Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Alkol Kullanım Bozukluğunu Modellemek İçin İki Şişe Seçimi ile Eşleştirilmiş Kronik Aralıklı Etanol Buharına Maruz Kalma

2.2K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/65320

⸱

23 Haziran 2023

 ,  ,  ,  , 
1Department of Basic Medical Sciences, College of Veterinary Medicine, Purdue University, 2The Scripps Research Institute, 3Purdue Institute for Integrative Neuroscience, 4Weldon School of Biomedical Engineering, Purdue University, 5Purdue Institute of Inflammation, Immunology, and Infectious Disease

Bu makalede

Özet

Burada sunulan, alkol kullanım bozukluğunu incelemek için farelerde alkol bağımlılığının 2BC/CIE modeli için bir protokoldür.

Özet

Alkol kullanım bozukluğu (AUD), tipik olarak kontrolsüz içme ve alkolle meşgul olma olarak ortaya çıkan kronik alkolle ilişkili bir bozukluktur. AUD araştırmasının önemli bir bileşeni, translasyonel olarak ilgili preklinik modellerin kullanılmasıdır. Son birkaç on yılda, AUD çalışmak için çeşitli hayvan modelleri kullanılmıştır. AUD'nin öne çıkan bir modeli, inhalasyon yoluyla tekrarlanan etanol maruziyeti döngüleri yoluyla kemirgenlerde alkol bağımlılığını indüklemek için iyi bilinen bir yaklaşım olan kronik aralıklı etanol buharına maruz kalma (CIE) modelidir. Farelerde AUD'yi modellemek için, CIE maruziyeti, alkol tüketiminin artışını ölçmek için gönüllü iki şişe alkol içme ve su seçimi (2BC) ile eşleştirilir. 2BC/CIE prosedürü, alkol içme artışının artması sağlanana kadar tekrarlanan alternatif haftalar boyunca 2BC içme ve CIE'yi içerir. Bu çalışmada, CIE buhar odasının günlük kullanımı da dahil olmak üzere 2BC/CIE gerçekleştirme prosedürlerini ana hatlarıyla açıklıyoruz ve bu yaklaşımı kullanarak C57BL/6J farelerde artan alkol içme örneği sunuyoruz.

Giriş

Kronik aşırı alkol tüketimini içeren alkol kullanım bozukluğu (AUD), en sık görülen psikiyatrik bozukluklardan biridir ve küresel bir sorundur. AUD semptomları, tekrarlanan zehirlenme, yoksunluk ve aşerme döngülerini içerir ve sosyal, mesleki ve sağlık sonuçlarına bakılmaksızın sürekli alkol tüketimi ile karakterize edilir1,2,3,4,5,6,7. Alkol kullanım bozukluğu genellikle DE9, anksiyete10 veya depression11 gibi diğer yaygın, kalıcı ve bozulmuş zihinsel bozukluklarla birlikte ortaya çıkar ve yalnızca Amerika Birleşik Devletleri'nde yılda yaklaşık 88< ölümden sorumludur>2. Aşırı veya sık alkol kullanımı, bir kişinin iş durumunu ve sosyal ilişkilerini etkileyebilir12 ve şiddetin artmasına neden olabilir13. Fiziksel olarak, alkolden akut çekilme anksiyete, ajitasyon, titreme, aşırı terleme, bilinç değişikliği ve halüsinasyonlar14,15 ile sonuçlanabilir. Ayrıca, insanlar içkiyi keserken veya bırakırken yoksunluk belirtileri hissedebilir ve sinirli veya huysuz hale gelebilir16. Ek olarak, kronik alkol tüketimi hafıza kaybına17 neden olabilir ve alkolün neden olduğu demansa önemli ölçüde katkıda bulunan Wernicke-Korsakoff sendromu (WKS) olarak da bilinen tiamin eksikliğine neden olabilir18.

AUD araştırmasını daha da ilerletmek için, hastalığın translasyonel olarak ilgili hayvan modellerine sahip olmak gerekir. Kemirgenlerde en yaygın AUD modeli, alkol buharının tekrar tekrar solunması yoluyla alkol bağımlılığını indüklemek için iyi bilinen bir yaklaşım olan kronik aralıklı etanol buharına maruz kalmadır (CIE)4,19,20,21,22,23,24,25,26,27,28,29,30. Kemirgen CIE prosedürleri, elleçlemeye bağlı konvülsiyonlar31, aşırı uyarılabilirlik, sinirlilik benzeri davranış, anksiyete benzeri davranış ve uyku bozuklukları gibi yoksunluk semptomlarına neden olur ve alkol içmenin artmasına neden olur22,32,33,34,35. Ayrıca, CIE, insan AUD36'da gözlemlenen kompulsif alımı yansıtan gönüllü alkol tüketiminde önemli bir artışa yol açar. Zehirlenme aşamaları sırasında fareler, ataksi, sedasyon ve bozulmuş hipotermi dahil olmak üzere insanlarda alkol zehirlenmesi ile tutarlı davranışsal ve fizyolojik belirtiler gösterir37,38,39. Bu sonuçlar, CIE modelinin alkol bağımlılığının hem nörobiyolojik hem de davranışsal yönlerini yakalamadaki faydasının altını çizerek, onu AUD mekanizmalarını aydınlatmak ve potansiyel terapötik müdahaleleri test etmek için değerli bir araç haline getirmektedir. Kronik aralıklı etanol (CIE) buharına maruz kalma gibi klinik öncesi AUD modellerinde, fareler insan alkol zehirlenmesine ve bağımlılığına paralel davranışsal ve fizyolojik belirtiler sergiler. Zehirlenme aşamaları sırasında, fareler ataksi, sedasyon, azalmış keşif davranışı ve bozulmuş düzeltme refleksi gibi belirtiler gösterebilir. Bu riskler göz önüne alındığında, hayvanlar, ciddi zehirlenme veya sağlık bozulması belirtilerini belirlemek için etanol buharına maruz kalma sırasında ve sonrasında yakından izlendi.

