Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Kene tükürüğü biyomoleküllerine yanıt olarak alerjik reaksiyonların incelenmesi için zebra balığı hayvan modeli

1.9K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/64378

⸱

16 Eylül 2022

 ,  , 
1SaBio. Instituto de Investigación en Recursos Cinegéticos IREC (CSIC-UCLM-JCCM), 2Department of Veterinary Pathobiology, College of Veterinary Medicine, Oklahoma State University

Bu makalede

Özet

Burada, zebra balığı (Danio rerio), tükürük ve memeli eti tüketimine karşı alerjik reaksiyonları değerlendirerek alfa-Gal sendromu (AGS) ile ilgili alerjik reaksiyonları ve bağışıklık tepkilerini incelemek için bir model olarak kullanılır.

Özet

Keneler, patojen bulaşarak hastalığa neden olan ve ısırıkları dünya çapında insan sağlığını etkileyen alerjik reaksiyonlarla ilişkili olabilecek eklembacaklı vektörlerdir. Bazı bireylerde, glikan Galα1-3Galβ1-(3)4GlcNAc-R'ye (α-Gal) karşı yüksek seviyelerde immünoglobulin E antikorları kene ısırıkları ile indüklenmiştir. Kene tükürüğünde bulunan glikan α-Gal'i içeren glikoproteinler ve glikolipidlerin aracılık ettiği anafilaktik reaksiyonlar, alfa-Gal sendromu (AGS) veya memeli eti alerjisi ile ilişkilidir. Zebra balığı (Danio rerio), farklı patolojilerin incelenmesi için yaygın olarak kullanılan bir omurgalı modeli haline gelmiştir. Bu çalışmada, zebra balığı, α-Gal ve memeli eti tüketimine yanıt olarak alerjik reaksiyonların incelenmesi için bir model olarak kullanılmıştır, çünkü insanlar gibi bu glikanı sentezlemezler. Bu amaçla, Ixodes ricinus kene tükürüğü ve memeli eti tüketimine yanıt olarak davranış kalıpları ve hemorajik anafilaktik tip alerjik reaksiyonlar değerlendirildi. Bu deneysel yaklaşım, AGS de dahil olmak üzere kene kaynaklı alerjilerin incelenmesi için zebra balığı hayvan modelini destekleyen geçerli verilerin gizlenmesini sağlar.

Giriş

Keneler, hastalıklara neden olan patojenlerin vektörleridir ve aynı zamanda dünya çapında insanların ve hayvanların sağlığını etkileyen alerjik reaksiyonların nedenidir 1,2. Kene beslemesi sırasında, kene tükürüğündeki biyomoleküller, özellikle proteinler ve lipitler, konakçı savunmalarından kaçınarak bu ektoparazitlerin beslenmesini kolaylaştırır3. Glikan Galα1-3Galβ1-(3)4GlcNAc-R (α-Gal) modifikasyonlarına sahip bazı tükürük biyomolekülleri, kene ısırmasından sonra, sadece bazı bireylerde α-Gal Sendromu (AGS)4 olarak bilinen yüksek anti-α-Gal IgE antikor seviyelerinin üretilmesine yol açar. Bu, kene ısırıkları, primat olmayan memeli eti tüketimi ve cetuximab5 gibi bazı ilaçlar için anafilaksi ile sonuçlanabilecek IgE aracılı alerji ile ilişkili bir hastalıktır. α-Gal'e karşı reaksiyonlar genellikle şiddetlidir ve bazen ölümcül olabilir 6,7,8,9,10,11,12,13,14,15.

