS, çeşitli ve kompleks klinik bulguları olan multifaktöriyel bir hastalıktır. İnflamatuar infiltrasyon ve demiyelinizasyon ile karakterize klasik nörolojik bozukluklara ek olarak, MS sıklıkla görme bozukluğu, ekstremite diskinezisi ve bilişsel ve duygusal bozukluklar gösterir 5,6,7. MS hastaları doğru ve doğru tedaviyi alamazlarsa, yarısı 20 yıl sonra tekerlekli sandalyede yaşayacak ve neredeyse yarısı depresif ve anksiyete belirtileri yaşayacak ve bu da genel popülasyondan çok daha yüksek intihar düşüncesine yol açacaktır 8,9.

Uzun bir araştırma süresine rağmen, MS'in etiyolojisi belirsizliğini korumaktadır ve MS'in patogenezi henüz aydınlatılamamıştır. MS'in hayvan modelleri, kemirgen ve insan bağışıklık sistemleri arasındaki önemli farklılıklara rağmen, aynı zamanda bazı temel ilkeleri paylaşırken, hastalık gelişimini ve yeni terapötik yaklaşımları keşfetmek için test araçları olarak hizmet etmeye izin vermiştir. Deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) şu anda, duyarlı farelerde CNS bileşenlerine otoimmüniteyi indüklemek için miyelin proteinlerinden otoantijen bağışıklığı kullanan MS'i incelemek için ideal bir hayvan modelidir ve humoral immün yanıtı arttırmak için tam Freund adjuvanı (CFA) ve boğmaca toksini (PTX) ilavesi ile birlikte. Genetik arka plana ve immün antijenlere bağlı olarak, MS10,11,12'nin çeşitli klinik formlarını taklit etmek için akut, relapsing-remitting veya kronik dahil olmak üzere farklı hastalık süreçleri elde edilir. EAE modellerinin yapımında yaygın olarak kullanılan ilgili immünojenler, miyelin bazik proteini (MBP), proteolipid proteini (PLP) veya miyelin oligodendrosit glikoproteini (MOG) gibi kendinden CNS proteinlerinden gelir. MBP veya PLP ile aşılanmış SJL / L fareleri relapsing-remitting bir seyir geliştirir ve MOG, C57BL / 6 farelerde11,12,13'te kronik ilerleyici EAE'yi tetikler.

Hastalık modifiye edici tedavinin (DMT) temel amacı, hastalık semptomlarını en aza indirmek ve fonksiyon6'yı iyileştirmektir. MS'i hafifletmek için klinik olarak çeşitli ilaçlar kullanılmaktadır, ancak henüz tamamen tedavi etmek için hiçbir ilaç kullanılmamıştır, bu da sinerjik tedavinin gerekliliğini ortaya koymaktadır. C57BL / 6 fareleri şu anda transgenik fareleri oluşturmak için en yaygın kullanılanlardır ve bu çalışmada, hastalığın ilerlemesini izlemek için C57BL / 6J farelerde MOG35-55 tarafından indüklenen 5 noktalı bir EAE modeli kullanılmıştır. EAE modelleri ayrıca anksiyete benzeri ruh halleri ve kemik kaybı ve yaygın olarak bilinen demiyelinizan lezyonlardan muzdariptir. Burada, EAE semptomlarını açık alan testi ve mikro-bilgisayarlı tomografi (Mikro-BT) analizi kullanarak çoklu perspektiflerden değerlendirme yöntemi de açıklanmaktadır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tongji Üniversitesi Hayvan Bakım Komitesi mevcut çalışmayı onayladı ve tüm hayvan bakım kurallarına uyuldu. Deneyler için 8-12 haftalık erkek veya dişi C57BL/6J fareler kullanıldı. Deney gruplarında yaş ve cinsiyetin aynı olması sağlanmış; aksi takdirde, hastalığa duyarlılık etkilendi. Fareler, sabit koşullar altında (oda sıcaklığı 23 ± 1 ° C, nem% 50 ±% 10) alternatif 12 saat açık ve karanlık döngülere sahip patojensiz belirli bir ortamda barındırıldı.