Sıçanlarda, CIE modeli genellikle alımın artışını ölçmek için alkolün edimsel kendi kendine uygulanmasını içerir40,41,42, fare modeli ise CIE ve iki şişe seçimi (2BC) içme43,44 içerir. Alkol bağımlılığının klinik öncesi modelleri, hayvanların kronik etanol buharına maruz kaldıktan sonra etanol alımlarını artırdığını tutarlı bir şekilde göstermiştir23,45,46,47. Özellikle farelerde, tekrarlanan CIE döngülerinin gönüllü etanol alımını artırdığı gösterilmiştir3,21,48,49,50. Genel olarak, önceki çalışmalar, CIE modelinin kemirgenlerde etanol tüketimini artırmak ve AUD'yi modellemek için yeterli olduğunu göstermektedir.

Bu çalışma, AUD çalışması için CIE yöntemini vurgulamayı ve daha spesifik olarak 2BC/CIE fare modeline odaklanmayı amaçlamaktadır. 2BC/CIE'yi gerçekleştirmek için gerekli adımların ayrıntılı bir sürecinden geçiyoruz ve CIE'den sonra alkol içmenin artmasına bir örnek sunuyoruz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm prosedürler Purdue Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı. Bu çalışmada 8 haftalık C57BL/6J fareler kullanılmıştır. CIE grubunda 5 fare (3 erkek, 2 dişi) ve Air grubunda 10 fare (5 erkek ve 5 dişi) vardı. Hayvanlar ticari bir kaynaktan elde edildi (Malzeme Tablosuna bakınız) ve yiyeceğe erişimi olan 12 saatlik bir aydınlık-karanlık döngüsünde grup halinde barındırıldı. Farelerin vücut ağırlıkları deney boyunca haftada bir kez ölçüldü.

1. Genel deney tasarımı

NOT: İki şişe seçeneği (2BC)/kronik aralıklı etanol buharına maruz kalma (CIE), etanol bağımlılığını araştırmak için klinik öncesi bir fare modelidir51.

  1. M.Ö. 2 hafta boyunca, farelerin etanol içeren bir şişeye (%15 a/h) ve günde 2 saat (Pazartesi-Cuma) su içeren bir şişeye erişimi olduğundan emin olun, bu da karanlık döngünün 2 saatinden başlayarak.
  2. İlk başta, farelerin stabil bir etanol alım seviyesine ulaşılana kadar en az 2 haftalık temel 2BC içmesine izin verin. Deneysel ihtiyaçlara bağlı olarak, fareleri iki gruba (bir CIE grubu ve bir Hava grubu) veya ortalama başlangıç etanol alımına dayalı olarak ek tedaviler dahil edilirse daha fazlasına bölün.
  3. Başlangıç 2BC haftalarından sonra, CIE grubundan fareleri art arda dört gün (Pazartesi-Perşembe) boyunca 16 ardışık saat buhar açık ve 8 ardışık saat buhar kapalı olacak şekilde etanol buharına (CIE) maruz bırakın. Maruziyet süresi boyunca stabil ve sürekli kan etanol konsantrasyonları sağlamak için, pirazol bir alkol dehidrojenaz inhibitörü olarak birlikte uygulandı, böylece hızlı etanol metabolizmasını önledi ve tutarlı sistemik etanol seviyelerini teşvik etti.
    NOT: Aydınlatma, titreşim, gürültü ve sıcaklık gibi odaya özgü potansiyel değişkenleri kontrol etmek için, Hava grubundaki fareler, CIE grubuyla aynı çevresel koşullar altında, ancak alkol buharına maruz kalmadan aynı bir odaya yerleştirildi.
  4. CIE/Air haftası boyunca, 2BC'nin oluşmadığından emin olun. 1 haftalık CIE / Air'den sonra, bir sonraki Pazartesi'den Cuma'ya kadar fareleri 2BC'de devam ettirin.
  5. CIE farelerinde alkol içme artışının artması meydana gelene kadar prosedürün geri kalanında farelere alternatif haftalar CIE / Air ve 2BC'ye izin verin. Kan etanol konsantrasyonlarını (BEC) belirlemek için farelerden haftada en az bir kez CIE kan toplayın52.