α-Gal, Eski Dünya maymunları, maymunlar ve α-Gal13'ü sentezleme yeteneğine sahip olmayan insanlar dışındaki tüm memelilerde bulunur. Bununla birlikte, bakteri ve protozoa gibi patojenler, bu glikanı yüzeylerinde eksprese eder, bu da yüksek miktarda anti-α-Gal IgM / IgG antikorlarının üretimini indükleyebilir ve bu patojenlere karşı koruyucu bir mekanizma olabilir16,17. Bununla birlikte, anti-α-Gal antikorlarının üretimi, IgE aracılı anti-α-Gal alerjileri gelişme riskini arttırır 7,13. İnsanlarda, özellikle IgM / IgG alt tiplerinde üretilen doğal anti-α-Gal antikorları, bağırsak mikrobiyotası16'dan bakterilerde bulunan bu modifikasyonla ilişkilendirilebilir. AGS zorlu bir klinik tanı olabilir, çünkü şu anda ana tanı yöntemi, özellikle gıda alerjileri (yani, kaşıntı, lokalize kurdeşen veya anafilaksi, ürtiker ve gastrointestinal semptomlara tekrarlayan anjiyoödem) ile ilişkili gecikmiş alerjik reaksiyonların klinik öyküsüne ve IgE anti-α-Gal antikor seviyelerinin ölçümüne dayanmaktadır9. Mevcut bulgular, kene ısırıklarının AGS 18,19'un ortaya çıkmasında başlıca risklerden birini oluşturduğunu, kene ısırığı 19'u takiben IgE düzeylerinde α-Gal'e 20 kat veya daha fazla bir artış, AGS20,21,22'li hastalarda kene ısırığı öyküsü, AGS hastalarında kene antijenlerine reaktif antikorların varlığı 19, ve anti-α-Gal IgE'nin kene karşıtı IgE seviyeleri19,23 ile güçlü bir şekilde ilişkili olduğunu, ancak hangi biyomoleküllerin gerçekte dahil olduğunu değerlendirmek için daha ileri çalışmalara ihtiyaç duyulduğunu belirtti.

Ek olarak, bir başka olası senaryo, kene ısırıklarına karşı güçlü alerjik reaksiyonlar ve yüksek düzeyde anti-α-Gal IgE antikorları sunan, ancak memeli eti tüketimine toleranslı olan hastalardır12. Bu nedenle, memeli eti alerjisi, kene ısırığı ile ilgili alerjinin belirli bir türü olabilir. AGS ile ilişkili başlıca kene türleri arasında Amblyomma americanum (ABD), Amblyomma sculptum (Brezilya), Amblyomma testudinarium ve Haemaphysalis longicornis (Japonya), Ixodes holocyclus (Avustralya) ve Ixodes ricinus (Avrupa'daki Lyme borreliosis'in ana vektörü)11,24 bulunur.

Kene ısırıkları ile ilgili IgE üretimini değerlendirmek için kullanılan tek model, α-1,3-galaktosiltransferaz nakavt edilmiş (α-Gal KO) fareler25,26 için gen ile genetik olarak değiştirilmiş fare modelidir, çünkü diğer memeliler gibi, fareler de proteinler ve lipitler üzerinde α-Gal eksprese eder ve α-Gal'e IgE üretmez. Bununla birlikte, zebra balığı (Danio rerio), memelilere uygulanan biyomedikal araştırmalar için yararlı bir modeldir, çünkü memelilerle birçok anatomik benzerliği paylaşır ve insanlar gibi α-Gal'i sentezleyemez. α-Gal, zebra balıklarında doğal olarak üretilmediğinden, uygun fiyatlı bir modeldir, manipüle edilmesi kolaydır ve α-Gal ile ilişkili alerjik reaksiyonların incelenmesi için yüksek bir örneklem büyüklüğüne izin verir.

Bu çalışmada, zebra balığı, lokal alerjik reaksiyonları, davranış kalıplarını ve tükürük26,27 kene ve müteakip memeli eti tüketimine karşı perkütan sensitizasyona yanıt ile ilişkili moleküler mekanizmaları karakterize etmek ve tanımlamak için model bir organizma olarak kullanılmıştır. Bu amaçla, balıklar intradermal enjeksiyon ile kene tükürüğüne maruz bırakılır ve daha sonra α-Gal27 içeren hayvan kullanımına uygun memeli eti türevi ürünler içeren köpek yemi ile beslenir, daha sonra olası ilişkili alerjik reaksiyonlar değerlendirilir. Bu yöntem, alerjik süreçlerle ilgili diğer biyomoleküllerin, özellikle AGS ile ilgili olanların incelenmesine uygulanabilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Burada açıklanan tüm yöntemler, Castilla La Mancha Üniversitesi Hayvan Deneyleri Etik Komitesi tarafından "İnaktive edilmiş M. bovis aşısına karşı bağışıklık tepkisinin değerlendirilmesi ve zebra balığı model numarası PR-2017-05-12'de M. marinum ile meydan okuma" çalışması kapsamında onaylanmıştır.

