Yöntem makalesi

Kısmi Siyatik Sinir Ligasyonu: Yeni Tedavilerin Antinosiseptif Etkisini İncelemek için Kronik Nöropatik Ağrının Bir Fare Modeli

DOI:

10.3791/64555

⸱

6 Ekim 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pharmacology, College of Medicine, The University of Arizona, Tucson, 2Department of Anesthesiology, College of Medicine, The University of Arizona, Tucson, 3Neuroscience Graduate Interdisciplinary Program, College of Medicine, The University of Arizona, Tucson, 4Comprehensive Pain and Addiction Center, The University of Arizona, Tucson, 5Department of Anesthesiology and Pain Management, University of Texas Southwestern Medical Center

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Parsiyel siyatik sinir ligasyonu, termal ve mekanik uyaranlara abartılı tepkilerle karakterize uzun süreli kronik nöropatik ağrıya neden olur. Nöropatik ağrının bu fare modeli, ağrı yönetimi için yenilikçi terapileri incelemek için yaygın olarak kullanılır. Bu makalede, standardizasyonu ve tekrarlanabilirliği artırmak için cerrahi prosedür ayrıntılı olarak anlatılmaktadır.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kronik ağrının yönetimi bu güne kadar zor olmaya devam etmektedir ve mevcut tedaviler tolerans ve bağımlılık da dahil olmak üzere olumsuz etkilerle ilişkilidir. Kronik nöropatik ağrı, somatosensoriyel sistemdeki lezyonlardan veya hastalıklardan kaynaklanır. Yan etkileri azaltılmış potansiyel tedavileri araştırmak için, hayvan ağrı modelleri klinik öncesi çalışmalarda altın standarttır. Bu nedenle, iyi karakterize edilmiş ve iyi tanımlanmış modeller, yenilikçi tedavilerin geliştirilmesi ve doğrulanması için çok önemlidir.

Siyatik sinirin kısmi ligasyonu (pSNL), farelerde kronik nöropatik ağrıyı indükleyen, mekanik ve termal aşırı duyarlılık, devam eden ağrı ve uzuv sıcaklığındaki değişiklikler ile karakterize edilen bir prosedürdür ve bu modeli nöropatik ağrıyı preklinik olarak incelemek için mükemmel bir uyum haline getirir. pSNL, nöropatik ağrılı insanlarda gözlenen birçok semptomu yeniden ürettiği için nöropatik ağrıyı incelemek için avantajlı bir modeldir. Ayrıca, cerrahi prosedürün gerçekleştirilmesi nispeten hızlı ve basittir. Bir ekstremitenin tek taraflı pSNL'si, ipsilateral ve kontralateral pençeler arasında karşılaştırmanın yanı sıra merkezi sensitizasyonun değerlendirilmesine izin verir.

Kronik nöropatik aşırı duyarlılığı indüklemek için, siyatik sinirin dorsal üçte birini bağlamak için 9-0 emilemeyen bir naylon iplik kullanılır. Bu makalede cerrahi prosedür anlatılmakta ve kronik nöropatik ağrı gelişimi, yaygın olarak kullanılan birçok davranış testi ile karakterize edilmektedir. Kronik ağrıyı tedavi etmek için çok sayıda yenilikçi tedavi araştırıldığından, bu makale standardizasyon için çok önemli kavramlar ve nöropatik ağrıyı indüklemek için gereken ameliyatların doğru bir tanımını sunmaktadır.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kronik ağrı, dünya çapında önemli bir sağlık sorunudur ve Amerika Birleşik Devletleri'ndeki en pahalı sağlık sorunlarından biridir. Hem farmakolojik hem de farmakolojik olmayan modaliteler multidisipliner bir şekilde kullanıldığında kronik ağrı daha iyi yönetilir1. Kronik ağrının yönetimi zordur ve bazı durumlarda ağrıyı yeterince tedavi etmez2. Bu nedenle, kronik ağrı yönetimini iyileştirmek için yeni ve tamamlayıcı yöntemlere ihtiyaç vardır ve hayvan modelleri yenilikçi tedavileri araştırmak için çok önemlidir.

