Method Article

Primer Dismenore Olan Sıçanlarda Sıvı Kromatografi-Tandem Kütle Spektrometrisi Kullanılarak Ham ve İşlenmiş Siperi Rizom Örneklerinin Analizi

DOI:

10.3791/64691

⸱

December 23rd, 2022

 ,  ,  ,  ,  , 
1Chongqing Engineering Research Center of Pharmaceutical Evaluation of Chinese Medicine, Chongqing Academy of Chinese Materia Medica

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada, ham ve işlenmiş Cyperi rizoma (CR) örneklerinin karşılaştırmalı bir analizi, primer dismenore olan sıçanlarda ultra yüksek performanslı sıvı kromatografisi-yüksek çözünürlüklü tandem kütle spektrometresi (UPLC-MS / MS) kullanılarak sunulmuştur. Metabolitlerin ve örnek bileşenlerinin kan düzeylerindeki değişiklikler, CR ile tedavi edilen sıçanlar ve sirke (CRV) ile işlenmiş CR arasında incelendi.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cyperi rizomu (CR) jinekolojide yaygın olarak kullanılmaktadır ve Çin'deki kadın hastalıklarının tedavisinde kullanılan genel bir ilaçtır. Sirke ile işlendikten sonra CR'nin analjezik etkisi arttığından, sirke ile işlenen CR (CRV) genellikle klinik olarak kullanılır. Bununla birlikte, analjezik etkinin sirke işleme ile arttırıldığı mekanizma belirsizdir. Bu çalışmada, dismenore ile CR ile tedavi edilen ve CRV ile tedavi edilen sıçanlar arasındaki eksojen bileşenlerin ve metabolitlerin kan düzeylerindeki değişiklikleri incelemek için ultra yüksek basınçlı sıvı kromatografitandem kütle spektrometresi (UPLC-MS / MS) tekniği kullanılmıştır. Sonuçlar, bu sıçanların kanında 15 bileşenin ve iki metabolitin farklı seviyelerini ortaya çıkardı. Bunlar arasında, CRV grubundaki (-)-myrtenol ve [(1R,2S,3R,4R)-3-hidroksi-1,4,7,7-tetrametilbisiklo [2.2.1]hept-2-yl]asetik asit seviyeleri CR grubundan oldukça yüksekti. CRV, proinflamatuar, trombosit agregasyonu ve vazokonstriksiyon aktiviteleri ile 2 seri prostanoidlerin ve 4 seri lökotrienlerin seviyesini azaltmış ve arakidonik asit ve linoleik asit metabolizmasını ve doymamış yağ asitlerinin biyosentezini modüle ederek analjezik etkiler sağlamıştır. Bu çalışma, sirke işlemenin CR'nin analjezik etkisini arttırdığını ve CRV'nin etki mekanizmasını anlamamıza katkıda bulunduğunu ortaya koymuştur.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Primer dismenore (PD) klinik jinekolojide en sık görülen durumdur. Üreme sisteminde pelvik patoloji olmadan adet öncesi veya sırasında sırt ağrısı, şişlik, karın ağrısı veya rahatsızlık ile karakterizedir1. Prevalansı ile ilgili bir rapor, öğrencilerin% 85.7'sinin PD2'den muzdarip olduğunu göstermiştir. Düşük doz oral kontraseptifler standart tedavidir, ancak derin ven trombozu gibi yan etkileri giderek daha fazla dikkat çekmektedir3. Oral kontraseptif kullanıcılar arasında derin ven trombozu prevalansı 1.000 kadında >1'dir ve risk ilk 6-12 ay boyunca ve 40 yaşından büyük kul....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvanlarla ilgili tüm deneyler, TCM Chongqing Enstitüsü Deney Etik Komitesi'nin onayıyla gerçekleştirildi. Bu deneyde 8-10 haftalık ve 200 g ± 20 g ağırlığında yirmi dört dişi Sprague Dawley sıçanı (SD) kullanılmıştır.