Keneler, kolonideki kenelerin temsili örneklerinin ortak kene patojenleri için PCR tarafından test edildiği laboratuvar kolonisinden elde edildiPatojenlerin yokluğunu doğrulamak için Çek Cumhuriyeti Bilimler Akademisi Biyoloji Merkezi (IP BC CAS), Çek Cumhuriyeti.Tüm hayvan deneyleri, Çek Cumhuriyeti Hayvan Koruma Kanunu No. 246/1992 Sb (etik onay No. 34/2018) uyarınca gerçekleştirildi.

1. Zebra balığı tedavisi

NOT: Çalışma, memeli eti tüketimine yanıt olarak kene tükürüğü ile tedavi edilen zebra balıklarında alerjik reaksiyonları ve bağışıklık tepkisini değerlendirmek için tasarlanmıştır.

  1. Balıklara (bölüm 4'te açıklandığı gibi) kene tükürüğü, ticari Gala1-3Gal-BSA 3 (α-Gal) (bakınız Malzeme Tablosu), pozitif bir kontrol olarak kullanılırken, fosfat tamponlu salin (PBS) negatif bir kontrol olarak muamele edin. Yetişkin zebra balığı rastgele cinsiyet dengeli üç gruba ayrılır (Şekil 1).
    NOT: AGS ile ilgili istenen diğer bileşikler bu model kullanılarak değerlendirilebilir.

2. Ixodes ricinus kene tükürüğü ekstraksiyonu

  1. Gine domuzlarında 6-7 gün boyunca beslenen yarı engorge patojen içermeyen dişi keneler kullanın.
  2. Keneyi PBS'de% 2'lik bir pilokarpin hidroklorür çözeltisinin 5 μL'si ile (wt / vol) pH 7.4'te ( Malzeme Tablosuna bakınız) hemokole, kene tükürük üretimini indüklemek için daha önce tarif edildiği gibi0.33 mm'lik bir iğne ile 50 μL'lik bir şırınga kullanarak hemokole uygulayın.
    NOT: Keneler forseps kullanılarak işlenir; Onları kavrarken çok fazla güç uygulamamaya dikkat edin.
  3. Bir mikropipet üzerine monte edilmiş 10 μL'lik bir uç kullanarak tükürük toplayın.
    1. Ucu kene hipostomunun içine dikkatlice yerleştirin.
    2. Tükürüğü buz üzerinde 1,5 mL'lik bir tüpte tutun, havuzda biriktirin ve daha önce tarif edildiği gibi -80 ° C'de saklayın27.
  4. Tükürük protein konsantrasyonunu belirlemek, önceki çalışmalarda olduğu gibi balığa enjekte edilecek protein miktarını belirlemek için27 üreticinin tavsiyelerini takiben bir BCA Protein Tahlil Kiti (bakınız Malzeme Tablosu) kullanarak.