1. MOG35-55 emülsiyonunun hazırlanması

  1. Freund'un adjuvanını (kendisi 1 mg / mL ısı ile inaktive edilmiş MTB, H37Ra içeren) tamamlamak için ısıda inaktive edilmiş liyofilize Mycobacterium tuberculosis (MTB, H37Ra) ekleyin, bu da 5 mg / mL'lik nihai bir MTB konsantrasyonu ile sonuçlanır (bkz.
    NOT: Tüm operasyon biyogüvenlik kabininde tamamlanmalıdır; üfleme havasını açmayın.
  2. Liyofilize MOG35-55 peptidini ( bakınız Malzeme Tablosu) steril önceden soğutulmuş Fosfat Tamponlu Salin (PBS) (kalsiyum ve magnezyum iyonları olmadan, pH 7.4) ile çözün ve antijen çözeltisini 2 mg / mL konsantrasyonunda hazırlayın.
  3. Temiz bir 2 mL mikrosantrifüj tüpü alın ve her tüpe bir adet sterilize edilmiş 5 mm çelik bilye ekleyin ( bkz.
  4. Bir çelik bilye içeren yukarıdaki mikrosantrifüj tüpüne 5 mg / mL MTB ve 500 μL MOG35-55 antijen çözeltisi içeren 500 μL komple Freund adjuvanı ekleyin.
  5. Yukarıdaki tüpü 10 dakika boyunca bir TissueLyser üzerinde salıncaklayın ( Malzeme Tablosuna bakınız), 10 dakika boyunca buz üzerinde soğutun ve iyice karıştırmak ve sonunda beyaz viskoz bir çözelti oluşturmak için dört kez tekrarlayın.
    NOT: İyi emülsifikasyon, MOG35-55 emülsiyonunun hazırlanmasında önemli bir adımdır, bu nedenle kapsamlı bir karıştırma gereklidir. TissueLyser 28 Hz hıza ayarlanmıştır.

2. Boğmaca toksininin hazırlanması (PTX)

  1. PTX'i ddH2O ile 100 μg/mL konsantrasyona hazırlayın ve 4 °C'de saklayın.
  2. PTX stok çözeltisini steril 1x PBS (kalsiyum ve magnezyum iyonları olmadan, pH 7.4) ile 50 kez seyrelterek kullanım için 200 ng/100 μL çözelti elde edin.

3. EAE hayvan modelinin kurulması

  1. EAE modelini 8-12 haftalık erkek veya dişi C57BL/6J fareleri kullanarak oluşturun. Aşılamadan önce farelerin beslenme ortamına yeterince alıştığından emin olun.
  2. Hazırlanan MOG35-55 emülsiyonunu (adım 1) 4 °C'de 2-3 s için santrifüjleyin, tüpün altındaki tüm emülsiyonları çökeltmek için ekipmanın Darbe düğmesine basarak (bkz. Malzeme Tablosu).
    NOT: MOG35-55 emülsiyonu -20 °C'de birkaç gün saklanabilir. İlaç başarısızlığını önlemek için, mümkün olan en kısa sürede kullanılması önerilir.
  3. 1 mL'lik bir şırınga namlusuna 22 G'lik bir iğne takın, MOG 35-55 emülsiyonunu aspire edin ve MOG35-55 emülsiyonunu yeni bir 1 mL şırınga namlusuna aktarın. 1 mL şırınga namlusu ile 26 G'lik iğne arasındaki bağlantıyı sızdırmazlık filmi ile sabitleyin (bkz.
    NOT: MOG35-55 emülsiyonunu 1 mL şırınga varillerine yüklerken hava kabarcıklarından kaçının.
  4. Enjeksiyon bölgesini %70 etanol ile silin ve dezenfekte edin.
  5. MOG35-55 emülsiyonunu, farelerin dorsal omurgasının her iki tarafına, her iki tarafa 100 μL'ye deri altından enjekte edin. Enjeksiyon işlemi tamamlandıktan sonra farelerin dorsumunun derisi altında soğanlı kütlelerin otomatik oluşumunu gözlemleyin.
    NOT: Deneyimli deneycilerin bağışıklama işlemini gerçekleştirdiğinden ve fareler üzerindeki baskıyı en aza indirmek için enjeksiyonun nazikçe ve yavaşça yapıldığından emin olun.
  6. Yukarıdaki fareleri intraperitoneal olarak 100 μL PTX ile enjekte edin (adım 2).
    NOT: Aşılama günü 0. gündür. Ayrıca, farelerin kuyruğunda bir renk işaretleyicisi kullanmak gibi sonraki günlük değerlendirme için farelerin doğru bir şekilde tanımlanabildiğinden emin olun.
  7. Bağışıklamadan sonraki 2. günde aynı dozda PTX enjekte edin.
  8. Bir grup aşılanmamış fareyi vahşi tip (WT) fareler olarak hazırlayın.

