Seçici Spinal Manipülasyonlar Kullanarak Bebek Serebral Palsili Sıçanların Gelişimini ve Büyümesini Artırma

Özet

Bu çalışma, seçici spinal manipülasyonun serebral palsili bebek sıçanların büyümesi ve gelişimi üzerindeki etkisini göstermekte ve spesifik prosedürü ve standardize protokolü vurgulamaktadır. Protokolü değerlendirmek için vücut ağırlığı ölçümü, Rotarod testi, Ayak hatası skoru, diğer davranış testleri ve büyüme hormonu tespiti yapıldı.

Özet

Serebral palsi (SP) prevalansı yüksek, özürlülük oranı yüksek ve tedavisi zor olan dirençli bir pediatrik hastalıktır. SP için şu anda çeşitli tedaviler kullanılmaktadır. Tedavi ilaç ve ilaç dışı tedaviyi içerir. Geleneksel Çin tıbbı eksternal terapi, ilaç dışı tedavide çok belirgin bir tedavi yöntemidir. Geleneksel Çin tıbbının dış terapilerinden biri olan masaj, serebral palsi tedavisinde kullanılır ve iyi bir etkinliğe, küçük yan etkilere ve güçlü çalışabilirliğe sahiptir. TCM dış tedavisinin bir parçası olarak, seçici spinal manipülasyon, serebral palsili bebek sıçanların büyümesini ve gelişmesini etkili bir şekilde teşvik edebilir. Ameliyat esas olarak dört aşamaya ayrıldı: ilk olarak, omurgaya ve omurganın her iki tarafına 1 dakika boyunca sürtünme yöntemi uygulandı. Bastırma ve yoğurma yöntemi 5 dk boyunca omurgaya, 5 dk boyunca omurganın her iki yanındaki kaslara uygulandı. İkinci olarak, omurgadaki hassas lokal akupunktur noktalarının 2 dakika süreyle bastırılması ve yoğrulması yapıldı. Üçüncü olarak, etkilenen uzuv 1 dakika boyunca büküm yöntemi ile tedavi edildi. Dördüncüsü, ovma yöntemi 1 dakika boyunca alından beynin arkasına kadar bir orta hatta uygulandı. Bu çalışma, serebral palsili bebek sıçanları tedavi etmek için seçici spinal manipülasyon kullanmayı amaçladı. Serebral palsili bebek sıçanların ağırlığı, Rotarod testi, Ayak hatası skoru ve büyüme hormonu, selektif spinal manipülasyonun serebral palsili bebek sıçanların büyüme ve gelişimi üzerindeki etkisini anlamak için tespit edildi. Sonuçlar, kilo alımını teşvik edebileceğini, denge yeteneğini ve motor fonksiyonu geliştirebileceğini, bebek serebral palsili sıçanların büyümesini ve gelişmesini teşvik edebileceğini, büyüme hormonu salgılanmasını teşvik edebileceğini ve sırtın hassas kısımlarının sıcaklığını artırabileceğini gösterdi.

Giriş

Serebral Palsi (SP), fetüste veya bebeklik döneminde beynin ilerleyici olmayan hasarının neden olduğu, anormal motor ve postüral gelişim¹, yavaş kilo alımı ^2,3,4 dahil gelişimsel bozukluklar ve motor disfonksiyon ile karakterize bir grup bozukluktur. Çin'de serebral palsi insidansı %2,48 ve prevalansı sırasıyla ‰2,46 (1-6 yaş)^5'tir. Yabancı çalışmalar %2,4-%3,6 arasında bir prevalans ^{bildirmiştir6}. Serebral palsi, denge ve hareket bozukluklarının günlük yaşam aktivitelerini önemli ölçüde etkilediği çocuklarda önemli bir fiziksel yaralanma ve sakatlık nedenidir¹. Serebral palsiye erken doğum, enfeksiyon, genetik, yenidoğan iskemisi ve hipoksisi, yenidoğan sarılığı ve diğer karmaşık ve çeşitli patojenik faktörlerden kaynaklanabilir⁷. Serebral palsi tedavisinin amacı fiziksel fonksiyonu ve yaşam kalitesini iyileştirmektir ⁸. Şu anda, serebral palsi için tedavi yöntemleri arasında derin beyin stimülasyonu⁹, robot yardımlı yürüyüş eğitimi¹⁰, el bileği ve ayak bileği akupunkturu¹¹ ve masaj ile birlikte meridyen akupunkturu¹² bulunmaktadır.

Geleneksel Çin tıbbı (TCM), CP^13,14 için etkili bir tedavi olarak giderek daha fazla kullanılmaktadır. Masaj, bunun bir parçası olarak, aynı zamanda belirli bir rol oynar. Örneğin, seçici spinal manipülasyon, nöral gelişimi düzenlemek ve öğrenme ve hafıza fonksiyonunu iyileştirmek için DNA hidroksimetilasyon durumunu düzenleyebilir¹⁵. Serebral palsili bebek sıçanların tedavisinde, seçici spinal manipülasyon, inflamatuar sitokinler TNF-α ve IL-10 gen promotör bölgesi^16'nın metilasyon seviyesini düzenleyerek korteks ve hipokampusun inflamatuar homeostazını iyileştirebilir ve serebral palsili bebek sıçanın denge yeteneğinde olumlu bir terapötik rol oynayabilir¹⁶. Seçici spinal manipülasyon, serebral palsili bebek sıçanların bilişsel işlevini iyileştirebilir¹⁷. Serebral palsili bebek sıçanların tedavisinde selektif spinal manipülasyon kullanılmış ve büyüme ve gelişmeleri üzerinde de terapötik etkileri olduğu görülmüştür¹⁸.

Bu çalışmanın amacı, selektif spinal manipülasyonun serebral palsili bebek sıçanların vücut ağırlığının ölçülmesi, Rotarod testi¹⁹, Ayak hatası skoru^20,21 ve diğer davranış testleri ile büyüme hormonunun saptanması üzerine etkisini göstermek ve ilgili personel için araştırma fikirleri sunmaktır.

Protokol

Bu çalışma, Yunnan Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Deney Hayvanları Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır. Hayvanlar üzerinde yapılan tüm deneysel işlemler, deney hayvanı indirgeme, optimizasyon ve değiştirme (No. R-06202018) 3R ilkesini izledi. Bu deneyde, ortalama vücut ağırlığı 250-300 g olan Spesifik patojen içermeyen (SPF) dereceli sağlıklı Sprague Dawley (SD) sıçanları (14 erkek ve 7 dişi) kullanıldı. Sıçanlar, Yunnan Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi'nin SPF hayvan odasında yetiştirildi, Sertifika numarası: SYXK(Yunnan)K2022-0004. Tüm sıçanlar, 22-26 ° C oda sıcaklığında ve% 40 -% 50 bağıl nemde doğal ışık kontrollü bir ortam ile 12 saatlik bir aydınlık / karanlık döngüsü altında barındırıldı. 1 haftalık adaptif beslenmeden sonra, erkek / kadın oranı 1: 2'de tutuldu. 1 hafta sonra gebe fareler tek bir kafese konuldu, normal şekilde beslendi, serbestçe yiyip içti. Doğal doğumdan sonra, gebe sıçanlardan doğan sağlıklı bebek sıçanlar seçildi. Bebek sıçanlar, seçici spinal manipülasyonun serebral palsili bebek sıçanların büyümesi ve gelişmesi üzerindeki etkisini gözlemlemek için Sham, Kontrol ve Tedavi gruplarına ayrıldı. Deney için her gruptan 6 erkek yavru seçildi. Tedavi grubu doğumdan sonraki 5^{. günden itibaren} selektif spinal manipülasyon ile tedavi edildi ve tedavi 6 gün boyunca verildi ve ardından 1 gün istirahat edildi.