Kronik nöropatik ağrı, diyabet, enfeksiyonlar, sinir sıkışmaları veya otoimmün hastalıklar dahil olmak üzere somatosensoriyel sistemdeki lezyonlardan veya hastalıklardan kaynaklanır3. Nöropatik ağrı hem periferik hem de santral sensitizasyon mekanizmalarına dayanır ve sinirlerin lezyonundan kaynaklanır. Bu ağrı hem dokunma hem de termal olarak uyarılmış hiperaljezi ve allodinya, devam eden ağrı ve etkilenen ekstremitenin sıcaklığındaki değişiklikler ile karakterize edilebilir4. Mekanizmaları daha iyi anlamak ve yeni tedavileri ilerletmek için, kemirgenlerde nöropatik ağrının semptomlarını ve nedenlerini taklit etmek için çeşitli modeller geliştirilmiştir5. Örneğin, kemoterapötik ajan enjeksiyonları, spinal sinir ligasyonu (SNL), siyatik sinirin kronik daralma hasarı (CCI), pSNL, korunmuş sinir hasarı, siyatik sinir transeksiyonu ve siyatik sinir triseksiyonu6 ile nöropatik ağrı indüklenebilir. Özellikle, siyatik sinirin bağlanması, insanlarda gözlenen nöropatik ağrının, mekanik ve termal aşırı duyarlılık veya etkilenen ekstremitenin sıcaklığındaki değişiklikler, karmaşık bölgesel ağrı sendromunun (CRPS) karakteristiği gibi birçok özelliğini yeniden üretir7. Bu nedenle, bu model CRPS veya kronik nöropatik ağrıya neden olan diğer sinir hasarı etkilerinin incelenmesi için çok uygundur. Model ilk olarak Seltzer tarafından 1990yılında geliştirilmiştir 8 ve ağrı çalışmalarında yeni analjezik bileşikleri araştırmak veya kronik ağrının bilişsel etkilerini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılmaktadır 9,10,11,12,13. Model yüksek tekrarlanabilirlik sunar ve kısmi ligasyon periferik uyaranlara davranışsal tepkileri korur6.

Şu anda kullanılan modellerin çoğunda pSNL'de gözlenmeyen eksiklikler vardır. CCI modeli, daraltıcının sıkılığına bağlı olarak her hayvan arasında çok daha yüksek bir yaralanma değişkenliğine sahiptir ve ototomi, arka pençe basamaklarını değiştirerek modeli davranışsal analiz için uygun hale getirmez6. SNL modeli, sadece ileri teknik beceriler gerektirmekle kalmayıp aynı zamanda ciddi motor eksiklikleri riski taşıyan çok daha karmaşık ve daha uzun bir ameliyattır3. Bu eksiklikler pSNL modelinde görülmez. Tekrarlanabilirliğin kolaylığı, ameliyatın kısa sürmesi ve postoperatif olarak görülen motor defisit riskinin azalması, bu modeli periferik nöropatik ağrıyı incelemek için değerli kılmaktadır 8,14. Bununla birlikte, kısmi ligasyon prosedürünün kendisi deneyciler arasında değişkenliğe sahip olabilir, bu da bağlanmış sinir liflerinin sayısında daha az tutarlılık sağlar. Bu nedenle, ameliyatın detaylarının sunulması, çalışmalar arasında tekrarlanabilirliği artırmak için çok önemlidir.

Kronik nöropatiyi indüklemek için, siyatik sinirin genişliğinin üçte birini bağlamak için 9-0 emilemeyen bir naylon sütür kullanılır. Ameliyattan sonra, termal ve mekanik uyaranlara verilen yanıtlar abartılır, ameliyat sonrası 1. günde başlar ve 50 günden fazla sürer8. Burada, hem termal hem de mekanik hassasiyetler, Hargreaves'in, sıcak plakanın ve von Frey filament testlerinin kullanıldığı 28 gün boyunca değerlendirildi. Tüm davranışsal analizler, uzun süreli aşırı duyarlılığın tutarlılığını göstermiştir. Bu modelin hem morfin hem de ibuprofenin doza bağımlı etkilerine sahip olduğu gösterilmiştir ve bu da klinik öncesi ağrı çalışmaları için çok uygun olduğunu doğrulamaktadır. Özellikle, bu makalede, "sinir camı kancası" olarak adlandırılan benzersiz bir el yapımı cam aletin talimatları açıklanmaktadır. Bu araç, siniri manipüle etmek ve ameliyat sırasında istenmeyen ek sinir yaralanmasını önlemek için forseps yerine kullanılır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm prosedürler Arizona Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır ve Ulusal Sağlık Enstitüleri'nin laboratuvar hayvanlarının kullanımına ilişkin kılavuzlara uygundur (NIH yayını no. 80-23, 1966). Patojen içermeyen, yetişkin C57Bl6 / J fareler (testte ağırlık: 22-28 g), 12 saatlik bir ışık / karanlık döngüsünde iklim kontrollü odalarda standart vivaryum fare kafeslerine (kafes başına beş fare) yerleştirildi ve yiyecek ve su ad libitumuna erişmesine izin verildi. Tüm davranışsal deneyler, tedavi koşullarına kör olmuş deneyciler tarafından gerçekleştirildi.

