Bu çalışmada, periodontitis indüksiyonunun sıçan modeli, ilk maksiller azı dişlerinin etrafında 14 gün boyunca, Porphyromonas gingivalis'ten türetilen tekrarlayan lipopolisakkarit enjeksiyonları ve geciktirici ligatür kombinasyonu ile sunulmuştur. Ligasyon ve LPS enjeksiyon teknikleri peridonti indüklemede etkiliydi, bu da alveoler kemik kaybı ve inflamasyona neden oldu.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bir sıçan modelinde ligatür ve lipopolisakkarit enjeksiyonunun bir kombinasyonu ile periodontitisin indüksiyonu
Bu makalede
Özet
Özet
Periodontitis (PD), periodonsiyumun oldukça yaygın, kronik immün-inflamatuar bir hastalığı olup, dişeti yumuşak dokusu, periodontal ligament, sementum ve alveoler kemik kaybına neden olur. Bu çalışmada, sıçanlarda basit bir PD indüksiyon yöntemi tanımlanmıştır. Ligatür modelinin ilk maksiller azı dişlerinin (M1) etrafına yerleştirilmesi ve M1'in mesio-palatal tarafındaki Porphyromonas gingivalis'ten türetilen lipopolisakkarit (LPS) enjeksiyonlarının bir kombinasyonu için ayrıntılı talimatlar sunuyoruz. Periodontitisin indüksiyonu 14 gün boyunca korundu ve bakteri biyofilm ve inflamasyon birikimini teşvik etti. Hayvan modelini doğrulamak için, anahtar bir inflamatuar mediatör olan IL-1β, dişeti oluk sıvısında (GCF) bir immünoassay ile belirlendi ve koni ışınlı bilgisayarlı tomografi (CBCT) kullanılarak alveoler kemik kaybı hesaplandı. Bu teknik, 14 gün sonra deneysel prosedürün sonunda dişeti çekilmesini, alveoler kemik kaybını ve GCF'de IL-1β düzeylerinde bir artışı teşvik etmede etkiliydi. Bu yöntem PD'yi indüklemede etkiliydi, böylece hastalık ilerleme mekanizmaları ve gelecekteki olası tedaviler üzerine yapılan çalışmalarda kullanılabiliyordu.
Giriş
Periodontitis (PH), dünya çapında en sık görülen altıncı halk sağlığı durumudur ve toplam popülasyonun yaklaşık %11'ini etkileyen, periodontal hastalığın gelişmiş, geri dönüşümsüz ve yıkıcı bir formudur 1,2. PD, dişeti ve periodontal dokuları etkileyen, dişeti çekilmesi, bileşke epitelinin cep gelişimi ile apikal migrasyonu ve alveoler kemik kaybı ile sonuçlanan inflamatuar bir süreçtir3. Ayrıca, PH kardiyovasküler hastalık, obezite, diyabet ve romatoid artrit gibi çevresel ve konakçıya özgü faktörlerin önemli rol oynadığı çeşitli sistemik hastalıklarla ilişkilidir
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
NOT: Çalışmanın deneysel protokolü Balear Adaları Sağlık Araştırma Enstitüsü Hayvan Deneyleri Etik Kurulu (CEEA-UIB; referans numarası 163/03/21) tarafından onaylanmıştır.
1. Hayvan anestezisi ve prosedür hazırlama
- Ameliyattan önce tüm cerrahi aletleri (alüminyum ağız tıkaçları, diş kaşifi, elmas mızrak, cerrahi makas, mikrocerrahi pense, mikro iğne tutucu, hollenback oymacı, periosteal mikrocerrahi asansör ve mikrocerrahi makas) sterilize edin (135 ° C'de 5 dakika).
- Açıklandığı gibi steril koşullarda prosedür için gerekli tüm çözeltileri hazırlayın:
- 1.6 mL Ketamin'i Fosfat Tampon Çözeltisi (PBS) ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Deneysel adımların zaman çizelgesi Şekil 1'de sunulmuştur. Şekil 2A , cerrahi müdahaleden sonra mandibulanın bir görüntüsünü, deneyin 0 zamanında M1'in sulkusunun etrafına bağ yerleştirilmesiyle göstermektedir. Şekil 2B , işlemden 14 gün sonra, M1 etrafındaki bağın dişeti sulkusuna nasıl girdiğini, dişetinin iltihaplanmasına ve birikime sızmasına neden olduğunu göstermektedir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu yöntem, Pg-LPS enjeksiyonlarının kombine tekniğini ve M1 etrafındaki ligatür yerleşimini takiben sıçanlarda PD'nin indüksiyonunu açıklamakta ve periodontal dokularda ve alveoler kemikte önemli değişikliklerin bu yöntemi takip eden 14 gün içinde indüklenebileceğini ortaya koymaktadır.