1. Serebral palsi modelinin oluşturulması

1. Ameliyat için gerekli olan mikroskop, oftalmik makas, forseps, dikiş, cerrahi plaka, makas, pamuklu çubuk ve eldivenleri sterilize edin ve ameliyathaneye yerleştirin.
2. Yaşamın üçüncü gününde bir yavruyu geçici olarak annesinden ayırın, tek bir çerçeveye yerleştirin ve steril ameliyathaneye taşıyın.
3. Vücut ağırlığını ölçün. Çalışmaya vücut ağırlığı 7-9 g arasında değişen bebek sıçanları dahil edin ve vücut ağırlığına uymayanları hariç tutun. Bebek fareleri rastgele olarak Sham, Kontrol ve Tedavi gruplarına ayırın.
4. % 2'lik bir konsantrasyonda izofluran ile anesteziyi indükleyin ve küçük bir hayvan inhalasyon gazı anestezi makinesi kullanarak% 1'de tutun.
   NOT: Bu deney esas olarak seçici spinal manipülasyonun serebral palsili bebek sıçanların büyümesi ve gelişmesi üzerindeki etkilerini gözlemlemek içindir. Modelleme sürecinde anestezi genel gereksinimlere uygun olarak gerçekleştirilmiştir ve ek analjezi gözlem sonuçlarını etkileyecektir.
   1. Küçük hayvan gazı anestezikini güç kaynağına bağlayın ve indüksiyon kutusuna bağlı valfi açın.
   2. Bebek fareyi indüksiyon kutusuna koyun, konsantrasyon ayar düğmesini çevirin ve anesteziyi indüklemek için izofluran konsantrasyonunu% 2'ye ayarlayın.
   3. Bebek sıçan bilinçsiz olduğunda, onu indüksiyon kutusundan çıkarın. Ameliyat plağına yerleştirin ve anestezi makinesinin 1. kanalını kapatın.
   4. Bebek fareyi sırtüstü yatırın. Anesteziyi korumak için anestezi inhalasyon maskesini sabitleyin.
   5. Anestezi inhalasyon maskesine bağlı kanalı açın. Konsantrasyon ayar düğmesini çevirerek ve izofluran konsantrasyonunu% 1'e ayarlayarak anesteziyi koruyun.
      NOT: Anesteziden sonra, bebek sıçanların ayak parmaklarını ve kuyruğunu zorla kaldırarak ve sıkıştırarak anestezik derinliği değerlendirin. Ayak parmakları ve kuyruk kaldırıldığında ve sıkıştırıldığında yanıt alınmaması, anestezi derinliğine ulaşıldığını doğrular.
5. Bebek sıçanın boyun derisini% 75 alkol ile üç kez dezenfekte edin ve deri altı dokusunu ortaya çıkarmak için boyun derisinde uzunlamasına 1 cm'lik bir kesi yapın.
   NOT: Boyun derisinin uzunlamasına kesilmesi cilt defektine neden olmaz.
6. Sol boynun derisini diseksiyon mikroskobu altında kesin ve sternohyoid kası ve sol sternomastoid kası kör bir şekilde ayırmak için oftalmik cımbız kullanın.
   1. Sol ana karotis arteri ve vagus sinirini bulun ve sol ortak karotis arteri ve vagus sinirini ayırın.
   2. Model grubunda, sol ana karotis arteri elektrikli pıhtılaşma kalemi ile kesin. Boyun kesisini temizleyin ve dikin.
   3. Sham grubunda, sol ortak karotis arteri vagus sinirinden ayırın.
7. Ameliyattan sonra, bebek faresini 1 saat boyunca resüsitasyon için yüzüstü pozisyonda termostatik su banyosuna yerleştirin.
   NOT: Doğal iyileşmeden sonra, uzuvların ve tüm vücudun ten rengi kırmızıydı. Bebek sıçan uzuvlarını özerk bir şekilde hareket ettirebilir ve bağımsız olarak sürünebilir.
8. Kontrol ve Tedavi gruplarının resüsitasyona tabi sıçanlarını yüzüstü pozisyonda 37 ° C'de kapalı bir inkübatöre yerleştirin. Hipoksiyi indüklemek için% 5 oksijen ve% 95 azot gazı karışımı ekleyin ve fareleri 2 saat sonra çıkarın.
9. Hipoksi sürecini tamamlayan bebek fareyi hipoksi kutusundan çıkarın ve normal atmosferik oksijen içeriğine sahip bir kutuya yüzüstü pozisyonda yerleştirin. 1 saat boyunca 37 °C termostatik su banyosuna koyun. Tamamen iyileştikten sonra, bebek fareyi annenin kafesine geri aktarın.
   NOT: Doğal olarak iyileştikten sonra, uzuvların ve tüm vücudun ten rengi kırmızıydı. Bebek sıçan uzuvlarını özerk bir şekilde hareket ettirebilir ve bağımsız olarak emekleyebilir.
10. Sham grubunun bebek faresini normal atmosferik oksijen içeriğine sahip bir kutuya yerleştirin ve kutuyu 1 saat boyunca 37 ° C termostatik su banyosuna yerleştirin. Tamamen iyileştikten sonra, bebek fareyi beslemek için annenin kafesine geri koyun.
    NOT: Doğal olarak iyileştikten sonra, uzuvların ve tüm vücudun ten rengi kırmızıydı. Bebek sıçan uzuvlarını özerk bir şekilde hareket ettirebilir ve bağımsız olarak emekleyebilir. Tüm operasyon süreci, Yunnan Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi SPF hayvan odasının özel ameliyathanesinde tamamlandı. Resüsitasyon ve hipoksi sırasında, operatör, yanlış duruştan kaynaklanan ölümü önlemek için bebek fareyi her zaman gözlemler. Emziren dişi sıçanlar, Spesifik Patojen İçermeyen (SPF) üreme yemi ile beslendi ve yavrular kendi kendine beslenebildiklerinde, yavrular sütten kesildi (doğum sonrası 21. gün) ve SPF bakım yemi ile beslendi.

2. Doğrultma refleks deneyi

1. Doğumdan sonraki 4^{. günde (} modellemeden sonraki 2^{. gün),} modelin başarılı olup olmadığını doğrulamak için doğrultma refleks deneyini gerçekleştirin (Şekil 1 ve Tablo 1).
   1. Bebek farenin kuyruğunu kaldırın, sırtını yatay bir tahtaya yaslayın ve karnını ve boynunu sabitlemek için başparmak ve işaret parmağını kullanın. Sıçanın normal pozisyonuna dönüp dönmediğini kontrol edin. Doğrultma refleksinin kaybı nedeniyle sıçanın anormal pozisyondan normal pozisyona dönememesi başarılı bir model olarak kaydedilmiştir^16,22.
   2. Her bir yavru grubunun sırtüstü pozisyondan yüzüstü pozisyona geçmesi için geçen süreyi kaydedin. Başparmak ve işaret parmaklarının sırtüstü pozisyonda aynı anda serbest bırakıldığı zamanı kaydetmeye başlayın, bebek farenin yüzüstü pozisyona dönmesine izin verin ve ön ve arka pençeler yere yerleştirildiğinde kaydı durdurun. Bebek sıçan 20 saniyeden fazla normal pozisyona dönemezse, düzeltme süresini 20 saniye olarak kaydedin.

3. Operasyon öncesi hazırlık

1. Modellemeden sonra, serebral palsili bebek fareyi annesinden ayırın ve çevreye uyum sağlaması için 2 dakika boyunca 22-26 ° C sabit oda sıcaklığındaki bir ameliyathaneye getirin.
2. Avuç içini yumuşak ve yumuşak tutmak ve sıcaklığı 36-37 °C arasında tutmak için tek kullanımlık eldivenler giyin.
3. Fareyi yavaşça sol elin avucuna yerleştirin. Farenin operatörün avucunun ortamına uyum sağlayabilmesi için karanlık bir görüş alanı oluşturmak için farenin gözlerini kapatmak için 2 dakika boyunca farenin gözlerini kapatmak için sol başparmağınızı bükün. Manipülasyon için sağ işaret ve orta parmakları kullanın.
   NOT: Bebek farenin gözlerini kapatmak karanlık bir ortam yaratabilir. Bu, deney sonuçlarını etkileyen güvensiz ve belirsiz ortam nedeniyle bebek faresinin tedirgin olmasını önleyecektir.

