Koyunlarda uzun süreli uyanık ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO) modeli oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. ECMO modeli sırasında pıhtılaşma sisteminin yönetimine ve değerlendirilmesine özel önem verilmektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
* These authors contributed equally
Koyunlarda uzun süreli uyanık ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO) modeli oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. ECMO modeli sırasında pıhtılaşma sisteminin yönetimine ve değerlendirilmesine özel önem verilmektedir.
Bu çalışmada uzun süreli uyanık ekstrakorporeal membran oksijenasyonunun (ECMO) koagülasyon sistemi üzerindeki etkilerinin bir koyun modelinde araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya her grupta 5 koyun olmak üzere toplam on sağlıklı koyun dahil edildi. Veno-arteriyel ECMO (V-A ECMO) grubunda sağ karotis arter ve sağ eksternal juguler vende kanülasyon yapıldı. Veno-venöz ECMO (V-V ECMO) grubunda, sağ eksternal juguler ven içine yerleştirmek için çift lümenli bir kateter kullanıldı. ECMO'ya başlandıktan sonra koyunlar anesteziden kurtarıldı ve 7 gün boyunca uyanık kaldı. Hedef aktif pıhtılaşma süresi (ACT) hedefi 220-250 s olarak belirlendi. Her iki grupta da, gerçek ACT 250 s civarında dalgalandı ve heparin dozu yavaş yavaş arttı ve deneylerin sonunda neredeyse 60 IU / kg / dk'ya ulaştı. Ayrıca, aktive edilmiş parsiyel tromboplastin zamanı (APTT) ve trombin zamanı (TT) değerleri, aynı dozlarda heparin almasına rağmen, V-A ECMO grubunda V-V ECMO grubuna göre anlamlı olarak daha yüksekti. Laboratuvar test sonuçları normal ve makul bir aralıkta dalgalanmasına rağmen, çalışmanın sonunda her iki grupta da böbreklerde enfarktüs odakları gözlendi.
Ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO), ağır hastalar için kardiyopulmoner destek sağlayarak hayat kurtarıcı bir müdahale görevi görür. İki ana forma ayrılır: veno-arteriyel ECMO (V-A ECMO) ve veno-venöz ECMO (V-V ECMO)1,2. V-A ECMO dolaşım yetmezliği yaşayan hastalar için kullanılırken, V-V ECMO solunum yetmezliği olan ancak ciddi kardiyovasküler disfonksiyonu olmayanlar için tercih edilir 3,4.
Tromboz ve kanama ECMO hastalarında sık görülen komplikasyonlardır5. ECMO devresi kanı yapay yüzeylere maruz bırakarak karmaşık pıhtılaşma tepkilerini başlatır6. Bu süreçler endotel hasarına ve mikrosirkülasyon bozukluklarına yol açarak hayati organlarda daha sonra işlev bozukluğuna neden olabilir 7,8. Sonuç olarak, ECMO hastaları için etkili sistemik antikoagülan tedavinin hayati önem taşıdığı düşünülmektedir. Buna rağmen, ECMO ile ilgili çeşitli klinik ortamlarda antikoagülasyon stratejilerine rehberlik edecek kanıt eksikliği devam etmektedir.
İstikrarlı bir ECMO hayvan modelinin oluşturulması, ECMO'nun vücut üzerindeki etkisine dair içgörüler sağlayabilir ve ECMO yönetim stratejilerinin optimizasyonuna, ECMO ile ilişkili komplikasyonların azaltılmasına ve klinik uygulamada hasta sonuçlarının iyileştirilmesine önemli ölçüde katkıda bulunabilir. Koyun ve domuz gibi büyük hayvanlar, insanlarınkine çok benzeyen fizyolojik parametreleri nedeniyle ECMO modellerinin oluşturulmasında birincil seçeneklerdir 9,10. Bununla birlikte, önceki büyük hayvan ECMO modellerinin bakım süresi 24 saatten azdı, bu da ECMO'nun pıhtılaşma sistemi11 üzerindeki etkisini kapsamlı bir şekilde değerlendirmeyi zorlaştırıyordu. Bu nedenle, ECMO'nun patofizyolojik mekanizmalarını kapsamlı bir şekilde araştırmak için uzun vadeli ECMO büyük hayvan modellerinin oluşturulmasına ihtiyaç vardır. ECMO'nun pıhtılaşma sistemi üzerindeki etkilerini araştırmak için uzun vadeli büyük hayvan modellerinin kullanılması, klinik uygulama için daha sağlam kanıtlar sağlayabilir.