2. Deney hazırlığı

  1. Çalışmaya başlamadan önce aşağıdaki tüm malzemeleri edinin: fareler, kafesler/metal kafes üstleri, kafes başına iki tanesini yan yana sığdıracak içme şişeleri, yatak takımları, yiyecek, tartı, kronik aralıklı buhar odası ve bir Analox makinesi veya BEC'leri analiz etmek için başka bir yöntem (bkz.
  2. Gerekli tüm kimyasalların deney için hazır olduğundan emin olun: içme suyu, %95 etanol, pirazol, heparin ve steril tuzlu su.

3. Hayvan alışkanlığı

  1. Fareler halihazırda deneylerle aynı yerde barındırılmamışsa, yeni ortama alışmaları için en az 1 hafta bekleyin.
    NOT: Bu süre zarfında, stresle ilgili karışıklıkları en aza indirmek ve hayvan refahını iyileştirmek için fareler de nazik muameleye alıştırılmalıdır. İşleme seansları, her biri hayvan başına yaklaşık 2-3 dakika süren art arda beş gün boyunca günde bir kez gerçekleştirildi. Fareler, kuyruğu kaldırılmadan deneycinin ellerine tuttu veya nazikçe yönlendirildi, bu da işleyicinin elini gönüllü olarak keşfetmelerine izin verdi. Bu teknik, rutin etkileşimi kolaylaştırır, sonraki deneysel prosedürler sırasında stresi azaltır ve daha güvenilir davranışsal veriler sağlar. Ek olarak, hayvanlar test ortamına daha fazla alışmaları için günde 30 dakika boyunca deney alanına transfer edildi.
  2. Farelere, farklı kafes kurulumuna uyum sağlamaları ve içmek için ayrı bir kafese yerleştirilmeleri için her iki şişenin de suyla doldurulduğu 1 hafta boyunca iki şişe seçeneği verildiğinden emin olun.

4. %15 w/v etanol ve su içeren iki şişe seçeneği

  1. İki şişe seçim alışkanlığı
    1. İki şişe seçim testi paradigması, su ile iki şişe seçimi ve daha sonra su ve etanol ile test etme haftası boyunca aynıdır. Işıklar kapanmadan 30 dakika önce grup halinde barındırılan fareleri kendi içme kafeslerine taşıyın ve ardından farelerin 2 saat içmesine izin verin.
    2. 2 saatlik içme periyodundan önce ve sonra her bir içme şişesinin hacimlerini kaydedin. Her grup, Pazartesi'den Cuma'ya 5 gün boyunca 2BC'ye tabi tutulur.
      NOT: Alışkanlık haftasının amacı, tek bir şişenin doğal yan pozisyonundan kaynaklanan herhangi bir önyargıyı en aza indirmek için hayvanların kafeste bulunan iki şişeye uyum sağlamasına izin vermektir. Bu hafta boyunca her iki şişe de su ile doldurulur. Ürünle birlikte verilen metal hazne yalnızca bir şişe tutacak şekilde tasarlanmışsa, ikinci şişe için yer açmak için ilk şişeye bitişik çubukları arasındaki boşluğu dikkatlice kullanın. İçme deneyleri için kullanılan şişeler, 10 mL ve 25 mL'lik pipetler kullanılarak, farelerin içmesi için bilyeli rulmanlı düz bir yudumlayıcıya izin vermek için uçları kesilmiş olarak özel olarak üretilmiştir. Şişeleri tel kapağa klipslemek için bağlayıcı klipslerin kullanılması, içme süresi boyunca şişelerin hareket etmemesini sağlayacaktır (Ek Şekil 1 ve Ek Şekil 2).
  2. Temel iki şişe seçimi
    1. Alışkanlıktan sonra, stabil bir etanol alımı sağlamak için farelerin en az 2 haftalık temel 2BC içme işlemine tabi tutulmasına izin verin. Temel içme sırasında, fareleri günde 2 saat ve haftada 5 gün (Pazartesi-Cuma) bir su şişesi ve% 15 w / v etanol içeren ikinci bir şişe ile test edin. 2 saatlik içme periyodundan önce ve sonra her bir içme şişesinin hacmini kaydedin.
      NOT: Etanol alımının stabil bir taban çizgisini oluşturmak için, her farenin günler arasındaki alımında yaklaşık %15'ten daha az değişiklik olana kadar 2BC haftalarını tekrarlayın.
    2. Fareler stabil bir etanol alımı taban çizgisine ulaştıktan sonra, fareleri etanol alımlarına göre etanole bağımlı olmayan (Hava işlemi) ve etanole bağımlı (CIE tedavisi) gruplara eşit olarak bölün. Temel etanol alımı belirlendikten sonra, fareler ertesi hafta CIE'ye (veya Havaya maruz kalmaya) tabi tutulur.
      NOT: Tüm deneyler, bağımlı olmayan bir grubun dahil edilmesini gerektirmez ve bu, çalışmanın odağına göre belirlenmelidir. Örneğin, spesifik bir muamele görmüş ve edilmemiş etanol bağımlı fareler daha uygun bir karşılaştırma olabilir.
  3. İki şişe seçeneği (2BC)
    1. İlk CIE haftasından sonra temel içme sırasında gerçekleştirilen 2BC prosedürüne devam edin.
      NOT: İki şişe seçenekli fare içme formülü %15 w/v etanol karışımıdır (1 L): %95 etanol (195 mL) ve fare içme suyudur (805 mL).

