RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Research Article
Mary O. Shodipo1, Ranelagh Yzabelle Lauguico1, Klaus M. Stiefel1,2, Paul C. Sikkel3,4
1Institute of Environmental and Marine Sciences,Silliman University, 2Neurolinx Research Institute, 3Department of Marine Biology and Ecology, Rosenstiel School of Marine Atmospheric and Earth Sciences,University of Miami, 4Water Research Group, Unit for Environmental Sciences and Management,North-West University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Erratum Notice
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
Deniz gnathiid izopod balık parazitlerini nefes tutma dalışı veya tüplü dalış yoluyla saha alanlarına yerleştirilen ışık tuzaklarını kullanarak toplamak için bir yöntem sunuyoruz.
Işık tuzakları kullanılarak deniz gnathiid izopod balık parazitlerini toplamak için bir yöntem sunulmaktadır. Gnathiid izopodları, çoğunlukla geceleri konakçı balıklardan kan ve sıvı ile beslenen önemli bir deniz balığı parazit grubudur. Karadaki keneler ve sivrisinekler gibi, sadece geçici olarak ev sahipleriyle ilişki kurarlar ve hayatlarının çoğunu benthos'ta özgürce yaşayarak geçirirler. Yüksek hareketlilikleri ve konakçılarla geçici ve ağırlıklı olarak gece ilişkileri göz önüne alındığında, serbest yaşayan konakçıları yakalayarak kolayca toplanamazlar. Bununla birlikte, su altı ışık kaynaklarına kolayca çekilirler ve bu da onları ışık tuzaklarında toplama fırsatı yaratır. Burada, gnathiid izopodlarının serbest yaşam aşamalarını toplamak için özel olarak uyarlanmış ışık tuzaklarının konuşlandırılması ve işlenmesinde yer alan tasarım ve bireysel adımlar özetlenmiştir. Numune sonuçları ve çeşitli farklı örnekleme ihtiyaçları için temel protokolün olası modifikasyonları sunulmakta ve tartışılmaktadır.
Paraziter kabuklular, resif balıklarının ekolojisinde ve yaşam öykülerinde önemlidir. Ev sahiplerinden çıkardıkları biyokütle ve enerji önemlidir ve davranışı, fizyolojiyi ve hayatta kalmayı etkiler1. Gnathiid izopod kabukluları, tropikal ve subtropikal resif sistemlerinde en belirgin balık paraziti grubunu temsil eder, burada hem bol hem de çeşitlidir 2,3 ve daha temiz balıkların birincil gıda maddesidir 4,5. Gnathiidler genellikle 1-3 mm büyüklüğündedir. Sadece üç yavru evrenin balıkların kan ve vücut sıvılarıyla beslendiği olağandışı yaşam geçmişleri vardır 6,7. En çok gece 8,9'da aktiftirler ve görme bir rol oynuyor gibi görünse de, konakçı bulma 10, konakçı 11,12'yi bulmak için koku alma ipuçlarına büyük ölçüde dayanır. Üç yavru besleme aşamasının her biri, tek bir konakçı balıkla beslenir ve her yem bir erime aşaması ile ayrılır. Son yemden sonra, üçüncü aşama larvaları, çoğalan ve sonra ölen beslenmeyen yetişkinlere dönüşür. Beslenmenin konakçı ile sadece kısa bir ilişki gerektirdiği göz önüne alındığında, her bir beslenme aralığı günler sürerken, gnathiidler yaşamlarının çoğunu benthos'ta serbest yaşayarak geçirirler.
Gnathiidler konakçıları çeşitli şekillerde etkiler1. Daha temiz balıklar ve müşteriler arasındaki etkileşimlerin itici gücü olarak rollerinin yanı sıra 13,14,15, gnathiidler kortizol seviyelerini artırabilir ve yetişkin balık konakçılarında hematokriti azaltabilir16 ve yüksek sayılarda ölüme bile neden olabilir 17. Yavru balıklar için, tek bir gnathiid bile ölümcül olabilir 18,19,20 ve balık hayatta kalsa bile, uzay için rekabet etme ve avcılardan kaçma kabiliyetitehlikeye girer 20,21,22. Gnathiidlerden kaçınmak, bazı resif balıklarında gece göçünün faydalarından birini bile oluşturabilir23.