3. Zebra balıklarının bakımı

  1. Zebra balığını, 14 saat/10 saatlik aydınlık/karanlık döngü ile 27 °C'de akan bir su sisteminde tutun (Şekil 2).
  2. Balıkları günde iki kez sabah 9:30 ve 13:30'da kuru balık yemi (50-70 μg / balık) ile 2. güne kadar besleyin.
  3. Balıkları günde iki kez sabah 9:30 ve 13:30'da tedavi enjeksiyonundan sonraki 2. günden deneyin sonuna kadar kuru köpek yemi (50-70 μg / balık) ile besleyin

4. Zebra balığı enjeksiyonu

  1. Grup başına benzer dişi/erkek oranına ve benzer ağırlığa sahip 10 balık seçin.
    NOT: Grup 1, PBS enjekte edilen balıkları, grup 2'de kene tükürüğü enjekte edilen balıkları ve grup 3'te α-Gal enjekte edilen balıkları içerir.
  2. Balıkları% 0.02 trikain metansülfonat (MS-222) içine daldırarak kısaca uyuşturun (Film 1).
    NOT: Düzgün anestezi uygulanan balıklar normal solunum gösterir ve yüzmezken, su tankının dibine yerleştirilebilir veya yüzebilir. Olası fizyolojik hasarı önlemek için her balık ayrı ayrı uyuşturulmalıdır.
  3. Bir balık ağı kullanarak anestezi altındaki balıkları yakalayın.
  4. Balıkları, lezyonları kontrol etmek için bileşikleri aynı yönde enjekte etmek için sağ taraftaki kaudal yüzgeci ile forseps veya elleri dikkatlice kullanarak yarım tarafına yerleştirin.
  5. Balık gruplarını, önceki çalışmalarda olduğu gibi intradermal olarak enjekte edin26, kaslara kaudal yüzgecine 5 mm'de ve balığın vücuduna göre 45 ° 'lik bir açıyla enjekte edin (Film 2). 1 cm, 1 μL PBS (α α-Gal)27'de 1 μL (9 μg / μL protein ile) I. ricinus tükürüğü ile donatılmış 1 cm, 29 G iğne ile donatılmış 100 μL şırınga ile 27 dahaönce tarif edildiği gibi 0, 3 ve 8. günlerde uygun tedaviyi kullanın,  ve 10 μL PBS (Şekil 3).
    NOT: Hayvana herhangi bir fiziksel zarar gelmesini önlemek için elleçleme hızlı ve dikkatli bir şekilde yapılmalıdır.
    Kene tükürüğündeki diğer biyomoleküller bu protokolü takiben değerlendirilebilir.
  6. Tedavi edilen balıkları, iyileşme için anestezi olmadan bir tatlı su tankına geri yerleştirin.
    NOT: Aynı gruptaki tüm balıklar geri kazanım için aynı su tankına yerleştirilebilir.

5. Zebra balığı besleme

  1. Köpek mamasını bir harç ve havaneyle ezin.
  2. 2. güne kadar günde iki kez 09:30 ve 13:30'da kuru balık yemi ile 50-70 μg / balık besleyin.
  3. Günde iki kez sabah 9:30 ve 13:30'da 50-70 μg / balık, tedavi enjeksiyonundan sonraki 2. günden 8. günde deneyin sonuna kadar püresi köpek yemi ile besleyin.
    NOT: Tedavilere yanıt olarak α-Gal veya IgE antikoruna karşı bağışıklık belirteçleri veya antikor titreleri veya farklı aşılamalar boyunca yem değerlendirilecekse, deneyin sonuna kadar besleme gerekli olacaktır.