4. Farelerin klinik olarak izlenmesi

  1. EAE ve WT farelerinin vücut ağırlığını günlük olarak kaydedin.
    NOT: EAE'nin şiddeti, farelerin kilo kaybı ile pozitif ilişkilidir, bu nedenle vücut ağırlığı da çok önemli bir izleme indeksidir.
  2. Tablo 1'de listelenen 0-5 puanlama sistemini kullanarak aşılamadan 0-21 gün sonra farelerin durumunu izleyin.
    NOT: Aradaki belirtiler artı veya eksi 0,5 puan olarak sayılır.

5. Açık alan testi

NOT: Bu adım için seçilen deney hayvanları, erken başlangıç, tepe ve remisyon dönemlerinde EAE fareleridir. Ek olarak, WT fareleri kontrol olarak kullanılmıştır. EAE modellemesi için anksiyete bozukluğu olan fareleri dışlamak için modellemeden önce tüm farelerin anksiyete benzeri davranışlar için test edildiği belirtilmelidir. Ek olarak, tam motor yetersizliği olan pik ve remisyon dönemlerinde EAE fareleri testin dışında bırakıldı.

  1. 40 × 40 × 40cm3 açık alan reaksiyon odası ve bir hareket aktivitesi (açık alan) video analiz sistemi hazırlayın (bakınız Malzeme Tablosu).
    NOT: Kamera kutuyu tamamen kaplayacak bir konuma monte edilmiştir, reaksiyon odası eşit şekilde aydınlatılmıştır ve test odasının sessiz bir alan olması gerekmektedir.
  2. Test farelerini deneye başlamadan 1 saat önce alışkanlık için test odasına yerleştirin.
  3. Teste başlamadan önce reaksiyon odasının temiz olduğundan emin olmak için tüm alana% 70 etanol püskürtün ve temiz bir kağıt havluyla silin.
  4. Her fareyi kafesinden ayrı ayrı çıkarın ve keşfetmeye başlamadan önce arenanın aynı köşesine yerleştirin.
    NOT: Kutunun alt kısmı, ortadaki dört ızgara alanı merkezi alan ve çevresindeki alan periferik alan olan 16 ızgaraya bölünmüştür.
  5. Video analiz sisteminin menü çubuğundaki Yakalamayı Başlat düğmesine tıklayın, zaman kaydedin ve çekime başlayın.
  6. Sınav salonunda sessiz kalın.
  7. Kayıt işlemi sırasında farenin 5 dakika boyunca serbestçe hareket etmesine izin verin.
  8. Edinme sistemini durdurun ve videoyu kaydedin.
  9. Fareyi arenadan çıkarın, kafese geri koyun ve bir sonraki fareye geçin.
    NOT: Kokuları ve diğer maddeleri gidermek için test alanını çalışmalar arasında% 70 etanol ile temizleyin.
  10. Video analiz sistemini kullanarak sonuçları analiz edin.

6. Kemik fenotipinin analizi

  1. EAE ve WT farelerini 21. günde servikal çıkık ile ötenazileştirin.
    NOT: Servikal çıkık ameliyatları yapan personel, hayvanın ölümü sırasında katlanılan ağrıyı en aza indirmek için iyi eğitilmelidir.
  2. Fareyi diseksiyon tepsisinde düz bir şekilde yatırın ve ekstremiteleri sabitleyin.
  3. Farenin arka ekstremite derisini forseps ile tutun ve fare derisini ve kas dokusunu makasla açın.
  4. Femuru tibia ve kalça kemiğinden makasla dikkatlice ayırın.
  5. Femura yapışan kası makasla çıkarın ve femuru oda sıcaklığında% 70 etanol içine yerleştirin.
  6. Distal femuru, 10 μm izotropik voksel boyutunda, 70 kV'luk bir tepe X-ışını tüp voltajı ve 0.114 mA'lık bir X-ışını yoğunluğu olan bir mikro-BT sistemi kullanarak tarayın ( Malzeme Tablosuna bakınız).
    NOT: Bir 3B Gauss filtresi, 2B eşik görüntülerinin gürültüsünün giderilmesine izin verir.
  7. Kemik hacmi, doku hacmi, kemik mineral yoğunluğu, trabeküler ayırma, trabeküler sayı, trabeküler bağlantı yoğunluğu, trabeküler ve kortikal kalınlık dahil olmak üzere femur parametrelerini ölçmek için orta femur milinden taranan 100 dilimi analiz edin.
    NOT: Farelerde distal femur büyüme plağının proksimal ucundan başlayarak, epifizyal kapak yapılarından tamamen yoksun kesitler bulundu ve epifizyal trabekülleri tanımlamak için iç kortikal yüzeyden uzaktaki birkaç vokselde konturlar manuel olarak özetlenen proksimal femura doğru 100 dilim uzatılmaya devam edildi.
  8. Mikro-BT sistemindeki kontur bölgelerinden eşik 2B görüntüleri istifleyerek 3B rekonstrüksiyonları oluşturun.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Farelerin bağışıklanmasından sonra, farelerin vücut ağırlığı günlük olarak kaydedilir ve klinik semptomları yukarıda açıklanan protokole göre değerlendirilir (adım 4). MOG peptidi ile aşılanmış C57BL / 6J farelerde, lezyonun yeri esas olarak omurilikle sınırlı olduğundan, EAE farelerinin patogenezi kuyruk ucundan başa doğru yayılır. Hastalığın başlangıcında, EAE fareleri kuyruğun zayıflığı ve sarkması, ardından arka bacakların zayıflığı, koordinasyonsuz hareket ve felç sergiler. Hastalık kötüleştikçe, yavaş yavaş ön ayak...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

