Yöntem makalesi

Tek Seferlik Tuina Müdahalesinden Sonra 24 Saat İçinde Sinir Yaralanması Olan Sıçanlarda Ağrı Değişikliklerinin Özellikleri

1.4K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/65593

⸱

26 Ocak 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1School of Acupuncture-Moxibustion and Tuina, Beijing University of Chinese Medicine, 2Beijing Hospital

Bu makalede

Özet

Minör kronik daralma yaralanması olan sıçanlar için "Üç Manipülasyon ve Üç Akupunktur Noktası" tuina tedavisini gerçekleştirmek için tuina manipülasyon simülatörünü kullanan bir protokol sunuyoruz ve davranış analizi yoluyla ağrı değişikliklerini ve enzime bağlı immünosorbent testi kullanarak inflamatuar faktör ekspresyonundaki değişiklikleri test ederek 24 saat içinde tuina'nın etkili analjezik zaman noktalarını değerlendiriyoruz.

Özet

Geleneksel Çin tıbbının harici bir tedavi yöntemi olan Tuina'nın periferik nöropatik ağrı (pNP) üzerinde analjezik etkisi olduğu klinik ve temel araştırmalarda kanıtlanmıştır. Bununla birlikte, tuina'nın analjezik etkisi için en uygun zaman noktası, tuina analjezisinin başlama mekanizmasının araştırılmasını etkileyen farklı yaralanma duyumlarına göre değişebilir.

Araştırma, pNP'yi simüle etmek için minör kronik daralma yaralanması (minör CCI) model sıçanları kullandı ve tuina terapisini gerçekleştirmek için üç yöntemi (nokta basma, koparma ve yoğurma) ve üç akupunktur noktasını (Yinmen BL37, Chengshan BL57 ve Yanglingquan GB34) simüle etmek için akıllı tuina manipülasyon simülatörünü kullandı. Çalışma, soğuk duyarlılık eşiği (CST), mekanik geri çekilme eşiği (MWT) ve termal geri çekilme gecikmesini (TWL) test ederek minör CCI modellerine sahip sıçanlarda 24 saat içinde ağrıdaki değişiklikleri ve tuina analjezisinin etkinliği için en uygun zaman noktasını değerlendirdi. Ayrıca, çalışma, Elisa tespiti yoluyla IL-10 ve TNF-α ekspresyon değişikliklerini değerlendirdi. Sonuçlar, tuina'nın hem ani hem de sürekli analjezik etkilere sahip olduğunu göstermektedir. CST, MWT, TWL'nin üç farklı yaralanma duyarlılık eşiği ve IL-10 ve TNF-α'in iki sitokinleri için, müdahaleden sonraki 24 saat içinde tuina'nın analjezik etkinliği farklı zaman noktalarında önemli ölçüde farklıdır.

Giriş

Periferik nöropatik ağrı (pNP), periferik somatosensoriyel sinir sisteminin bir lezyonu veya hastalığının neden olduğu, bir dizi semptom ve belirti olarak ortaya çıkan ve ana semptomlardan biri olarak hiperaljezi olan ağrıyı ifade eder 1,2. Hiperaljezi, iğne batması, soğuk ve sıcak3 dahil olmak üzere zararlı bir uyaranın neden olduğu yüksek bir ağrı deneyimidir. Nöropatik ağrıda prevalans oranı %6.9-%10 olan pNP'nin en sık görüleni olduğunu gösteren geniş epidemiyolojik çalışmalar yapılmıştır4. pNP, sinir yaralanması, postherpetik nevralji, ağrılı diyabetik polinöropati, multipl skleroz, felç, kanser vb. dahil olmak üzere birçok hastalıktan kaynaklanabilir.5. Günümüzde, pNP'yi tedavi etmek için ana yöntem ilaç tedavisidir, ancak etki ideal değildir; Ve yan etkiler önemlidir, bu da bireyler ve toplum üzerindeki yüksek ekonomik yükün ana nedenidir6.

Tuina, geleneksel Çin tıbbının yeşil, ekonomik, güvenli ve etkili bir dış tedavi yöntemidir7. Birçok klinik çalışma, tuina'nın pNP üzerindeki analjezik etkisini kanıtlamıştır ve temel çalışmalar, tuina 8,9'un ani ve kümülatif analjezik etkilerini doğrulamıştır. Tuina'nın ana kümülatif analjezik mekanizması, enflamatuar faktörlerin seviyelerini azaltmak ve glial hücrelerin aktivasyonunu inhibe etmektir10,11. Önceki araştırma, tuina'nın kümülatif analjezik etkisini doğruladı ve 20 kez tuina tedavisinden sonra siyatik sinir yaralanması olan sıçanların dorsal kök gangliyonlarında (DRG) ve spinal dorsal boynuzunda (SDH) diferansiyel olarak eksprese edilen genler (DEG'ler) buldu, esas olarak protein bağlanması, basınç tepkisi ve nöronal projeksiyonile ilgili 12. Son çalışmalarda, tuina'nın ani bir analjezik etkiye sahip olduğu ve 1 kez tuina müdahalesinin minör CCI sıçanlarının hiperaljezisini hafifletebileceği ve özellikle termal hiperaljeziyi daha etkili bir şekilde hafifletebileceği doğrulanmıştır13. Bununla birlikte, tuina'nın analjezik etkisi için en uygun zaman noktası, yaralanma hissine (soğuk, sıcak, mekanik) bağlı olarak değişebilir ve tuina analjezisinin başlama mekanizmasının araştırılmasını etkileyebilir.