4. Sıçanların Kontrol ve Tedavi gruplarına ayrılması

1. Modellemeden sonraki ikinci gün (P5), modeli doğrultma refleks testi ile doğrulayın ve bebek sıçanları rastgele Kontrol ve Tedavi gruplarına bölün. Tedavi grubunun bebek sıçanlarında seçici spinal manipülasyon gerçekleştirin.
2. Bebek fareyi yüzüstü pozisyona getirin. Omurganın her zaman düz bir seviyede tutulduğundan emin olun (Şekil 2A).
3. Sürtünme yöntemi ile omurgaya ve omurganın her iki tarafına 1 dakika masaj yapın ve 5 dakika boyunca omurgaya ve omurganın her iki yanındaki kaslara bastırma ve yoğurma yöntemini kullanın.
   1. Bebek fareyi rahatlatmak ve gerginliğini tamamen azaltmak için sürtünme yöntemini kullanarak her iki taraftaki omurgaya ve cilde masaj yapın. Bebek sıçan sessiz ve ajitasyon olmadan 1 dakika boyunca sürtünme sıklığının 100-120 kez / dak olduğundan emin olun.
      1. Temas yüzeyi olarak sağ işaret parmağını, orta parmağı ve yüzük parmağını kullanın ve deri altı dokusunu rahatsız etmeden servikal omurga, torasik omurga ve lomber omurganın yüzey derisi üzerinde baştan kuyruğa dairesel bir sürtünme hareketi yapın.
      2. Temas yüzeyleri olarak sağ işaret parmağı, orta parmak ve yüzük parmağı ile trapezius kası, yüzeysel gluteus kası, servikal eşkenar dörtgen kas, pektoral eşkenar dörtgen kas, latissimus dorsi kası ve dış eğik kasın cilt yüzeyinde hayvan anatomik standardına^{göre baştan kuyruğa doğru} dairesel hareket gerçekleştirin 23, deri altı dokusunu rahatsız etmeden.
   2. Omurgayı önce 5 dakika presleyerek ve yoğurarak, ardından omurganın her iki yanındaki kasları 5 dakika boyunca bastırarak ve yoğurarak tedavi edin.
      1. Yoğurma yöntemini omurgaya 5 dk boyunca 120 kez/dk sıklıkta uygulayın. Temas yüzeyi olarak sağ işaret veya orta parmakları kullanın. Baştan kuyruğa, servikal, torasik ve bel omurlarının yüzey derisi üzerinde aşağı doğru bastırma (1.77 ± 0.54 N) ile birlikte dairesel yoğurma yapın. Kuvvetin servikal omurlara, torasik omurlara, bel omurlarına ve supraspinöz bağlara ulaştığından emin olun.
      2. Bastırma ve yoğurma yöntemini omurganın her iki yanındaki kaslara 120 kez/dk frekansında 5 dk süreyle uygulayın. Temas yüzeyi olarak sağ işaret parmağını veya orta parmağı kullanın. Hayvan anatomik standardı^23'e göre, trapezius, yüzeysel gluteus, eşkenar dörtgen boyun, eşkenar dörtgen pektoralis, latissimus dorsi ve dış eğik karın kaslarının deri yüzeyini baştan kuyruğa yuvarlak bir yoğurma hareketiyle, 1.77 ± 0.54 N'lik bir kuvvetle bastırın, böylece kuvvet trapezius, yüzeysel gluteus, eşkenar dörtgen boyun, eşkenar dörtgen pektoralis, latissimus dorsi ve eksternal oblik karın kasları (Şekil 2B)²³.
4. Hassas spinal akupunktur noktası noktalarını (Ganshu, Xinshu, Pishu, Shenshu ve Feishu²⁴ gibi) 2 dakika boyunca 100-120 kez / dk frekansında bastırın ve yoğurun. Temas yüzeyi olarak sağ işaret parmağını veya orta parmağı kullanarak, serebral palsili bebek sıçanlarda lokal akupunktur noktalarının (Ganshu, Xinshu, Pishu, Shenshu ve Feishu gibi) yüzey derisi üzerinde dairesel yoğurma ve aşağı doğru bastırma (1.77 ± 0.54 N) gerçekleştirin.
   NOT: Akupunktur noktaları, Çin Akupunktur Derneği Deneysel Akupunktur Araştırma Şubesi tarafından formüle edilen "Hayvan Akupunktur Noktası Haritası"na göre seçilmiştir) (Şekil 3)²⁵.
5. Etkilenen uzuvu, 1 dakika boyunca 25 kez / dk frekansında büküm yöntemiyle lokal olarak uyarın.
   1. Sağ başparmağınız ve işaret parmağınızla, serebral palsili bebek farenin etkilenen uzvunu sıkıştırın ve iki parmağa simetrik kuvvet uygulayın. Kuvvetin yumuşak olduğundan ve hareketin hafif ve yumuşak olduğundan emin olun. Sağ ekstansör carpi radialis, ekstansör digitorum ortak, ekstansör carpi ulnaris, falanks, interfalangeal eklem, gastroknemius kası, semitendinosus kası, metatarsal kemik ve bebek sıçanın intermetatarsal eklemini ileri geri ovalayın.
6. Ovma yöntemini alnın orta hattına beynin arkasına 100-120 kez/dk frekansında 1 dk süreyle uygulayın. Temas yüzeyi olarak sağ işaret parmağını kullanın ve bebek farenin alnından arka beyninin ortasına kadar hayali bir çizgiye (yani bir Baihui, Fengfu ve Dazhui çizgisi) sürtünme yöntemini kullanın (Şekil 3).
   NOT: Masaj esas olarak cilde uygulanır. Serebral palsili bebek farenin başının cilt yüzeyinde dairesel bir harekettir. Serebral palsili bir bebek sıçanın deri altı kas hareketini sürmesine gerek yoktur.
7. İşlemin sonunda, bebek fareyi anne fare kafesine geri koymadan önce 30 dakika yalnız bırakın.
   NOT: Yaşla birlikte, bebek sıçanların kılları kalınlaşır, bu nedenle deneysel etkiyi etkilememek için masaj işlemi sırasında tüm bebek sıçan gruplarının arka kıllarını çıkarmak gerekir.

5. Lokal akupunktur noktalarının sıcaklığının tespit edilmesi

1. İşlemden önce ve sonra yerel akupunktur noktası alanının sıcaklığını tespit etmek için bir kızılötesi termal kamera kullanın.
   1. Seçici omurga masajından önce, cep telefonunun Type-C arayüzünü bir veri kablosuyla kızılötesi görüntüleme cihazının USB arayüzüne bağlayın ve Güç düğmesini açın.
   2. Yazılımın cep telefonu terminaline girmek için Analiz Et'e tıklayın, fotoğraf moduna girmek için Fotoğraf'ı seçin ve sağ alt köşedeki Resim Modunda Resim'e tıklayın.
   3. Sıcaklık çekimleri yapmak için kamerayı bebek farenin arkasındaki Dazhui, Xinshu ve Shenshu akupunktur noktalarının (Şekil 3) akupunktur noktası bölgelerine odaklayın. Görüntü yakalamayı tamamlamak için Fotoğraf'a tıklayın ve JPG formatında kaydedin .
   4. Bilgisayarı bir veri kablosuyla bağlayın ve kaydedilen görüntüyü analiz için Fotric yazılımının yüklü olduğu bir bilgisayara yükleyin.
      1. PC'de Fotric yazılımını açın, Yerel Dosyayı açın ve görüntünün konumunu bulun.
      2. Termogram çalışma alanını seçin, analiz edilecek görüntüyü seçin ve analiz arayüzüne girin.
      3. Analiz ekranında, sağdaki Termal görüntü kutusundaki resmi seçin ve Kilidi açın.
      4. Yakınlaştırma İşlevini seçin, Termal görüntünün ve sol kutu Arka Plan görüntüsünün boyutunu çakışacak şekilde ayarlayın ve sağdaki Kilidi kapatın.
      5. Üstteki araç çubuğunda Ölçüm dikdörtgenini ayarla'yı bulun ve şekilde algılanacak akupunktur noktasını işaretleyin.
      6. Sıcaklık değerini kaydetmek için sağdaki Rapor'a tıklayın.

