$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Tüm deneysel prosedürler Seul Ulusal Üniversitesi Bundang Hastanesi Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından gözden geçirildi ve onaylandı. Bu çalışmadaki deneyler için inme geçiren 34 katılımcı çalışmaya alındı. Tüm katılımcılardan imzalı bilgilendirilmiş onam alındı. Bir katılımcının kriterleri karşılaması ancak engellilik nedeniyle onay formunu imzalayamaması durumunda yasal temsilciden imzalı bilgilendirilmiş bir onay alındı.
1. Deney düzeneği
- Hasta alımı
- Aşağıdaki dahil etme kriterlerini kullanarak tarama işlemini gerçekleştirin:
Üst ekstremite fonksiyonlarında bozulma olan 18 ila 85 yaşları arasında;
Beyin bilgisayarlı tomografi veya manyetik rezonans görüntüleme ile doğrulanan ilk iskemik veya hemorajik inme;
Katılımcının klinik değerlendirme ve EEG çalışması için talimatları takip etme yeteneği;
İnme dışında herhangi bir psikiyatrik veya nörolojik hastalık öyküsünün olmaması.
- Hastaları aşağıdakilere göre hariç tutun:
Merkezi sinir sistemini içeren önceki hastalık (örneğin, travmatik beyin hasarı, beyin tümörü, Parkinson hastalığı);
EEG başlığını takamama; ve
Klinik değerlendirme ve EEG çalışması için talimatları takip edememe.
NOT: Dahil etme ve hariç tutma kriterleri, deneye katılabilecek katılımcıları seçmek ve sonuçları etkileyebilecek demografik faktörleri düzenlemek için seçilmiştir.
- İşe alınan tüm katılımcılara deneysel prosedürün ayrıntıları hakkında bilgi verin.
- Deneysel sistem: EEG
- Veri kaydı için 32 Ag/AgCl kafa derisi elektrodu, tekstil EEG başlığı ve EEG kayıt yazılımından oluşan bir EEG sistemi kullanın.
- EEG kayıt yazılımı yüklü bir kişisel bilgisayar (PC) kullanın ve PC'yi Bluetooth aracılığıyla EEG cihazına bağlayın.
- Mühendislik için sayısal analiz ve programlama yazılımı uygulaması olan başka bir bilgisayar kullanın (bkz.
- Uyaran sunumu için bilgisayarı özel bir tetikleme kutusuna bağlayın (Şekil 1).
NOT: İki bilgisayarın ayrıntılı özellikleri Malzeme Tablosu'nda verilmiştir.
- Programlama yazılımına dayalı deneysel paradigma
NOT: Katılımcılar, EEG verilerinin ölçüldüğü etkilenen ve etkilenmeyen elleri kullanarak bir el uzatma görevi gerçekleştirdiler. Şekil 2 , bu çalışmanın deneysel paradigmasını göstermektedir.- Katılımcının gözlerini kapatıp açtığı temel dinlenme durumu EEG verilerini ölçmek için bir monitörün merkezinde her biri 30 saniye boyunca KAPALI ve AÇIK olmak üzere iki görsel uyaran sunun.
NOT: Dinlenme durumu EEG verileri, istenmeyen fizyolojik artefaktlar tarafından nispeten daha az kontamine olduğundan, EEG verilerinin kalitesini doğrulamak ve dinlenme durumuna göre bireysel EEG özelliklerini tanımlamak için yararlıdırlar.
- Katılımcıya bir el uzatma hareketi yapması talimatını vermek için 3 saniye boyunca bir el hareketi görüntüsü ve ardından dinlenmek için 5 saniye boyunca bir sabitleme işareti sunun.
NOT: Bu işlem bir deneme olarak kabul edildi ve tek seansta 10 kez tekrarlandı. Her katılımcıya her el için 4 seans uygulandı. Katılımcı, aşırı yorgunluğu önlemek için her seansı gerçekleştirdikten sonra istediği zaman mola verdi.