Bu prosedür sırasında, farklı kritik adımlara dikkat edilmelidir. Hayvan anestezisi ve prosedür hazırlığı sırasında, cerrahi işlem sırasında uygun anestezinin değerlendirilmesi, hayvanın doğru konumlan.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.
Teşekkürler
Bu çalışma, Fundació Universitat-Empresa de les Illes Balears (Kavram kanıtı çağrısı 2020), ESF Avrupa Sosyal Fonu ve ERDF Avrupa Bölgesel Kalkınma Fonu (M.M.B. sözleşmesi; FI18/00104) ve Direcció General d'Investigació, Conselleria d'Investigació, Govern Balear tarafından (M.M.F.C. sözleşmesi; FPI/040/2020). Yazarlar, deneysel cerrahi ve IdISBa platformundaki yardımları için Dr. Anna Tomás ve Maria Tortosa'ya teşekkür eder. Son olarak, CBCT tarayıcısına erişim için ADEMA Diş Hekimliği Fakültesi'ne teşekkürler.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Adsorban kağıt noktası nº 30&nbşk; | Proclinc | 8187 | |
| Aprotinin | Sigma-Aldrich | A1153 | |
| Atipamezole | Dechra | 573751.5 | Revanzol 5 mg / mL |
| Örgülü ipek ligatür (5/0) | Laboratorio Arago Sl | 613112 | |
| Buprenorfin | Richter pharma | 578816.6 | Bupaq 0.3 mg/mL |
| Konik ışınlı bilgisayarlı tomografi (CBCT) Tarayıcı | MyRay | hyperion X9 | Model Hyperion X9 |
| CTAn yazılımı | SkyScan | Sürüm 1.13.4.0 | |
| Diş kaşifi | Proclinc | 99743 | |
| Elmas mızrak şeklinde frez | Dentaltix | IT21517 | |
| Gıda bakım diyeti | Sodispain araştırması | ROD14 | |
| Isıtmalı cerrahi platform | PetSavers | ||
| Hollenback oyma makinesi | Hu-FRIEDY | ||
| Hipodermik iğne | BD | 300600 | 25G X 5/8" - 0,5 X 16 MM |
| İzofluran | Karizoo | Isoflutek 1000mg/g | |
| Ketamin | Dechra | 581140.6 | Anesetin 100 mg / mL |
| Lipopolisakkarit P.Gingivalis 'den türetilmiştir; | InvivoGen | TLRL-PGLPS | |
| Metanol | Fisher Scientific | M/4000/PB08 | |
| Mikro iğne holter | Fehling Cerrahi Aletler | KOT-6 | |
| Mikrocerrahi pense | KLS Martin | 12-384-06-07 | |
| mikrocerrahi makas ve nbsp; | S & T mikrocerrahi aletler | SDC-15 RV | |
| Monitörü iMEC 8 Veteriner | Mindray | ||
| Multipleks boncuk immünoassay | Procartaplex, Thermo fisher Scientific | PPX-05 | |
| Paraformaldehit (PFA) | Sigma-Aldrich | 8187151000 | |
| Periosteal mikrocerrahi asansörü | Dentaltix | CU19112468 | |
| Fenilmetilsülfonilflorür (PMSF) | Roche | 10837091001 | |
| Fosfat Tampon Çözeltisi (PBS) | Capricorn Scientific | PBS-1A | |
| PhosSTOP | Roche | 4906845001 | Ticari fosfataz inhibitörü tablet |
| Plastik flakon | SPL Lifesciencies | 60015 | 1.5mL |
| Salin | Cinfa | 204024.3 | |
| Stereo Mikroskop ve nbsp; | Zeiss | Model SteREO Discovery.V12 | |
| Cerrahi luplar led ışık | Zeiss | ||
| Cerrahi makas | Zepf Cerrahi | 08-1701-17 | |
| Şırınga | BD plastipak | 303172 | 1mL |
| Veteriner diş mikromotor | Eickemeyer | 174028 | |
| Ksilazin | Kaliyer | 20102-003 | Ksilajik 20 mg / mL |
Kaynaklar
- Carvalho, J. D. S., et al. Impact of citrus flavonoid supplementation on inflammation in lipopolysaccharide-induced periodontal disease in mice. Food and Function. 12 (11), 5007-5017 (2021).
- Nazir, M. A.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
