Method Article

Amigdala'nın Elektriksel Çırası ile Temporal Lob Epilepsi Fare Modeli Oluşturmak için Bipolar Elektrot Kullanma

DOI:

10.3791/64113

June 29th, 2022

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Amigdala, bu yapıdan kaynaklanan ve yayılan temporal lob epilepsisinde önemli bir rol oynar. Bu makale, hem kayıt hem de uyarıcı işlevlere sahip derin beyin elektrotlarının üretiminin ayrıntılı bir açıklamasını sunmaktadır. Amigdala kaynaklı medial temporal lob epilepsisinin bir modelini sunar.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Amigdala, nöbetlerin en yaygın kökenlerinden biridir ve amigdala fare modeli, epilepsinin gösterilmesi için gereklidir. Bununla birlikte, az sayıda çalışma deneysel protokolü ayrıntılı olarak tanımlamıştır. Bu yazıda, bipolar elektrot üretimi yönteminin tanıtılmasıyla amigdala elektriksel çıra epilepsi modeli yapımının tüm süreci gösterilmektedir. Bu elektrot hem uyarabilir hem de kaydedebilir, böylece stimülasyon ve kayıt için ayrı elektrotların implante edilmesinin neden olduğu beyin hasarını azaltabilir. Uzun süreli elektroensefalogram (EEG) kayıt amacıyla, kablo karmaşalarının ve düşmenin neden olduğu kayıt kesintisini ortadan kaldırmak için kontak halkaları kullanılmıştır.

Bazolateral amigdala'nın (AP: 1.67 mm, L: 2.7 mm, V: 4.9 mm) 19.83 ± 5.742 kez periyodik olarak uyarılmasından sonra (60 Hz, her 15 dakikada 1 sn), altı farede tam çıra gözlendi (Racine'in ölçeğine göre sınıflandırılan üç sürekli derece V bölümünün indüksiyonu olarak tanımlandı). Tüm çıra işlemi boyunca intrakraniyal EEG kaydedildi ve çıralama sonrası amigdala'da 20-70 s süren epileptik akıntı gözlendi. Bu nedenle, bu, amigdala kaynaklı epilepsiyi modellemek için sağlam bir protokoldür ve yöntem, temporal lob epilepsisinde amigdala'nın rolünü ortaya çıkarmak için uygundur. Bu araştırma, mesial temporal lob epilepsisinin mekanizmaları ve yeni antiepileptojenik ilaçlar üzerine gelecekteki çalışmalara katkıda bulunmaktadır.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Temporal lob epilepsisi (TLE) en sık görülen epilepsi türüdür ve ilaca dirençli epilepsiye dönüşme riski yüksektir. Selektif amigdalohipokampektomi gibi cerrahi, TLE'nin etkili bir tedavisidir ve hastalığın epileptogenezi ve iktogenezi hala araştırılmaktadır 1,2. TLE'nin patogenezinin sadece hipokampusta değil, amigdalada da yaygın olarak görüldüğü gösterilmiştir 3,4. Örneğin, hem amigdala skleroz hem de amigdala büyümesi sıklıkla TLE nöbetlerinin kökenleri olarak bildirilmiştir 5,6. Amigdala'n....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu deney, Başkent Tıp Üniversitesi, Xuanwu Hastanesi Deneysel Hayvan Etik Kurulu tarafından onaylandı. Tüm fareler Başkent Tıp Üniversitesi, Xuanwu Hastanesi'nin hayvan laboratuvarında tutuldu. Bu protokol dört bölüme ayrılmıştır. İlk iki bölüm, elektrotları ve EEG kayıt / stimülasyon ekipmanını bağlamak için bir kontak halkası kullanarak elektrot ve elektrik devresini oluşturma yöntemini tanıtmaktadır. Üçüncü bölümde elektrot implantasyonunun operasyon yöntemi, dördüncü bölümde ise amigdala epilepsi modelinde kullanılan EEG kayıt ve stimülasyon parametreleri sunulmaktadır.

1. Elektrotların imalatı

  1. Önceden hazırla....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Elektrot ve devre, EEG'nin kaydedilmesini ve bir stimülasyon olarak işlev görmesini sağlar (Şekil 1); Bu kurulum, kayıt ve uyarıcı elektrotların ayrı ayrı implante edilmesinin karmaşıklığını önler ve beyin dokusuna verilen hasarı en aza indirir. Kontak halkalarının uygulanması, her türlü cihazla elektrot bağlantısına izin verir.

Altı sağlıklı yetişkin erkek C57BL/6 fareye elektrot implantasyon ameliyatı yaptık ve ameliyattan 2 hafta sonra elektriksel stimülasyon y.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Epilepsi, birden fazla belirtisi ve çeşitli nedenleri olan bir grup hastalıktır18; Tüm epilepsi türleri için tek bir modelin kullanılamayacağı ve araştırmacıların kendi özel çalışmaları için uygun bir model seçmeleri gerektiği belirtilmelidir. Bu çalışma, elektrot üretiminin en erişilebilir yöntemlerinden birini tanıtmaktadır. Bu yöntemin çeşitli bölümleri, farklı deneysel koşullara uyum sağlamak için ayarlanabilir.

Bu yöntem, hem uyarıcı hem de kayıt fonksiyonlarına sa.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların açıklayacağı bir çıkar çatışması yoktur.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Araştırma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No. 82030037, 81871009) ve Pekin Belediye Sağlık Komisyonu (11000022T000000444685) tarafından desteklenmiştir. TopEdit'e (www.topeditsci.com) bu makalenin hazırlanması sırasındaki dilbilimsel yardımları için teşekkür ederiz.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Alexa Fluor 488-konjuge Eşek anti-Tavşan IgGinvitrojenA-21206
c-Fos antikoruab222699
Kraniyal matkapSANSSA302
diş çimentosuNISSIN
EEG kayıt ve stimülasyon ekipmanıNeuracle Technology (Changzhou) Co., LtdNSHHFS-210803
kurşunsuz kalay telBAKON
Pin başlığı / Dişi başlık1,27 mmXIANMISI
Gümüş telA-M sistemleri786000
Kayma halkasıSenring Electronics Co., LtdSNM008-04
Tungsten telA-M sistemleri796000
ultra ince çok ayaklı telShenzhen Chengxing tel ve kabloUL10064-FEP
kaynak ekipmanlarıBAKONBK881
aralığı

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kurita, T., Sakurai, K., Takeda, Y., Horinouchi, T., Kusumi, I. Very long-term outcome of non-surgically treated patients with temporal lobe epilepsy with hippocampal sclerosis: A retrospective study. PLoS One. 11 (7), 0159464(2016).
  2. Choy, M., Duffy, B. A., Lee, J. H.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Amygdala KindlingTemporal Lobe EpilepsyBipolar ElectrodeMouse Epilepsy ModelElectrical StimulationIntracranial EEGStereotaxic SurgerySeizure Monitoringc Fos ExpressionImmunohistochemistry

Related Articles