MS, MSS'nin demiyelinizan inflamatuar bir hastalığıdır ve gençlerde kronik sakatlığa neden olan en yaygın nörolojik bozukluklardan biridir ve ailelere ve topluma büyük bir yük getirmektedir 3,4. MS her zaman organa özgü bir T hücresi aracılı otoimmün hastalık olarak sınıflandırılmıştır ve otoimmün sistemi CNS'yi yavaşça aşındırmaya teşvik eder, bu da vücutta birden fazla sistemi içerecektir27. Tipik klinik semptomlar görme bozukluğu, motor...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı'nın (32070768, 31871404, 31900658, 32270754) ve Devlet Anahtar İlaç Araştırmaları Laboratuvarı'nın desteğini kabul etmektedir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
1 mL şırınga (26 G iğne ile)Shanghai Kindly Medical Instruments Co., Ltd60017031
2 mL mikrosantrifüj tüpüHAIKELASIKY-LXG2A
22 G iğneShanghai Kindly Medical Instruments Co., Ltd60017208
Komple Freund' s AdjuvanSigmaF58814 ° C'de saklanır; C, mL başına 1 mg ısıyla inaktive edilmiş MTB (H37Ra)
Şartlandırılmış yer tercih sistemiShanghai Jiliang Software Technology Co., LtdHayvan davranışı
EtanolSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd10009218RT'de saklanır
Hareket aktivitesi (açık alan) video analiz sistemiShanghai Jiliang Software Technology Co., LtdDigBehv-002Hayvan davranışı
MOG35-55 peptitGill Biochemical Co., LtdGLS-YM-03590-20 °C'de saklanır; C
Mycobacterium tuberculosis H37RaBD2311414 °C'de saklanır; C
Açık alan reaksiyon odasıShanghai Jiliang Software Technology Co., LtdHayvan davranışı
Boğmaca toksiniCalbiochem5165604 °C'de saklanır; C
Fosfat Tamponlu SalinLaboratuvarımızda üretilmiştir
MakasŞangay Tıbbi Alet (grup) Co, LtdJ21010
Sızdırmazlık filmiHeathrow ScientificHS 234526B
Sorvall Legend Micro 21RMikrosantrifüj Termo Bilimsel75002447
Çelik bilyeQIAGEN69975
TissueLyser IIQIAGEN85300
CımbızŞangay Tıbbi Alet (grup) Co, LtdJD1060
& mu; CT 35 masaüstü mikroCT tarayıcıScanco Medical AG, Bassersdorf, İsviçre