5. Kronik aralıklı etanol buharı (CIE) maruziyeti

  1. Aşağıdaki malzemeleri düzenleyin: ısmarlama CIE buhar odaları (Ek Şekil 3), %95 etanol, bir etanol-pirazol çözeltisi (%20 etanol içinde karıştırılmış 68,1 mg/kg pirazol), bir salin-pirazol çözeltisi (68,1 mg/kg pirazol tuzlu suda karıştırılmış), şırıngalar (1 mL) ve iğneler.
  2. Kronik aralıklı etanol buharı (CIE) prosedürü
    1. CIE için buhar odalarına konmadan önce, farelere intraperitoneal olarak bir etanol-pirazol çözeltisi (0.0075 mL / g) enjekte edin, bu çözelti bir başlangıç etanol zehirlenmesi oluşturmak, etanol dehidrojenazı inhibe etmek ve etanol metabolizmasını bloke etmek için kullanılır53.
    2. Tüm Hava kontrollerine ve diğer gruplara etanol yerine salin (0.0075 mL / g) ile karıştırılmış aynı pirazol dozunu enjekte edin. Her hafta CIE'nin ilk günü ve son günü yarım doz (0.00375 mL / g) pirazol çözeltisi verilmesi önerilir.
    3. Enjeksiyonlardan sonra, Hava/kontrol farelerini ev kafeslerine geri koyun ve CIE grubu kafeslerini buhar odasının içine yerleştirin.
      NOT: Kronik etanol buharına maruz kalma ile ilişkili potansiyel sağlık riskleri göz önüne alındığında, hayvanlar refahlarını sağlamak ve herhangi bir olumsuz etkiyi tespit etmek için protokol boyunca yakından izlendi. Fareler haftada en az iki kez tartıldı ve sağlık değerlendirmeleri klinik sıkıntı belirtileri için gözlem içeriyordu. Başlangıç seviyesinden %20'yi aşan bir vücut ağırlığı kaybı sergileyen veya kambur duruş, uyuşukluk, piloereksiyon veya dağınık kürk gibi belirtiler gösteren hayvanların, insancıl uç noktalara ulaştığı kabul edildi ve onaylanmış kurumsal hayvan bakımı ve kullanım kılavuzlarına uygun olarak çalışmadan derhal çıkarıldı. CIE sırasında, fareler, etanol maruziyetinin sona ermesini takiben uzun bir geri çekilme dönemine girdiklerinde, haftanın sonuna doğru kötü sağlık sonuçlarına karşı en hassastırlar. Geri çekilmenin şiddetini en aza indirmek için, her hafta buhara maruz kalmanın son gününde yarım doz pirazol uygulanır. Ek olarak, hayvanları etanol maruziyetine geri döndürmek için her yeni CIE döngüsünün başlangıcında yarım doz verilir. Bir alkol dehidrojenaz inhibitörü olan pirazol, kan etanol konsantrasyonlarını stabilize etmek ve uzatmak için kullanılır; dozlar tipik olarak 0.00375 mL / g ila 0.0075 mL / g arasında değişir ve istenen kan etanol konsantrasyonunu elde etmek için ayarlanabilir.
    4. Fareler buhar odalarına konulduktan sonra kapıları kilitleyin ve pompayı uygun buhar seviyesine ayarlayın (örn. 1-3). Denemenin çalışma süresini ayarlayın. Bu çalışma için deney saat 17:00'de başlamış ve saat 09:00'da tamamlanmıştır ve 1-2 pompa ayarı kullanılmıştır (baştan sona kullanılmıştır).
    5. Ardından, deneyi başlatmak için CIE buhar odası kontrol ekranındaki Başlat düğmesine basın.
      NOT: Bu adım, kullanılan hazneye ve kurulumdaki farklılıklara bağlı olarak değişebilir. Burada, tüm fareler enjekte edildikten ve etanol odasına yerleştirildikten sonra, oda %95 etanolü bir cam şişeye pompalamaya başlamalı ve sıvı etanolü buhara ısıtmalıdır. Buhar, farelerin 4 gün boyunca (Pazartesi akşamından Cuma sabahına kadar) 16 saat / gün tutulduğu odadan akar. Fareler her gün 8 saat buharın kapalı olduğunu deneyimliyor. Fareler daha sonra dördüncü günün sonunda (Cuma sabahı) odadan çıkarılır ve bir sonraki Pazartesi günü MÖ 2'ye başlar. Spesifik buhar odası sistemine ve kurulumuna bağlı olarak, farklı ayarlar/buhar seviyelerinin neden olduğu BEC'lerde farklılıklar olabilir. Sistem bileşenlerindeki küçük farklılıklar, hava akışı, egzoz vb. gibi çeşitli faktörler buna neden olabilir. Pirazol dozu yerine etanol buhar seviyesinin ayarlanması, bir BEC'yi hedef aralıkta tutmak için uygundur. Tolerans geliştikçe, BEC'ler çok düşük olabilir ve buhar seviyesinin ayarlanması gerekebilir. Buhar seviyeleri arasındaki gradyan BEC'leri artırmak için çok dikse, BEC'leri değiştirmek için pirazol dozunun buna göre ayarlanması önerilir.
    6. CIE sırasında farelerin BEC'lerini (bkz. adım 5.3) haftada en az bir kez ölçün. BEC'lerin düşmeye başlamadığından emin olmak için buhar durmadan 30 dakika önce kan alımı yapın.
      NOT: Etanol toleransı birkaç hafta boyunca oluştuğu için deney sırasında buhar seviyesinin ayarlanması gerekebilir. BEC'ler, buhar ayarlarını yapmadan önce ve sonra test edilmelidir.
    7. Fareleri CIE'yi takip eden hafta 2BC testine geri koyun. Adım 4 ve adım 5'i tekrarlayın. Fareleri, temel içme hacimlerine kıyasla önemli etanol tüketimi artışına sahip olana kadar dört ila sekiz döngü (8-16 hafta) boyunca CIE ve 2BC arasında dönüşümlü tutun.
  3. Kan ölçümleri
    1. Aşağıdaki malzemeleri düzenleyin: Analoks sistemi, bıçak, tüp (0,2 mL), heparin/EDTA ve santrifüj gibi BEC'leri ölçmek için ekipman (bkz.
    2. BEC'yi belirlemek için kan toplamak için CIE farelerini CIE haftası boyunca bir kez, buhar sistemi kapanmadan 30 dakika önce kuyruk kesin. Kan alımı, lab54.
      tercihlerine bağlı olarak çeşitli yöntemler kullanılarak gerçekleştirilebilir      . NOT: Kan, heparinize veya EDTA kaplı 0,5 mL'lik tüplere toplanır (bkz. Malzeme Tablosu).
    3. Toplanan kan örneklerini işlenene kadar 4 °C'de tutun.
    4. Numuneleri işlemek için, plazmayı ayırmak için önce 208 x g'da 4 °C'de 10 dakika santrifüjleyin.
    5. Bir oksijen oranı etanol analizörü (Malzeme Tablosuna bakınız) veya BEC'leri belirleyebilen diğer sistemler kullanarak kan etanol konsantrasyonlarını belirleyin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Bu temsilci çalışmada, 2BC sırasındaki etanol alımı (g/kg), bazal içme süresince ve haftalarca süren CIE sonrası (buhar sonrası) rapor edilmiştir. Kısaca, protokolde açıklandığı üzere, 2BC sırasında farelerin iki şişeye erişimi vardı: biri su, diğeri ise %15 (w/v) etanol içeriyordu. Bazal alımlar belirlendikten sonra, denekler bölünerek eşit şekilde CIE veya Hava grubuna atanmıştır. 3 haftalık dönem boyunca başlangıç bazal etanol alımı, CIE öncesinde 2.00 g/kg ± 0.21 g/kg (n = 15) değerinde stabilize olmuştur (