Enflamatuar mediatörler ağrı reseptörlerini hassaslaştırabilir ve aktive edebilir, bu da deşarj eşiklerinin azalmasına ve ektopik deşarjlara yol açarak periferik sensitizasyona katkıda bulunur14,15. Periferik sinir yaralanmasından sonra, TNF-α, IL-10 ve IL-1β gibi enflamatuar faktörlerin sentezini teşvik edebilen, doğrudan doku enflamatuar hasarına neden olan, lokal sinir uçlarını uyaran ve ağrıya neden olan inflamatuar yanıtın başlatıcısıdır 16,17,18. Tuina, TNF-α, IL-10, IL-6 ve IL-1β 19,20,21 gibi inflamatuar faktörlerin ekspresyonunu azaltarak analjezik etkiler elde edebilir. Çalışma, klinik pNP'yi simüle etmek için minör CCI model sıçanları seçti ve soğuk duyarlılık eşiği (CST), mekanik geri çekilme eşiği (MWT), termal geri çekilme gecikmesi (TWL) ile 1 kez tuina müdahalesinden sonra soğuk, termal ve mekanik stimülasyon ağrısının davranışsal testi için farklı zaman noktaları seçti ve enzime bağlı immünosorbent testi (ELISA) ile serumda IL-10 ve TNF-α seçti, Tuina'nın analjezik etkisinin önemli olduğu zaman noktasını seçmek için, daha sonraki aşamada Tuina analjezisinin başlama mekanizmasının incelenmesi için bir temel sağlar.

Protokol

Pekin Çin Tıbbı Üniversitesi Hayvanları Koruma ve Kullanımı Komitesi (BUCM-4-2022082605-3043) bu çalışmada kullanılan tüm prosedürleri onayladı.

1. Hayvanlar ve çalışma tasarımı

  1. 200 ila 10 g ağırlığında, 8 haftalık 49 erkek Sprague-Dawley ± SDN sıçan elde edin.
  2. Rastgele bir sayı tablosu yöntemi kullanarak, sıçanları sahte bir işlem grubuna (n = 7), bir model grubuna (n = 7) ve tuina grubundan hemen sonra (n = 7), tuina grubundan 6 saat sonra (n = 7), tuina grubundan 12 saat sonra (n = 7), tuina grubundan 18 saat sonra (n = 7) ve tuina grubundan 24 saat sonra (n = 7).

2. Minör CCI için bir sıçan modelinin kurulması (Şekil 1)

NOT: Minör CCI'yi modelleme yöntemi önceki çalışmalarda açıklandığı gibiydi 22,23,24.

  1. 7 gün boyunca SD sıçanının uyarlanabilir beslenmesine izin verin. Modellemeden önce farenin 2-3 saat hızlı kalmasına izin verin.
  2. Fareyi bir anestezi makinesi ile anestezi için% 3-5 izofluran ile doldurulmuş bir kutuya yerleştirin. Anesteziden sonra, kurumayı önlemek için her iki göze de oftalmik bir merhem sürün.
  3. Fareyi bir masaya yüzüstü pozisyonda sabitleyin, sağ kalça eklemi bölgesinin kürkünü tıraş edin ve bölgeyi iyotla dezenfekte edin (Şekil 1B).
  4. Cerrahi anestezi düzlemini bir ayak parmağı tutamıyla onaylayın. Siyatik sinirin yürüme yönü boyunca yaklaşık 0,5-1 cm'lik bir cilt kesisi yapın, kas tabakasını künt olarak ayırın ve piriformis kasının alt kenarını tamamen ortaya çıkarın (Şekil 1C).
  5. Ekstranöral damarların kan dolaşımını kesintiye uğratmadan sinirin etrafına emilebilir bir krom bağırsak sütürünü (4-0 tipi) gevşek bir şekilde bağlayın. Sahte grup sıçanların siyatik sinirini ligasyon olmadan 3 dakika boyunca açığa çıkarın (Şekil 1A, D, E).
  6. Siyatik siniri sıfırlamaya yardımcı olmak için 1 damla% 0.9 sodyum klorür çözeltisi uygulamak için iğnesiz bir şırınga kullanın. Katman tabaka dikin, uygun miktarda Amoksisilin tozu gibi antienflamatuar ilaç verin, kas tabakasını 1 dikişle dikin ve cildi 2 dikişle dikin (Şekil 1F).
    NOT: Adım 2.3'ten adım 2.6'ya kadar, anesteziyi sürdürmek için sıçanların ağızlarına ve burunlarına akan %2 -% 3 izofluranı koruyun.
  7. Fareyi sıcak tutun ve uyanmasını bekleyin. Fareleri üreme odasına geri koyun.

3. Akıllı tuina manipülasyon simülatörü müdahalesi (Şekil 2)

NOT: Tedavi, model kurulduktan sonraki 7. günde başladı .