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhernakova, A., Withoff, S., Wijmenga, C. Clinical implications of shared genetics and pathogenesis in autoimmune diseases. Nature Reviews Endocrinology. 9 (11), 646-659 (2013).
  2. Filippi, M., et al. Multiple sclerosis. Nature Reviews Disease Primers. 4 (1), 43(2018).
  3. Dobson, R., Giovannoni, G. Multiple sclerosis - a review. Europen Journal of Neurology. 26 (1), 27-40 (2019).
  4. Rietberg, M. B., Veerbeek, J. M., Gosselink, R., Kwakkel, G., van Wegen, E. E. Respiratory muscle training for multiple sclerosis. Cochrane Database of Systematic Reviews. 12 (12), (2017).
  5. O'Brien, K., Gran, B., Rostami, A. T-cell based immunotherapy in experimental autoimmune encephalomyelitis and multiple sclerosis. Immunotherapy. 2 (1), 99-115 (2010).
  6. Feinstein, A., Freeman, J., Lo, A. C. Treatment of progressive multiple sclerosis: what works, what does not, and what is needed. Lancet Neurology. 14 (2), 194-207 (2015).
  7. Li, H., Lian, G., Wang, G., Yin, Q., Su, Z. A review of possible therapies for multiple sclerosis. Molecular and Cellular Biochemistry. 476 (9), 3261-3270 (2021).
  8. Lewis, V. M., et al. depression and suicide ideation in people with multiple sclerosis. Journal of Affective Disorders. 208, 662-669 (2017).
  9. Boeschoten, R. E., et al. Prevalence of depression and anxiety in Multiple Sclerosis: A systematic review and meta-analysis. Journal of the Neurological Sciences. 372, 331-341 (2017).
  10. Constantinescu, C. S., Farooqi, N., O'Brien, K., Gran, B. Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) as a model for multiple sclerosis (MS). British Journal of Pharmacology. 164, 1079-1106 (2011).
  11. Glatigny, S., Bettelli, E. Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE) as Animal Models of Multiple Sclerosis (MS). Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 8 (11), 028977(2018).
  12. Procaccini, C., De Rosa, V., Pucino, V., Formisano, L., Matarese, G. Animal models of Multiple Sclerosis. European Journal of Pharmacology. 759, 182-191 (2015).
  13. Mix, E., Meyer-Rienecker, H., Hartung, H. P., Zettl, U. K. Animal models of multiple sclerosis-potentials and limitations. Progress in Neurobiology. 92 (3), 386-404 (2010).
  14. DiToro, D., et al. Insulin-like growth factors are key regulators of T helper 17 regulatory T cell balance in autoimmunity. Immunity. 52 (4), 650-667 (2020).
  15. Jain, R., et al. Interleukin-23-induced transcription factor Blimp-1 promotes pathogenicity of T helper 17 cells. Immunity. 44 (1), 131-142 (2016).
  16. Du, C., et al. Kappa opioid receptor activation alleviates experimental autoimmune encephalomyelitis and promotes oligodendrocyte-mediated remyelination. Nature Communications. 7, 11120(2016).
  17. Yang, C., et al. Betaine Ameliorates Experimental Autoimmune Encephalomyelitis by Inhibiting Dendritic Cell-Derived IL-6 Production and Th17 Differentiation. The Journal of Immunology. 200 (4), 1316-1324 (2018).
  18. McGinley, A. M., et al. Interleukin-17A serves a priming role in autoimmunity by recruiting IL-1β-producing myeloid cells that promote pathogenic T cells. Immunity. 52 (2), 342-356 (2020).
  19. Kocovski, P., et al. Differential anxiety-like responses in NOD/ShiLtJ and C57BL/6J mice following experimental autoimmune encephalomyelitis induction and oral gavage. Laboratory Animals. 52 (5), 470-478 (2018).
  20. Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. Use of the Open Field Maze to measure locomotor and anxiety-like behavior in mice. Journal of Visualized Experiments. (96), e52434(2015).
  21. Walsh, R. N., Cummins, R. A. The Open-Field Test: a critical review. Psychological Bulletin. 83 (3), 482-504 (1976).
  22. Tauil, C. B., et al. Depression and anxiety disorders in patients with multiple sclerosis: association with neurodegeneration and neurofilaments. Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 54 (3), 10428(2021).
  23. Gentile, A., et al. Interaction between interleukin-1beta and type-1 cannabinoid receptor is involved in anxiety-like behavior in experimental autoimmune encephalomyelitis. Journal of Neuroinflammation. 13, 231(2016).
  24. Hearn, A. P., Silber, E. Osteoporosis in multiple sclerosis. Multiple Sclerosis. 16, 1031-1043 (2010).