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Alkol kullanım bozukluğu, yüksek yaygınlığı ve topluma maliyeti olan küresel bir halk sağlığı sorununu temsil etmektedir56. Klinik öncesi hayvan modellerinde AUD'yi incelemek için farelerde yaygın bir yöntem 2BC/CIE 20,34,43,44,51,57,58,59'dur.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Maury Cole, La Jolla Alcohol Research Inc.'in sahibi ve işletmecisidir.

Teşekkürler

Bu çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) hibe AA027301 ve AA029985 tarafından desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
500 Eppendorf TüpleriEppendorfL203896J
%95 etanolDecon laboratuvarları2816
Analoks makinesiAnaloks AletleriAnalox-AM1
Hayvan Tartı KantarıKent ScientificSCL-4000
Bağlayıcı KlipslerOfis Deposu560394
C57BL/6J fareler Jackson Laboratuvarı000664
SantrifüjEppendorf5418R
Kronik aralıklı buhar odasıLa Jolla Alkol Araştırma A.Ş.Özel yapım malzemeler
Heparin/EDTASagent İlaçTS/İLAÇ/2/2015
Fare yatağıBed-o' Cobs8B1/8 "derin
Fare içme şişesiÖzel yapım malzemeler
PyrazoleSigma-Aldrichbccc6397
Teklad global% 18 protein (fare maması)Teklad globalEnvigo 2018
, ile doldurun