Şekil 1: Ekipman kurulumunun şeması. Deneysel uyaranlar sunan bir PC (PC1) bir tetik kutusuna bağlandı ve başka bir PC (PC2) bir EEG amplifikatörüne bağlandı. PC1'de üretilen stimülasyon olayları, PC1'e bağlı tetik kutusu aracılığıyla EEG amplifikatörüne iletildi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 2: Bu çalışmada kullanılan deneysel paradigma. Tek bir deneme, 3 s'lik bir el uzatma hareketi ve ardından 5 s'lik bir gevşemeden oluşuyordu. Bu model tek seansta 10 kez tekrarlandı. Toplam sekiz seans gerçekleştirildi; Dört seans etkilenen el hareketini içerirken, diğer dördü etkilenmemiş el hareketini içeriyordu. Bu şekil, Mary Ann Liebert, Inc.'in izniyle Shim ve ark.17'den uyarlanmıştır. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
2. Hareketle ilgili EEG verilerinin kaydedilmesi
- EEG kurulumu
- Katılımcıyı monitörün önünde rahat bir koltuğa oturtun.
NOT: Göz yorgunluğunu önlemek için katılımcı ile monitör arasındaki mesafe en az 60 cm olmalıdır. Bununla birlikte, katılımcının konsantrasyonunu dağıtabileceğinden aşırı mesafeden kaçınılmalıdır (örneğin, >150 cm).
- EEG ölçümü için kapağı doğru bir şekilde takmak için, nasion ve inion'u birbirine bağlayan uzunlamasına çizginin ve her iki kulak kepçesinin üst kısmını bağlayan enine çizginin kesişimini kullanarak uluslararası 10-20 sistemine dayalı Cz konumunu tanımlayın.
NOT: EEG ölçüm ekipmanına bağlı olarak bir EEG başlığı gerekmeyebilir. Böyle bir durumda, EEG elektrotları uluslararası 10-20 sistemine göre doğrudan kafa derisinebağlanır 15.
- Doğru bir EEG ölçümü için, katılımcının kafa boyutuna göre uygun boyutta bir EEG başlığı kullanın ve Cz elektrot konumu bireysel Cz konumuna yerleştirilecek şekilde yerleştirin.
- Çene kayışını uygun sıkılıkta sabitleyin; Bu, katılımcının deneyde yutkunma ve göz kırpma sırasında rahatsız olmasını önleyecektir. Bundan sonra, EEG başlığının T9 ve T10 elektrot konumlarının her iki kulak kepçesinin üzerindeki temporal bölgede olduğunu ve EEG başlığının Fpz elektrot konumunun alnın ortasında bulunduğunu doğrulayın.
NOT: Bu elektrotlar belirlenen konumun dışındaysa, kapağı değiştirmeyi düşünün. Çalışmamızda üç EEG başlığı ölçüsü kullanıldı (54 cm: küçük, 56 cm: orta, 58 cm: büyük).
- EEG başlığını doğru bir şekilde yerleştirdikten sonra, 32 Ag / AgCl kafa derisi elektrotlarını, genişletilmiş uluslararası 10-10 sistemine göre, toprak ve referans elektrotları sırasıyla Fpz ve FCz'de olacak şekilde kafa derisine takın16.
NOT: Referans elektrotun (FCz) konumu, elektrookülografi, elektromiyografi ve elektrokardiyografi gibi çeşitli fizyolojik artefaktlardan nispeten daha az etkilenir, çünkü kafa derisinin merkezi alanı (Cz) çevresinde bulunur.
- İletken jel kullanarak EEG elektrotları ile kafa derisi arasındaki empedans seviyesini ayarlayın ve EEG elektrotları ile kafa derisi arasında herhangi bir tıkanıklığı önlemek için saçı jel ile sabitleyin.
NOT: Jel sızıntısı nedeniyle komşu EEG elektrotları arasında herhangi bir köprü oluşup oluşmadığının doğrulanması önemlidir.
- EEG kaydı için yazılımı kullanın.
- EEG sistemini açın ve Konfigürasyon > Amplifikatörü Seçin. Bağlanmak > Liveamp > > amplifikatörünü seçin. Live'ı arayınamp kablosuz bağlantı için işlev (Şekil 3).
- Her elektrotun empedans seviyesini izlemek için Empedans kontrol işlevini yürütün.
NOT: Deneyin <20 KΩ empedans seviyesinde yapılması önerilir (Şekil 4).
- Gerçek zamanlı EEG sinyal izleme yoluyla tüm elektrotların EEG'lerinin benzer genlik seviyelerine sahip olup olmadığını doğrulamak için izleme işlevini yürütün (Şekil 5).
NOT: EEG sinyalinin genliği genellikle 10 μV ile 100 μV arasındadır ve gözler kapalıyken oksipital bölge çevresinde alfa (8-12 Hz) gücü artar. Bu nedenle, EEG verilerinin kalitesi, gözler kapalıyken oksipital alan etrafındaki kanallardaki amplitüd seviyesi ve alfa salınımları izlenerek kalitatif olarak doğrulanabilir.