6. Serebral palsili bebek sıçanların motor denge fonksiyonunun saptanması

1. Doğumdan sonraki 61^{. günde} Sham, Kontrol ve Tedavi gruplarındaki sıçanların motor fonksiyonunu tespit etmek için Davranışsal Rotarod testini¹⁹ kullanın.
   1. Parametre ayarları: Güç anahtarını başlatın, bir sonraki adıma geçmek için Deney yap'ı seçin, sonraki adıma girmek için Pozitif, Sıçanlar, Zamanlama 5 dakika'yı seçin ve Acc süresi: 10 s, Hız: 10 rpm'yi seçin.
   2. Ardından, fareleri koşu parkuruna yerleştirin ve sağlam durduktan sonra Çalıştır'a tıklayarak teste başlayın. Her çalıştırmanın çalışma durumunu AÇIK olarak ayarlayın. Her fareyi 5 dakika boyunca bir kez eğitin ve ardından testi üç kez yapmaya başlayın.
   3. Eğitimden sonra, bebek fareleri rotarod koşu parkuruna yerleştirin. Kararlı hale geldikten sonra Çalıştır'a tıklayın ve çalışma durumunu AÇIK olarak ayarlayın. 5 dakikanın sonunda, rotarod koşu parkurundan ilk kez düşen her bir sıçanın zamanını ve hızını, yani Çalışma süresi verilerini kaydetmek için Tarih'i seçin.
2. Doğumdan sonraki 61^{. günde} Sham, Kontrol ve Tedavi gruplarının sağ ön ayağının denge motor fonksiyonunu değerlendirmek için Ayak hatası testi 20,21'i kullanın.
   1. Bebek fareleri yatay merdivenin başlangıç ucuna yerleştirin ve diğer uca (100 cm uzunluğunda ve her merdiven arasındaki mesafe 2 cm'dir) geçerken bir video kaydedin. Bir eğitim seansından sonra, resmi testi her sıçan için 5 dakikalık aralıklarla üç kez gerçekleştirin.
   2. Puanlama standardında gösterildiği gibi, bir skor yapmak için düşük hızlı oynatma kullanarak hayvan merdiveni geçtiğinde sağ ön ayağı gözlemleyin (Tablo 2).

7. Batı lekeleme

1. Daha önce tarif edildiği gibi doku örneklerinin western blotlama analizini yapın²⁶.
   NOT: Lizat miktarı doku bloğunun boyutuna göre belirlendi. Kullanılan antikorlar aşağıdaki gibidir: birincil anti-Büyüme Hormonu antikoru (0.5 μg [0.5 ng/lan]); anti-Büyüme Hormonu reseptör antikoru (1/1000); primer antikorlar için dahili referans anti-beta Aktin antikoru (1/2000); İkincil antikor için keçi anti-RabbitIgG H&L (HRP) (1/10000).

8. Elin gücünü tespit etmek

1. Masaj için kullanılan eldeki manipülasyon kuvvetini tespit etmek için kullanılan cihazı takın. Bebek faresine masaj yapmak için kullanılan parmağınızı cihazın sensör çipi ile takın ve Güç düğmesini açın.
2. Manuel test yazılımını depolayan sabit disk arayüzünü bilgisayara bağlayın ve URL giriş kutusuna manuel test cihazının özel IP adresini girin.
3. SpringVR istemcisini bilgisayara kurun, toplama arayüzüne girmek için tıklayın ve manipülasyon kuvvetini test etmek için sağ alt köşedeki Parmak Desenini seçin.
4. Basınç seçeneğini seçin ve çalışma sırasında operatörün manuel kuvvetini kaydetmeye başlamak için Başlat'a tıklayın. Yazılım, manipülasyonun yoğunluğunu otomatik olarak kaydedecek ve PressureSensor dosya adındaki verilerin bulunacağı yerel diskte bir veri tablosu oluşturacaktır.

9. Veri istatistikleri

NOT: İstatistiksel analizler için SPSS26.0 yazılımı, çubuk grafik üretimi için Graphpad Prism9.0.0 ve protein bantlarının gri değer analizi için Image J yazılımı kullanılmıştır.

1. Tüm verileri ortalama ± standart sapma (Mean ± SD) olarak analiz edin ve sunun.
   NOT: Test standardı α = 0.05 idi ve P ≤ 0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. Verilerin varyans ve normallik analizi ile analiz edilmesi ve normal dağılım özelliklerine ve varyans homojenliğine uygun olması nedeniyle Fisher testi kullanılmıştır.

Sonuçlar

Seçici spinal manipülasyon, serebral palsili bebek sıçanlarda vücut ağırlığı artışını teşvik edebilir.
Tedavi sırasında vücut ağırlığı doğum sonrası 3, 14, 28, 42 ve 61. günlerde ölçüldü (Şekil 4, Tablo 3). Doğumdan sonraki üçüncü günde, Sham grubunun vücut ağırlığı 5.53 ± 0.035 g ve Kontrol grubunun vücut ağırlığı 3.15 ± 0.43 g idi. Tedavi grubunun vücut ağırlığı 4.42 ± 0.13 g idi ve modelleme öncesi Sham ve Kontrol gruplarından anlamlı olarak farklı değildi.

Doğum sonrası 14. günde, Sham grubunun vücut ağırlığı 35.97 ± 1.019 g, Kontrol grubunun vücut ağırlığı 28.00 ± 0.7403 g ve Tedavi grubunun vücut ağırlığı 33.78 ± 3.705 g idi. Tedavi ve Sham grupları arasında vücut ağırlığı açısından anlamlı bir fark yoktu. Tedavi grubunun ağırlığı Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.01).

Doğumdan sonraki 28. günde Sham grubunun vücut ağırlığı 104.9 ± 3.534 g, Kontrol grubunun vücut ağırlığı 80.35 ± 6.767 g ve Tedavi grubunun vücut ağırlığı 96.73 ± 7.638 g idi. Tedavi grubu kontrol grubu ile karşılaştırıldı ve istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.01).

Doğum sonrası 42. günde, Sham grubunun vücut ağırlığı 194.1 ± 4.333 g, Kontrol grubunun vücut ağırlığı 138.0 ± 6.029 g ve Tedavi grubunun vücut ağırlığı 173.9 ± 5.433 g idi. Tedavi ve Kontrol grupları arasında vücut ağırlığı açısından istatistiksel olarak anlamlı bir fark vardı (P < 0.0001).

Doğum sonrası 61. günde, Sham grubunun vücut ağırlığı 321.5 ± 5.675 g, Kontrol grubunun vücut ağırlığı 230.3 ± 5.198 g ve Tedavi grubunun vücut ağırlığı 268.9 ± 15.22 g idi. P < 0.0001 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. Tedavi ve Kontrol grupları arasında vücut ağırlığı açısından P < 0.0001'de istatistiksel olarak anlamlı bir fark vardı.

