$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Yeni bir beta koronavirüs1'in (yani 2019-nCoV) neden olduğu ve daha sonra şiddetli akut solunum sendromu koronavirüs 2 (SARS-CoV-2)2 (bundan sonra ağırlıklı olarak virüs olarak anılacaktır) olarak adlandırılan, pnömonik bir küme ve şiddetli akut solunum sıkıntısı içeren viral bir pandemi, 2019'un sonunda Çin'in Wuhan şehrinde ortaya çıktı3. Dünya çapında insandan insana hızlı bulaşması, yüksek enfeksiyon oranı, yüksek ölüm oranı ve yaşamı tehdit eden ciddi yan etkileri4 nedeniyle, pandemi sırasında viroloji araştırmaları5 virüsün genomik organizasyonunu ve yapısını tanımlamak için hızla gelişti 5,6. COVID-19 7,8'in semptomları arasında yüksek ateş, kuru öksürük ve yaygın ağrıbulunur 9. Daha da önemlisi, virüsün farklı serotipleri farklı hastalık şiddetlerine yol açar10. Ayrıca, asemptomatik taşıyıcılar virüsü potansiyel olarak yayabilir. Genellikle, mikroskop altında, COVID-19 virüs parçacıkları, spike proteinleri11 tarafından oluşturulan kulüp benzeri projeksiyonlar gösterir. Bu nedenle, bu yeni patojenin yayılmasını kontrol etmek için vakaların tespiti zamanında ve verimli olmalıdır. Bu nedenle, viral enfeksiyonun erken aşamalarında virüsün ultra hassas, hızlı ve seçici tespiti çok önemli hale gelmiştir 2,11. Virüsün12 bulaşmasını önlemek için sosyal/fiziksel mesafeye ihtiyaç vardır. Sağlık kurumları, akıllı teşhis araçlarının ve nano sistemlerin geliştirilmesine vurgu yapıyor13. Gerçekten de, sağlık kurumlarının önerdiği gibi, hedefli ve toplu test14,15 gereklidir ve hala talep edilmektedir.
Prensip olarak, ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR) gibi devam eden biyolojik tanı yöntemleri, Orta Doğu solunum sendromu ile ilişkili koronavirüs (MERS-CoV)16 ve SARS-CoV-117'de olduğu gibi SARS-CoV-2'nin toplu olarak tanımlanması için en iyi araçtır. Bu bağlamda, SARS-CoV-2 kontaminasyonunun mevcut standart tanımlaması, enfeksiyona özgü özellikleringeliştirilmesine bağlıdır 18,19. Ek olarak, SARS-CoV-2 enfeksiyonundaki bölgeye, yaşa, ırka ve cinsiyete göre varyasyon dikkate alınmalıdır. Hayat kurtarma nihai hedefiyle, bakım noktası (POC)20,21 kullanımı için hızlı tanı araçları oluşturmak çok önemlidir.
Bu bağlamda, floresan in situ hibridizasyon (FISH), protein immünosorbent incelemesi (ELISA), mikroküre tabanlı yöntemler, elektrokimyasal testler ve MRI, PET ve NIRFOI22 gibi düzenli stratejilerin düşük virüs seviyelerine duyarlılığı, düşük seçiciliği ve düşük yeniden kullanım kapasitesi vardır; Ek olarak, bu tür prosedürlerin maliyetli biyo-algılama teşhis sistemleri, yeniden kullanılamayan reaktifler ve yüksek vasıflı bir işgücü gereksinimi dahil olmak üzere dezavantajları vardır23. Bu nedenle, bu anlayışlı teknikler hızlı, makul, istisnai olarak spesifik veya hassas POC yöntemleri olarak görülemez 24,25. Dikkat çekici bir şekilde, bileşik, kapasitif ve elektrik tekniklerini kullanan farklı türde DNA ve bağışıklayıcı tabanlı biyosensörler vardır 18,26,27,28. Örnek olarak, Ebola31, Zika, MERS-CoV ve SARS-CoV32,33,34'ün tespiti için yüksek duyarlılığa sahip, basit bir şekilde küçültülebilen ve ayarlanabilir29,30 olan elektriksel DNA biyosensörleri üretilmiştir. Benzer şekilde, grafen sırlı cihazlar üzerinde hareketsiz hale getirilmiş belirli antikorları (monoklonal) kullanarak virüsün spike proteinini tespit etmek için bir alan etkili yarı iletken (FET) biyosensörü etkili bir şekilde oluşturulmuştur35,36. Bununla birlikte, bu yeni strateji RT-PCR'den daha az hassastır. Ayrıca, daha yakın zamanlarda, virüs için düşük bir tanımlama sınırına (2,8 × 10-15 M) sahip olan, aerosol jet nanopartikül ile azaltılmış grafen oksit (GrO) kaplı bir 3D terminal tabanlı algılama çerçevesi geliştirilmiştir; her durumda, önerilen karmaşık biyosensör yapısı35, POC kullanımı açısından test edilmiş ve virüsün 35,37,38 tespiti için kullanılan diğer mevcut biyosensör stratejileriyle karşılaştırılmıştır.
Bu çalışmada, diğer biyosensörler için yukarıda belirtilen sınırlamalar olmaksızın virüs spike proteinini tanımlamak için küçültülmüş ve yeniden kullanılabilir bir GrO tabanlı DIDC biyosensörü tasarladık ve ürettik. Bu biyosensör, yanıt süresinin 3 s 18,27'si içinde femtogram (fg) seviyesinde algılamaya izin verir. Bu araştırmayı gerçekleştirmek için, daha iyi yanıt verme ve seçicilik için GrO nanopulları seçildi, bu da orofaringeal veya nazofaringeal sürüntülerden virüs antijen proteininin düşük konsantrasyonlarının tespit edilebileceği anlamına geliyor. GrO, biyoalgılama uygulamaları için faydalı bir şekilde kullanılabilecekuygun, sentetik olarak güvenilir, tutarlı ve iletken bir malzemedir 2,39,40,41. Ek olarak, virüs spike S1 proteinine odaklanan bir monoklonal IgG antikoru etiketsiz hibridizasyon yaklaşımı kullanıldı. Fabrikasyon SARS-CoV-2-GrO-DIDC biyosensörü, piranha çözeltisi ile ileri tedavi ve temizlikten sonra tekrar kullanılabilir. Bu ultra hızlı, hassas, seçici, etiketsiz ve yeniden kullanılabilir biyosensör, klinik numune biyoalgılama ve kişiselleştirilmiş sağlık hizmetleri uygulamaları için kullanılabilir 26,42,43,44.