  1. Cihaz parametrelerini bilgisayar çalıştırma arayüzünde 4 N'luk bir stimülasyon kuvvetine, 60 kez/dk'lık bir stimülasyon frekansına ve 36 °C'lik bir sıcaklığa ayarlayın. Sıçanı sıçan fiksatörüne yerleştirin ve arka bacak akupunktur noktalarının yerini ortaya çıkarın (Şekil 2A, kendi geliştirdiği makine, patent No. ZL 2023 20511277.5)25.
  2. Nokta basma, koparma ve yoğurma yöntemlerini gerçekleştirmek için aleti etkinleştirin (Tablo 1). Tuina grubunun sıçanın model tarafındaki Yinmen (BL37), Chengshan (BL57) ve Yanglingquan (GB34) noktalarındaki (Tablo 2) sırayla bilgisayar ekranında görüntülenen Nokta Basma, Koparma ve Yoğurma üzerine tıklayın (Şekil 2B, C)26.
    1. Tuina grubu için, 1 gün boyunca günde bir kez, 4 N'luk bir kuvvetle, 60 kez / dak sıklıkta ve yöntem başına nokta başına toplam 9 dakika ile bir müdahale gerçekleştirin.
    2. Sahte ve model gruplarını, tuina grubuyla aynı sayıda olacak şekilde 9 dakika boyunca kısıtlayın.

4. Davranışsal ölçüm

NOT: Girişimden sonra, eşik soğuk duyarlılık eşiği (CST), mekanik çekilme eşiği (MWT) ve termal geri çekilme gecikmesi (TWL) sırasıyla 5 tuina alt grubunda, model grubunda ve sahte operasyon grubunda test edildi. Model ve sahte gruplar için test süresi, tuina grubu için olanla aynıdır (yani, 24 saat).

  1. Soğuğa duyarlılık eşiği (CST)
    1. Fareyi, yüzey sıcaklığı 4 ± 1 °C olan akıllı bir soğuk sıcak plaka ağrı dedektörüne yerleştirin ( BAŞLAT > SET'e tıklayın) ve şeffaf plastik bir kafesle örtün.
    2. Şeffaf plastik kafese alışana kadar farelerin keşif aktivitelerini 5 dakika boyunca gözlemleyin.
    3. Önümüzdeki 5 dakika içinde arka uzuvun ameliyat tarafındaki ayak kaldırma sayısını gözlemleyin ve kaydedin.
      NOT: Sıçanın aktivitesindeki veya duruşundaki değişikliklerin neden olduğu ayak kaldırma sayısı dahil değildir.
  2. Mekanik çekilme eşiği (MWT)
    1. Fareyi, testten önce 15-30 dakika boyunca bir test kutusuna ızgara (0,5 cm × 0,5 cm) olarak alt yüzeye yerleştirin.
    2. Ağrı probunu (EVF 5 tipi) sıçanın sağ arka plantar bölgesinin merkezine hareket ettirin, basıncı elle doğrusal olarak artırın ve sıçan ayaklarını kaldırıp yaladığında cihaz ekranında görüntülenen eşiği kaydedin. Her biri 10 dakikalık bir ölçüm aralığı ile sürekli olarak 5 kez ölçün.
  3. Termal çekme gecikmesi (TWL)
    1. Fareyi cam alt yüzeyi olan bir test kutusuna yerleştirin ve teste başlamadan önce 15 dakika boyunca uyum sağlamasına izin verin.
      NOT: Termal kasılma ayak refleksinin latent periyodu, bir termal stimülasyon ağrı aleti (PL200 tipi) kullanılarak tespit edildi.
    2. Parametreleri ayarlayın: maksimum test süresi 30 sn ve yoğunluk% 50'dir. BAŞLAT ve yön düğmelerine tıklayın.
    3. Kızılötesi probu sıçanın sağ arka plantar bölgesinin merkezine getirin ve algılamayı başlatın.
    4. Sıçan ayaklarını kaldırıp yaladığında ayak geri çekme refleksinin gecikmesini kaydedin. Gecikmeyi, her ölçüm arasında 10 dakikalık bir aralıkla sürekli olarak 5 kez ölçün.

