Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Spontan Solunum Yapan Farelerde Balon Kateter Kullanılarak Uzaktan Tetiklenen LAD Oklüzyonu

2K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/66386

⸱

22 Mart 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Bu makale, farelerde miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarını (IRI) indüklemek için benzersiz bir kapalı göğüs tekniği sunmaktadır. Sunulan yöntem, farelerin uzaktan miyokard iskemisini indüklerken kendiliğinden nefes almalarını sağlar. Bu, iskemi ve reperfüzyonun dinamik süreçlerini yerinde ve noninvaziv görüntüleme yoluyla gerçek zamanlı olarak incelemek için hayvana erişim sağlar.

Özet

Akut miyokard infarktüsü (AMİ) sık görülen ve yüksek mortaliteye sahip bir kardiyovasküler hastalıktır. için revaskülarizasyon stratejilerindeki gelişmelere rağmen, sıklıkla miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarına (IRI) yol açarak kardiyak hasarı arttırır. Murin modelleri, hem akut yaralanmayı hem de kronik miyokardiyal yeniden şekillenmeyi in vivo olarak araştırmak için hayati araçlar olarak hizmet eder. Bu çalışma, farelerde miyokardiyal IRI'yi uzaktan indüklemek için benzersiz bir kapalı göğüs tekniği sunar ve MRI veya PET gibi in vivo görüntüleme kullanılarak oklüzyon ve reperfüzyonun çok erken evresinin araştırılmasını sağlar. Protokol, göğüs kapatıldıktan sonra iskemi başlangıcı üzerinde hassas kontrol sağlayan bir uzaktan oklüzyon yöntemi kullanır. Cerrahi travmayı azaltır, spontan nefes almayı sağlar ve deneysel tutarlılığı artırır. Bu tekniği diğerlerinden ayıran şey, oklüzyon ve reperfüzyon olayları sırasında ultrason ve manyetik rezonans görüntüleme (MRI) dahil olmak üzere eşzamanlı noninvaziv görüntüleme potansiyelidir. Doku tepkilerini neredeyse gerçek zamanlı olarak analiz etmek için eşsiz bir fırsat sunarak, iskemi ve reperfüzyon sırasındaki süreçler hakkında kritik bilgiler sağlar. Bu yenilikçi yaklaşımın kapsamlı sistematik testleri yapıldı, enfarktüs için kardiyak nekroz belirteçleri ölçüldü, kontrastlı MRG kullanılarak risk altındaki alan değerlendirildi ve yara olgunlaşma aşamasında enfarktüsler boyandı. Bu araştırmalar sayesinde, miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarına yönelik araştırma yaklaşımlarını ilerletmede ve hedefe yönelik müdahalelerin geliştirilmesini hızlandırmada önerilen aracın değerine vurgu yapılmıştır. Önerilen yenilikçi deneysel protokolün noninvaziv görüntüleme teknikleri ile kombine edilmesinin uygulanabilirliğini gösteren ön bulgular burada sunulmuştur. Bu ilk sonuçlar, aynı anda MRI taramaları yaparken miyokardiyal iskemiyi uzaktan indüklemek için amaca yönelik hayvan beşiğinin kullanılmasının faydasını vurgulamaktadır.

Giriş

Akut miyokard infarktüsü (AMİ), sık görülen global bir kardiyovasküler hastalıktır ve yüksek mortalite oranları ve morbidite ile ilişkilidir1. hastaları için erken ve etkili revaskülarizasyon stratejilerini mümkün kılan teknolojik gelişmelere rağmen, hastalar bu girişimleri takiben hala miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarı (IRI) yaşamaktadır2. Bu nedenle, IRI'yi azaltmak için temel mekanizmaları anlamak ve yaklaşımlar formüle etmek çok önemlidir. IRI, çok sayıda karmaşık biyolojik süreci içeren karmaşık bir patofizyolojik durumu temsil eder. Bunlar, düzenlenmiş hücre ölümünü, oksidatif....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu hayvan protokolü, Leuven Katolik Üniversitesi'ndeki Hayvan Deneyleri Etik Komitesi (ECD) tarafından belirlenen yönergeler ve düzenlemeler tarafından onaylanmıştır ve bunlara uygundur. Yerel ECD tarafından geliştirilen tüm politikalar, 2010/63/EU sayılı Direktifte belirtildiği gibi Avrupa Birliği'nin laboratuvar hayvanlarının refahı ile ilgili düzenlemelerini takip eder. Aşağıda açıklanan tüm testler 8-12 haftalık (vücut ağırlığı = 20-23 g) erkek C57BL / 6 fareler üzerinde gerçekleştirilmiştir. Akut deneyler, ameliyattan hemen sonra sakrifiye edilen hayvanları temsil ediyor. Hayatta kalma deneyleri, troponin ölçümü, MRI ve SR boyama....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

İskemiyi indükleme yeteneğinin doğrulanması dört testle gerçekleştirilmiştir: Trifenil tetrazolyum klorür (TTC) ve Sirius Red (SR) boyama, kardiyak troponin I ölçümü ve Geç gadolinyum güçlendirme (LGE) MR görüntüleme. İstatistiksel anlamlılık, sınırlı örneklem büyüklükleri göz önünde bulundurularak Mann-Whitney non-parametrik test kullanılarak değerlendirildi. İstatistiksel anlamlılık p < 0.05 olarak belirlendi.