1. Ekstraksiyonun hazırlanması

  1. Hesaplama
    1. CR veya CRV ekstraktını 3 gün boyunca altı Sprague-Dawley sıçanından (10 g / [kg ∙ gün]) oluşan bir tedavi grubuna uygulamayı planlayın. 1 g / mL'lik bir CR veya CRV ekstrakt konsantrasyonu kullanın (ekstraktın 1 mL'si 1 g bitkiden elde edilir).
      NOT: CR dozu 6-10 g'dır. Bu çalışmada dozaj olarak maksimum 10 g doz kullanılmıştır. Yetişkin bir kişini....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dismenore modeli deneyinin analizi
Kontrol grubunda 30 dakika içinde kıvranan bir yanıt yoktu, çünkü bu sıçanlara ağrıya neden olmak için intraperitoneal olarak oksitosin ve östradiol benzoat enjekte edilmedi. Model, CR ve CRV gruplarındaki sıçanlar, oksitosin enjeksiyonunu takiben önemli kıvranma reaksiyonları gösterdi. Bu sonuçlar, dismenoreyi indüklemek için östradiol benzoat ve oksitosin kombinasyonunun etkinliğini göstermektedir. Model ve kontrol grupları arasındaki PGF 2α, PGE 2 ve PGF2α

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

TCM'lerin çok çeşitli ve farklı doğası nedeniyle, bu otlar bazen klinik uygulamada çalışmaz ve bu, TCM'lerin uygun olmayan şekilde işlenmesi ve kaynatılmasından kaynaklanabilir. TCM'nin mekanizmaları çağdaş bilim ve teknolojinin kullanımı ile daha belirgin hale gelmektedir29,30. Bu çalışma, PD model sıçanlarda hem CR hem de CRV'nin terapötik etkilere sahip olduğunu ve CRV'nin terapötik etkisinin daha önemli olduğunu göstermektedir. CRV'nin etki mekanizması, sirke.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar, rakip finansal çıkarları olmadığını beyan ederler.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Chongqing Belediye Sağlık ve Aile Planlaması Komisyonu Çin Tıbbı Bilim ve Teknoloji Projesi (Proje Numarası: ZY201802297), Chongqing Doğa Bilimleri Vakfı'nın Genel Projesi (Proje Numarası: cstc2019jcyj-msxmX065), Chongqing Modern Dağ Alanı Karakteristik Yüksek Verimli Tarım Teknolojisi Sistemi İnovasyon Ekibi Bina Planı 2022 [10] ve Çin Materia'nın Chongqing Belediye Sağlık Komisyonu Anahtar Disiplin İnşaat Projesi tarafından desteklenmiştir Medica İşleme.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Asetonitril Fisher Scientific, Pittsburg, PA, ABD197164
BECKMAN COULTER Mikrofüj 20Beckman  Coulter, Inc.
Estradiol benzoatShanghai Macklin Biochemical Co., LtdC10042616
formik asitFisher Scientific, Pittsburg, PA, ABD177799
LC 30A sistemiShimadzu, Kyoto, Japonya228-45162-46
ZeytinyağıShanghai Yuanye Biotechnology Co., LtdH25A11P111909
Oksitosin sentetikZhejiang peptit biyoloji Co, Ltd & nbsp;
Sıçan PGF2α ELISA kitiShanghai lmai Bioengineering Co., Ltd202101
Sıçan PGFE2 ELISA kitiŞangay lmai Biyomühendislik Co., LtdEDL202006217
SPF Sprague-Dawley sıçanlarıHunan SJA Laboratory Animal Co., LtdSertifika numarası SCXK (Hunan) 2019-0004
Tecan Infinite 200 PRO   Tecan Austria GmbH, Avusturya1510002987
Üçlü TOF 4600 sistemiSCIEX, Framingham, MA, ABDBK20641402
suFisher Scientific, Pittsburg, PA, ABD152720
MRZ15K0472019092001

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Yu, W. Y., et al. Acupuncture for primary dysmenorrhea: A potential mechanism from an anti-inflammatory perspective. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2021, 1907009(2021).
  2. Rafique, N., Al-Sheikh, M. H.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Cyperi RhizomaVinegar ProcessingPrimary DysmenorrheaLiquid ChromatographyTandem Mass SpectrometryMetabonomics AnalysisDifferential MetabolitesKEGG PathwayPrincipal Component AnalysisOrthogonal Partial Least Squares

Related Articles