  25. Gibson, J. C., Summers, G. D. Bone health in multiple sclerosis. Osteoporosis International. 22, 2935-2949 (2011).
  26. Ye, S., Wu, R., Wu, J. Multiple sclerosis and fracture. The International Journal of Neuroscience. 123, 609-616 (2013).
  27. Zamvil, S. S., et al. Lupus-prone' mice are susceptible to organ-specific autoimmune disease, experimental allergic encephalomyelitis. Pathobiology. 62 (3), 113-119 (1994).
  28. Oh, J., Vidal-Jordana, A., Montalban, X. Multiple sclerosis: clinical aspects. Current Opinion in Neurology. 31 (6), 752-759 (2018).
  29. Smith, P. Animal models of multiple sclerosis. Current Protocols. 1 (6), 185(2021).
  30. Aharoni, R., Globerman, R., Eilam, R., Brenner, O., Arnon, R. Titration of myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG)-Induced experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) model. Journal of Neuroscience Methods. 351, 108999(2021).
  31. Lassmann, H., Bradl, M. Multiple sclerosis: experimental models and reality. Acta Neuropathological. 133 (2), 223-244 (2017).
  32. Goverman, J., Perchellet, A., Huseby, E. S. The role of CD8(+) T cells in multiple sclerosis and its animal models. Current Drug Targets. Inflammation and Allergy. 4 (2), 239-245 (2005).
  33. Schultz, V., et al. Acutely damaged axons are remyelinated in multiple sclerosis and experimental models of demyelination. Glia. 65 (8), 1350-1360 (2017).
  34. McRae, B. L., et al. Induction of active and adoptive relapsing experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) using an encephalitogenic epitope of proteolipid protein. Journal of Neuroimmunology. 38 (3), 229-240 (1992).
  35. Zamvil, S., et al. T-cell clones specific for myelin basic protein induce chronic relapsing paralysis and demyelination. Nature. 317 (6035), 355-358 (1985).
  36. Jackson, S. J., Lee, J., Nikodemova, M., Fabry, Z., Duncan, I. D. Quantification of myelin and axon pathology during relapsing progressive experimental autoimmune encephalomyelitis in the Biozzi ABH mouse. Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 68 (6), 616-625 (2009).
  37. Gudi, V., Gingele, S., Skripuletz, T., Stangel, M. Glial response during cuprizone-induced de- and remyelination in the CNS: lessons learned. Frontiers in Cellular Neuroscience. 8, 73(2014).
  38. Yu, Q., et al. Strain differences in cuprizone induced demyelination. Cell & Bioscience. 7, 59(2017).
  39. Dehghan, S., Aref, E., Raoufy, M. R., Javan, M. An optimized animal model of lysolecithin induced demyelination in optic nerve; more feasible, more reproducible, promising for studying the progressive forms of multiple sclerosis. Journal of Neuroscience Methods. 352, 109088(2021).
  40. Kuypers, N. J., James, K. T., Enzmann, G. U., Magnuson, D. S., Whittemore, S. R. Functional consequences of ethidium bromide demyelination of the mouse ventral spinal cord. Experimental Neurology. 247, 615-622 (2013).
  41. Haji, N., et al. TNF-alpha-mediated anxiety in a mouse model of multiple sclerosis. Experimental Neurology. 237, 296-303 (2012).
  42. Butler, E., Matcham, F., Chalder, T. A systematic review of anxiety amongst people with Multiple Sclerosis. Multiple Sclerosis and Related Disorders. 10, 145-168 (2016).
  43. Peres, D. S., et al. TRPA1 involvement in depression- and anxiety-like behaviors in a progressive multiple sclerosis model in mice. Brain Research Bulletin. 175, 1-15 (2021).
  44. Bouxsein, M. L., et al. Guidelines for assessment of bone microstructure in rodents using micro-computed tomography. Journal of Bone and Mineral Research. 25 (7), 1468-1486 (2010).
  45. Chappard, D., Retailleau-Gaborit, N., Legrand, E., Baslé, M. F., Audran, M. Comparison insight bone measurements by histomorphometry and microCT. Journal of Bone and Mineral Research. 20 (7), 1177-1184 (2005).
  46. Akhter, M. P., Lappe, J. M., Davies, K. M., Recker, R. R. Transmenopausal changes in the trabecular bone structure. Bone. 41 (1), 111-116 (2007).
  47. Wei, H., et al. Identification of Fibroblast Activation Protein as an Osteogenic Suppressor and Anti-osteoporosis Drug Target. Cell Reports. 33 (2), 108252(2020).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Multipl Skleroz ModeliMiyelin Oligodendrosit GlikoproteiniKlinik Skorlama SistemiA k Alan TestiKemik Mineral Yo unlu uAk Sitometrisimm n H cre AnaliziAnksiyete Benzeri DavranOsteoporoz De erlendirmesi

İlgili makaleler