- Paradigma kurulumu
- Stabil EEG verisi elde etmek için, harici uyaranları sunmak ve EEG verilerini kaydetmek için iki ayrı PC kullanın (bkz. Şekil 1).
- Katılımcılara deneysel uyaranlar sunmak için, programlama yazılımını kullanarak deneysel paradigmaya dayalı bir stimülasyon programı oluşturun (adım 1.3'te tanıtıldı).
NOT: Bu çalışmada yazılım tabanlı bir stimülasyon programı oluşturulmuştur, ancak deney için kullanılan EEG ekipmanı ile uyumlarına ve kullanıcı kolaylığına bağlı olarak başka yazılımlar da kullanılabilir. Programlama yazılımı tabanlı uyaran komut dosyası, Ek Dosya 1'de (Experimental_stimulus.m) sağlanır. Uyaranların başlangıç noktasını gösteren olay bilgisi, kurum içi programlama yazılımı tarafından üretilir, tetik kutusu aracılığıyla EEG amplifikatörüne ve nihayetinde EEG kayıt yazılımına iletilir (Şekil 1).
- Deneysel uyaranları izleme modunda sunan programı çalıştırın (bkz. alt adım 2.1.10). Daha sonra, Şekil 6'da gösterildiği gibi, her uyaran sunulduğunda EEG kayıt yazılımının altında olay bilgilerinin zamanında doğru bir şekilde işaretlendiğini onaylayın.
NOT: Zaman noktasındaki bilgiler, yeni bir uyaran sunulduğunda kaydedilir ve daha sonra veri segmentasyonu için kullanılır. Bu nedenle, analizde güvenilmez sonuçlara yol açacak yanlış veri segmentasyonunu önlemek için deneysel olayların kesin zaman noktalarını mümkün olduğunca elde etmek önemlidir.
- EEG kayıt yazılımını başlatın, ardından veri ihmalini önlemek için programlama yazılımı kullanarak deneysel paradigmaya dayalı olarak geliştirilen uyaran sunum programını bağımsız olarak çalıştırın.
NOT: Veri analizinin kolaylığı için, veri depolama için tutarlı bir kurala (örneğin, Sub1_Session1) sahip dosya adları oluşturulması önerilir.
- EEG kaydı
- EEG'yi adım 1.3'te tanıtılan deneysel paradigmayı izleyerek 1.000 Hz'lik bir örnekleme hızında ölçün.
NOT: Örnekleme hızı, araştırmacının araştırmak istediği EEG frekanslarının aralığına bağlı olarak değiştirilebilir. EEG bilgisinin Nyquist teoremine dayalı olarak ≤100 Hz'de araştırılabildiği durumlarda genellikle >200 Hz'lik bir örnekleme hızı kullanılması önerilir. Bunun nedeni, çoğu EEG bilgisinin 100 Hz'in altında bulunmasıdır.
- Katılımcılar arasında mümkün olduğunca aynı deney ortamlarını (örn. deney yeri, ekipman, oda sıcaklığı vb.) koruyun ve EEG ölçümü sırasında gereksiz hareketleri en aza indirmelerini söyleyin.

Şekil 3: EEG kayıt yazılımı ile bir EEG amplifikatörü ve PC arasındaki kablosuz bağlantı prosedürü. Adımları sırayla izleyin: (A) amplifikatörü seçin, (B) amplifikatörü bağlayın, (C) bağlı amplifikatörü arayın kablosuz bağlantı için, (D) bağlantı tamamlandı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 4: Her kanal için empedans kontrol prosedürü. Sabit EEG ölçümü için tüm kanallar yeşil renge ayarlanmalıdır. Deneyin 20 KΩ'dan daha düşük bir empedans ile yapılması tavsiye edilir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 5: Her kanal için gerçek zamanlı veri izleme prosedürü. Ölçülen tüm kanallardan gelen sinyaller gerçek zamanlı olarak izlenebilir ve üst çubuktaki seçenek (kırmızı kutu) kullanılarak yakınlaştırılabilir/uzaklaştırılabilir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 6: Olay bilgilerini izlemek için ekran görüntüsü. Kırmızı çubuklar, PC1 tarafından her uyaran sağlandığında sunulan olay oluşturucuları gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
3. EEG veri analizi
NOT: Bu çalışma, araştırma konseptini çoğaltmak için kesin yönergeler sağlar. Bu nedenle, analiz sürecinin ve temsili sonuçların kısa bir özetini sunar. Ayrıntılı süreçler ve ilgili sonuçlar önceki bir çalışmada bulunabilir17. Bu, Mary Ann Liebert, Inc.'in telif hakkıyla korunan materyalin kullanımına izin verdiğinin bir göstergesidir.