1. Temel: mekanik hassasiyetin ölçüsü

  1. Farelerin varışında, 1 hafta boyunca hayvan tesisine alışmalarına izin verin. Ardından, hayvanları bundan sonra ≥7 gün boyunca deneyci kullanımına alıştırın.
  2. Fareleri testten önce 1 saat boyunca von Frey test cihazına alıştırın, şeffaf Pleksiglas kutulara, bir tel örgü üzerine, test odasıyla aynı odaya, tercihen alışkanlık sırasında odada bulunan deneyci ile birlikte yerleştirin.
  3. Temel pençe çekilme eşiğini, 3.61 (3.9 mN) filamentten başlayarak, Ek Tablo S1'de açıklanan von Frey filamentlerini kullanarak "yukarı ve aşağı" yöntemiyle belirleyin.
    1. Orta plantar arka pençenin bir dizi kalibre edilmiş ince (von Frey) monofilamentle araştırılmasına verilen geri çekilme tepkisini ölçün. Her bir filamenti, asılı tel örgü kafeslerde tutulan hayvanların pSNL ipsilateral arka pençesinin plantar yüzeyine bir kez dik olarak uygulayın. "Yukarı ve aşağı" yöntem15'i kullanarak mekanik hassasiyeti değerlendirin: filamentin boyutuna karşılık gelen uyaran mukavemetini sırayla artırarak veya azaltarak geri çekilme eşiğini belirleyin. Her filamenti sırayla bir kez uygulayın.
      NOT: Deneyci, hayvanlar arasında tutarlı sonuçlar elde etmek için ayak tabanlarından herhangi birini uyarmaktan kaçınmalıdır.
    2. Örneğin, hayvan 3.61 filamentine cevap vermezse, daha kalın 4.08 filamentini (9.8 mN) kullanın (bir yanıt görsel olarak etkilenen pençenin geri çekilmesi, sallanması veya yalanması olarak belirtilir); Hayvan ilk kez cevap verdiyse, daha ince 3.22 (1.6 mN) filament kullanın. Hayvanın sırasıyla olumlu veya olumsuz sonraki tepkilere sahip olup olmadığına bağlı olarak azalan veya giderek daha kalın filamentler kullanmaya devam edin. Olumsuz ve olumlu yanıtları Ek Tablo S1'de sunulan veri sayfasında raporlayın. İlk olumlu yanıtı takiben aynı pençeyi 4x farklı filamentlerle test edin.

2. Temel: Hargreaves testini kullanarak termal duyarlılık ölçüsü

  1. Farelerin varışında, 1 hafta boyunca hayvan tesisine alışmalarına izin verin. Ardından, hayvanları bundan sonra ≥7 gün boyunca deneyci kullanımına alıştırın.
  2. Fareleri testten önce 1 saat boyunca Hargreaves test cihazına alıştırın, şeffaf Pleksiglas kutulara, test odasıyla aynı odaya, tercihen alışkanlık sırasında odada bulunan deneyci ile birlikte yerleştirin.
    NOT: Hargreaves testi, hayvanın birkaç saniye sabit durmasını gerektirir. Farelerde, alışkanlık başarılı bir deneyin anahtarıdır. Bu nedenle, fareler 1 saatlik alışkanlıktan sonra çok aktif kalırsa, gerektiğinde daha uzun süre alışmalarına izin verin.
    1. Hargreaves ve ark.16 tarafından açıklandığı gibi pençe çekilme gecikmelerini belirleyin. Pleksiglas muhafazalardaki fareleri berrak bir Pleksiglas plaka üzerine yerleştirin.
    2. Radyant bir ısı kaynağını (yüksek yoğunluklu projektör lambası) arka pençenin plantar yüzeyine pSNL'ye ipsilateral olarak odaklayın. Yaklaşık 10 sn'lik bir pençe çekme gecikmesi taban çizgisi elde etmek için ısı kaynağının yoğunluğunu ayarlayın. Ardından, deneyin geri kalanı için yoğunluğu sabit tutun.
    3. Pençe çekildiğinde bir hareket dedektörünün uyaranı ve zamanlayıcıyı otomatik olarak durdurmasını bekleyin. Doku hasarını önlemek için maksimum 33,5 sn'lik bir kesim kullanın.
      NOT: Kesim, herhangi bir ek cilt hasarını önlemek için önceki deneylere ve makalelere dayanarak belirlenir11,17,18. Bu çalışmada kullanılan yoğunlukla, 33.5, Hargreaves aparatını kullanarak 30 (50 W) uyaran yoğunluğuna karşılık gelen kesimdir. Gözlemlenen davranış gönüllü değil, refleks bir davranıştır.
    4. Hargreaves aparatını kullanarak ve pSNL ipsilateral arka pençenin plantar yüzeyini hedefleyerek taban çizgisi pençe geri çekilme gecikmelerini belirleyin. Termal stimülasyonu başlatın ve geri çekilme gecikmesini kaydedin. Isı uyaranının sıcaklığını etkilemekten kaçınmak için, denemeler sırasında idrarı temizleyin.