Kaynaklar

  1. Koob, G. F., Volkow, N. D. Neurobiology of addiction: A neurocircuitry analysis. Lancet Psychiatry. 3 (8), 760-773 (2016).
  2. Witkiewitz, K., Litten, R. Z., Leggio, L. Advances in the science and treatment of alcohol use disorder. Science Advances. 5 (9), 4043(2019).
  3. Becker, H. C. Alcohol dependence, withdrawal, and relapse. Alcohol Research and Health. 31 (4), 348-361 (2008).
  4. Becker, H. C. Effects of alcohol dependence and withdrawal on stress responsiveness and alcohol consumption. Alcohol Research. 34 (4), 448-458 (2012).
  5. Erickson, E. K., Grantham, E. K., Warden, A. S., Harris, R. A. Neuroimmune signaling in alcohol use disorder. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 177, 34-60 (2019).
  6. Aalsma, M., et al. Adolescent suicide assessment and management in primary care. BMC Pediatrics. 22 (1), 389(2022).
  7. Grant, B. F., et al. Epidemiology of DSM-5 alcohol use disorder: Results from the National Epidemiologic Survey on Alcohol and Related Conditions III. JAMA Psychiatry. 72 (8), 757-766 (2015).
  8. Helle, A. C., Watts, A. L., Trull, T. J., Sher, K. J. Alcohol use disorder and antisocial and borderline personality disorders. Alcohol Research. 40 (1), (2019).
  9. Luderer, M., Ramos Quiroga, J. A., Faraone, S. V., Zhang James, Y., Reif, A. Alcohol use disorders and ADHD. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 128, 648-660 (2021).
  10. Ribadier, A., Varescon, I. Anxiety and depression in alcohol use disorder individuals: The role of personality and coping strategies. Substance Use and Misuse. 54 (9), 1475-1484 (2019).
  11. McHugh, R. K., Weiss, R. D. Alcohol use disorder and depressive disorders. Alcohol Research. 40 (1), (2019).
  12. Le Berre, A. P. Emotional processing and social cognition in alcohol use disorder. Neuropsychology. 33 (6), 808-821 (2019).
  13. Sontate, K. V., et al. Alcohol, aggression, and violence: From public health to neuroscience. Frontiers in Psychology. 12, 699726(2021).
  14. Prescrire International. Alcohol withdrawal syndrome: how to predict, prevent, diagnose and treat it. Prescrire International. 16 (87), 24-31 (2007).
  15. Mendelson, J. H. The effect of Alcohol on the nervous system. Alcohol Health and Research World. 19 (1), 28-29 (1995).
  16. Murray, T. D., Berger, A. Alcohol withdrawal. Virginia Medical Quarterly. 124 (3), 184-187 (1997).
  17. Fama, R., et al. Memory impairment in alcohol use disorder is associated with regional frontal brain volumes. Drug and Alcohol Dependence. 228, 109058(2021).
  18. Kopelman, M. D. The Korsakoff syndrome. British Journal of Psychiatry. 166 (2), 154-173 (1995).
  19. Griffin, W. C. Alcohol dependence and free-choice drinking in mice. Alcohol. 48 (3), 287-293 (2014).
  20. Griffin, W. C., Lopez, M. F., Yanke, A. B., Middaugh, L. D., Becker, H. C. Repeated cycles of chronic intermittent ethanol exposure in mice increases voluntary ethanol drinking and ethanol concentrations in the nucleus accumbens. Psychopharmacology. 201 (4), 569-580 (2009).
  21. Kimbrough, A., et al. CRF(1) receptor-dependent increases in irritability-like behavior during abstinence from chronic intermittent ethanol vapor exposure. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 41 (11), 1886-1895 (2017).
  22. Kimbrough, A., et al. Brain-wide functional architecture remodeling by alcohol dependence and abstinence. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 117 (4), 2149-2159 (2020).
  23. O'Dell, L. E., Roberts, A. J., Smith, R. T., Koob, G. F. Enhanced alcohol self-administration after intermittent versus continuous alcohol vapor exposure. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 28 (11), 1676-1682 (2004).
  24. Pleil, K. E., et al. Effects of chronic ethanol exposure on neuronal function in the prefrontal cortex and extended amygdala. Neuropharmacology. 99, 735-749 (2015).
  25. Warden, A. S., et al. Microglia control escalation of drinking in alcohol-dependent mice: Genomic and synaptic drivers. Biological Psychiatry. 88 (12), 910-921 (2020).
  26. Gilpin, N. W., Koob, G. F. Neurobiology of alcohol dependence: Focus on motivational mechanisms. Alcohol Research and Health. 31 (3), 185-195 (2008).
  27. Kreifeldt, M., et al. Central amygdala corticotropin-releasing factor neurons promote hyponeophagia but do not control alcohol drinking in mice. Molecular Psychiatry. 27 (5), 2502-2513 (2022).
  28. Sidhu, H., Kreifeldt, M., Contet, C. Affective disturbances during withdrawal from chronic intermittent ethanol inhalation in C57BL/6J and DBA/2J male mice. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 42 (7), 1281-1290 (2018).
  29. Kononoff, J., et al. Systemic and intra-habenular activation of the orphan G protein-coupled receptor GPR139 decreases compulsive-like alcohol drinking and hyperalgesia in alcohol-dependent rats. eNeuro. 5 (3), (2018).
  30. Avegno, E. M., et al. Central amygdala circuits mediate hyperalgesia in alcohol-dependent rats. Journal of Neuroscience. 38 (36), 7761-7773 (2018).
  31. de Guglielmo, G., et al. Recruitment of a neuronal ensemble in the central nucleus of the amygdala is required for alcohol dependence. Journal of Neuroscience. 36 (36), 9446-9453 (2016).