6. Zebra balıklarında alerjik reaksiyonların, lezyonların ve davranışların değerlendirilmesi

  1. Hemorajik tip alerjik reaksiyonları (cilt kızarıklığı, renk değişikliği ve kanama) doğruluk için bir büyüteç veya stereomikroskop kullanarak inceleyin ve Tablo 1'de yer alan kategorizasyonu takiben balıklardaki görünümlerinin yerini belirtin (Şekil 4A).
    NOT: Şekil 4'te sunulan alerjik reaksiyonlar, kene tükürüğü enjeksiyonundan ve kırmızı et içeren yemlerin tüketiminden sonra ortaya çıkmıştır. Bu nedenle, tarif edilen reaksiyonlar, klinik bağlamda benzer reaksiyonlar ortaya çıktığı için AGS ile ilişkili reaksiyonların türüdür.
    1. Tedavilerden sonra ve balıklar su tankındayken günde iki kez yiyecek uygularken herhangi bir reaksiyon olup olmadığını gözlemleyin.
  2. Tablo 1'de yer alan kategorizasyonu takiben yüzme düzenindeki27 değişikliği (hareketlilik, hız, su tankının dibinde hareketsiz durma ve zikzak yüzme) değerlendirerek balık davranışını inceleyin.
  3. Birikmiş ölüm oranını değerlendirin, ölüm zamanı / günü de dahil olmak üzere ölü balık sayısını bildirin (Şekil 4B).
    NOT: Tüm parametreler tedaviden hemen sonra veya yem değişikliğinden sonra değerlendirilir ve nitel değişkenleri kategorize ederek 8. günde deneyin sonuna kadar günlük olarak takip edilir (Tablo 1). Bir öneri olarak, bu değerlendirme, zebra balığı hakkında bilgi sahibi bir profesyonel tarafından, bu hayvan modeliyle çalışma geçmişlerine ve deneyimlerine dayanarak davranış değişikliklerini göz önünde bulundurmak için yapılmalıdır.
  4. Her grupta bildirilen alerjik reaksiyonlar, anormal davranışlar ve beslenme değişiklikleri ile günlük zebra balığı sayısını hesaplayın ve gruplar arasında tek yönlü bir ANOVA testi ile karşılaştırın.

7. Örnek toplama

  1. Balıkları 8. günde% 0.04 MS-222'ye batırarak ötenazi yapın.
    NOT: Ayrıca deneme sırasında alerjik reaksiyonlardan ölen balıklardan örnekler toplayın.
  2. Balıkları pimli bir parafin tabağa sabitleyin.
  3. Ötanaziden hemen sonra, solungaçlar hala kanla sulandığında, 1 cm, 29 G iğne ile donatılmış 0.5 mL'lik bir şırınga kullanarak, balığın solungaç kan damarlarından29 serum toplayın. Kullanıma kadar -20 ° C'de 1,5 mL'lik bir tüpte saklayın (Film 3).
  4. Balıkları bir neşter bıçağı ile sagittal olarak kesin ve ortaya çıkarsa iç lezyonları (hemorajik lezyonlar veya granülomlar)27,30 değerlendirin.
    NOT: Lezyonlar mutlaka ortaya çıkmaz, ancak ortaya çıkarlarsa kaydedilmelidir.
  5. Her bir balıktan bağırsak (Film 4) ve böbreği (Film 5), daha önce tarif edildiği gibi ayrı boş 1.5 mL tüplerde toplayın31 ve bunları -80 ° C'de saklayın (Şekil 4C).
  6. Bir RNA saflaştırma kiti kullanarak zebra balığı bağırsağından ve böbrek örneklerinden toplam RNA'yı çıkarın (bkz.
  7. Zebra balığında daha önce tarif edildiği gibi bağışıklık tepkisi ile ilgili genlerin ekspresyonunu analiz edin30,32 (primer dizileri için Tablo 2'ye bakınız), üreticinin talimatlarına göre RT-qPCR için ters transkripsiyon karışımı kullanarak kantitatif bir ters transkripsiyon-polimeraz zincir reaksiyonu (RT-qPCR) gerçekleştirin (bkz. mRNA cT değerlerini D. rerio GAPDH'ye karşı normalleştirin ve eşit olmayan varyansa sahip bir Student t-testi kullanarak gruplar arasında (tükürük ile tedavi edilen balıklar, α-Gal ve PBS ile tedavi edilen gruplar) karşılaştırın.
  8. Daha önce tarif edildiği gibi ELISA ile serum örneklerinde zebra balıklarında α-Gal'i tanıyan IgM antikor titrelerini ELISA ile belirleyin27,30. Bir plaka okuyucu kullanarak antikor titrelerini O.D.450 nm değerleri olarak kaydedin ve eşit olmayan varyanslı bir Student t-testi kullanarak gruplar arasında (tükürük ile muamele edilmiş balıklar, α-Gal ve PBS ile tedavi edilen gruplar) karşılaştırın.
    NOT: IgM antikor titrelerinin belirlenmesi ve ekspresyon gen analizi isteğe bağlıdır ve sadece immünolojik bilgi gerektiğinde yapılır. RT-qPCR karışımı, gerçek zamanlı qPCR kullanarak gen ekspresyon analizi için birinci basamaklı bir cDNA sentez kitidir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Burada sunulan protokol, daha önce yayınlanmış deneylerin çeşitli yönlerine dayanmaktadır27,30 ve zebra balığı modelinin AGS çalışması ve α-Gal'e karşı bağışıklık tepkisi için kurulduğu ve doğrulandığı laboratuvarımızda gerçekleştirilen sonuçlar, çünkü hem insanlar hem de zebra balığı bu molekülü sentezlememektedir13. Bu model, kene tükürüğüne karşı konakçı yanıtının bir sonucu olarak çeşitli alerjik reaksiyonların karakterizasyonuna ve de...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Zebra balığı, bağışıklık tepkisinin moleküler mekanizmaları, patojen hastalıkları, yeni ilaç testleri ve enfeksiyonlara karşı aşılama ve korunma çalışmaları için çok uygun bir araç olan uygun maliyetli ve kullanımı kolay bir modeldir33,34,35. Zebra balıklarının davranışları üzerine yapılan çalışma yararlıdır, çünkü önceki çalışmalar bazı balık türlerinin stresli olduklarında tankın dibinde hareketsiz kaldığını, bu da yiyecek tük...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