3. Taban çizgisi: sıcak plaka testini kullanarak termal hassasiyet ölçümü

  1. Testten önce hayvanları 1 saat boyunca test odasına alıştırın.
    NOT: Oda sıcaklığı önemli olduğundan ve sıcak plaka testine verilen yanıtları etkileyebileceğinden, alışma süresi boyunca ve test süresi boyunca odanın sıcaklığının tutarlı bir şekilde 22 ° C civarında olduğundan emin olun.
  2. Sıcak plakayı 52 ° C'ye ayarlayın, çünkü bu sıcaklığın ideal olarak caydırıcı bir termal tepki19 ortaya çıkardığı gösterilmiştir.
  3. Hayvanı test odasına yerleştirin ve bir kronometre başlatın.
  4. Gürültülü davranışları gözlemleyin (yani, pençe çekilmesi, yalama, sallama). pSNL ameliyatı arka bacağı etkilediğinden, ön ayaklarda gözlenen davranışları göz ardı edin (özellikle ön ayak yalama).
  5. Nosifensif davranış gözlenir gözlenmez kronometreyi durdurun.
  6. Hayvanı odadan çıkarın ve gecikmeyi bu davranışa kaydedin.
    NOT: Doku hasarını önlemek için hayvanları en fazla 30 sn sonra hazneden çıkarın. Ek olarak, gözlemlenen davranışın gönüllü bir davranış değil, refleks bir davranış olduğuna dikkat etmek önemlidir.
  7. Kokuların davranışsal etkisini azaltmak için test odasını hayvanlar arasında% 70 etanol ile temizleyin. Isı uyaranının sıcaklığını etkilemekten kaçınmak için, test edilen her hayvan arasındaki herhangi bir idrarın aparatını temizleyin.
  8. Sonuçları doğrulamak için, hayvanlar test edildikten sonra gözden geçirilmek üzere test sırasında hayvanların videolarını sıcak plaka odasına kaydedin.
    NOT: Gecikme sürelerini ölçmek için video incelemesini kullanarak, deneyci testi tekrar tekrar gözlemleyebilir ve gerçek zamanlı gözlem sırasında gözden kaçmış olabilecek nosifensif davranışları yakından analiz edebilir.

4. Preoperatif hazırlık

NOT: Ameliyattan sonra fareleri kurtarmak için temiz kafeslerin mevcut olduğundan emin olun. Ameliyat bölgesini %70 etanol ile temizleyin, ellerinizi %70 etanol ile dezenfekte edin, steril eldivenler kullanın, uygun kişisel koruyucu ekipman (KKD) giyin (laboratuvar önlüğü, saç filesi, ayakkabı örtüleri) ve ameliyat boyunca steril teknikler uygulayın.

  1. Ameliyatta kullanılacak aletleri (Ek Şekil S1) ve ek kaynakları (gazlı bez) önceden otoklavlayarak hazırlayın.
  2. Uçucu izofluran kullanarak anesteziyi indükleyin ve cerrahi bir düzlemi korumak için gerektiği gibi ayarlayın. Oksijenin uygun bir akış hızında olduğundan emin olun.
  3. Hayvanın uyuşturulmasını sağlamak için, pençe refleksinin yokluğundan emin olmak için ayak parmaklarını cımbızla arka pençeye sıkıştırın ve yağlama oftalmik merhem uygulamadan önce kornea göz kırpma refleksini kontrol edin.
    NOT: Analjezikler, analiz edilmek istenen ağrı yolunu değiştirebileceğinden, hatta ağrı araştırma hedeflerineuygun olarak ölçülen davranışı nötralize edebileceğinden ve geçersiz kılabileceğinden bu çalışmada önerilememektedir 20,21,22.
  4. Ameliyatın hangi tarafta yapılacağını seçtikten sonra (solda burada gösterilmiştir), hayvanın arka bacağını uyluk bölgesi etrafında, patellaya doğru, kalçaya doğru ve femur üstünde tıraş edin. 3x'i klorheksidin ile bir yönde, ılık steril salin ile dönüşümlü olarak üç ayrı gazlı bezle silin.
    NOT: İleriye dönük olarak, tutarlılığı korumak için her hayvanın ameliyatı aynı tarafta gerçekleştirdiğinden emin olun.
  5. Tercih edilen bacağın etrafında steril bir alan oluşturmak için bacağı 10 cm x 10 cm steril bir örtüden yapılmış bir yarıktan geçirin.