5. ELISA

  1. Davranışsal testlerden sonra intraperitoneal enjeksiyon anestezisi için sıçanı 35 mL / 100 g% 4 klor hidrat dozu ile uyuşturun. İç organlarını ortaya çıkarmak için cildi ve kasları farenin karnının ortası boyunca uzunlamasına kesin.
  2. Saf ayırma için bir balast ve iğne tutucu kullanın, abdominal aortu tanımlayın, taze kan alın ve test için bir numune saklayın. Serumu ayırmak için bir ayırma tüpü kullanın. Serum örneğini hemen tespit etmek için alın veya ayrı olarak paketleyin ve -80 ° C'de buzdolabında saklayın.
    NOT: Ayırmadan önce, kan örneğinin 30 dakika boyunca aglütine olmasına izin verin.
  3. Test işlemi için sıçanların serumunu hazırlayın ve en az 30 dakika oda sıcaklığında (RT) saklayın.
  4. Test edilecek numune için boş kuyular ve standart numune kuyuları kurun. Enzim bağlantılı plakaya toplam 50 μL standart numune ekleyin. Önce 40 μL seyreltici ekleyin ve ardından test edilecek numune kuyucuğuna 10 μL numune ekleyin.
    NOT: Numune eklerken, bunları enzim etiketli kuyunun dibine eklemek, mümkün olduğunca kuyu duvarına temas etmemelerini sağlamak ve hafifçe çalkalayarak iyice karıştırmak gerekir. Boş kuyu, numuneler veya enzim etiketli reaktifler içermez ve diğer adımlar aynıdır. Numunenin son seyreltilmesi 5 katıdır.
  5. Plakayı bir sızdırmazlık filmi ile kapattıktan sonra, 30 dakika boyunca 37 ° C'lik bir inkübatöre yerleştirin.
  6. Konsantre yıkama solüsyonunun 30 katını damıtılmış suyla seyreltin ve bir kenara koyun.
  7. Sızdırmazlık filmini çıkarın, sıvıyı kuyudan dökün ve kurulayın. Her kuyuyu yıkama sıvısı ile doldurun, 30 saniye bekletin ve sonra dökün. Bu adımı 5 kez tekrarlayın ve son olarak sallayarak kurulayın.
  8. Yaban turpu peroksidaz etiketli avidin (oyuk başına 100 μL) ekleyin.
  9. Her oyuğa 50 μL renk geliştirici A ekleyin, ardından 50 μL renk geliştirici B ekleyin. Hafifçe çalkalayın ve karıştırın ve karanlıkta 10 dakika boyunca 37 ° C'lik bir ortama koyun.
  10. Reaksiyonu sonlandırmak için oyuk başına 50 μL durdurma çözeltisi ekleyin.
    NOT: Bu noktada mavi renk sarıya dönecektir.
  11. Boş kuyuları sıfırlayın ve her bir kuyucuğun optik yoğunluğunu (OD değeri) 450 nm dalga boyunda sırayla ölçün.

Sonuçlar

CST: Model grubu ile karşılaştırıldığında, tuinadan 6 saat sonra grupta ayak kaldırma sayısı anlamlı olarak azaldı ve fark istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.05). Sham grubu ile karşılaştırıldığında, model grubundaki ayak kaldırma sayısı anlamlı olarak artmış ve fark istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.05) (Tablo 3, Şekil 3).

MWT: Model grubu ile karşılaştırıldığında, tuina'nın her bir alt grubunun ÖÇT'si, tuina'dan sonraki 18 saat dışında model grubununkinden anlamlı derecede yüksekti ve tuina'dan sonraki 24 saatin ÖGT'si, istatistiksel olarak anlamlı bir farkla model grubununkinden anlamlı derecede yüksekti (P < 0.05). Sahte operasyon grubu ile karşılaştırıldığında, model grubundaki DYT, istatistiksel olarak anlamlı bir farkla (P < 0.01) anlamlı derecede düşüktü (Tablo 3, Şekil 4).

TWL:
Model grubu ile karşılaştırıldığında, tuinadan hemen sonra, tuinadan 6 saat sonra ve tuinadan 18 saat sonra, istatistiksel olarak anlamlı bir farkla anlamlı bir artış vardı. Sahte operasyon grubu ile karşılaştırıldığında, model grubu istatistiksel olarak anlamlı bir farkla (P < 0.01) önemli ölçüde azalmıştır (Tablo 3, Şekil 5)

ELISA (ELISA)
IL-10: Model grubu ile karşılaştırıldığında, tuinadan 6 saat ve 24 saat sonra istatistiksel olarak anlamlı bir farkla anlamlı bir azalma olmuştur (P < 0.01) (Tablo 4, Şekil 6).

TNF-α: Model grubu ile karşılaştırıldığında, tuina'dan hemen sonra (**P < 0.01), tuina'dan 6 saat sonra (**P < 0.01) ve tuina'dan 24 saat sonra (**P < 0.05) istatistiksel olarak anlamlı bir fark ile anlamlı bir azalma olmuştur (Tablo 4, Şekil 6)

figure-results-1
Şekil 1: Minör CCI'nin bir sıçan modelinin oluşturulması. (A) Kromik bağırsak sütürü (4-0). (B) Cilt hazırlığı. (C) Kesi. (D) Siyatik sinirin açığa çıkması. (E) Sinir etrafında emilebilir kromik bağırsak sütürü (4-0 tipi). (F) Kas tabakasının ve cildin dikilmesi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-2
Resim 2: Akıllı tuina manipülasyon simülatörü tedavisi. (A) Akıllı Tuina Manipülasyon Simülatörü (patent No. ZL ZL 2023 20511277.5). (B) Yinmen (BL37), Chengshan (BL57) ve Yanglingquan'ın (GB34) pozisyonları. (c) Uyarıcı Yinmen (BL37). Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-3
Şekil 3: Her gruptaki sıçanların soğuğa duyarlılık eşiğinin (CST) sonuçları. *P < 0.05, model grubuyla karşılaştırıldığında, #P <0.05, sahte grupla karşılaştırıldığında. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-4
Şekil 4: Her gruptaki sıçanların mekanik çekilme eşiğinin (MWT) sonuçları. *P <0.05, model grubuyla karşılaştırıldığında, #P < 0.05, sahte grupla karşılaştırıldığında. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-5
Şekil 5: Her gruptaki sıçanların termal çekilme gecikmesinin (TWL) sonuçları. *P < 0.05, **P < 0.01, model grubuyla karşılaştırıldığında; #P <0.05, ##P < 0.01, sahte grupla karşılaştırıldığında. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-6
Şekil 6: Her gruptaki sıçanların serum IL-10 ve TNF-α düzeylerindeki değişiklikler (Ortalama ± SD, n = 7), "*P<0.05, **P<0.01, model grubu ile karşılaştırıldığında. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Üç YöntemYöntemlerSınıflandırmalarIşlev
Nokta basmaIsınma ve tıkanıklık açmaMeridyenlerin ısınması ve teminatların blokajının kaldırılması
KoparmaRahatlamaSinir gövdesine etki etmek ve uzuvlarda uyuşukluk veya ağrıyı tedavi etmek
YoğurmaRahatlamaKas spazmlarını hafifletmek

Tablo 1: Üç stimülasyon yöntemi.