Seçici spinal manipülasyon, serebral palsinin etkili motor denge fonksiyonunu iyileştirebilir.
Doğumdan sonraki 61^{. günde} , tedavinin bitiminden sonra yorgunluk rotarod testini gerçekleştirdik. Her grubun ilk düşme süresi Sham grubunda 296.1 ± 1.65 s, Kontrol grubunda 102.7 ± 7.73 s ve Tedavi grubunda 220.1 ± 8.04 s idi. Sham ve Kontrol grupları arasında anlamlı fark vardı (P < 0.0001). Tedavi grubu ile Kontrol grubu arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.0001) ve Tedavi grubu ile Sham grubu arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.0001) (Şekil 5, Tablo 4)

Doğumdan sonraki 61^{. günde} , tedavinin bitiminden sonra, Sham ve Kontrol gruplarının Ayak hatası skorları sırasıyla 5.53 ± 0.03 ve 3.15 ± 0.43 idi. Tedavi grubunun skoru, 4.42 ± 0.13, Sham grubundan anlamlı derecede düşüktü (P < 0.0001). Tedavi grubunun skoru Kontrol grubundan anlamlı olarak yüksekti (P < 0.0001). Tedavi grubu ve Sham grubu ile karşılaştırıldığında, fark istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.0001) (Şekil 6, Tablo 5).

Seçici spinal manipülasyon, serebral palside büyüme hormonu sekresyon seviyesini düzenleyebilir.
Doku örnekleri doğum sonrası 32. günde alındı ve serebral palsili sıçanların hipotalamusu Western blot için seçildi ve karşılık gelen birincil ve ikincil antikorlar seçildi: Kullanılan antikorlar, birincil anti-Büyüme Hormonu antikoru, anti-Büyüme Hormonu reseptör antikoru, birincil antikorlar için dahili referans Anti-beta Aktin antikoru ve ikincil antikor için Keçi anti-Tavşan IgG H & L (HRP) (1/10000) idi. Seçici spinal manipülasyon, büyüme hormonu (GH) ve büyüme hormonu reseptörünün (GHR) ekspresyonunu düzenleyerek serebral palsili bebek sıçanların büyümesini ve gelişmesini teşvik edebilir (Şekil 7, Tablo 6)²⁶.

Serebral palsili bebek sıçanların büyümesini ve gelişmesini teşvik etmek, hipokampustaki serotonin ve norepinefrin içeriğini iyileştirebilir, böylece öğrenme ve hafıza yeteneğini geliştirebilir²⁷.

Seçici spinal manipülasyon, lokal akupunktur noktası sıcaklığını etkili bir şekilde iyileştirebilir (Şekil 8, Tablo 7).
Tedavi grubunda tedavi öncesi ve sonrası lokal akupunktur noktası alanının sıcaklığını tespit etmek için kızılötesi termal görüntüleme kullanıldı. Tedaviden önce sıcaklığın 32.92 ± 0.55 °C'de, tedaviden hemen sonra 36.32 ± 0.15 °C'de ve tedaviden 2 dakika sonra 35.32 ± 0.28 °C'de tutulduğu bulundu. Tedavinin bitiminden 5 dakika sonra sıcaklık 34.61 ± 0.17 °C ve tedavinin bitiminden 10 dakika sonra 0.60 °C ± 34.28 idi. Farklar, tedavinin bitiminden önceki anlık sıcaklık ve tedaviden 2 dk, 5 dk ve 10 dakika sonra lokal akupunktur noktası alanı ile karşılaştırıldığında istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.05). Selektif spinal manipülasyondan sonra, tedavi grubundaki lokal akupunktur noktası alanının sıcaklığı arttırıldı ve bir dereceye kadar korundu.

Şekil 1: Doğrultma refleksi. (A) Doğrultma refleksi deneyinin şematik gösterimi. Modelleme başarısını doğrulamak için doğumdan sonraki 4^{. günde (} modellemeden sonraki ikinci gün) doğrultma refleks testi yapıldı. (B) Her grupta doğrultma refleks testinin çubuk grafiği (n = 6, Ortalama ± SD). Not: ns, P > 0.05'i gösterir ve istatistiksel bir fark yoktur. P < 0.0001'i gösterir ve bu da oldukça önemli bir farkı gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 2: Seçici spinal manipülasyon. (A) Manipülasyondan önce yavruların ele alınması. Yavru fareler operatörün avucuna yerleştirildi ve kamptaki ortam olan sessiz tutuldu. (B) Seçici spinal manipülasyonun temsili. Omurganın her iki yanındaki kaslara bastırın ve yoğurun. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 3: İnsan ve (B) SD sıçanlarına karşı insan sırtındaki akupunktur noktalarının haritası. (A) İnsan ve (B) SD sıçan. C7: yedinci servikal vertebra; GV14: Dazhui (GV14), yer: yedinci servikal vertebra ile birinci torasik vertebra arasında, dorsal orta hat; T3: üçüncü torasik vertebra; BL13: Feishu (BL13), yer: üçüncü torasik omurun altındaki iki kaburga arasında; T5: beşinci torasik omur; BL15: Beşinci torasik omurun alt kaburgasının iki tarafı arasında yer alan Xinshu noktası; T7: yedinci torasik vertebra; BL17: Geshu noktası, yer: yedinci torasik omurun alt ve alt kaburgaları; BL18: Ganshu noktası, yer: yedinci torasik omurun alt ve alt kaburgaları; T11: on birinci torasik omur; GV6: Torasik vertebranın on birinci ve on ikinci spinöz süreci arasında yer alan Jizhong noktası; BL20: On ikinci torasik omurun altındaki iki kaburga arasında yer alan Pishu noktası; L2: ikinci lomber omurga; GV4: Mingmen (GV4), yer: dorsal medyan çizgi, ikinci lomber spinöz süreç altındaki depresyon; BL23: İkinci lomber omurganın her iki yanında bulunan Shenshu noktası. GV20: Baihui (GV20), yer: medyan parietal kemik; GV16, Fengfu noktası, yer: oksipital kretin arkasında oksipito-atlantoaksiyel eklem dorsal çöküntüsü. İnsan vücudundaki akupunktur noktalarının konumu, anatomik pozisyondan hayvanlardaki akupunktur noktalarının konumu ile oldukça tutarlıdır. Anormal yanıt noktası, innerve vücut yüzeyinin projeksiyon noktasına yakındı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 4: Her gruptaki ağırlık ölçümünün çubuk grafiği (n = 6, Ortalama ± SD). Not: ns P >0.05, istatistiksel fark yok; **P < 0.01, ***P < 0.001,****P < 0.0001, fark istatistiksel olarak anlamlıydı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 5: Her grupta Roat-rod testinin ilk damla zamanının çubuk grafiği (n = 6, Ortalama ± SD). Not: P < 0.0001, fark istatistiksel olarak anlamlıydı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 6: Her gruptaki Ayak hatası skorlarının çubuk grafiği (n = 6, Ortalama ± SD). Not: ****P < 0.0001, fark istatistiksel olarak anlamlıydı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 7: GH ve GH reseptörünün western blot bantları. Her grupta moleküler biyolojik düzeyde büyüme hormonu salgılanmasını tespit etmek için western blot kullanıldı ve selektif spinal manipülasyonun büyüme hormonu üzerine etkisi gözlendi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 8: Tedavi öncesi ve sonrası sıcaklık izleme. (Üst Panel) Kızılötesi termal kamera tarafından çekilen termal görüntüler. Lokal akupunktur noktası alanının sıcaklığı (° C), tuina tedavisinden önce ve sonra bir kızılötesi termal kamera ile kaydedildi. (A) Tuina tedavisinden önce. (B) Tedavinin hemen sonunda sıcaklık. (C) Tedaviden 2 dakika sonra lokal akupunktur noktası sıcaklığı. (D) Tedavinin bitiminden 5 dakika sonra lokal akupunktur noktası sıcaklığı. (E) tedaviden 10 dakika sonra lokal akupunktur noktası sıcaklığı. (Alt Panel) Tedavi öncesi ve sonrası sıcaklık izleme çubuk grafiği (n = 3, Ortalama ± SD). *P < 0.05, P < 0.01, * * * * * P < 0.001, * * * *P < 0.0001, fark istatistiksel olarak anlamlıdır. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Grup	Vaka sayısı (n)	Doğrultma refleksi/leri
Sahte	6	0,77 ± 0,10
Kontrol	6	19.00 ± 2.04*
Muamele	6	19.77 ± 0.55#

Tablo 1: Serebral palsili bebek sıçanlarda refleksi düzeltme zaman istatistiği (Ortalama ± SD; n=6). Her gruptaki yavrular, modelin başarılı olup olmadığını doğrulamak için doğumdan sonraki 4^{. günde (} modellemeden sonraki 2^{. gün)} doğrultma refleks testine tabi tutuldu. * Sham grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001; # Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001.