5. Cerrahi prosedür

  1. İnce cerrahi makas kullanarak (Ek Şekil S1F), uyluğun lateral yönünün orta hattında cildin 2 mm'lik küçük bir kesimini yapın. Fasyayı kırmak ve kesi alanını genişleterek bir boşluk oluşturmak için makası cildin altına dairesel bir hareketle kaydırın.
  2. Bağlama forsepslerini (Ek Şekil S1H) kullanarak, uyluk kaslarında 1 cm derinliğinde 90°'lik bir açıyla dikey olarak keskin bir kesi oluşturun.
  3. İnce küçük makası (Ek Şekil S1G) aynı insizyona, yine 90° açıyla yerleştirin ve kasları ayırmak için yavaşça açın. Siyatik sinir görselleştirilene kadar bunu yapmaya devam edin.
  4. Parlak ve ince görünebilen, dikey uyluğa paralel olarak uzanan, kalçadan dize doğru uzanan siyatik siniri bulun. Devam etmeden önce makası ve bağlama forsepslerini vücuttan çıkarın.
  5. Siniri alttan izole etmek için ekstra ince forseps (Ek Şekil S1D) ve sinir cam kancasını (Ek Şekil S1E) kullanın. Siniri, kalçaya en yakın ve dizden en uzak olan femur trokanterine yakın bir bölgede çevreleyen bağ dokularından dikkatlice serbest bırakın.
  6. Sinirin cam çubuk üzerinde durmasına izin verin ve çubuğun ucunun sinirin yuvarlanmasını önlediğinden emin olun.
  7. Siyatik sinirin genişliğinin 1 / 3'ünü 9-0 naylon bir sütür kullanarak bağlamak için cerrahi bir düğüm yerleştirin, ortak peroneal, tibial ve sural sinir dallarına bölünmeden önce3.
    NOT: Dallanma, siyatik sinir dizden aşağıya, kalçadan uzağa doğru ilerlerken meydana gelir. Sinirin bu üç dalı üç farklı innervasyona sahip olduğundan, tüm hayvan ameliyatlarında aynı sinir eksikliklerini sağlamak için cerrahi düğümü dallanmadan önce yerleştirmek zorunludur.
  8. İplikleri sıkıca çekerken iplikleri düğüme yakın tutmaya özen gösterin, böylece sinirin cam çubuktan kaymasını önlemek ve daha fazla gerilme yaralanmasını önlemek için siniri aşırı kuvvetle çekmemek için.
  9. Düğüm tamamlandıktan sonra siniri cam çubuktan dikkatlice kaydırın ve ayrılmış kasların altındaki seviyede orijinal yerine geri yerleştirin.
  10. Kas insizyonunu emilebilir bir poliglikolik 5-0 sütür kullanarak dikin. Ayrı olarak, emilemeyen bir polipropilen 6-0 sütür kullanarak cildi dikin.
  11. Ameliyat ve anestezi durma zamanını kaydedin. Yeni bir temiz kafese geri döndürmeden önce fareyi kurtarma kafesinde tek başına uyandırmasına izin verin.
    NOT: Ameliyat boyunca, anestezinin yeterli bakımını doğrulamak ve nefes almasını ve vücut perfüzyonunu (kırmızı, pembe, soluk) izlemek için hayvanın ayak parmaklarını sıkıştırın. Solunum önemli ölçüde azalırsa veya hayvan soluk görünüyorsa, anestezi akışını azaltmayı veya oksijen akışını arttırmayı düşünün ve hayvanı yeniden sulandırmak için deri altından enjekte etmeye hazır salinle dolu bir şırınga bulundurun. Her zaman, hayvanın vücut sıcaklığını korumak için altına yerleştirilmiş bir ısı kaynağı olmalıdır.

6. Kontrol hayvanları için sahte cerrahi prosedürü

  1. Cerrahi prosedürün 5.1-5.11 adımlarını izleyin; 5.4-5.9 arasındaki adımları hariç tutun.

7. Cerrahi sonrası davranış testleri

NOT: Deneycinin herhangi bir tedaviye kör olduğundan emin olun. Kronik nöropatik ağrı, ameliyattan sonraki 2 hafta boyunca gelişecektir, bundan sonra ilgili bileşiklerin uygulanmasını takiben davranış testleri yapılabilir.

  1. Hem termal hem de mekanik aşırı duyarlılığı ve potansiyel tersine çevrilmesini değerlendirmek için von Frey, Hargreaves veya sıcak plaka testini kullanın.
  2. Kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı komitesi tarafından açıklanan son nokta kriterlerini karşılayan herhangi bir hayvanı çalışmadan çıkarın.
  3. Davranış testinin sonunda kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı komitesi tarafından açıklanan prosedürleri izleyerek hayvanları ötenazi yapın.

8. Veri analizi

  1. von Frey:
    1. Chaplan ve meslektaşları23 tarafından açıklandığı gibi Dixon'un parametrik olmayan yöntemini kullanarak verileri analiz edin ve verileri ortalama geri çekilme eşiği olarak ifade edin.
      1. Referans verilen yazılımın ana sayfasında (bakınız Malzeme Tablosu), çalışma için kullanılan tüm filamentleri seçin (2.44, 2.83, 3.22, 3.61, 4.08, 4.31 ve 4.56). Grup panelinde, son simülasyona karşılık gelen filamenti seçin. Boş kutuda, olumlu (X) ve olumsuz (o) yanıtları bildirin. Gözlemlenen yanıt düzeninin solundaki kutuda bildirilen eşikleri yazın.
        NOT: Bir desen ve niceleme örneği Ek Şekil S2'de sunulmuştur.
  2. Hargreaves ve sıcak plaka:
    1. Daha fazla istatistiksel analiz için gecikme sürelerini bir elektronik tabloda raporlayın.
    2. Sonuçları, zamanın bir fonksiyonu olarak hassasiyetlerin (eşikler veya gecikmeler) ortalaması olarak çizin.