Akut deneylerde (TTC boyama, n = 15) teknik bir arıza yoktu ve tüm hay.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu çalışmada tanıtılan yeni uzaktan oklüzyon tekniği, ilk cerrahi sırasında doğrudan damar manipülasyonu ihtiyacını ortadan kaldırarak ve erken reperfüze miyokardın eşzamanlı multimodal görüntülemesine izin vererek iskemi-reperfüzyon yaralanma modellemesi alanındaki araştırmaları ilerletmek için benzersiz bir platform sunmaktadır. Troponin-I ölçümleri, LGE kontrast MRG, TTC ve SR boyama dahil olmak üzere kapsamlı karakterizasyon, önerilen tekniğin mevcut altın standarda eşdeğer olduğunu .......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Deneyler, KU Leuven çekirdek tesisi 'Moleküler Küçük Hayvan Görüntüleme Merkezi'nde (MoSAIC) gerçekleştirildi. Yazarlar, teknik yardım için Katarzyna Błażejczyk'e teşekkürlerini sunarlar. Araştırma, KU Leuven (C14/20/095) ve Araştırma Vakfı - Flanders (FWO G0A7722N) tarafından sağlanan araştırma hibeleri ile desteklenmiştir. M. Algoet, Araştırma Vakfı - Flanders Burs Bursu (FWO 11A2423N) tarafından desteklenmektedir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
2-0 ipek sütürSharpoint ÜrünlerDC-2515N
5-0 polipropilen sütürEthicon8710H
7-0 polipropilen sütürEthicon8206H
ACCLARENT Balon Şişirme CihazıJohnson& Johnson MedTechBID30
AsepromazinKela
BD Vialon 18 GBD381347
BD Vialon 20 GBD381334
BetadineÇözeltisi Purdue Pharma25655-41-8
Buprenorfin (Buprenex Enjekte Edilebilir)Reckitt Benkiser SağlıkNDC 12496-0757-1
Sazan Zoom Styl Knijplood 2.1 g (kurşun balıkçılık ağırlıkları)Visdeal.nl
Dumont #3 ForsepsGüzel Bilim Araçları11231-30
Dumont #5 ForsepsGüzel Bilim Araçları11251-30
İnce MakasGüzel Bilim Araçları14040-10
Fucidine jelLeo Pharma
IsofluranAbbottNDC 5260-04-05
KD Fare/Sıçan Göz SpekulumuDünyası Hassas Aletler501897
KD fare/sıçan gözü spekulumuDünyası Hassas Aletler501897
KetaminDechra
Işık kaynağıZeissKL 1500 LCD
MRI sistemi Bruker BioSpin, Ettlingen, AlmanyaBioSpec 70/30
NatriumChloride %0.9Baxter
Gece Kızılötesi IsıLambası Zoo Med Laboratories, Inc.RS-75
ParaVision yazılımı Bruker BioSpinsürüm 6.0.1 
polietilen boru PE-10SAI İnfüzyon teknolojileriPE-10
polietilen boru PE-50SAI İnfüzyon teknolojileriPE-50
uzaktan IRI aracı (PMMA)ev yapımı
Kemirgen Cerrahi MonitörüIndus aletleri
Segment v4.0Medviso, segment.heiberg.seR12067
Kendinden kapılı gradyan yankı dizisi Bruker BioSpin, Ettlingen, AlmanyaIntraGate, ParaVision 6.0.1
İnce Uzatılmış İğne TutucuGüzel Bilim Araçları12005-15
Sure-Seal Fare/Sıçan İndüksiyon OdasıDünya Hassas AletlerEZ-178
Boru Konnektörleri, Poli, Y ŞekliWestlab072025-0001
Ultraverse 035 PTA Dilatasyon Kateteri: 5mm x 40mm, 130 cm uzunluğunda kateter üzerinde 17 ATM RBP balonuBard Periferik Vasküler, Inc.
Veet (tüy dökücü krem)Reckitt Benkiser Sağlık Ventilatörü
, MiniVent Model 845Hugo Sachs73-0043
VidisicBAUSCH & LOMB PHARMA685313
KsilazinBayer
00801741092671

Kaynaklar

  1. Bryda, E. C. The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research. Mo Med. 110 (3), 207-211 (2013).
  2. Fishbein, M. C., et al. Early phase acute myocardial infarct size quantificat....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Miyokard İskemisiReperfüzyon HasarıMurine ModelKardiyak MRGNoninvaziv GörüntülemeAkut Miyokard EnfarktüsüDoku Yanıt Analizi