Daha temiz balıklara ek olarak, gnathiid popülasyonları diğer mikro etçil balıklardan24 ve mercanlar25,26'dan etkilenebilir. Okyanus ısınması ve buna bağlı canlı mercanların kaybı, gnathiidler 27,28,29 üzerinde zıt etkilere sahip gibi görünmektedir.
Açık ekolojik önemleri ve antropojenik çevresel değişimin popülasyonları üzerindeki olası etkileri göz önüne alındığında, onları mercan resiflerinin ekolojik çalışmalarına dahil etmek için zorlayıcı nedenler vardır. Bununla birlikte, benzersiz yaşam öyküleri ve onları inceleyen az sayıda araştırmacı, araştırma için onları toplamak için güvenilir, tekrarlanabilir örnekleme yöntemlerinin geliştirilmesi, uygulanması ve yayılması için bir engel oluşturmaktadır.
Işık tuzakları, geceleri küçük deniz organizmalarını toplamak için uzun zamandır kullanılmaktadır30,31. Eklembacaklılar da dahil olmak üzere gece aktif birçok organizmanın ışığa çekilmesinden yararlanırlar ve buna dayanırlar. Geleneksel olarak, su sütunu30'daki planktonik organizmaları toplamak için kullanılmıştır. Bununla birlikte, temel ilkeler, benthos yakınında aktif olan serbest yüzme organizmalarını toplamak için uygulanabilir. Burada, Filipinler gibi uzak mercan resifi ortamlarında okyanus dibine yakın gnathiid izopodlarının serbest yaşam aşamalarını toplamak için uyarlanmış bir ışık yakalama yöntemi sunuyoruz. Uzak bölgelerde toplama için, bu ışık tuzakları (Şekil 1), bu organizmaları toplamak için geliştirilen diğer yöntemlere göre bazı avantajlar sunar32. Son derece taşınabilir ve dayanıklıdırlar, kolayca elde edilebilen ve ucuz olan sadece üç parça gerektirirler. Ayrıca, konuşlandırıldıklarında tamamen deniz suyuyla dolduruldukları için negatif olarak yüzdürücüdürler. Çekim için ışığa bağımlı olduklarından, sadece geceleri gece aktif türlerin toplanmasında etkilidirler. Ayrıca, hedef türlerden daha fazlasını çekerler ve hedef organizmaları elde etmek için örneklerin diseksiyon kapsamı altında sıralanmasını gerektirirler. Ekibimiz ve işbirlikçilerimiz tarafından şimdiye kadar dünya çapında mercan resif sistemlerinde gnathiidleri toplamak için üç yöntem kullanılmıştır32. Bunlar arasında ortaya çıkma tuzakları, canlı balık yemi tuzakları ve her biri avantajları ve sınırlamaları olan ışık tuzakları bulunur.
Örneklerin toplanmasına Tarım Bakanlığı-Balıkçılık ve Su Kaynakları Bürosu (0154-18 DA-BFAR) tarafından Filipin yasa ve yönetmeliklerine uygun olarak izin verilmiştir (RA 9147; FAO 233) ve Silliman Üniversitesi (SU) hayvan etik komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. Işık Tuzakları
2 Laboratuvar işlemleri
Orta Filipinler'de örnekleme için, ana hatlarıyla belirtilen tuzak tasarımı (Şekil 1) kullanılmıştır. Bir gecede 36 tuzak kurulduğunda (bir bölgede), tuzak başına 1 ila 1343 gnathiid (275 ± 54) toplandı. Bunlar hem beslenen hem de beslenmeyen çocuk evrelerini içeriyordu (Şekil 2; Tablo 1, 2). Bu sonuçlar, çalışma koşulları altında gnathiid izopodlarının toplanmasında ışık tuzaklarının etkinliğini göstermektedir. Şekil 3 , tuzağın su altındaki yerleşimini göstermektedir.