9. Sinir cam kancasının nasıl yapılacağına dair talimatlar

NOT: Bu süreç boyunca yangın güvenliği uygulayın. Gerektiğinde ısıya dayanıklı eldivenler veya gözlükler gibi uygun koruma kullanın.

  1. Bunsen brülörünü açın.
  2. Cam çubuğun (A) bir ucunu ateşe bir elinizle tutun. Bu cam çubuk eridikçe, çubuk A üzerindeki eriyen camı yönlendirmek ve çekmek için diğer elinizde başka bir cam çubuk (B) kullanın. cam çubuk A'yı ateşten çıkarın ve erimiş kısmın ucunun doğal olarak içe doğru yuvarlanmasına izin vererek küçük bir top şekli oluşturun. Bu şekli yönlendirmek için B cam çubuğunu kullanın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kronik nöropatik ağrı, C57Bl6/J erkek farelerin siyatik sinirinin kısmi bağlanması ile indüklendi (Şekil 1A). Mekanik duyarlılık von Frey filamentleri ve "yukarı-aşağı" yöntemi kullanılarak değerlendirildi. Isıya karşı termal duyarlılık, Hargreaves ve sıcak plaka testleri kullanılarak değerlendirildi. Tüm veriler, pSNL cerrahisinin zaman içinde sahte hayvanlara etkisini veya farklı dozlarda morfin ve ibuprofenin etkilerini karşılaştırmak için Geisser-Sera düzeltmesi ile tekrarlanan iki yönlü...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kronik ağrı tedavisi genellikle uzun süreli ilaç tedavisi gerektirir ve bu da ağrı yönetimini zorlaştırır. Bu nedenle, preklinik modeller, farmakolojik veya farmakolojik olmayan yaklaşımlara dayanan yenilikçi tedavilerin potansiyel faydalarını değerlendirmek için önemli bir araçtır. Çok sayıda kronik nöropatik ağrı modeli, farklı araştırmacılar arasında cerrahi tekniklerdeki değişkenliğin artması nedeniyle zorluklar getirmekte ve tekrarlanabilirliğin azalmasına neden olmaktadır. Bu nedenle, yeni tedavilerin potansiyel an...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların bildirecek çıkar çatışması yoktur. Makalenin yazarlarından hiçbiri başka bir şekilde herhangi bir ücret veya geri ödeme veya onur ödülü almamıştır. Yazarlar bu çalışma ile ilişkili herhangi bir satıcı veya ilaç şirketi ile bağlantılı değildir.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu araştırma, Ulusal Tamamlayıcı ve Bütünleştirici Sağlık Merkezi [R01AT009716, 2017] (M.M.I.), Kapsamlı Kronik Ağrı ve Bağımlılık Merkezi-Arizona Üniversitesi (M.M.I.) ve Arizona Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Tucson'daki Tıp Bilimcisi Eğitim Programı (MSTP) tarafından desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
5/0, FS-2, 30" Boyasız PGA Örgülü Poliglikolik Asit Sentetik Emilebilir SütürCP Medical421Ahttps://cpmedical.com/suturesearch/product/421a-visorb-50-fs-2-30/
6/0, P-1, 18" Mavi Polipropilen Monofilament Emilmeyen SütürCP Medical8697Phttps://cpmedical.com/suturesearch/product/8697p-polypro-60-p-1-18/
9/0 (0.3 metrik) Naylon Siyah Monofilament SütürCrestpoint OftalmikMANI 1407https://crestpointophthalmics.com/mani-1407-suture-trape-spatula-nylon-black-mono-box-of-12.html
