Bu protokol, tibial sinirin lezyonunu ve ardından proksimal sinir ucunun subkutan pretibial veya lateral pozisyona doğru transpozisyonunu gerektiren tibial nöroma transpozisyon modelini tanımlar. Nöroma ağrısı ve plantar hiperaljezinin davranışsal testleri, Von Frey monofilamentleri kullanılarak ölçülür.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Sıçanlarda Tibial Nöroma Transpozisyon Modelinde Cerrahi ve Davranışsal Test
Bu makalede
Özet
Özet
Tibial nöroma transpozisyonu (TNT), nöroma bölgesindeki (tibial sinir) allodininin, sağlam sural sinir tarafından innerve edilen arka pençenin plantar yüzeyindeki allodinyadan bağımsız olarak değerlendirilebildiği bir sıçan modelidir. Bu TNT modeli, klinikte halihazırda kullanılan bazı cerrahi tedavilerin potansiyel üstünlüğü gibi nöroma ağrısı için tedavileri test etmek veya yeni ilaçları ve bunların aynı hayvandaki her iki ağrı modalitesi üzerindeki etkilerini değerlendirmek için uygundur. Bu modelde, tibial sinirde distal bir lezyon (nörotmesis) yapılır ve proksimal sinir ucu, 15 g'lık bir Von Frey monofilamenti ile nöroma bölgesinin değerlendirilmesini sağlamak için deri altından ve pretibiyal olarak transpoze edilir ve sabitlenir. Sural sinir üzerindeki allodiniyi değerlendirmek için, Von Frey monofilamentleri arka pençenin plantar lateral bölgesinde yukarı-aşağı yöntemle kullanılabilir. Tibial siniri kestikten sonra, ameliyattan sonraki 1 hafta içinde nöroma bölgesinde mekanik aşırı duyarlılık gelişir ve ameliyattan en az 12 hafta sonrasına kadar devam eder. Sural innerve plantar yüzeydeki allodinya, kontralateral ekstremite ile karşılaştırıldığında ameliyattan sonraki 3 hafta içinde gelişir. 12 haftada, kopmuş tibial sinirin proksimal ucunda, aksonların dağılması ve dönmesi ile gösterilen bir nöroma oluşur. TNT modeli cerrahi için çok sayıda kritik (mikro) cerrahi adımın izlenmesi gerekir ve terminal anestezi altında bazı cerrahi uygulamalar önerilmektedir. Korunmuş sinir hasarı modeli gibi diğer nöropatik ağrı modelleriyle karşılaştırıldığında, nöroma bölgesi üzerindeki allodinya, TNT modelinde sural sinir aşırı duyarlılığından bağımsız olarak test edilebilir. Bununla birlikte, nöroma bölgesi farelerde değil, sadece sıçanlarda test edilebilir. Bu protokolde verilen ipuçları ve talimatlar, ağrı üzerinde çalışan araştırma gruplarının TNT modelini tesislerinde başarıyla uygulamalarına yardımcı olabilir.
Giriş
Basit yırtılmalardan tüm ekstremite amputasyonuna kadar değişen her yaraya değişen derecelerde periferik sinir hasarı eşlik eder. Bu tür sinir hasarı, filizlenen sinir liflerinin düzensiz bir dolaşıklığı olan bir nörom oluşumuna neden olabilir. Nöromlar hastaların %8-30'unda ağrılı hale gelir ve yaşam kalitelerini ciddi şekilde etkiler1,2,3,4,5. Ekstremite amputasyonundan sonra hastaların %50'sinde nöroma ağrısı gelişir6,7,8
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu araştırma IVD (Instantie voor Dierenwelzijn Utrecht) ve AVD1150020198824 proje numaralı hayvan araştırmaları kılavuzuna uygun olarak gerçekleştirilmiştir.
1. Von Frey taban çizgisi ölçümleri
- Ameliyattan önce, aşağıda bölüm 5 ve bölüm 6'da açıklanan Von Frey test prosedürüne göre temel ölçümleri yapın.
2. Anestezi ve hazırlık
NOT: Bu çalışma, 12 haftalık 15 erkek Sprague Dawley sıçanı üzerinde gerçekleştirilmiştir.
- Hayvanları %5 izofluran ile indüksiyon ile uyuşturun ve %2-3 izofluran ile anesteziyi sürdürün.