SaBio grubu üyelerine, balık deney tesisi ile deneysel tasarımdaki işbirlikleri ve teknik yardımları için ve Juan Galcerán Sáez'e (IN-CSIC-UMH, İspanya) zebra balığı sağladığı için teşekkür ederiz. Bu çalışma Ministerio de Ciencia e Innovación/Agencia Estatal de Investigación MCIN/AEI/10.13039/501100011033, İspanya ve AB-FEDER (Grant BIOGAL PID2020-116761GB-I00) tarafından desteklenmiştir. Marinela Contreras, Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades, İspanya tarafından IJC2020-042710-I hibesi ile finanse edilmektedir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
1.5 mL tüpVWR525-0990
Tüm Hazırlık DNA / RNAQiagen80284
Su sporları tesisleri
BCA Protein Test Kiti ve nbsp;Thermo Fisher Scientific23225
Dissection setiVWR631-1279
Köpek Maması - Kırmızı KlasikAcana
ELISA tabakları-96 kuyuluThermo Fisher Scientific10547781
Gala1-3Gal-BSA 3 (α-Gal) DextraNGP0203
iScript Ters Transkripsiyon SupermixSupermix 1708840
Mikrolitre şırıngalarHamilton7638-01
Plaka okuyucuherhangi bir
Fosfat tamponlu tuzlu suSigmaP4417-50TAB
pilokarpin hidroklorür ve nbsp;SigmaP6503
Pipet ucu P10 VWR613-0364
Pipet ucu P1000VWR613-0359
Birinci sınıf gıda tropikal balıkDAPC
Sünger Hayvan Tutucu Hurda köpükten yapılmıştır
Stereomikroskopherhangi bir
Termal Döngüleyici, Gerçek Zamanlı PCR,herhangi bir
Trikain metansülfonat (MS-222)SigmaE10521
,