Allodini Yazılımı National Instruments, LabView 2015Ortalama çekilme eşiklerinin ölçülmesi (Von Frey verileri)
C57Bl6/J fareler Jackson Laboratuvarı, Bar Harbor, ME000664 https://www.jax.org/strain/000664
Castroviejo iğne tutucuGüzel Bilim Araçları12565-14https://www.finescience.com/en-US/Products/Wound-Closure/Needle-Holders/Castroviejo-Needle-Holder/12565-14
Soğuk Sıcak Plaka TestiBiosebBIO-CHPhttps://www.bioseb.com/en/pain-thermal-allodynia-hyperalgesia/563-cold-hot-plate-test.html
BiosebBIO-STD2-EVFiçin yükseltilmiş metal örgü standıhttps://www.bioseb.com/en/pain-mechanical-allodynia-hyperalgesia/1689-elevated-metal-mesh-stand-30-cm-height-to-fit-up-to-2-pvf-cages.html
Ekstra ince Graefe forsepsGüzel Bilim Araçları11152-10https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-curved-medium-point-general-purpose-forceps/16100110
İnce Castroviejo iğne tutucuSimovision/Geuder17565https://simovision.com/assets/Uploads/Brochure-Geuder-Ophthalmic-Surgical-Instruments-EN2.pdf
İnce makas (11,5 cm)Güzel Bilim Araçları14558-11https://www.finescience.com/en-US/Products/Scissors/Standard-Scissors/Fine-Scissors-Tungsten-Carbide-ToughCut%C2%AE/14558-11
İnce makas (9 cm)Güzel Bilim Aletleri14558-09https://www.finescience.com/en-US/Products/Scissors/Standard-Scissors/Fine-Scissors-Tungsten-Carbide-ToughCut%C2%AE/14558-09
İris forsepsGüzel Bilim Aletleri11064-07https://www.finescience.com/en-US/Products/Forceps-Hemostats/Fine-Forceps/Iris-Forceps/11064-07
Mikro Adson forsepsGüzel Bilim Araçları392487https://www.fishersci.com/shop/products/micro-adson-tissue-forceps-1x2-teeth-german-steel/13820072#?keyword=adson%20forceps
Sıçanlar ve fareler için modüler tutucu kafeslerBiosebBIO-PVFhttps://www.bioseb.com/en/pain-mechanical-allodynia-hyperalgesia/1206-modular-holder-cages-for-rats-and-mice.html
Moretti / Effetre # 240 Açık Kobalt Mavisi cam çubuklar 4 mmEbayN / Ahttps://www.ebay.com/itm/402389491328?hash=item5db0485e80:g:agYAAOS
w9CtfnIVJ & amdata=enc
%3AAQAHAAAAwCoqvgWRo
NTe5Vq8PWOgfE4ygWeW4tL
k81J1AFu%2Fkcbsk6pxYtJi6
digE5TL9SzlgMzYUMNDr%2B
dku2%2B%2FEvB1qXqFmebE
020SGs9LPDXLL5w21un7jrM0
9xfWYvIzIN byqyh6FRWyUJngC
uuA9Bkjb9lxtZoYlg5y6PyFR2P
34xFk5xaNC5ib65M1%2Fr%2F
4w2Iw45QqsSyXH2cuUKRom0
AGBoBaIr%2BbJw1VnlMjGuc9dtx
4fbPbqoBNSWjj3RbZPOPTYS8Q
%3D%3D%7Ctkp% 3ABk9SR4q6-
6LfYA
Termal Stimülasyon için Plantar Test - Hargreaves AparatıUgo Basile37570https://ugobasile.com/products/categories/pain-and-inflammation/plantar-test-for-thermal-stimulation
Dokunma Testi Duyusal Değerlendiriciler, 20 Monofilament SetiNorth Coast MedicalNC12775-99https://www.ncmedical.com/products/touch-test-sensory-evaluators_1278.html
Forseps bağlamaDuckworth & Kent2-504ER8https://duckworth-and-kent.com/product/tying-forceps-9/
Von Frey