Bu çalışmanın amacı, sağlıklı koyunlarda uzun süreli (7 gün) uyanık V-A ve V-V ECMO modeli oluşturmaktır. Tüm model oluşturma ve değerlendirmenin merkezi odak noktası antikoagülasyonun yönetimidir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu deneysel protokol, Fuwai Hastanesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi'nden (no. 0101-2-20-HX(X)) onay almıştır. Tüm prosedürler, Ulusal Sağlık Enstitüleri'nin Laboratuvar Hayvanlarının Kullanımı ve Bakımı Kılavuzu'nda belirtilen yönergelere uygun kalmıştır. Deney, Fuwai Hastanesi Hayvan Deney Merkezi, Kardiyovasküler İmplant Malzemeleri için Klinik Öncesi Araştırma ve Değerlendirme Pekin Anahtar Laboratuvarı'nda gerçekleştirildi (kayıt no. CNAS LA0009). Çalışmada Fuwai Hastanesi Hayvan Deney Merkezi'nde gerekli karantina standartlarını karşılayan sağlıklı koyunlar kullanıldı. Ayrıca, bu araştırma Hayvan Araştırmaları: İn Vivo Deneylerin Raporlanması yönergelerini takip etti. Ağırlık aralığı 50-65 kg ve yaş aralığı 12-24 ay olan erkek Küçük Kuyruklu Han koyunları (bkz. Malzeme Tablosu), ameliyattan en az bir hafta önce yiyecek ve suya ücretsiz erişimi olan belirli bir patojen içermeyen ortamda barındırıldı. Koyunlar rastgele olarak, her biri 5 bireyden oluşan iki gruba ayrıldı: Veno-Arteriyel ECMO (V-A ECMO) grubu ve Veno-Venöz ECMO (V-V ECMO) grubu. Sağlıklı koyunların seçimi, ECMO desteğinin organizma üzerindeki etkilerinin kesin olarak değerlendirilmesi gerekliliği ile haklı çıkarıldı. Çalışmada kullanılan ekipman ve reaktifler Malzeme Tablosunda listelenmiştir.
1. Hayvan hazırlama
2. Kanülasyon
3. ECMO'nun Başlatılması
4. Ameliyat sonrası yönetim ve izleme
5. Ötenazi
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tüm deney boyunca, her grupta beş koyun olmak üzere toplam on koyun değerlendirildi (Tablo 1). ECMO'nun başlamasının ardından, tüm koyunlar anesteziden kurtuldu ve 7 gün boyunca uyanık kaldı. Her iki grupta da ECMO akışı 1.8 L/dk'yı aştı. V-V ECMO grubunda akış 1,8 L/dk civarında dalgalanırken, V-A ECMO grubunda 2,3 L/dk ile 1,8 L/dk arasında değişmektedir (Şekil 1A). Her koyunun yaşamsal belirtileri sabit kaldı. Her iki grupta da uyandıktan 60 saat ile 180 saat sonra kan la...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışma, koyunlarda V-V ve V-A ECMO için sağlam, uzun vadeli sağkalım modelleri oluşturma prosedürünü özetlemektedir. Hayatta kalan tüm hayvanlar stabil yaşamsal belirtiler sergiledi ve ciddi kanama veya pıhtılaşma olayı meydana gelmedi. ECMO akışı ve oksijenasyon performansı stabil kaldı ve önemli bir patolojik yaralanma gözlenmedi. Çalışmada antikoagülan tedavisi hakkında detaylı bilgi verilmektedir.
Antikoagülasyon yönetimi, ECMO perioperatif bakımında ç...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.
Hiç kimse.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| ACT analizörü | Hemochron, USA | Jr Signature Anestezi | |
| makinesi | Dräger, Almanya | Primus | |
| Arteriyel kateter | Edwards Lifescience, ABD | 18-FR | VA-EMCO |
| Kan kimyası analizörü | IDEXX Laboratories, USA | Catalyst One | |
| Kan gazı analizörü | Abbott, ABD | Abbott i-STAT1 | |
| Santrifüj pompa | Jiangsu STMed Technologies, Çin | STM CP-24 I | |
| Santrifüj pompa sürücüsü ve konsolu | Jiangsu STMed Technologies, Çin | OASSIST STM001 | |
| Pıhtılaşma test analizörü | Pekin Başaran Teknolojisi, Çin | SF-8050 | |
| Tam kan sayımı analizörü | Siemens Healthcare, Almanya | ADVIA 2120i | |
| Çift kanallı mikro enjeksiyon pompası | Zhejiang Smith Tıbbi Alet, Çin | WZS-50F6 | |
| Çift lümenli kateter | MAQUET Avalon Elite, Almanya | 23-FR | için sağ dış juguler ven'e dönüş ve drenaj erişimleri sağlayın |
| , Çin | 5ml: 50mg | ||
| GraphPad yazılımı | GraphPad Yazılımı, ABD | GraphPad Prism v9.0 | İstatistiksel analiz |
| Heparin | Shanghai Shangyao No.1 Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Çin | 2ml: 12500IU | |
| Yüksek frekanslı elektrocerrahi | COVIDIEN, ABD | Force F | |
| Çok parametreli tıbbi monitör | Philips, Hollanda | MP60 | |
| Oksijenatör kiti | Medos, Almanya | Hilite 7000LT | |
| Oksijenatör kiti | Maquet, Almanya | BE-PLS 2050 | |
| Propofol | Xi' bir Libang Pharmaceutical Co. Ltd, Çin | 20ml: 0.2g | |
| Tek lümenli merkezi venöz kateter | TuoRen, Çin | 18Fr | Hemodinamik izleme ve kan örneklemesi için sol karotis artere yerleştirin. |
| Küçük Kuyruk Han koyun | Jinyutongfeng Ticaret ve Ticaret A.Ş., Çin | Ağırlık: 50-65 kg, Yaş: 12-24 ay | |
| Üç lümenli santral venöz kateter | TuoRen, Çin | 7Fr | İntravenöz sıvı uygulaması, ilaç enjeksiyonu ve kan örneklemesi için sol juguler ven yerleştirin. |
| Ultrason makinesi | GE, ABD | E9 | |
| Venöz kateter | Edwards Lifescience, ABD | 24-FR | için bir damara drenaj erişimi sağlayın |
| Savina |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu makale yayımlandı
Video yakında