Puan	Değerlendirme için standart
1	Genç sıçan yatay merdivene yerleştirildiğinde, ağırlık taşırken ayak kayar ve yürümeyi etkiler
2	Genç sıçan merdivene yerleştirildiğinde, ağırlık taşırken ayak kayar, ancak yürümeyi etkilemez
3	Genç sıçan yatay merdivene yerleştirildiğinde, sıçan ayağını hızlı bir şekilde ağırlık taşıyan merdivenin bir sonraki basamağına hareket ettirir
4	Genç sıçan yatay merdivene yerleştirildiğinde, sıçan ayağını kısmen yerleştirir ve ağırlık taşıyan merdiven boyunca hareket eder
5	Genç sıçan yatay merdivene yerleştirildiğinde, sıçan ayağını bir basamağa koyar ve hızla başka bir basamağa geçer
6	Genç sıçan yatay merdivene yerleştirildiğinde, sıçan pençe yastıklarını doğru bir şekilde yerleştirir ve vücut ağırlığını tam olarak taşır

Tablo 2: Ayak hata testi skoru standart tablosu

Saat (Gün)	Vaka sayısı (n)	Grup
		Sahte	Kontrol	Muamele
P3 (Türkçe)	6	8,52 ± 0,27	8,60 ± 0,08	8.45 ± 0.28D
P14 Serisi	6	35,97 ± 1,01	28,00 ± 0,74*	33,78 ± 3,70ñ
P28 Serisi	6	104.9 ± 3.53	80,35 ± 6,76*	96,73 ± 7,63ñ
P42 Serisi	6	194.1 ± 4.33	138,0 ± 6,02*	173,9 ± 5,43#D
P61 Serisi	6	321,5 ± 5,67	230,3 ± 5,19*	268.9 ± 15.22#D

Tablo 3: Her grubun ağırlık testi sonuçları (Ortalama ± SD) (g). Not: Ñ Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.01; ° Sham grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.01; à Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.001; * Sham grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001; # Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001; D Sham grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001.

Grup	Vaka sayısı (n)	Roat-çubuk/zaman/s
Sahte	6	296.1 ± 1.65
Kontrol	6	102,7 ± 7,73*
Muamele	6	220.1 ± 8.04#D

Tablo 4: Her gruptaki bebek sıçanların Rotarod testi (Ortalama ± SD) (s). Not: * Sham grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001; # Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001; D Sham grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001.

Grup	Vaka sayısı (n)	Ayak Fay skoru
Sahte	6	5,53 ± 0,03
Kontrol	6	3,15 ± 0,43*
Muamele	6	4,42 ± 0,13#D

Tablo 5: Her grubun ayak hatası skorları (Ortalama ± SD). Not: * Sham grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001; # Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001; D Sham grubu ile karşılaştırıldığında, P < 0.0001.

Grup	GH (Güneydoğu)	GHR (GHR)
Sahte	2.325 ± 0.830	1.469 ± 0.265
Kontrol	1.563 ± 0.070#	1.563 ± 0.070Ñ
Muamele	2,471 ± 0,956*	2.471 ± 0.956&

Tablo 6: Büyüme hormonu ve büyüme hormonu reseptörü Western blot bandı gri değer verileri (n=10). GH:* Tedavi grubu ve Kontrol grubu arasındaki ikili karşılaştırma (P = 0.020 < 0.05) istatistiksel olarak anlamlı fark gösterdi; # Sham grubu ve Kontrol grubu arasında ikili karşılaştırma (P = 0.022 < 0.05) anlamlı fark gösterdi; Tedavi grubu ve Sham grubu arasındaki ikili karşılaştırma istatistiksel olarak anlamlı göstermedi (P = 0.076 > 0.05); GHR: & Tedavi grubu ve Kontrol grubu arasındaki ikili karşılaştırma (P = 0.024 < 0.05) anlamlı fark gösterdi; Ñ Sham grubu ve Model grubu arasında ikili karşılaştırma (P = 0.021 < 0.05) istatistiksel olarak anlamlı fark gösterdi; Tedavi grubu ve Sham grubu arasındaki ikili karşılaştırmada istatistiksel olarak anlamlı fark yoktu (P = 0.085 > 0.05).

Terapi zamanı	Vaka sayısı (n)	Sıcaklık
Tedaviden önce	3	32,92 ± 0,55
Hemen	3	36,32 ± 0,15*
2 dk sonra	3	35.32 ± 0.28#
5 dk sonra	3	34,61 ± 0,17ñ
10 dakika sonra	3	34.28 ± 0.60Dà

Tablo 7: Tedavi öncesi ve sonrası sıcaklık izleme sonuçları (Ortalama ± SD) (°C). Not: * Tedavi öncesi olanlarla karşılaştırıldığında, P < 0.0001; # Tedavi öncesi ile karşılaştırıldığında, P < 0.001; D Tedaviden 0 dakika sonra karşılaştırıldığında, P <0.001; Ñ Tedavi öncesi ile karşılaştırıldığında, P < 0.01; à Ön işlemle karşılaştırıldığında, P < 0.05.

Tartışma

İskemi ve hipoksi serebral palsinin önemli patojenik faktörleri olduğundan, serebral palsi modelini oluşturmak için uluslararası kabul görmüş yöntem hipoksi ile birleştirilerek serebral palsi modeli^hazırlanır 16,28,29,30. Serebral palsi geliştiğinde, büyüme hormonu salgılanması³¹ seviyesi ile ilişkili olabilecek kilo ve motor fonksiyon dahil olmak üzere küresel gelişimsel gecikmeye neden olur. Serebral palsili bebek sıçanları tedavi etmek için seçici spinal manipülasyon kullanıldı. Tedavi sırasında vücut ağırlığı izlendi ve Rotarod testi, Ayak hatası skoru ve büyüme hormonu gibi davranış testleri yapıldı. Lokal akupunktur noktalarının sıcaklığı tedaviden önce ve sonra gözlendi. İskemi-hipoksi modeli kurulduktan sonra, serebral palsili bebek sıçan kilo verdi. Yine de, masajın uzatılmasıyla, Tedavi grubunun kilo alımının Kontrol grubundan önemli ölçüde daha iyi olduğu bulundu. Ayrıca büyüme hormonunun salgılanmasını düzenlemede belirgin avantajları vardı. Bu sonuçlar, seçici spinal manipülasyonun serebral palsili bebek sıçanların büyümesini ve gelişimini etkili bir şekilde iyileştirebileceğini göstermektedir. Ayrıca, sol ana karotis arter, hipoksi ile birlikte iskemi ve pıhtılaşma modelini oluşturmak için kullanıldığından, sol kortekste hasar olmalı ve bu da motor fonksiyonun bozulmasına yol açmalıdır. Tedavi sonrası serebral palsili bebek sıçanların davranışsal yeteneğini tespit etmek için Rotarod testi ve Ayak hatası skoru^kullanıldı 32,33,34. Serebral palsili sıçanların motor fonksiyonunun seçici spinal manipülasyondan sonra düzeldiği bulunmuştur³⁵. Seçici spinal manipülasyon, serebral palsili bebek sıçanların büyümesini, gelişimini ve motor fonksiyonunu etkili bir şekilde iyileştirebilir.