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Hassett, A. L., Gevirtz, R. N. Nonpharmacologic treatment for fibromyalgia: patient education, cognitive-behavioral therapy, relaxation techniques, and complementary and alternative medicine. Rheumatic Disease Clinics of North America. 35 (2), 393-407 (2009).
  2. Hylands-White, N., Duarte, R. V., Raphael, J. H. An overview of treatment approaches for chronic pain management. Rheumatology International. 37 (1), 29-42 (2017).
  3. Campbell, J. N., Meyer, R. A. Mechanisms of neuropathic pain. Neuron. 52 (1), 77-92 (2006).
  4. Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nature Review Disease Primers. 3, 17002(2017).
  5. Colleoni, M., Sacerdote, P. Murine models of human neuropathic pain. Biochimica et Biophysica Acta. 1802 (10), 924-933 (2010).
  6. Challa, S. R. Surgical animal models of neuropathic pain: Pros and cons. International Journal of Neuroscience. 125 (3), 170-174 (2015).
  7. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33 (1), 87-107 (1988).
  8. Seltzer, Z., Dubner, R., Shir, Y. A novel behavioral model of neuropathic pain disorders produced in rats by partial sciatic nerve injury. Pain. 43 (2), 205-218 (1990).
  9. Hasnie, F. S., Wallace, V. C., Hefner, K., Holmes, A., Rice, A. S. Mechanical and cold hypersensitivity in nerve-injured C57BL/6J mice is not associated with fear-avoidance-and depression-related behaviour. British Journal of Anaesthia. 98 (6), 816-822 (2007).
  10. Ito, H., et al. Suvorexant and mirtazapine improve chronic pain-related changes in parameters of sleep and voluntary physical performance in mice with sciatic nerve ligation. PLoS One. 17 (2), 0264386(2022).
  11. Martin, L., et al. Conotoxin contulakin-G engages a neurotensin receptor 2/R-type calcium channel (Cav2.3) pathway to mediate spinal antinociception. Pain. 163 (9), 1751-1762 (2021).
  12. Peiser-Oliver, J. M., et al. Glycinergic modulation of pain in behavioral animal models. Frontiers in Pharmacology. 13, 860903(2022).
  13. Ramiro, I. B. L., et al. Somatostatin venom analogs evolved by fish-hunting cone snails: From prey capture behavior to identifying drug leads. Science Advances. 8 (12), (2022).
  14. Chung, J. M. Encyclopedia of Pain. Schmidt, R. F., Willis, W. D. , Springer. Berlin Heidelberg. 1299-1300 (2007).
  15. Zahn, P. K., Brennan, T. J. Primary and secondary hyperalgesia in a rat model for human postoperative pain. Anesthesiology. 90 (3), 863-872 (1999).
  16. Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32 (1), 77-88 (1988).
  17. Yeomans, D. C., Proudfit, H. K. Characterization of the foot withdrawal response to noxious radiant heat in the rat. Pain. 59 (1), 85-94 (1994).
  18. Cheah, M., Fawcett, J. W., Andrews, M. R. Assessment of thermal pain sensation in rats and mice using the Hargreaves test. Bio-Protocol. 7 (16), 2506(2017).
  19. Hook, M. A., et al. The impact of morphine after a spinal cord injury. Behavioural brain research. 179 (2), 281-293 (2007).
  20. Loram, L. C., et al. Prior exposure to repeated morphine potentiates mechanical allodynia induced by peripheral inflammation and neuropathy. Brain, behavior, and immunity. 26 (8), 1256-1264 (2007).
  21. Green-Fulgham, S. M., et al. Oxycodone, fentanyl, and morphine amplify established neuropathic pain in male rats. Pain. 160 (11), 2634-2640 (2019).
  22. Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Frontiers in Molecular Neuroscience. 10, 284(2017).
  23. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).
  24. Jensen, T. S., Finnerup, N. B. Allodynia and hyperalgesia in neuropathic pain: clinical manifestations and mechanisms. Lancet Neurology. 13 (9), 924-935 (2014).
  25. Malmberg, A. B., Gilbert, H., McCabe, R. T., Basbaum, A. I. Powerful antinociceptive effects of the cone snail venom-derived subtype-selective NMDA receptor antagonists conantokins G and T. Pain. 101 (1-2), 109-116 (2003).
  26. Nakamura, Y., et al. Neuropathic pain in rats with a partial sciatic nerve ligation is alleviated by intravenous injection of monoclonal antibody to high mobility group box-1. PLoS One. 8 (8), 73640(2013).
  27. Sherman, K., et al. Heterogeneity in patterns of pain development after nerve injury in rats and the influence of sex. Neurobiology of Pain. 10, 100069(2021).
  28. Ba, X., et al. Cinobufacini protects against paclitaxel-induced peripheral neuropathic pain and suppresses TRPV1 up-regulation and spinal astrocyte activation in rats. Biomedicine Pharmacotherapy. 108, 76-84 (2018).
  29. Hao, Y., et al. Huachansu suppresses TRPV1 up-regulation and spinal astrocyte activation to prevent oxaliplatin-induced peripheral neuropathic pain in rats. Gene. 680, 43-50 (2019).
  30. Guo, J., et al. Effects of resveratrol in the signaling of neuropathic pain involving P2X3 in the dorsal root ganglion of rats. Acta Neurologica Belgica. 121 (2), 365-372 (2021).
  31. Ni, W., Zheng, X., Hu, L., Kong, C., Xu, Q. Preventing oxaliplatin-induced neuropathic pain: Using berberine to inhibit the activation of NF-kappaB and release of pro-inflammatory cytokines in dorsal root ganglions in rats. Experimental and Therapeutic Medicine. 21 (2), 135(2021).
  32. Wang, J., et al. Selective activation of metabotropic glutamate receptor 7 blocks paclitaxel-induced acute neuropathic pain and suppresses spinal glial reactivity in rats. Psychopharmacology. 238 (1), 107-119 (2021).
  33. Sun, C., Wu, G., Zhang, Z., Cao, R., Cui, S. Protein tyrosine phosphatase receptor type D regulates neuropathic pain after nerve injury via the STING-IFN-I pathway. Frontiers in Molecular Neuroscience. 15, 859166(2022).
  34. Coyle, D. E., Sehlhorst, C. S., Mascari, C. Female rats are more susceptible to the development of neuropathic pain using the partial sciatic nerve ligation (PSNL) model. Neuroscience Letters. 186 (2-3), 135-138 (1995).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

N ropatik A r ModeliKronik A rFare A r ModeliDavran sal A r TestleriVon Frey TestiHargreaves TestiS cak Plaka TestiSiyatik Sinir Cerrahisi

İlgili makaleler