Gnateid toplama için bu yöntem, çeşitli saha alanları ve bilimsel sorular için etkili ve yeterince esnektir. Örneğin, referans29, mercan örtüsünün ve balık biyokütlesinin gnathiid bolluğu üzerindeki etkilerini ölçmek için ışık tuzakları kullandı (Şekil 4) ve referans33, kasırgaların genetik haplotipler üzerindeki etkilerini ölçmek için benzer tuzaklar kullandı (Şekil 5). Gnathiidlerin toplanması için başka teknikler geliştirilmiş ve kullanılmış olsa da32, bu teknik özellikle etkilidir (Tablo 3). Ortaya çıkma tuzakları, plankton örgü32'den yapılmış "çadırlar", taşınması için büyük platformlar gerektirir, konuşlandırılması zordur ve sürekli onarım gerektiren kolayca yırtılır. Dahası, nadiren beslenen çocuk aşamalarını toplarlar. Canlı balıklarla beslenen tuzaklar32 (gnathiidler ölü balıklarla beslenmeyeceği için gereklidir), canlı balıkların yakalanmasını ve barındırılmasını gerektirir. Bu, uzak yerlerde kullanımlarını zorlaştırır. Dahası, etkinlikleri, balığın büyüklüğünden, tuzağın açıklıklarının büyüklüğünden ve su akımlarından etkilenen koku alma ipuçları 11,12'ye dayanır. Daha az gnathiid toplama eğilimindedirler, ışık tuzaklarından daha zor elde edilirler ve sadece beslenen aşamaları toplarlar.

Resim 1: Işık tutucu PVC borular. Sağ: üstten görünüm, yarı saydam huni akrilik yapıştırıcı ile tüpe yapıştırılmış, görünür. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

Resim 2: Yakalandıktan sonra Petri kabındaki gnathiid izopod. Balığın şeffaf vücut sıvısına ve gnathiid'in bağırsağındaki kahverengimsi kırmızı balık kanına dikkat edin. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

Resim 3: Işığın aşağı doğru yönlendirildiği modifiye edilmiş bir ışık tuzağı (ön plan). Bu tasarım, tuzağın altındaki substratı daha doğrudan örneklemek için sakin deniz koşullarında kullanılabilir. Ortaya çıkma tuzakları arka planda gösterilir. Bu şekilreferans 32'den izin alınarak yeniden basılmıştır. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 4: Dağılımdaki farklılıkları gösteren kutu grafikleri. (A) birinci aşama gnathiid bolluğunun, (B) birinci aşama hiperbolluğun, (C) toplam bolluğun ve (D
Yazarlar herhangi bir açıklama yapmayacaklarını beyan ederler.
Deniz gnathiid izopod balık parazitlerini nefes tutma dalışı veya tüplü dalış yoluyla saha alanlarına yerleştirilen ışık tuzaklarını kullanarak toplamak için bir yöntem sunuyoruz.
Finansman ABD Ulusal Bilim Vakfı (NSF OCE 2023420 ve DEB 2231250, P. Sikkel PI) tarafından sağlandı. Filipinler'in Negros Oriental kentindeki Dumaguete Şehri belediyesine bu çalışmayı yürütmeye izin verdiği için teşekkür ederiz. Ayrıca, saha yardımları için birçok gönüllüye ve Silliman Üniversitesi Çevre ve Deniz Bilimleri Enstitüsü'ndeki personele ve meslektaşlarımıza destekleri için teşekkür ederiz.
| Kovalar, küçük numune kapları | hırdavatçı | ||
| Huni | Tedarikçi No. 2209-03 | Huniler: AMERICAN SCIENTIFIC LLC SE - 75 mm (3 inç) | https://us.vwr.com/store/product/8884369/plastic-funnels |
| Işık tuzaklarının ana gövdesi (piyasada bulunan PVC sıhhi tesisat borularından yapılmıştır) | (SKU 145640) | Alasco Sıhhi uPVC Borular Serisi 1000 107mm / 4 '' & nbsp; | https://alascopvcpipes.com/product/alasco-standard-sanitary-upvc-pipe-series-1000/. Bu marka Filipinler'de bulunabilir. Diğer simular markaları da kullanılabilir |
| Modelleme kili | Sanat malzemeleri ve çocuk oyuncak mağazalarında bulunabilir | Geri alma işleminden sonra huniyi kapatmak için | |
| Plankton ağı (50-100 & mikro; m) | herhangi bir saygın marka ve kaynak | https://www.adkinstruments.in/products/plankton-nets-in-various-mesh-size-1633936883 | |
| Alasco | için kapakları vidalayın | Sıhhi Temizleme 4 inç | https://alascopvcpipes.com/product/alasco-standard-sanitary-upvc-clean-out/. Bu marka Filipinler'de bulunabilir. Diğer simular markaları da kullanılabilir |
| Tüplü/şnorkel ekipmanı | , | herhangi bir saygın marka ve kaynak | |
| Stereo-mikroskoplar | , | Bilimsel tedarikçiler | |
| Sualtı dokunuşları, | Princeton Tec,Ecoflare ve Fantasea Nano Gözcü 6023 |