Kaynaklar

  1. de la Fuente, J., Estrada-Pena, A., Venzal, J. M., Kocan, K. M., Sonenshine, D. E. Overview: Ticks as vectors of pathogens that cause disease in humans and animals. Frontiers in Bioscience: A Journal and Virtual Library. 13 (18), 6938-6946 (2008).
  2. de la Fuente, J., et al. Tick-pathogen interactions and vector competence: identification of molecular drivers for tick-borne diseases. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 7, 114(2017).
  3. Villar, M., et al. Characterization of tick salivary gland and saliva alphagalactome reveals candidate alpha-gal syndrome disease biomarkers. Expert Review of Proteomics. 18 (12), 1099-1116 (2021).
  4. Chmelař, J., Kotál, J., Kovaříková, A., Kotsyfakis, M. The use of tick salivary proteins as novel therapeutics. Frontiers in Physiology. 10, 812(2019).
  5. Chung, C. H., et al. Cetuximab-induced anaphylaxis and IgE specific for galactose-alpha-1,3-galactose. The New England Journal of Medicine. 358 (11), 1109-1117 (2008).
  6. Van Nunen, S. A., O'Connor, K. S., Clarke, L. R., Boyle, R. X., Fernando, S. L. An association between tick bite reactions and red meat allergy in humans. The Medical Journal of Australia. 190 (9), 510-511 (2009).
  7. Cabezas-Cruz, A., et al. Environmental and molecular drivers of the α-Gal syndrome. Frontiers in Immunology. 10, 1210(2019).
  8. de la Fuente, J., Pacheco, I., Villar, M., Cabezas-Cruz, A. The alpha-Gal syndrome: new insights into the tick-host conflict and cooperation. Parasites & Vectors. 12 (1), 154(2019).
  9. Platts-Mills, T. A. E., et al. On the cause and consequences of IgE to galactose-α-1,3-galactose: A report from the National Institute of Allergy and Infectious Diseases workshop on understanding IgE-mediated mammalian meat allergy. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 145 (4), 1061-1071 (2020).
  10. Commins, S. P., et al. Delayed anaphylaxis, angioedema, or urticaria after consumption of red meat in patients with IgE antibodies specific for galactose-alpha-1,3-galactose. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (2), 426-433 (2009).
  11. Platts-Mills, T. A. E., Schuyler, A. J., Tripathi, A., Commins, S. P. Anaphylaxis to the carbohydrate side chain alpha-gal. Immunology and Allergy Clinics of North America. 35 (2), 247-260 (2015).
  12. Mateos-Hernández, L., et al. Tick-host conflict: immunoglobulin E antibodies to tick proteins in patients with anaphylaxis to tick bite. Oncotarget. 8 (13), 20630-20644 (2017).
  13. Galili, U. Evolution in primates by "Catastrophic-selection" interplay between enveloped virus epidemics, mutated genes of enzymes synthesizing carbohydrate antigens, and natural anti-carbohydrate antibodies. American Journal of Physical Anthropology. 168 (2), 352-363 (2019).
  14. Hilger, C., Fischer, J., Wölbing, F., Biedermann, T. Role and mechanism of galactose-alpha-1,3-galactose in the elicitation of delayed anaphylactic reactions to red meat. Current Allergy and Asthma Reports. 19 (1), 3(2019).
  15. Cabezas-Cruz, A., Valdés, J., de la Fuente, J. Cancer research meets tick vectors for infectious diseases. The Lancet. Infectious Diseases. 14 (10), 916-917 (2014).
  16. Yilmaz, B., et al. Gut microbiota elicits a protective immune response against malaria transmission. Cell. 159 (6), 1277-1289 (2014).
  17. Cabezas-Cruz, A., et al. Regulation of the immune response to α-Gal and vector-borne diseases. Trends in Parasitology. 31 (10), 470-476 (2015).
  18. Weins, A. B., Eberlein, B., Biedermann, T. Diagnostics of alpha-gal syndrome: Current standards, pitfalls and perspectives. Der Hautarzt; Zeitschrift Fur Dermatologie, Venerologie, Und Verwandte Gebiete. 70 (1), 36-43 (2019).
  19. Commins, S. P., et al. The relevance of tick bites to the production of IgE antibodies to the mammalian oligosaccharide galactose-α-1,3-galactose. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 127 (5), 1286-1293 (2011).
