Bu protokol, bir fitokimyasalın lepidopteran böcek larvaları üzerindeki potansiyel toksik etkisini değerlendirmek için zorunlu besleme testini açıklar. Bu, öldürücü ve öldürücü dozu, caydırıcı aktiviteyi ve fizyolojik etkiyi optimize etmek kolay, oldukça ölçeklenebilir bir böcek biyo-tahlilidir. Bu, çevre dostu böcek ilaçlarını taramak için kullanılabilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Fitokimyasalların Helicoverpa armigera Üzerindeki İnsektisidal Etkisinin Değerlendirilmesi için Beslenme Deney Sistemi Geliştirilmesi
Bu makalede
Özet
Özet
Bir lepidopteran böceği olan Helicoverpa armigera, dünya çapında bir dağılıma sahip polifag bir zararlıdır. Bu otçul böcek, bitkiler ve tarımsal üretkenlik için bir tehdittir. Buna karşılık, bitkiler böceğin büyümesini ve hayatta kalmasını olumsuz yönde etkileyen çeşitli fitokimyasallar üretir. Bu protokol, bir fitokimyasalın (quercetin) böcek büyümesi, gelişmesi ve hayatta kalması üzerindeki etkisini değerlendirmek için zorunlu bir beslenme tahlili yöntemini gösterir. Kontrollü koşullar altında, yenidoğanlar önceden tanımlanmış bir yapay diyetle ikinci girişe kadar tutuldu. Bu ikinci instar larvaların 10 gün boyunca kontrol ve kuersetin içeren yapay bir diyetle beslenmelerine izin verildi. Böceklerin vücut ağırlığı, gelişim evresi, frass ağırlığı ve ölüm oranı alternatif günlerde kaydedildi. Test süresi boyunca vücut ağırlığındaki değişim, beslenme düzenindeki farklılık ve gelişimsel fenotipler değerlendirildi. Açıklanan zorunlu beslenme testi, doğal bir yutma modunu simüle eder ve çok sayıda böceğe kadar ölçeklendirilebilir. Fitokimyasalların büyüme dinamikleri, gelişimsel geçiş ve H. armigera'nın genel uygunluğu üzerindeki etkisini analiz etmeye izin verir. Ayrıca, bu kurulum beslenme parametrelerindeki ve sindirim fizyolojisi süreçlerindeki değişiklikleri değerlendirmek için de kullanılabilir. Bu makale, toksikolojik çalışmalarda, böcek öldürücü molekül taramasında ve bitki-böcek etkileşimlerinde kimyasal etkilerin anlaşılmasında uygulamaları olabilecek besleme tahlil sistemleri için ayrıntılı bir metodoloji sunmaktadır.
Giriş
Mahsul verimliliğini etkileyen biyotik faktörler esas olarak patojenik ajanlar ve zararlılardır. Çeşitli böcek zararlıları, tarımsal ürün kaybının %15 ila %35'ine neden olur ve ekonomik sürdürülebilirlik uygulamalarını etkiler1. Coleoptera, Hemiptera ve Lepidoptera takımlarına ait böcekler, yıkıcı zararlıların ana takımlarıdır. Çevrenin son derece uyarlanabilir doğası, çeşitli hayatta kalma mekanizmalarının geliştirilmesinde lepidopteranlara fayda sağlamıştır. Lepidopteran böcekler arasında, Helicoverpa armigera (Pamuk kurdu) yaklaşık 180 farklı mahsulle beslenebilir ve üreme dokularına önemli zararlar verebilir2
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
H. armigera larvaları , ICAR-Ulusal Tarımsal Böcek Kaynakları Bürosu (NBAIR), Bangalore, Hindistan'dan elde edilmiştir. Bu çalışmada toplam 21 adet ikinci instar larvası kullanıldı.
1. Nohut bazlı yapay diyetin hazırlanması
NOT: Yapay bir diyet hazırlamak için gerekli bileşenlerin bir listesi Tablo 1'de belirtilmiştir.
- Tüm fraksiyonları Tablo 1'de listelendiği gibi bir beherde ayrı ayrı tartın ve bir spatula/manyetik karıştırıcı kullanarak homojen bir karışım hazırlayın.
- C Fraksiyonunu yaklaşık 100 °C'de bir mikrodalga kullanarak 5 da....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
1.000 ppm quercetin içeren bir diyetle beslenen böcek larvaları, kontrol grubuna kıyasla vücut ağırlığında ~% 57'lik önemli bir azalma göstermiştir (Şekil 2A). Vücut ağırlığındaki azalma, kuersetin ile tedavi edilen larvaların vücut boyutunun azalmasına neden oldu (Şekil 2B). Kuersetin ile beslenen larvaların beslenme hızında kontrole kıyasla kayda değer bir azalma gözlenmiştir (Şekil 2C).
Ayrıca, kuerset.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Laboratuvar biyoanalizleri, sonuçları tahmin etmek ve kısa bir süre içinde makul bir maliyetle çeşitli bileşikler üzerinde karşılaştırmalı toksisite verileri üretmek için yararlıdır. Besleme biyo-tahlili, böcek-böcek ilacı ve böcek-bitki-böcek öldürücüler arasındaki etkileşimleri yorumlamaya yardımcı olur. Öldürücü doz 50 (LD50), öldürücü konsantrasyon 50 (LC50) veya başka herhangi bir öldürücü konsantrasyon veya doz24,25 oluşturma sürecini .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemişlerdir.
Teşekkürler
SM, YP ve VN, Hindistan Hükümeti, Yeni Delhi Üniversite Hibeleri Komisyonu tarafından verilen bursu kabul eder. RJ, MLP036626, MLP101526 ve YSA000826 proje kodları kapsamında mali destek için Hindistan'daki Bilimsel ve Endüstriyel Araştırma Konseyi'ne (CSIR) ve Pune, Hindistan'daki CSIR-Ulusal Kimya Laboratuvarı'na teşekkür eder.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Agar Agar | Himedia | RM666 | Katılaştırıcı ajan |
| Askorbik asit | Himedia | CMS1014 | C vitamini kaynağı |
| Bengal Gram | NA | NA Protein | ve karbonhidrat kaynağı |
| Kazein | Sigma | C-5890 | Protein kaynağı |
| Kolesterol | Sisco Araştırma Laboratuvarları | 34811 | Yağ asidi kaynağı |
| Kolin Klorür | Himedia | GRM6824 | Amonyum tuzu |
| DMSO | Sigma 67-68-5 | Solvent | |
| GraphPad Prizma v8.0 | https://www.graphpad.com/guides/prism/latest/user-guide/using_choosing_an_analysis.htm | ||
| Metil Paraben | Himedia | GRM1291 | Antifungal ajan |
| Multivitamin kapsülü | GalaxoSmithKline | NA | Vitamin kaynağı |
| Quercetin | Sigma | Q4951-10G | Fitokimyasal |
| Sorbik Asit | Himedia | M1880 | Antimikrobiyal ajan |
| Streptomisin | Himedia | CMS220 | Antibiyotik |
| E Vitamini kapsülü | Nukind Healthcare | NA | E Vitamini kaynağı |
| Maya Özü | Himedia | RM027 | Amino asit kaynağı |
Kaynaklar
- Popp, J., Pető, K., Nagy, J. Pesticide productivity and food security. A review. Agronomy for Sustainable Development. 33 (1), 243-255 (2013).
- da Silva, F. R., et al. Comparative toxicity of Helicoverpa armigera and Hel....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