Üç Akupunktur NoktasıAkupunktur noktalarıMeridyenSinirKas
Yinmen (BL37)Ayak Mesane Meridyeni-TaiyangSiyatik sinir gövdesiPazı femoris kası
Çengşan (BL57)Tibial sinirGastroknemius kası
Yanglingquan (GB34)Ayak safra kesesi meridyeni-ShaoyangOrtak peroneal sinirÖn tibial kaslar

Tablo 2: Bu çalışmada kullanılan üç akupunktur noktası.

SahteModelTuina Belediyesi
0 saat6 saat12 saat18 saat24 saat
CST12.8 ± 2.3825 ± 5.15#19,6 ± 10,9913,2 ± 2,49*16,4 ± 8,4117 ± 5.5719 ± 8.34
MWT (Nükleer Enerji Yatırım69,47 ± 10,3540.63 ± 9.65##44,19 ± 10,7246,58 ± 9,4742,83 ± 11,4140.1 ± 5.5948,33 ± 8,7*
TWL (İngilizce)12.06 ± 3.458.16 ± 2.09##12.09 ± 3.86**10,07 ± 2,7*9,44 ± 2,5210,42 ± 2,49**9,72 ± 2,29

Tablo 3: Her gruptaki sıçanların CST, MWT ve TWL sonuçları (Ortalama ± SD, n = 7). *P<0.05, **P<0.01, model grubuyla karşılaştırıldığında; #P<0.05, ##P<0.01, sahte grupla karşılaştırıldığında.

SahteModelTuina Belediyesi
0 saat6 saat12 saat18 saat24 saat
IL-1055,10 ± 1,37**70,27 ± 6,2267,28 ± 1,2861,41 ± 3,36**67,98 ± 1,8569,03 ± 6,2957,16 ± 1,30**
TNF-α311,52 ± 13,45**339,33 ± 24,50309,47 ± 8,37**309,99 ± 14,95**334,62 ± 21,85319,22 ± 10,38316,24 ± 8,72*

Tablo 4: Her gruptaki sıçanların serum IL-10 ve TNF-α düzeylerindeki değişiklikler (Ortalama ± SD, n = 7, pg / mL). *P < 0,05, **P < 0,01, grup modeliyle karşılaştırıldığında (*P < 0,05, **P < 0,01.)

Tartışma

Çalışma, klinik siyatik sinir hasarının neden olduğu pNP'yi simüle etmek için minör CCI modelini kullandı. Minör CCI modeli, ligatürün kademeli olarak şişmesinin eşlik ettiği, siyatik sinir içinde ödem ile sonuçlanan ve 3-5 gün içinde stabil kronik ağrı oluşturan ligasyon yoluyla sinir gövdesinin sürekli, kronik kompresyonunu ve kısıtlanmasını içerir27,28. Ön çalışmada araştırma grubu, modellemeden sonraki 7. günde minör CCI model grubunun klasik model grubuna göre daha kararlı olduğunu ve bu durumun kısa süreli deneysel tasarım için daha uygun olduğunu bulmuştur. Bu nedenle, tuina müdahalesi için bu zaman noktasını seçtik.

Önceki araştırmalar, akıllı tuina manipülasyon simülatörünün (hayvan), "Üç Yöntem ve Üç Akupunktur Noktası" kullanılarak 20 seans tuina tedavisinden sonra siyatik sinir hasarı olan sıçanlarda ağrıyı etkili bir şekilde hafifletebildiğini doğrulamıştır29,30,31. Ayrıca, araştırma grubu, tuina'nın bir kez minör CCI sıçanlarının, özellikle de termal hiperaljezi13'ün ağrı aşırı duyarlılık semptomlarını etkili bir şekilde hafifletebildiğini buldu. Çalışmada nokta presleme, yolma ve yoğurma yöntemleri üç tedavi yöntemi olarak benimsenmiştir. Nokta basma yöntemi, meridyenleri ısıtma ve teminatların blokajını kaldırma işlevine sahip bir ısınma ve blokaj açma tekniğidir. Yolma yöntemi, sinir gövdesine etki eden ve uzuvlardaki uyuşukluğu veya ağrıyı tedavi edebilen bir gevşeme tekniğidir. Yoğurma yöntemi, kas spazmlarını hafifletebilen, yorgunluğu ortadan kaldırabilen ve yaralı bölgedeki ağrıyı hafifletebilen bir gevşeme tekniğidir (Tablo 1). Çalışma, tedavi için üç akupunktur noktası olarak Yinmen (BL37), Chengshan (BL57) ve Yanglingquan'ı (GB34) seçer (Tablo 2). Meridyenler boyunca ve yerel olarak akupunktur ve yakıda akupunktur noktası seçimi ilkesine göre, üç akupunktur noktası Ayak-Taiyang'ın Mesane Meridyenine ve ayak-Shaoyang'ın Safra Kesesi Meridyenine aittir. Anatomik sinir lokalizasyonuna göre Yinmen (BL37) siyatik sinir ve dalları üzerinde, Chengshan (BL57) tibial sinir üzerinde ve Yanglingquan (GB34) ortak peroneal sinir üzerinde yer alır. Anatomik kas yerleşimine göre, üç akupunktur noktası biseps femoris kası, gastroknemius kası ve anterior tibial kasların etrafında yer alır (Tablo 2). Bu nedenle, üç yöntem ve üç akupunktur noktasının müdahalesi ile akupunktur noktası-sinir-kasın ilgili alanları uyarılabilir. Bu çalışmada, stabil kronik ağrı oluşturulduktan ve tuina ile bir müdahale yapıldıktan sonra, ağrıda davranış değişiklikleri tespit edildi, bu da tuina'nın ani bir analjezik etkiye sahip olduğunu ve farklı yaralanma reseptörleri için farklı terapötik önem zaman noktalarına sahip olduğunu doğruladı ve tuina analjezi başlatma mekanizması çalışmasında bir sonraki adım için terapötik destek sağladı.

