Tüm Merkezi ve Periferik Sinir Sistemi Fareleri Diseksiyonu

Krystina Rhéaume; Zhiguo Chen; Yong Wang; Camille Plante; Dhanushka Hewa Bostanthirige; Maude Lévesque; Sameh Geha; Lu Q. Le; Jean-Philippe Brosseau

doi:10.3791/64974

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Tüm Merkezi ve Periferik Sinir Sistemi Fareleri Diseksiyonu

10.8K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/64974

⸱

24 Şubat 2023

Krystina Rhéaume^*¹ , Zhiguo Chen^*² , Yong Wang^*² , Camille Plante¹ , Dhanushka Hewa Bostanthirige¹ , Maude Lévesque¹ , Sameh Geha³^,⁴ , Lu Q. Le²^,⁵^,⁶^,⁷ , Jean-Philippe Brosseau¹^,⁴

¹Department of Biochemistry and Functional Genomics, Université de Sherbrooke, ²Department of Dermatology, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ³Department of Pathology, Université de Sherbrooke, ⁴Centre de Recherche du Centre Hospitalier de Universitaire de Sherbrooke, Université de Sherbrooke, ⁵Simmons Comprehensive Cancer Center, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁶UTSW Comprehensive Neurofibromatosis Clinic, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁷Hamon Center for Regenerative Science and Medicine, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas

^* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Burada, farelerin merkezi ve periferik sinir sistemlerinin diseksiyonunu tamamlamak için bir protokol sunuyoruz. Diseke edilen dokular, brüt fotoğraf çekme veya histoloji gibi aşağı akış uygulamalarında daha fazla analiz edilir.

Özet

Hayvan modelleri, sinirbilim alanının beygir gücünü temsil eder. Buna rağmen, bugün, tam bir kemirgen sinir sistemini incelemek için adım adım bir protokol yoktur ve onu temsil eden ve serbestçe temin edilebilen tam bir şema yoktur. Sadece beyni, omuriliği, belirli bir dorsal kök ganglionunu ve siyatik siniri (ayrı ayrı) hasat etmek için yöntemler mevcuttur. Burada, merkezi ve periferik murin sinir sisteminin ayrıntılı resimlerini ve bir şemasını sunuyoruz. Daha da önemlisi, diseksiyonunu gerçekleştirmek için sağlam bir prosedürün ana hatlarını çiziyoruz. 30 dakikalık ön diseksiyon adımı, omur içindeki sağlam sinir sisteminin, iç organlardan ve deriden arındırılmış kaslarla izole edilmesini sağlar. Omuriliği ve torasik sinirleri ortaya çıkarmak için bir mikro diseksiyon mikroskobu altında 2-4 saatlik bir diseksiyon takip eder ve son olarak tüm merkezi ve periferik sinir sistemini karkastan soyar. Bu protokol, küresel olarak sinir sisteminin anatomisini ve patofizyolojisini incelemede ileriye doğru atılmış önemli bir adımı temsil etmektedir. Örneğin, bir nörofibromatozis tip I fare modelinden diseke edilmiş dorsal kök gangliyonları, tümör ilerlemesindeki değişiklikleri çözmek için histoloji için daha fazla işlenebilir.

Giriş

Bu yöntemin genel amacı, bir farenin merkezi ve periferik sinir sistemini tek parça halinde izole etmektir. Şu anda bir kemirgenin tüm sinir sistemini küresel düzeyde incelemek için incelemek için bir protokol yoktur. Sinirbilimciler tipik olarak siyatik siniri herhangi bir periferik sinir¹ için bir vekil olarak ve L3 ila L5 ganglionları^2'yi herhangi bir ganglion için bir vekil olarak kullanırlar. Bu yöntemleri kullanarak, sonuçların belirli bir sinire / gangliyona özgü olup olmadığı sonucuna varmak imkansızdır. En azından bazı sinir patolojilerinin tüm sinirleri ve ganglionları eşit der....