  20. Fischer, J., Yazdi, A. S., Biedermann, T. Clinical spectrum of α-Gal syndrome: from immediate-type to delayed immediate-type reactions to mammalian innards and meat. Allergo Journal International. 25 (2), 55-62 (2016).
  21. Hodžić, A., et al. Infection with Toxocara canis inhibits the production of IgE antibodies to α-Gal in humans: towards a conceptual framework of the hygiene hypothesis. Vaccines. 8 (2), 167(2020).
  22. Kiewiet, M. B. G., et al. Clinical and serological characterization of the α-Gal syndrome-importance of atopy for symptom severity in a European cohort. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. In Practice. 8 (6), 2027-2034 (2020).
  23. Steinke, J. W., Platts-Mills, T. A. E., Commins, S. P. The alpha-gal story: lessons learned from connecting the dots. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 135 (3), 589-596 (2015).
  24. Hashizume, H., et al. Repeated Amblyomma testudinarium tick bites are associated with increased galactose-α-1,3-galactose carbohydrate IgE antibody levels: A retrospective cohort study in a single institution. Journal of the American Academy of Dermatology. 78 (6), 1135-1141 (2018).
  25. Chandrasekhar, J. L., et al. Cutaneous exposure to clinically relevant lone star ticks promotes IgE production and hypersensitivity through CD4+ T cell- and MyD88-dependent pathways in mice. Journal of Immunology. 203 (4), 813-824 (2019).
  26. Araujo, R. N., et al. Amblyomma sculptum tick saliva: α-Gal identification, antibody response and possible association with red meat allergy in Brazil. International Journal for Parasitology. 46 (3), 213-220 (2016).
  27. Contreras, M., et al. Allergic reactions and immunity in response to tick salivary biogenic substances and red meat consumption in the zebrafish model. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 10, 78(2020).
  28. Poole, N. M., Mamidanna, G., Smith, R. A., Coons, L. B., Cole, J. A. Prostaglandin E(2) in tick saliva regulates macrophage cell migration and cytokine profile. Parasites & Vectors. 6 (2), 261(2013).
  29. Seibel, H., Baßmann, B., Rebl, A. Blood will tell: what hematological analyses can reveal about fish welfare. Frontiers in Veterinary Science. 8, 616955(2021).
  30. Pacheco, I., et al. Vaccination with alpha-gal protects against mycobacterial infection in the zebrafish model of tuberculosis. Vaccines. 8 (2), 195(2020).
  31. Gupta, T., Mullins, M. C. Dissection of organs from the adult zebrafish. Journal of Visualized Experiments. (37), e1717(2010).
  32. Lu, M. -W., et al. The interferon response is involved in nervous necrosis virus acute and persistent infection in zebrafish infection model. Molecular Immunology. 45 (4), 1146-1152 (2008).
  33. Saralahti, A., et al. Adult zebrafish model for pneumococcal pathogenesis. Developmental and Comparative Immunology. 42 (2), 345-353 (2014).
  34. Gore, A. V., Pillay, L. M., Venero Galanternik, M., Weinstein, B. M. The zebrafish: A fintastic model for hematopoietic development and disease. Wiley Interdisciplinary Reviews. Developmental Biology. 7 (3), 312(2018).
  35. Katoch, S., Patial, V. Zebrafish: An emerging model system to study liver diseases and related drug discovery. Journal of Applied Toxicology. 41 (1), 33-51 (2021).
  36. Kalueff, A. V., et al. Towards a comprehensive catalog of zebrafish behavior 1.0 and beyond. Zebrafish. 10 (1), 70-86 (2013).
  37. Xin, N., Jiang, Y., Liu, S., Zhou, Y., Cheng, Y. Effects of prednisolone on behavior and hypothalamic-pituitary-interrenal axis activity in zebrafish. Environmental Toxicology and Pharmacology. 75, 103325(2020).
  38. Aleström, P., et al. Zebrafish: Housing and husbandry recommendations. Laboratory Animals. 54 (3), 213-224 (2020).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Alfa Gal SendromuMemeli Eti AlerjisiBa kl k Yan tntradermal EnjeksiyonRT qPCR AnaliziIgM Antikor TespitiOmik Teknolojileri
Kene tükürüğü biyomoleküllerine yanıt olarak alerjik reaksiyonların incelenmesi için zebra balığı hayvan modeli
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.