Çalışma, tuina'nın farklı yaralanma duyumları için etkinliğini araştırmak için gösterge olarak CST, MWT ve TWL'yi kullandı. pNP'de indüklenen ağrının klinik belirtileri esas olarak hiperaljezi ve allodini, yani soğuk ve sıcak stimülasyona bağlı ağrı ve mekanik dokunsal kaynaklı ağrıyı içerir4. Şu anda, bu iki ağrı hissi için klasik kantitatif davranışsal araştırma göstergeleri CST, MWT ve TWL'dir. CST testinde, soğuk plaka testi, bu deneyde kullanılan ZH-6C akıllı soğuk ve sıcak plaka ağrı test cihazı, nispeten objektiftir, çevredeki çevresel faktörlerden daha az etkilenir, sabit sıcaklığa sahiptir ve yüksek hassasiyetesahiptir 32,33. Temel araştırmalarda, Von Frey filamentleri, nöropatik ağrıyı değerlendirmek için klasik göstergelerden biri olan MWT'yi tahmin etmek için yaygın olarak kullanılır. Esas olarak, kemirgenlerde mekanik dokunsal kaynaklı ağrıyı değerlendirmek için mekanik stimülasyonun neden olduğu akupunktur ağrısına yöneliktir34,35. Hargreaves testi, kemirgenlerin termal ağrı duyarlılığına tepkisini tespit etmek ve değerlendirmek için bir termal ağrı stimülatörü kullanır ve hayvanın arka pençelerinin ısıya bağlı bir daralma reaksiyonu olup olmadığını gözlemlemek için sinir yaralanmasından sonra ağrı duyarlılığının veya termal ağrı yanıtının iyileşmesini değerlendirmek için kullanılır. Cihaz, hayvanın arka pençelerinin36 hareketini algılar ve kontrolör, TWL olarak bilinen kızılötesi durdurma zamanlayıcısını34 otomatik olarak kapatır. Deneyler, minör CCI model sıçanların TWL'ye duyarlılığının optimal olduğunu göstermektedir38. Bu nedenle, bu sefer minör CCI model sıçanların davranışı için nicel araştırma yöntemi, tespit etmek için soğuk plaka deneyi, elektronik mekanik iğneleme aparatı ve termal iğneleme aparatı kullanmaktır.

Erken tuina müdahalesinden sonra farklı nosiseptif duyumlar üzerindeki iyileştirici etkilerin önemli zaman noktaları farklıdır. Şu anda, tuina analjezisinin klinik etkinliği ve mekanizması üzerine ön araştırmalar yapılmıştır. Önceki araştırmalarımız ağırlıklı olarak belirli bir tuina sayısından sonra analjezik mekanizmaya odaklanmıştır. Son 2 yılda, tuina analjezisinin nasıl başladığını araştırmak için tuina'nın başlangıç aşamasında analjezik mekanizma üzerine araştırmalar yapılmıştır. Bu çalışmada, minör CCI model sıçanlara bir kez müdahale etmek için "üç yöntem ve üç akupunktur noktası" kullanıldı. Daha sonra, minör CCI model sıçanların sıcaklık ve mekanik dokunma hissindeki değişiklikleri gözlemlemek için CST, MWT ve TWL tespiti için 5 zaman noktası seçildi. Bu çalışmada, davranışsal testlerden sonra sıçanların serum IL-10 ve TNF-α seviyelerindeki değişiklikleri tespit etmek için ELISA kullanılmıştır. Sonuçlar, tuina ile yapılan bir müdahaleden sonra, model grubuyla karşılaştırıldığında, her ikisinin de hemen iyileştiğini gösterdi. Bu, tuina'nın hemen analjezik bir etkiye sahip olduğu önceki araştırma sonuçlarını bir kez daha doğruladı. Bununla birlikte, farklı ağrı hissi türleri için, analjezik etkinin önemli olduğu zaman noktaları aynı değildir. CST açısından, tuinadan 6 saat sonra istatistiksel anlamlılık vardı; DYT açısından, tuina'dan 24 saat sonra istatistiksel anlamlılık vardı; TWL açısından, tuinadan 6 saat sonra anlamlı istatistiksel anlamlılık ve tuinadan hemen ve 18 saat sonra anlamlı istatistiksel anlamlılık vardı; Serum IL-10 düzeyi açısından tuinadan 6 saat sonra ve tuinadan 24 saat sonra istatistiksel olarak anlamlı bir fark ile anlamlı bir azalma oldu. Serum TNF-α düzeyi açısından, tuinadan hemen sonra, tuinadan 6 saat sonra ve tuinadan 24 saat sonra istatistiksel olarak anlamlı bir farkla anlamlı bir azalma vardı. Tuina'nın analjezik etkisi sürdürülebilse de, soğuk stimülasyona bağlı ağrı ve mekanik dokunsal kaynaklı ağrı için etkinlik zaman noktasında önemli bir gecikme olduğunu ve hemen etkili olduğunu ve termal stimülasyona bağlı ağrı için daha önemli ve kalıcı bir etkinliğe sahip olduğunu gösterir. Laboratuvarımız, geçici reseptör potansiyeli (TRP) proteinleri ve soğuk, sıcak ve mekanik duyarlılıkla ilgili genlerin yanı sıra TGF-β ve IL-6 gibi diğer enflamatuar faktörlerle ilgili protein ve genlerdeki değişiklikleri daha fazla araştırıyor.