- Ön
- EEG veri ön işleme yazılımı18,19'da uygulanan temel bileşen analizine dayalı matematiksel prosedürleri kullanarak ham EEG verilerinden gözle ilgili artefaktları çıkarın (bkz.
NOT: Herhangi bir dönem, elektrotların herhangi birinde ön işlemden sonra bile belirgin artefaktlar (± 100 μV) gösteriyorsa, daha fazla analizden hariç tutulmuştur. Standart sapmaları da dahil olmak üzere reddedilen dönemlerin ortalama sayısı, etkilenen el hareketi görevi için 3.69 ± 7.15 ve etkilenmeyen el hareketi görevi için 1.62 ± 3.95 idi.
- 0,1 Hz ile 55 Hz arasında bir bant geçiren filtre uygulayın. Olayla ilgili spektral pertürbasyon (ERSP) ve fonksiyonel ağ analizleri için kullanılan temel süreyi içerecek şekilde görev başlangıcına dayalı olarak her deneme için önceden işlenmiş EEG verilerini -1 sn ila 3,5 s arasında bölümlere ayırın.
- ERSP analizi
NOT: Ölçülen EEG verileri, istemli hareketlerle ilişkili düşük beta frekans bandı (12-20 Hz) için ERSP analizi ile doğrulanmıştır.- EEG spektral güçlerini hesaplamak için her deneme için kısa süreli bir Fourier dönüşümü gerçekleştirin, bunun için programlama yazılımındaki EEGLAB araç kutusunun yeni zamanlayıcı fonksiyonu 20 (örtüşmeyen bir Hanning penceresi,250 ms pencere boyutu) kullanılmıştır.
- El hareketi görevi ile başlangıç dönemi arasındaki spektral güçlerdeki değişiklikleri araştırmak için başlangıç periyodunun (-1 ila 0 s) ortalama gücünü çıkararak her denemenin güç spektrumunu normalleştirin.
- Denemeler boyunca normalleştirilmiş güç spektrumlarının ortalamasını alarak her hasta için temel normalleştirilmiş ERSP haritalarını tahmin edin.
- Fonksiyonel ağ analizi
NOT: EEG değişikliklerini beyin ağı perspektifinden araştırmak için fonksiyonel ağ analizi yapılmıştır. Grafik teorisine dayalı ağırlıklı tüm beyin ağı indekslerini hesaplamak için, farklı bölgeler arasındaki beyin bağlantısı önce faz kilitleme değeri (PLV) kullanılarak hesaplandı. Daha sonra, daha sonra tüm beyin ağ indekslerini hesaplamak için kullanılan PLV tabanlı bağlantı analizinin sonuçları kullanılarak işlevsel bir bağlantı matrisihesaplandı 17. Tüm fonksiyonel ağ analizleri programlama yazılımı kullanılarak gerçekleştirilmiştir.- Düşük beta frekans bandı (12-20 Hz) için Hilbert dönüşümü tabanlı faz kilitleme değerini (PLV) şirket içi bir fonksiyon21,22 kullanarak hesaplayın. Hilbert Dönüşümü tabanlı PLV'yi hesaplamak için şirket içi işlev, Ek Dosya 2'de (myPLV.m) sağlanır.
- Görev süreleri boyunca (0-3,5 sn) her bir zaman noktasında 32 EEG elektrotunun tüm olası çiftleri arasındaki PLV'leri değerlendirin ve görev süresi boyunca PLV'lerin ortalamasını alarak simetrik bir komşuluk matrisi (32 x 32, elektrot sayısı = 32) oluşturun. Ağ analizi için girdi verisi olarak PLV matrisini kullanın 17,23.
- Brain Connectivity Toolbox'ı (https://sites.google.com/site/bctnet) kullanarak grafik teorisine dayalı dört ağırlıklı küresel düzeyde ağ endeksini değerlendirin: (1) güç, (2) kümeleme katsayısı, (3) yol uzunluğu ve (4) küçük dünyalılık 17,24,25.