NOT: %2 izof....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Nöroma bölgesinde yapılan değerlendirme, 15 g von Frey monofilamentinin uygulanmasına karşı artan duyarlılık göstermiştir. Başlangıçta, sıçanlar tipik olarak 15 g'lık bir monofilamentin 25 uygulamasının% 10-15'ine (±% 13) yanıt verdi. TNT cerrahisinden 1 hafta sonra yanıt oranı E-50'ye ($± yükselmiştir. Kontralateral tarafta, ameliyat sonrası yanıt sayısı başlangıçtakilere benzerdi (Şekil 2A). Sıçanların yaklaşık% 20'si ağrılı bir nöroma geliştirmedi; yanıt oranı taban çizgisine kıyasla artm.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Protokoldeki kritik adımlar
TNT modeli, tibial sinirin kesilmesini ve sural sinir üzerindeki plantar hiperaljeziye ek olarak, nöromun duyarlılık testini sağlamak için lateral ve subkutan olarak pretibial bir bölgeye transpoze edilmesini içerir. TNT modelinde, nöromun yerinin araştırmacılar tarafından görülebilmesi anahtardır. Bu nedenle, bir albino sıçan suşu tercih edilir, çünkü deri altı dikişler deriden kolayca görülebilir ve dikişin rengi tercihen koyu mavi veya siyah olmalıdır.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar çıkar çatışması olmadığını bildirmektedir. Bu araştırma çalışması kısmen Axogen tarafından finanse edilmesine rağmen, şirketin çalışmanın yürütülmesi ve sonuçlar üzerinde hiçbir etkisi yoktu.
Teşekkürler
Mikrocerrahi sırasında yardımcı oldukları için Sabine Versteeg'e ve Ortak Hayvan Laboratuvarı'ndan (Gemeenschappelijk Dieren Laboratorium) Anja van der Sar ve Trudy Oosterveld-Romijn'e mikroskop ve ameliyathanenin hazırlanmasında ve hayvanlara bakmadaki yardımları için teşekkür ederiz.
Bu araştırma Axogen tarafından finanse edildi.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Aesthesio | Linton Enstrümantasyon | 514007 514015 kadar | 0,6 g ila 15 g monofilamentler |
| Carprofen | Yerel Veteriner Eczanesi | yok | Yerel veteriner eczanesi kaprofen seyreltme yapar |
| Pamuklu çubuklar | Nobamed | 974255 | |
| Elektrokoter | Güzel Bilim Araçları | 18010-00 | |
| Etanol %70 | Interchema BV | ||
| Ethilon 4.0 | Johnson & Johnson | 1854G | ÖNEMLİ: renk mavi veya siyah olmalıdır |
| Ethilon 8.0 | Johnson & Johnson | BV130-5 | |
| Isoflo, izofluran Zoetis | Dechra Veterinerlik Ürünleri | B506 | |
| Mesh alt kafesler | StoeltingCo | 57816 ve 57824 | |
| Mikro forseps | Güzel Bilim Araçları | 11251-35 | |
| Mikro iğne tutucu ve nbsp; | Güzel Bilim Araçları | 12076-12 | |
| Mikro makas | Güzel Bilim Araçları | 15019-10 | |
| Mikro cımbız | Güzel Bilim Araçları | 11254-20 | |
| NaCl %0,9 | Trademed | H7 1000-FRE | |
| İğne tutucu | Güzel Bilim Araçları | 12004-16 | |
| Oftalmik merhem | Yerel Veteriner Eczanesi | n/a | Yerel veteriner eczanesi oftalmik merhem yapar |
| Neşter | Güzel Bilim Araçları | 10003-12 | |
| Makas | Güzel Bilim Araçları | 14001-12 | |
| Stereo cerrahi mikroskop | Leica | A60 F | |
| Delikli steril levha | Evercare OneMed | 1555-01 | |
| Cerrahi bıçak nr.15 | Güzel Bilim Aletleri | 10015-00 | |
| Cımbız | Güzel Bilim Aletleri | 11617-12 |
Kaynaklar
- Stokvis, A., vander Avoort, D. J., van Neck, J. W., Hovius, S. E., Coert, J. H. Surgical management of neuroma pain: a prospective follow-up study. Pain. 151 (3), 862-869 (2010).
- Domeshek, L. F., et al. Surgical treatment of neu....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