Özetle, bu çalışmanın sonuçlarına dayanarak, tuina'dan etkilenen proteinlerin veya yolakların işlev görebileceği zaman noktalarının farklı olabileceği ve bunun da önemli analjezik etkiler için farklı zaman noktaları ile sonuçlanabileceği sonucuna varılabilir. Tuina analjezisinin başlama mekanizmasını araştırmak ve tuina'nın klinik etkinlik araştırmaları için bir temel sağlamak için daha derinlemesine araştırmalara ihtiyaç vardır.

Açıklamalar

Yazarlar tarafından finansal veya başka türlü hiçbir çıkar çatışması beyan edilmez.

Teşekkürler

Yazarlar, bu makalenin araştırılması, yazılması ve yayınlanması için Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı'ndan (No. 82074573 ve 82274675) ve Pekin Doğa Bilimleri Vakfı'ndan (No. 7232278) fon almışlardır.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Anestezi makinesiRuiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, ÇinR500Hayvan solunum anestezisi ile ilgili ekipmanlar
Kromik bağırsak sütürüShandong Boda Medical Products Co., Ltd., ÇinBD210903Esas olarak sağlıklı genç keçilerin bağırsaklarından işlenen kollajen proteininden yapılan emilebilir bir cerrahi sütür
Elektronik Von Frey aletiBioseb, ABDBIO-EVF5Mekanik çekilme eşiğini tespit etmek için bir alet
Akıllı soğuk ve sıcak plaka ağrı dedektörüAnhui Zhenghua Biyolojik Alet Equipment Co, Ltd, Çin.ZH-6CSoğuk hassasiyet eşiğini tespit etmek için bir alet
IsofluraneRuiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, ÇinR510-22-10Anestezik
Çok fonksiyonlu tam dalga boylu mikroplaka okuyucuMoleküler Cihazlar (Şangay) Co., Ltd.SpectraMax M2Optik yoğunluğu (OD) tespit etmek için bir cihazTermal
analjezi cihazıChengdu Techman Software Co., Ltd., ÇinPL-200Termal çekilme gecikmesini tespit etmek için bir alet

