Biyopsi Kaynaklı Böbrek Hücrelerinin Metabolik Fenotipinin Tanımlanması

Masataka Kawamura; Catherine Parmentier; Lisa A. Robinson; Markus Selzner; Caitriona M. McEvoy; Julia M. Murphy; Maya G. Bozzo-Rey; Sarah Q. Crome; Ana Konvalinka; Sergi Clotet-Freixas

doi:10.3791/65457

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Biyopsi Kaynaklı Böbrek Hücrelerinin Metabolik Fenotipinin Tanımlanması

652 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/65457

⸱

17 Haziran 2025

Masataka Kawamura¹^,²^,³ , Catherine Parmentier¹^,³ , Lisa A. Robinson²^,⁴^,⁵ , Markus Selzner¹^,³ , Caitriona M. McEvoy⁶^,⁷^,⁸ , Julia M. Murphy¹^,⁶^,⁹ , Maya G. Bozzo-Rey¹⁰ , Sarah Q. Crome¹^,⁶^,⁹ , Ana Konvalinka¹^,⁴^,⁶^,¹¹^,¹² , Sergi Clotet-Freixas¹⁰

¹Soham and Shaila Ajmera Family Transplant Centre, University Health Network, ²Division of Nephrology, The Hospital for Sick Children, ³Division of General Surgery, University Health Network, ⁴Institute of Medical Science, University of Toronto, ⁵Program in Cell Biology, The Hospital for Sick Children Research Institute, ⁶Toronto General Hospital Research Institute, University Health Network, ⁷Division of Nephrology, Tallaght University Hospital, ⁸Trinity Kidney Centre, Trinity College Dublin, ⁹Department of Immunology, University of Toronto, ¹⁰Division of Nephrology, McMaster University and St. Joseph's Healthcare, ¹¹Division of Nephrology, Department of Medicine, University Health Network, ¹²Department of Laboratory Medicine and Pathobiology, University of Toronto

Bu makalede

Özet

Bu protokol, biyopsi kaynaklı böbrek hücrelerinin metabolik profillemesini yapmak için benzersiz bir yöntemi tanımlar. Sunulan yaklaşım, sağlıklı yetişkin erkek domuzlarda optimize edilmiştir ve böbrek allogreft canlılığının gerçek zamanlı değerlendirmesini geliştirme potansiyeline sahiptir. Bu yöntem aynı zamanda çoklu metabolizma temelli böbrek hastalıklarında yeni biyolojinin ortaya çıkarılmasına yardımcı olabilir.

Özet

Böbrek nakli, son dönem böbrek hastalığı için en uygun tedavi yöntemidir; Bununla birlikte, nakledilen böbrekler genellikle erken kaybedilir ve nakilden 10 yıl sonra %50'ye varan greft kaybı olur. Erken greft kaybının en önemli nedenlerinden biri, iskemi-reperfüzyon yaralanması (IRI) olarak bilinen, transplantasyon sırasında greftin maruz kaldığı yaralanmadır. Transplantasyon sonrası ilk hafta diyalize ihtiyaç duyulması olarak tanımlanan gecikmiş greft fonksiyonu (DGF), akut böbrek hasarının (ABH) fonksiyonel ve histolojik özelliklerini gösteren ciddi IRI'nin bir belirtisidir. ABH'yi yönlendiren mekanizmalar belirsizliğini korurken, biriken kanıtlar allogreftteki metabolik fonksiyonun AKI'ye aracılık ettiğini ve DGF'nin nedeni olabileceğini düşündürmektedir. Bu nedenle, IRI'nin metabolik temellerinin deşifre edilmesi ve izlenmesi, ABH'yi teşhis etme ve önleme kapasitemizi geliştirecektir. Bu makale, iğne biyopsisinden türetilmiş böbrek hücresi süspansiyonlarında mitokondriyal solunum (oksijen tüketim oranı aracılığıyla), glikoliz (hücre dışı asitleşme hızı) ve hücre içi ATP seviyelerini değerlendirmek için benzersiz bir yöntemi açıklamaktadır. Metodoloji, sağlıklı yetişkin erkek domuzlarda optimize edilmiş ve bir domuz oto-transplantasyon modelinde doğrulanmıştır. Sunulan yaklaşım, klinikte böbrek allogreft canlılığının gerçek zamanlı değerlendirmesini geliştirme potansiyeline sahiptir. Hasta kaynaklı biyopsilerde metabolizmanın profillenmesi, diğer metabolizma temelli böbrek hastalıklarında da yeni biyolojiyi ortaya çıkarabilir.

Giriş

Böbrek nakli, son dönem böbrek hastalığı için en uygun tedavi yöntemidir 1,2,3,4; Bununla birlikte, nakledilen böbrekler genellikle erken kaybedilir ve nakilden 10 yıl sonra %50'ye varan greft kaybı olur⁵. Etkilenen hastalar morbidite ve mortaliteyi artırmıştır ve sağlık sistemleri üzerinde önemli bir ekonomik yük oluşturmaktadır⁶. Erken greft kaybının önemli bir nedeni, iskemi-reperfüzyon hasarı (IRI) olarak bilinen, transplantasyon sırasında greftin maruz kal....