Geleneksel Çin masajı akupunktur noktalarına ve meridyen sistemine dayanmaktadır. Bu deneyin tasarımı esas olarak geleneksel Çin masajının serebral palsili bebek sıçanların büyümesi ve gelişmesi üzerindeki etkisini gözlemlemektir. Masaj tedavisi esas olarak ayak-taiyang birinci ve ikinci yan çizgilerin mesane meridyeni ve Du meridyeni üzerinde yapılır, ancak akupunkturdan farklı olarak, stimülasyon noktasının net bir yeri vardır. Masaj, operatörün parmaklarının karın operasyonu için kullanıldığı ve temas yüzeyinin belirli bir alan aralığına, yaklaşık 1.0 cm dairesel bir çapa sahip olduğu bir tür yüz stimülasyonudur. Meridyenlerin de belli bir aralığı vardır; bununla birlikte, insan parmağı temas yüzeyi, SD sıçan akupunktur noktası alanından daha geniştir. Bu, akupunktur noktası olmayan bazı yerlerde kaçınılmaz bir operasyonel prosedür olduğu anlamına gelir. Bu nedenle, bu çalışma için grupları atarken meridyen olmayan bir masaj grubunu kontrol olarak ayrı ayrı belirlemedik.

Seçici omurga masajı, operasyon sırasında stimülasyon için omurganın her iki tarafındaki omurgayı ve kasları seçer, bu da lokal kas spazmlarını hafifletebilir, yerel kan dolaşımını teşvik edebilir ve meridyen ve teminatları rahatlatma etkisini elde etmek için ilgili innervasyon alanının işlevini iyileştirebilir ve genel düzenleme ve tedavi. Geleneksel Çin tıbbının bütünsel kavramının, geleneksel Çin tıbbının meridyen teorisinin ve omurilik sinir innervasyonu ilkesinin entegrasyonunu tam olarak somutlaştırır ve serebral palsinin lokal tedavisini gerçekleştirirken bütünü dikkate alır⁸.

İşlemde, omurga üzerindeki masaj yöntemi ve tedavinin her iki yanındaki kaslar ve bağlar, yani ayak-taiyang masaj stimülasyonunun birinci ve ikinci yan çizgilerinin Du meridyeni ve mesane meridyeni, sırt akupunktur noktaları, omurilik ve beynin bağlanmasında rol oynayabilir. Bu nedenle, bir bebek sıçanın sırt noktalarında manipülatif operasyonlar yaptığımızda, sırt noktalarını ve meridyenleri qi ve kan çalıştırmak, vücudun iç organlarının işlevlerini düzenlemek ve böylece bebek sıçanın büyümesini ve gelişmesini teşvik etmek için omurilik ve beynin işlevlerini etkileyebiliriz. Genel olarak, ayak-taiyang birinci ve ikinci yan hatlarının Du meridyeni ve mesane meridyenini uyararak, tüm vücudun Yang'ı harekete geçirilebilir ve vücudun genel hastalık direnci geliştirilebilir, bu da Geleneksel Çin Tıbbı'nın genel kavramını yansıtır 16,26,35,36,37,38. Du meridyeni, insan vücudunun alt karın bölgesinden kaynaklanır ve omurga boyunca başın üst kısmına ulaşır ve insan vücudunun Yang qi'sini düzenler³⁶. Foot-Taiyang'ın mesane meridyeni esas olarak vali kabının her iki tarafı boyunca uzanır ve beş zang organının geri-shu noktaları, zangfu organlarının^{hastalıklarının} tedavisinde yer alan Foot-Taiyang mesane meridyeninin ilk yanal çizgisinde bulunur ^39,40. Meridyenler ve teminatlar, yüzer teminatlara, dakika teminatlarına ve kutanöz bölgelere ayrılır. Bu nedenle, prosedürü serebral palsili bir bebek sıçanın sırt derisi üzerinde gerçekleştirdiğimizde, meridyenlerin yönü boyunca çalışabilir ve yüzen teminatları, dakika teminatlarını ve kutanöz bölgeleri etkili bir şekilde uyarabiliriz. Bu nedenle, akupunktur noktalarını ve meridyenleri qi ve kanı çalıştırmaları için uyararak, vücudun iç organlarının işlevi düzenlenir ve yavruların kilo almasına neden olur⁸.

Serebral palsili çocukların sırtında ayak-taiyang idrar kesesi meridyeni üzerinde kordon benzeri reaksiyon noktaları bulduk ve bazı akupunktur noktalarının anormal sıcaklığını tespit etmek için infrared termografi kullanıldı. Spinal sinir innervasyonu prensibi ile birleştiğinde, bu reaksiyon noktalarının sinir innervasyonunun yüzeyindeki projeksiyon noktalarına yakın olduğunu bulduk, bu da serebral palsi tedavisi için seçici spinal sinir kökü rezeksiyonu prensibi ile tutarlıdır (Şekil 3)⁴¹. Akupunktur noktaları meridyenleri, qi'yi ve kanı besler ve vücut yüzeyini ve zang-fu organlarını birbirine bağlar^42,43. Bu nedenle, serebral palsili bebek sıçanların tedavisinde, sırttaki akupunktur noktalarını çalıştırmak, lokal akupunktur noktalarını aktive etmek, meridyenlerin, qi'nin ve kanın blokajını kaldırmak için seçici spinal manipülasyon kullanılır ve akupunktur noktaları ısıya duyarlı durumdadır⁴⁴. Ameliyat ve tedaviden sonra belirli bir sıcaklık hala korunabilir.

Sağ uzuvda döndürme yönteminin kullanılması, lokal kas dokusunun spazmını hafifletebilir, yerel meridyenleri azaltabilir ve lokal disfonksiyonu iyileştirebilir. Son olarak, kafaya masaj terapisi yapmayı seçiyoruz çünkü kafa, beş zang-fu organının özü qi ve kanının birleştiği tüm Yang'ın başıdır. Bu kısmın tedavisi Yin ve Yang'ı uzlaştırabilir ve genel rehabilitasyonun^{etkisini sağlayabilir 16,18}. Sonuç olarak, seçici spinal manipülasyon, büyüme ve gelişmeyi teşvik etmek için serebral palsili bebek sıçanların vücut ağırlığını, motor fonksiyonunu ve büyüme hormonunu etkili bir şekilde iyileştirebilir.

Operasyon sırasında hala dikkat edilmesi gereken bazı önemli noktalar vardır. İlk olarak, bebek sıçanın avuç içi sıcaklığına uyum sağlaması gerektiği ve ajitasyon durumunun tedaviden önce stabil olduğu unutulmamalıdır. Operatörlerin, operatörlerin cildi ile doğrudan temas ettikten sonra anormallikler nedeniyle dişi farelerin terk edilmesini önlemek için tek kullanımlık eldivenler kullanmaları gerekir. Operasyondan önce, operatörler manipülasyonları konusunda tek tip olarak eğitilmelidir ve değerlendirmeyi geçtikten sonra çalışabilirler. Burada, operasyonun standardizasyonunu sağlamak için test etmek için özel bir manipülasyon test cihazı kullandık. Serebral palsili bebek sıçanlarda büyüme sırasında kilo değişiklikleri gözlemlediğimiz için, manipülasyon düzenli olarak kontrol edilmelidir. Bastırırken ve yoğururken, aşağı doğru basınç dikey olmalı ve kuvvet hafiften ağıra, sabit ve sürekli olmalıdır, böylece stimülasyon hissi vücudun derin dokusuna tam olarak ulaşabilir. Hızlı şiddet kullanmayın. Yoğurma aralığı küçük ve büyük olmalı ve önce kuvvet hafif ve ağır olmalıdır. Yoğurma aralığı küçük ve büyük olmalı ve önce kuvvet hafif ve ağır olmalıdır. Yoğurma yönteminin işleyişinin kas ve bağ tabakasına ulaşması gerekir. Manuel test cihazı tarafından izlendiğinde manuel kuvvet 1,77 ± 0,54 N idi. Buna karşılık, ovma yapılırken sadece cilt yüzeyi tedavi edilir. Ek olarak, serebral palsili bebek sıçanların cildi hassastır ve yanlış kullanım cilt hasarına neden olabilir.

