Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Tüm Vücudun Solunabilir Silika'ya Maruz Bırakılması Yoluyla Bir Silikoz Sıçan Modeli Oluşturulması

1.8K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/64467

⸱

28 Ekim 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Bu çalışma, bir inhalasyon odasında tüm vücut boyunca silikanın solunması ile bir silikoz sıçan modeli oluşturma tekniğini açıklamaktadır. Silikozlu sıçanlar, insan silikozunun patolojik sürecini, iyi tekrarlanabilirlik ile kolay, uygun maliyetli bir şekilde yakından taklit edebilir.

Özet

Silikozisin en önemli nedeni, iş ortamında silikanın solunmasıdır. Bazı anatomik ve fizyolojik farklılıklara rağmen, kemirgen modelleri insan silikozunu incelemek için önemli bir araç olmaya devam etmektedir. Silikoz için, klasik patolojik sürecin, yeni üretilmiş kuvars parçacıklarının solunması yoluyla indüklenebilir olması gerekir, bu da özellikle insan meslek hastalığını indüklemek anlamına gelir. Bu çalışma, silikozisin patolojik dinamik evrim sürecini oluşturmak ve etkili bir şekilde taklit etmek için bir teknik tanımladı. Ayrıca, teknik, herhangi bir ameliyat gerektirmeden iyi bir tekrarlanabilirliğe sahipti. İnhalasyon maruz kalma sistemi üretildi, doğrulandı ve solunabilir partikül inhalasyonu ile ilgili toksikoloji çalışmaları için kullanıldı. Kritik bileşenler aşağıdaki gibidir: (1) bir hava akışı kontrolörü ile ayarlanmış toplu kuru SiO2 toz jeneratörü; (2) 3 yetişkin sıçanı barındıran 0,3m3 tüm vücut inhalasyon maruz kalma odası; (3) oksijen konsantrasyonunu, sıcaklığı, nemi ve basıncı gerçek zamanlı olarak düzenlemek için bir izleme ve kontrol sistemi; ve (4) laboratuvar teknisyenlerini ve çevreyi korumak için bir bariyer ve atık bertaraf sistemi. Özetle, mevcut protokol tüm vücut yoluyla inhalasyonu rapor eder ve inhalasyon odası, düşük mortalite, daha az yaralanma ve daha fazla koruma ile güvenilir, makul ve tekrarlanabilir bir sıçan silikotik modeli oluşturmuştur.

Giriş

Silikanın solunmasından kaynaklanan silikozis, Çin'deki en ciddi meslek hastalığıdır ve her yıl toplam meslek hastalığı raporlarının %80'inden fazlasını oluşturmaktadır1. Silikozisin etiyolojisi açıktır ve önlenebilir ve kontrol altına alınabilir, ancak etkili bir tedavi yöntemi mevcut değildir2. Birçok ilacın temel çalışmalarda etkili olduğu kanıtlanmıştır, ancak kesin olmayan klinik etkileri vardır 3,4. Bu nedenle, silikozisin patolojik ve fizyolojik mekanizmalarının hala araştırılması gerekmektedir.

Birçok çalı....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan deneyleri, Amerika Birleşik Devletleri Ulusal Sağlık Enstitüleri Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'na göre yürütülmüş ve Kuzey Çin Bilim ve Teknoloji Üniversitesi Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır (protokol kodu LX2019033 ve 2019-3-3 onayı). Bu çalışma için 3 haftalık erkek Wistar sıçanları kullanıldı. Tüm sıçanlar odun talaşı ile statik kafeslerde tutuldu. Hayvanlar 12 saat / 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde tutuldu ve yiyecek ve su ad libitum sağlandı. Takip deneyleri 1 haftalık adaptif beslenmeden sonra yapıldı.

1. Hayvan hazırlama

  1. Varışta, tüm fareleri belirl....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Önerilen yöntem kullanılarak, sıçanlarda bazı potansiyel mekanizmalar ve silikoz patogenezi araştırıldı. İnhalasyon odasının şeması Şekil 1'de gösterilmiştir. Oda, daha önce açıklandığı gibi hava ile verilen bir silika jeneratörü, bir tüm vücut odası ve bir atık bertaraf sisteminden oluşuyordu17. Önceki çalışmalarda solunum fonksiyonları, serum ve akciğerde inflamatuar faktörlerin seviyeleri, kollajen birikimi ve miyofibroblast farklılaşması bildirilmiştir 10,18,19.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Silikozun önde gelen nedeni olan silika, kalıplamada belirleyici bir rol oynar. Pnömokonyozlu hastalar tarafından solunan silika parçacıkları, mekanik kesim ile üretilen taze, serbest silika parçacıklarıdır. Silika, ya doğrudan taze parçalanmış parçacık yüzeylerinde ya da makrofajlar üzerindeki etkisiyle dolaylı olarak reaktif oksijen türleri üretebilir25. Bu nedenle, silika parçacıklarının öğütülmesi çok önemlidir. Önerilen protokolde silika, daha ince, daha düzensiz hale getirmek ve yüzey alanın.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmezler.

Teşekkürler

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82003406), Hebei Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı (H2022209073) ve Hebei Eğitim Departmanı Bilim ve Teknoloji Projesi (ZD2022127) tarafından finanse edilmiştir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Hava dedektörü (basınçlı atmosferik örnekleyici)Qingdao Xuyu Çevre Koruma Teknolojisi Co., LTD
Anatomik tablo  Belirli bir marka önerilmez.
CD68Abcamab201340
DABZSGB-BIOZLI-9018
Antikoru Elektrikli ısıtma hava üfleme kurutucuShanghai Yiheng Scientific Instrument Co., LTD
Elektronik dengeOHRUS
Gömme makinesileica
Egzoz gazı boşaltma cihazı  HOPE Sanayi ve Ticaret Ltd. Şti.
Jeneratör sistemleri HOPE Sanayi ve Ticaret Ltd. Şti.
Eldivenler (ince laboratuvar eldivenleri)Secco medical
Hematoksilen ve eozinBaSO Diagnostics Inc.BA4025
HOPE MED 8050 pozlama kontrol cihazıHOPE Sanayi ve Ticaret Ltd. Şti.
Soluma odası HOPE Sanayi ve Ticaret Ltd. Şti.
Enjeksiyon şırıngasıve nbsp; Belirli bir marka önerilmez.
Işık mikroskobu olympus
Nesne slaytshitai
PV-6000 (HRP konjuge keçi anti-fare IgG polimeri)Pekin Zhongshan Jinqiao Biyoteknoloji Co, Ltds5631
Silikon dioksitSigma-Aldrich
Dilimleme makinesileicaRM2255
Atık gaz arıtma cihazıHOPE Sanayi ve Ticaret A.Ş.
Islak kutuKooperatifi plastik Ürünler Fabrikası
XylolTianjin Yongda Kimyasal Reaktif Co, LTD

Kaynaklar

  1. Li, J., et al. The burden of pneumoconiosis in China: an analysis from the Global Burden of Disease Study. BMC Public Health. 22 (1), 1114(2019).
  2. The Lancet Respiratory Medicine. The world is failing on silicosis. The Lancet. Respiratory Medicine

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Silika İnhalasyonuTüm Vücut Maruziyetiİnhalasyon OdasıPatolojik SüreçFibrotik LezyonlarPolarize Işık Mikroskopisiİmmünohistokimyasal BoyamaAlveoler Duvar Kalınlaşması