Mevcut protokol, buğdayda perfloroalkil asitlerin uzun mesafeli taşınması için basit ve etkili bir yöntem tanımlamaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Mevcut protokol, buğdayda perfloroalkil asitlerin uzun mesafeli taşınması için basit ve etkili bir yöntem tanımlamaktadır.
Büyük miktarlarda perfloroalkil asitler (PFAA'lar) toprağa sokulmuş ve bitkiler tarafından biriktirilerek insan sağlığı için potansiyel riskler oluşturmuştur. PFAA'ların bitkiler içinde birikmesini ve yer değiştirmesini araştırmak zorunludur. Uzun mesafeli taşıma, bitki yapraklarından floem yoluyla yenilebilir dokulara aktarılan PFAA'lar için önemli bir yoldur. Bununla birlikte, kısa süreli maruz kalma döneminde organik kontaminasyonun translokasyon potansiyelini değerlendirmek daha önce zordu. Bölünmüş kök deneyi, bu çalışmada, santrifüj tüpü A'nın 50 mL çeyrek mukavemetli Hoagland steril besin çözeltisine sahip olduğu iki 50 mL santrifüj tüpünde (A ve B) gerçekleştirilen hidroponik bir deney kullanarak PFAA'ların uzun mesafeli translokasyonunu etkili bir şekilde ortaya çıkarmak için bir çözüm sunarken, santrifüj tüpü B aynı miktarda besin konsantrasyonuna sahipti. ve hedef PFAA'lar (perflorooktan sülfonik asit, PFOS ve perflorooktan asit, PFOA) belirli bir konsantrasyonda eklenir. Tam buğday kökü manuel olarak iki parçaya ayrıldı ve dikkatlice A ve B tüplerine yerleştirildi. PFAA'ların köklerdeki, buğday sürgünlerindeki ve A ve B tüplerindeki çözeltilerin konsantrasyonu, 7 gün boyunca bir inkübatörde kültürlendikten ve hasat edildikten sonra sırasıyla LC-MS / MS kullanılarak değerlendirildi. Sonuçlar, PFOA ve PFOS'un floem boyunca sürgünden köke benzer bir uzun mesafeli taşıma işlemi yaşadığını ve ortam ortamına salınabileceğini göstermiştir. Böylece, bölünmüş kök tekniği, farklı kimyasalların uzun mesafeli taşınmasını değerlendirmek için kullanılabilir.
Perfloroalkil asitler (PFAA'lar), yüzey aktivitesi ve termal ve kimyasal kararlılık 1,2,3 dahil olmak üzere mükemmel fizikokimyasal özellikleri nedeniyle çeşitli ticari ve endüstriyel ürünlerde yaygın olarak kullanılmaktadır. Perflorooktan sülfonik asit (PFOS) ve perflorooktan asit (PFOA), dünya çapında kullanılan en önemli iki PFAA'dır 4,5,6, ancak bu bileşikler sırasıyla 2009 ve 2019 yıllarında uluslararası Stockholm Sözleşmesinde listelenmiştir 7,8
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Buğday tohumları, Triticum aestivum L., tedarik edildi (bkz. Malzeme Tablosu) ve bu çalışma için kullanıldı.
1. Buğday fidesi çimlenmesi ve topraksız kültür
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bölünmüş kök deneyi, PFAA'ların buğdaydaki uzun mesafeli taşınmasını araştırdı. Şekil 2A,C'de gösterildiği gibi, hem PFOA hem de PFOS buğday kökü tarafından alınabilir ve sürgüne aktarılabilir. PFOS ve PFOA, buğday kökünde ve boş kontrolün A tüpünde çözelti tespit edilmedi. Çivisiz çözeltide kültürlenen buğday köklerinde PFOS ve PFOA'nın, 0.26 ng/g ± 0.02 ng/g ve 0.64 ng/g ± 0.05 ng/g kuru ağırlık (dw) (n=3) konsantrasyonlarında tespit edildiği ve bunun da tam buğday bitkisi.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu yöntemin doğruluğunu sağlamak için, B tüpündeki çivili çözeltinin A tüpündeki çivisiz çözeltiyi kirletmediğinden emin olmak için dikkatli bir çalışma yapılmalıdır. Bu çalışmada hedef PFAA'ların verilen konsantrasyonu, gerçek ortamdaki konsantrasyonlarından nispeten daha yüksekti ve LC-MS / MS kullanarak buğdaydaki hedef PFAA'ların ve çivisiz çözeltinin izlenmesini sağladı.
Bu yöntemin sınırlamaları vardır. Her işlem grubunda sadece bir buğday fidesi kullanıldığından ve kök ikiye bölündüğün.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.
Çin Doğa Bilimleri Vakfı (NSFC 21737003), Çin Üniversiteleri Bilimsel Fonu (No. 2452021103) ve Çin Doktora Sonrası Bilim Vakfı'nın (No. 2021M692651, 2021M702680) finansal desteğini minnetle kabul ediyoruz.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| ACQUITY UPLC BEH C18 sütunu | Waters, Milford, MA | Sıvı kromatografik sütun | |
| Temizleyici PEP kartuşu | Bonna-Angel Technologies, Çin | Katı faz ekstraksiyon sütunu | |
| Clearnert Pesticarb kartuşu | Bonna-Angel Technologies, Çin | Katı faz ekstraksiyon kolonu | |
| LC-MS/MS (Sular Acquity UPLC i-Sınıfı Xevo TQ-S'ye Bağlı) | Sular, Milford, MA | Sıvı kromatografisi ve kütle spektrometresi | |
| Liyofilizatör | Boyikang Instrument Ltd., Pekin, Çin | FD-1A50 | Dondurularak kurutulmuş numune |
| Masslynx | Waters, Milford, MA | veri analiz yazılımı | |
| Metil tert-bütil eter | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, ABD) | bitki dokularından hedef bileşikleri çıkarmak için kullanın | |
| MPFAC-MXA | Wellington Laboratuvarları (Ontario, Kanada) | PFACMXA0518 | iç standartlar |
| PFAC-MXB | Wellington Laboratuvarları (Ontario, Kanada) | PFACMXB0219 | PFAA kalibrasyon standartlarının karışımı |
| PFOA | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, ABD) | 335-67-1 | a, PFAA'ları temsil eder |
| PFOS | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, ABD) | 2795-39-3 | a, PFAA'ları temsil eder |
| Sodyum karbonat tamponu | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, ABD) | bitki dokularından hedef bileşikleri çıkarmak için kullanın | |
| Tetrabütilamonyum hidrojen sülfat | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, ABD)bitki | dokularından hedef bileşikleri çıkarmak için kullanın | |
| Buğday tohumları | Çin Tarım Bilimleri Akademisi (Pekin, Çin) | Triticum aestivum L. |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.