$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Bu koleksiyonun temel amacı, okuyuculara hem in vivo hem de in vitro, insanlarda veya bir fare modelinde hücre, protein ve mRNA seviyelerinde vasküler hastalığı incelemek için yeni metodoloji hakkında güncel bilgiler sağlamaktır. Bu, yeni görüntüleme ve yapay zeka yöntemlerinin yanı sıra kalsifiye arterler gibi zor doku alımı1'e kadar uzanan histopatolojik analizleri içerir. Koleksiyon, bu soruları tam olarak cevaplayan, eski konulara modern ve teknolojik bir bakış açısıyla nasıl yaklaşılacağına dair çok ilginç ipuçları sağlayan ve bu alanda hızlı bir teknik evrim gösteren dört yöntem sunuyor.
İskemi-reperfüzyon hasarı (IRI), akut böbrek hasarı (ABH) için önemli bir risk faktörüdür2. MiRNA'lar mükemmel adaylar olmasına rağmen, spesifik bir tanısal biyobelirteç belirlenmemiştir3. Aomatsu ve diğerleri.4 , miRNA'ları qRT-PCR ile saflaştıran ve ölçen ilginç bir AKI fare modeli geliştirdi. İskemi-reperfüzyon hasarının neden olduğu AKI ile yukarı regüle edilmiş 17 miRNA tanımladılar. Yöntem, AKI böbreklerindeki miRNA'ların profilinin dinamik bir aralık, doğru niceleme ve yüksek özgüllük ile incelenmesine izin verir. Ayrıca model, IRI'den önce ve sonra ilaçların uygulanmasını kolaylaştırır. Protokol ayrıca okuyucuya PCR sonrası dikkat edilmesi gereken kritik noktaları ve spesifik olmayan reaksiyonları açıklar. Bazı kilit noktalar homojenizasyon, endojen kontrolün seçimi ve saflaştırılmış miRNA'ların kalitesidir. Bu yöntem, insan böbreğinde IRI çalışması için bir AKI hayvan modeli sağladığı için çok faydalıdır ve bu, miRNA'ların ötesinde daha ileri çalışmalar için muhtemelen uygulanabilir olacaktır.
Bauer ve ark.5 az miktarda formalinle sabitlenmiş parafine gömülü (FFPE) aterosklerotik plaklardan DNA ekstraksiyonu için yarı otomatik bir yöntem oluşturmuşlardır. Bu başka bir ilginç konudur, çünkü yaygın kalsifiye ateromlar1 gibi çok zor bir dokunun patobiyolojisini incelemek için standartlaştırılmış bir yöntem sağlaması muhtemeldir. Bu, nükleik asitleri ve diğer hücre içeriğini değiştiren dekalsifikasyon protokollerinin kullanımını içerdiğinden doku alımını zorlaştırır1. Yazarlar, DNA parçalanmasında önemli farklılıklar olmaksızın, iki manuel kolon tabanlı yönteme kıyasla daha yüksek DNA konsantrasyonu ve daha iyi DNA kalitesi (stabilite ve tekrarlanabilirlik) elde ettiler. Önemli protokol modifikasyonları arasında deparafinizasyon için inkübasyon adımı (reaktiflerin daha az toksisitesi), gece proteaz K sindirimi, 65 °C'de lizis tamponunun eklenmesinden sonra daha fazla inkübasyon süresi ve elüsyon hacminin arttırılması yer alır. Protokol, gelecekteki yüksek verimli analizler için kesinlikle umut vericidir.
Suarez-Cuenca ve ark.6 kritik ekstremite iskemisi (CLI) olan hastalarda ekstremite amputasyonu riskini tahmin etmek amacıyla anjiyoplasti bölgesine yakın damarlardan dolaşımdaki mononükleer progenitör hücrelerin (MPC'ler) miktarının belirlenmesine yönelik bir protokol sunmuşlardır. Bu da bir başka ilginç konudur, çünkü günümüzde CLI'de amputasyon riski hala çok yüksektir7 ve mevcut öngörücü modellerde önemli bir eksiklik vardır8. Dolaşımdaki biyobelirteçleri belirleme olasılığı, klinik uygulamada çok umut vericidir ve CLI'li hastaların öyküsünü ve yönetimini değiştirmek için uygulanabilir bir bakış açısı sunar.
Zoli ve ark.'nın9 çalışması ile hipofiz-diensefalik ve kafa tabanı tümörlerinin yayılımını araştırmak için görüntüleme tekniği traktografi kullanılmıştır. Kafatası temelli cerrahiden önce preoperatif nörogörüntüleme değerlendirmesi çok önemlidir ve teknik sorunlar nedeniyle kafa tabanı cerrahisinde traktografi şimdiye kadar nadiren benimsenmiştir10. Bu tümörlerin tedavisi için MRG protokolünün uygulanmasına ek olarak, yazarların amacı beyin cerrahları ve nörogörüntüleme ekibi arasındaki translasyonel işbirliğini de tanımlamaktı. Bu işbirliği, bu hastalara etkili bir entegre çok eksenli yaklaşım için multidisipliner bir protokol sunmaktadır. Uygulanan protokol, gelişmiş bir işlem sonrası düzeltme için yeni bir yaklaşım olarak hızlı dizileri (difüzyon ağırlıklı görüntüler için faz ters kodlama taramaları) içeriyordu. Bu, bu zor tümörlerin ameliyat öncesi çalışması için yeni yaklaşımlara yol açar.
Vasküler ateromatöz hastalıklar dünya çapında hala önemli bir sağlık sorunudur ve bu hastaların görüntüleme ve kandan dokuya kadar farklı düzeylerde incelenmesi için yeni yöntemlere her geçen gün daha fazla ihtiyaç duyulmaktadır. Bu koleksiyon, vasküler hastalıkların incelenmesinde bazı sorunların üstesinden gelmek için ipuçlarını açıklar ve şunları kavrar: (1) plak hücresi, protein ve mRNA içeriğini incelemek için yeni yöntemler, (2) zor doku alımına (örneğin, kalsifiye alanlar) genişletilmiş histopatolojik analiz ve (3) anjiyogenezin nicelleştirilmesi. Kuşkusuz, doku analizi ile ilgili yeni yaklaşımların geliştirilmesi ve yaygınlaştırılması, çok çeşitli patolojilerle ilgilidir ve potansiyel olarak her düzeyde tanı için klinik kılavuzları etkiler.