Kaynaklar

  1. IASP taxonomy. ISAP. , Available from: https://www.iasp-pain.org/resources/terminology/#.2022 (2022).
  2. Baron, R., Binder, A., Wasner, G. Neuropathic pain: diagnosis, pathophysiological mechanisms, and treatment. Lancet Neurol. 9 (8), 807-819 (2010).
  3. Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002(2017).
  4. Liu, Z., et al. A review on the mechanism of tuina promoting the recovery of peripheral nerve injury. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 6652099(2021).
  5. Scholz, J., et al. The IASP classification of chronic pain for ICD-11: chronic neuropathic pain. Pain. 160 (1), 53-59 (2019).
  6. Finnerup, N. B., et al. Pharmacotherapy for neuropathic pain in adults: a systematic review and meta-analysis. Lancet Neurol. 14 (2), 162-173 (2015).
  7. Field, T. Massage therapy research review. Complement. Ther Clin Pract. 24, 19-31 (2016).
  8. Gok Metin, Z., et al. Aromatherapy massage for neuropathic pain and quality of life in diabetic patients. J Nurs Scholarsh. 49, 379-388 (2017).
  9. Izgu, N., et al. Effect of aromatherapy massage on chemotherapy-induced peripheral neuropathic pain and fatigue in patients receiving oxaliplatin: An open label quasi-randomized controlled pilot study. Cancer Nurs. 42, 139-147 (2019).
  10. Li, Y., et al. Mild mechanic stimulate on acupoints regulation of CGRP-positive cells and microglia morphology in spinal cord of sciatic nerve injured rats. Front Integr Neurosci. 13, 58(2019).
  11. Liu, Z. F., et al. Tuina for peripherally-induced neuropathic pain: A review of analgesic mechanism. Front Neurosci. 16, 1096734(2022).
  12. Lv, T., et al. Using RNA-seq to explore the repair mechanism of the three methods and three-acupoint technique on DRGs in sciatic nerve injured rats. Pain Res Manag. 2020, 7531409(2020).
  13. Xing, F., et al. MZF1 in the dorsal root ganglia contributes to the development and maintenance of neuropathic pain via regulation of TRPV1. Neural Plast. 2019, 2782417(2019).
  14. Cohen, S. P., Mao, J. Neuropathic pain: mechanisms and their clinical implications. BMJ. 348, 7656(2014).
  15. Tao, Y., et al. Effect of Bo'fa method on the expression of IL-1β in peripheral serum and 5-HT2A in spinal cord of CCI model rats. Global Traditional Chinese Medicine. 10, 905-909 (2017).
  16. Yang, J., et al. Study on curative effect of Duhuo Jisheng decoction combined with Tuina in patients with lumbar disc herniation and changes of TXB2, TNF-α and IL-1β. Chin Arch Tradit Chin Med. 38, 44-46 (2020).
  17. Yao, C., et al. Effects of acupressure at 'Shenshu' (BL 23)on lumbar intervertebral disc degeneration and related pain in aging rats. Chin J Tradit Chin Med Pharm. 37, 4360-4365 (2022).
  18. Wang, H., et al. Exploring the mechanism of immediate analgesic effect of 1-time tuina intervention in minor chronic constriction injury rats using RNA-seq. Front Neurosci. 16, 1007432(2022).
  19. Yao, C., et al. Exploring the mechanism of tuina-induced central analgesia in rats with lumbar disc herniation based on the p38MAPK signaling pathway. Chin J Tradit Chin Med Pharm. 38 (07), 3348-3352 (2023).
  20. Li, P. Study on the effects of modified Chuanqianghuo Decoction combined with tuina and physiotherapy on shoulder joint function and inflammation in patients with shoulder joint pain. New Chinese Medicine. 54 (13), 93-97 (2022).
  21. Ding, C., et al. Clinical efficacy of acupuncture and moxibustion, tuina and external application of traditional Chinese medicine on lumbar disc herniation and serum TXB2, IL-1β, Comparison of IL-10 levels. Advances in Modern Biomedicine. 21 (14), 2730-2734 (2021).
  22. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33, 87-107 (1988).
  23. Grace, P. M., et al. A novel animal model of graded neuropathic pain: Utility to investigate mechanisms of population heterogeneity. J Neurosci Methods. 193, 47-53 (2010).
  24. Wang, H., et al. Comparison of the characteristics of minor and classic CCI models. J Chin J Comp Med. 32 (10), 1-7 (2022).
  25. Zhang, Y., et al. An intelligent massage and tuina technique simulator. , Beijing. CN219398169U,19393681 (2023).
  26. Jia, D. Effects of three methods and three points stimulation on sensory function in rats with sciatic nerve injury. , Available from: https://kns.cnki.net (2017).
  27. Grace, P. M., et al. Adoptive transfer of peripheral immune cells potentiates allodynia in a graded chronic constriction injury model of neuropathic pain. Brain Behav Immun. 25 (3), 503-513 (2011).
  28. MacDonald, D. I., et al. Silent cold-sensing neurons contribute to cold allodynia in neuropathic. Brain. 144 (6), 1711-1726 (2021).
  29. Pan, F., et al. Chinese tuina downregulates the elevated levels of tissue plasminogen activator in sciatic nerve injured Sprague-Dawley rats. Chinese J Integr Med. 23 (8), 617-624 (2017).
  30. Lv, T., et al. An investigation into the rehabilitative mechanism of tuina in the treatment of sciatic nerve injury. Evid Based Complement Alternat Med. 2020, 5859298(2020).
  31. Lv, T., et al. Applying RNA sequencing technology to explore repair mechanism of Tuina on gastrocnemius muscle in sciatic nerve injury rats. Chin Med J. 135 (19), 2378-2379 (2022).
  32. Ruan, Y., et al. An effective and concise device for detecting cold allodynia in mice. Sci Rep. 8 (1), 14002(2018).
  33. Kim, S. O., Kim, H. J. Berberine ameliorates cold and mechanical allodynia in a rat model of diabetic neuropathy. J Med Food. 16 (6), 511-517 (2013).
  34. Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Front Mol Neurosci. 10, 284(2017).
  35. Ruscheweyh, R., et al. Long-term potentiation in spinal nociceptive pathways as a novel target for pain therapy. Mol Pain. 7, 20(2011).
  36. Hargreaves, K., et al. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32 (1), 77-88 (1988).
  37. Cheah, M., et al. Assesment of thermal pain sensation in rats and mice using the hargreaves test. Bio Protoc. 7 (16), 2506(2017).
  38. Challa, S. R. Surgical animal models of neuropathic pain: pros and cons. Int J Neurosci. 125 (3), 170-174 (2015).

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Tuina AnaljezisiN ropatik A rKronik S k t rma YaralanmasA r E ikleriSo uk Duyarl l k E i iMekanik Geri ekilme E i iTermal Geri ekilme LatansSitokin EkspresyonuSiyatik Sinir YaralanmasS an A r Modeli
Tek Seferlik Tuina Müdahalesinden Sonra 24 Saat İçinde Sinir Yaralanması Olan Sıçanlarda Ağrı Değişikliklerinin Özellikleri
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.