  32. Liang, J., et al. Chronic intermittent ethanol-induced switch of ethanol actions from extrasynaptic to synaptic hippocampal GABAA receptors. Journal of Neuroscience. 26 (6), 1749-1758 (2006).
  33. Becker, H. C. Animal models of alcohol withdrawal. Alcohol Research and Health. 24 (2), 105-113 (2000).
  34. Kimbrough, A., Kim, S., Cole, M., Brennan, M., George, O. Intermittent access to ethanol drinking facilitates the transition to excessive drinking after chronic intermittent ethanol vapor exposure. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 41 (8), 1502-1509 (2017).
  35. Koob, G. F., Colrain, I. M. Alcohol use disorder and sleep disturbances: A feed-forward allostatic framework. Neuropsychopharmacology. 45 (1), 141-165 (2020).
  36. Becker, H. C., Lopez, M. F. An animal model of alcohol dependence to screen medications for treating alcoholism. International review of neurobiology. 126, 157-177 (2016).
  37. Sharpe, A. L., Tsivkovskaia, N. O., Ryabinin, A. E. Ataxia and c-Fos Expression in Mice Drinking Ethanol in a Limited Access Session. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 29, 1419-1426 (2005).
  38. Koob, G. F. Alcoholism: allostasis and beyond. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 27 (2), 232-243 (2003).
  39. Chen, Y. C., Holmes, A. Effects of Topiramate and Other Anti-Glutamatergic Drugs on the Acute Intoxicating Actions of Ethanol in Mice: Modulation by Genetic Strain and Stress. Neuropsychopharmacol. 34, 1454-1466 (2009).
  40. Risher, M. L., et al. Long-term effects of chronic intermittent ethanol exposure in adolescent and adult rats: Radial-arm maze performance and operant food reinforced responding. PLoS One. 8 (5), e62940(2013).
  41. Van Skike, C. E., Novier, A., Diaz-Granados, J. L., Matthews, D. B. The effect of chronic intermittent ethanol exposure on spatial memory in adolescent rats: The dissociation of metabolic and cognitive tolerances. Brain Research. 1453, 34-39 (2012).
  42. Ho, A. M., et al. Chronic intermittent ethanol exposure alters behavioral flexibility in aged rats compared to adult rats and modifies protein and protein pathways related to Alzheimer's disease. ACS Omega. 7 (50), 46260-46276 (2022).
  43. Piggott, V. M., Lloyd, S. C., Perrine, S. A., Conti, A. C. Chronic intermittent ethanol exposure increases ethanol consumption following traumatic stress exposure in mice. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 14, 114(2020).
  44. Quijano Carde, N. A., De Biasi, M. Behavioral characterization of withdrawal following chronic voluntary ethanol consumption via intermittent two-bottle choice points to different susceptibility categories. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 46 (4), 614-627 (2022).
  45. Rimondini, R., Arlinde, C., Sommer, W., Heilig, M. Long-lasting increase in voluntary ethanol consumption and transcriptional regulation in the rat brain after intermittent exposure to alcohol. FASEB Journal. 16 (1), 27-35 (2002).
  46. Becker, H. C. Influence of stress associated with chronic alcohol exposure on drinking. Neuropharmacology. 122, 115-126 (2017).
  47. Zhao, Y., Weiss, F., Zorrilla, E. P. Remission and resurgence of anxiety-like behavior across protracted withdrawal stages in ethanol-dependent rats. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 31 (9), 1505-1515 (2007).
  48. Becker, H. C., Lopez, M. F. Increased ethanol drinking after repeated chronic ethanol exposure and withdrawal experience in C57BL/6 mice. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 28 (12), 1829-1838 (2004).
  49. Kreifeldt, M., Le, D., Treistman, S. N., Koob, G. F., Contet, C. BK channel beta1 and beta4 auxiliary subunits exert opposite influences on escalated ethanol drinking in dependent mice. Frontiers in Integrative Neuroscience. 7, 105(2013).
  50. Pringuey, D., et al. Comorbidity of affective disorders and alcohol use disorder. Encephale. 40, S3-S7 (2014).
  51. Okhuarobo, A., et al. A novel mouse model for vulnerability to alcohol dependence induced by early-life adversity. Neurobiology of Stress. 13, 100269(2020).
  52. Dilley, J. E., Nicholson, E. R., Fischer, S. M., Zimmer, R., Froehlich, J. C. Alcohol drinking and blood alcohol concentration revisited. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 42 (2), 260-269 (2018).
  53. Feierman, D. E., Cederbaum, A. I. Oxidation of the alcohol dehydrogenase inhibitor pyrazole to 4-hydroxypyrazole by microsomes. Effect of cytochrome P-450 inducing agents. Drug Metabolism and Disposition. 15 (5), 634-639 (1987).
  54. Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).
  55. Armstrong, R. A. When to use the Bonferroni correction. Ophthalmic and Physiological Optics. 34 (5), 502-508 (2014).
  56. Rehm, J., et al. Alcohol use disorders in primary health care: What do we know and where do we go. Alcohol and Alcoholism. 51 (4), 422-427 (2016).
  57. Gorini, G., Roberts, A. J., Mayfield, R. D. Neurobiological signatures of alcohol dependence revealed by protein profiling. PLoS One. 8 (12), e82656(2013).
  58. Frie, J. A., Khokhar, J. Y. An open source automated two-bottle choice test apparatus for rats. HardwareX. 5, 00061(2019).