Geleneksel Çin tıbbının harici bir tedavisi olan seçici spinal manipülasyon, serebral palsinin mevcut tedavi yöntemlerine etkili bir tamamlayıcıdır ve serebral palsinin çeşitlendirilmiş bir tedavi yöntemidir. Serebral palsili çocuklara kapsamlı bir rehabilitasyon sağlayabilen ve çocukların ailesine ve toplumuna daha iyi ekonomik faydalar ve sosyal etkiler sağlayabilen hem genel hem de yerel tedaviyi dikkate alır. Bununla birlikte, bu tekniğin de bazı eksiklikleri vardır, çünkü operatörler farklı anlayışlara ve tekniğe hakimdir, tekniğin birlik derecesi düşüktür, terapötik etkinin sapması meydana gelebilir ve iyileştirici etki kesin değildir. Bir sonraki adım, manipülasyonun tek tip bir standarda ulaşmasını sağlamaktır. Selektif spinal manipülasyonun serebral palsili bebek sıçanların büyüme ve gelişimini olumlu yönde etkilediğini ve inflamatuar homeostazı düzenleyerek terapötik bir rol oynayabileceğini doğrulamış olsak da, nöroplastisite ve beyaz cevher rejenerasyonu üzerindeki etki mekanizmasının hala araştırılması gerekmektedir.

İyileştirici etkinin kesinliği ve seçici spinal manipülasyonun bilimsel teorisi nedeniyle, seçici spinal manipülasyonun operasyon teorisine dayanarak, bu manipülasyon seti, çocukların büyüme geriliği, dil gelişimi geriliği gibi diğer pediatrik hastalıkları tedavi etmek için genişletilebilir. Araştırma fikirleri sağlamak, çoğu tıp çalışanı ve araştırmacı için tedavi sistemini zenginleştirir. Bu nedenle, bu makale tekniğin popülerleştirilmesi ve uygulanması için elverişlidir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
96 oyuklu plakalar	Beijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD	11510	Protein konsantrasyonunun belirlenmesi
Anti-beta Aktin antikoru	Abacm	Ab8227	Seyreltme: 1/2000
Anti-Büyüme Hormonu antikoru	Abacm	Ab126882	0.5 & mikro; g (0.5 ng / şerit)
Anti-Büyüme Hormonu reseptör antikoru	Abacm	Ab202964	Seyreltme: 1/1000
Temel ameliyat mikroskobu	Shanghai YuYAN Scientific Instrument Co.	LTD SM-101	Ortak karotis arter, modelleme sırasında mikroskop altında izole edildi
BCA geliştiricisi	Biyuntian Biological Engineering Co., LTD	P0010	Protein konsantrasyonunun belirlenmesi
Kemilüminesans görüntüleme sistemi	Shanghai Qinxiang Scientific Instrument Co., LTD	100240073	Protein bantlama görüntüleme
Doğrudan Yüklemeli Renk Boyalı İşaretleyici	Pekin Kangrunchengye Biotechnology Co., LTD (GenStar)	M221	Western Blot
DK-30Otomatik kar buz makinesi	Henan Brothers enstrüman ekipmanları Co., LTD	SHDX0023	Buz yapma
ECL ışıldayan alt tabaka kiti	Beijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD	BL520B	Pozlanmış filmdeki gizli görüntüleri görünür görüntülere dönüştürün
Elektrik ısıtmalı termostatik su banyosu	TAİSTE CİHAZI	DK-98-II	Genç sıçanlar modellendikten sonra yeniden canlandırıldı
Elektronik teraziler	Kunshan YoukeWEI ELECTRONIC Technology Co. LTD	CN-LQC10002	Genç sıçanların vücut ağırlığı ölçüldü
Alman küçük beyaz elektrik pıhtılaşma kalemi hemostat	Haohang	L55 & kez; W125 ve kez; H37	Sol ortak karotis arteri pıhtılaştırmak için kullanıldı
Eldiven	Jiangsu YANGzi LiDE Medical Device Co., LTD	Q/320684 YZYL001-2017	Masaj işlemi için
Glycine	Beijing Soleibao Technology Co., Ltd.	Kedi # G8200	Elektroforetik çözüm, Transfer sıvısını yapılandırın
Keçi Anti-RabbitIgG H & L (HRP)	Abacm	Ab6721	Seyreltme: 1/10000
Akıllı laboratuvar ultra saf su makinesi	Chongqing huachuag su arıtma mühendisliği co., LTD	Yok	Filtrasyon (15 L)
İzofluran	Shandong Ante Hayvancılık Technology Co. LTD	15198	Anestezi genç sıçanlarda indüksiyonla sürdürüldü
LinkIR	FOTIRC	V1.3.2.134	Kızılötesi görüntü analiz yazılımı
Düşük sıcaklık yüksek hızlı doku öğütücü	Wuhan Servicebio technology CO.,LTD	SKZ3F20200191	Doku taşlama
Metanol	Guangdong Guanghua Sci-Tech Co., Ltd	20220519	Transfer sıvısını yapılandırın
Mini-PROTEAN Tetra	Bole Life Medical Products (Shanghai) Co., Ltd	552BR 233193	Elektroforez
Multiskan Spektrumlu Mikroplaka Spektrofotometresi	TECAN	Spark	Doku proteininin absorbansı ve konsantrasyonu tespit edildi
Basınca duyarlı akıllı eldivenler	Jinan Super Sense Intelligent Technology Co. LTD	Miiglove	Operatörün manipülatif gücünü ölçmek için kullanılır
PVDF membranı	MerckMillipore Corporation	IPVH00010	Batı Lekesi
Soğutmalı santrifüj	Hettich Precision Technology (Zhuhai) Co., LTD	MİKRO 220R	Santrifüj
Araştırma üçü bir arada termal kamera	FOTIRC	226S (384 x 288)	Sıcaklık ölçümü
RIPA lizat	Beijing Solaibao Technology Co., LTD (Solarbio)	R0010	Litik doku
SHA-CA dijital ekranlı su banyosu termostatik osilatör	Changzhou Aohua Instrument Co. LTD	SHA-CA	Hipokside genç sıçanlar kullanıldı
Altı sıçan yorgunluğu rotarod aparatı	Shanghai Duoyi Industry Co., LTD	DO01104RT703	CP motor fonksiyonu tespit edildi
Yağsız süt tozu	Guangzhou Saiguo Biotechnology Co., LTD (BIOFROXX)	1172GR500	Sınırlayıcı sıvı
SPF ıslah yemi	SPF (Pekin) biyoteknoloji co., Ltd.	A1EC30005A1S4285266	Emziren dişi sıçanlar
SPF bakım yemi	SPF (Beijing) biotechnology co., Ltd.	A1EC30005A1S4285267	Yavrular sütten kesildikten sonra beslendi
Cerrahi plaka	Shanghai YuYAN Scientific Instrument Co. LTD	51002	Model ameliyat masası genç sıçanlarda kuruldu
TS-200 Orbital çalkalayıcı	Haimen Qilin Bell Manufacturing Co., Ltd.	TS-8S	Jel fiksasyonu
Tween 80	MedChemExpress	HY-Y1819	TBST 'yi yapılandırın;
ZS-MV Taşınabilir anestezi makinesi	ZHONGSHI SCIENCE & TEKNOLOJİ	ZS-MV-I	Anestezi deney hayvanlarında indüklendi ve sürdürüldü