  59. Smith, R. J., et al. Dynamic c-Fos changes in mouse brain during acute and protracted withdrawal from chronic intermittent ethanol exposure and relapse drinking. Addiction Biology. 25 (6), e12804(2020).
  60. Sachdeva, A., Choudhary, M., Chandra, M. Alcohol withdrawal syndrome: Benzodiazepines and beyond. Journal of Clinical and Diagnostic Research. 9 (9), (2015).
  61. Huitron-Resendiz, S., et al. Effects of withdrawal from chronic intermittent ethanol exposure on sleep characteristics of female and male mice. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 42 (3), 540-550 (2018).
  62. Gatch, M. B., Lal, H. Effects of ethanol and ethanol withdrawal on nociception in rats. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 23 (2), 328-333 (1999).
  63. Saitz, R. Introduction to alcohol withdrawal. Alcohol Health and Research World. 22 (1), 5-12 (1998).
  64. Emmerson, R. Y., Dustman, R. E., Shearer, D. E., Chamberlin, H. M. EEG, visually evoked and event related potentials in young abstinent alcoholics. Alcohol. 4 (4), 241-248 (1987).
  65. Gauvin, D. V., Youngblood, B. D., Holloway, F. A. The discriminative stimulus properties of acute ethanol withdrawal (hangover) in rats. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 16 (2), 336-341 (1992).
  66. George, O., Le Moal, M., Koob, G. F. Allostasis and addiction: Role of the dopamine and corticotropin-releasing factor systems. Physiology and Behavior. 106 (1), 58-64 (2012).
  67. Koob, G. F., Le Moal, M. Addiction and the brain antireward system. Annual Review of Psychology. 59, 29-53 (2008).
  68. Koob, G. F., Le Moal, M. Drug addiction, dysregulation of reward, and allostasis. Neuropsychopharmacology. 24 (2), 97-129 (2001).
  69. Nieto, S. J., Grodin, E. N., Aguirre, C. G., Izquierdo, A., Ray, L. A. Translational opportunities in animal and human models to study alcohol use disorder. Translational Psychiatry. 11 (1), 496(2021).
  70. Kuhns, L., Kroon, E., Lesscher, H., Mies, G., Cousijn, J. Age-related differences in the effect of chronic alcohol on cognition and the brain: A systematic review. Translational Psychiatry. 12 (1), 345(2022).
  71. Becker, H. C., Mulholland, P. J. Neurochemical mechanisms of alcohol withdrawal. Handbook of Clinical Neurology. 125, 133-156 (2014).
  72. Chen, M. M., et al. Intoxication by intraperitoneal injection or oral gavage equally potentiates postburn organ damage and inflammation. Mediators of Inflammation. , 971481(2013).
  73. Livy, D. J., Parnell, S. E., West, J. R. Blood ethanol concentration profiles: A comparison between rats and mice. Alcohol. 29 (3), 165-171 (2003).
  74. Jin, L., Batra, S., Jeyaseelan, S. Diminished neutrophil extracellular trap (NET) formation is a novel innate immune deficiency induced by acute ethanol exposure in polymicrobial sepsis, which can be rescued by CXCL1. PLoS Pathogens. 13 (9), e1006637(2017).
  75. Crabbe, J. C., Harris, R. A., Koob, G. F. Preclinical studies of alcohol binge drinking. Annals of the New York Academy of Sciences. 1216, 24-40 (2011).
  76. Blomstrand, R., et al. Pyrazoles as inhibitors of alcohol oxidation and as important tools in alcohol research: An approach to therapy against methanol poisoning. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 76 (7), 3499-3503 (1979).
  77. Domi, A., Stopponi, S., Domi, E., Ciccocioppo, R., Cannella, N. Sub-dimensions of alcohol use disorder in alcohol preferring and non-preferring rats, a comparative study. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 13, 3(2019).
  78. de Guglielmo, G., et al. Voluntary and forced exposure to ethanol vapor produces similar escalation of alcohol drinking but differential recruitment of brain regions related to stress, habit, and reward in male rats. Neuropharmacology. 222, 109309(2023).
  79. Haggerty, D. L., et al. The role of anterior insular cortex inputs to dorsolateral striatum in binge alcohol drinking. Elife. 11, 77411(2022).
  80. Slivicki, R. A., et al. Oral oxycodone self-administration leads to features of opioid misuse in male and female mice. Addiction Biology. 28 (1), e13253(2023).
  81. Godynyuk, E., Bluitt, M. N., Tooley, J. R., Kravitz, A. V., Creed, M. C. An open-source, automated home-cage sipper device for monitoring liquid ingestive behavior in rodents. eNeuro. 6 (5), (2019).
  82. Simpson, S., et al. The hidden brain: Uncovering previously overlooked brain regions by employing novel preclinical unbiased network approaches. Frontiers in Systems Neuroscience. 15, 595507(2021).
  83. Smith, L. C., Kimbrough, A. Leveraging neural networks in preclinical alcohol research. Brain Sciences. 10 (9), 578(2020).
  84. Hwa, L., Besheer, J., Kash, T. Glutamate plasticity woven through the progression to alcohol use disorder: A multi-circuit perspective. F1000Research. 6, 298(2017).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Alkol Ba ml l ModeliCIE ParadigmasFare me DavranKan Etanol KonsantrasyonuYoksunluk SemptomlarPreklinik AUD ModeliBuhar Odas
Alkol Kullanım Bozukluğunu Modellemek İçin İki Şişe Seçimi ile Eşleştirilmiş Kronik Aralıklı Etanol Buharına Maruz Kalma
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.