Ayrıntılı protokolümüz, insan bağırsak mukozasını 3D yapılar ve çeşitli hücre tipleri ile simüle eden, mikrobiyal kolonizasyona yanıt olarak bağışıklık tepkilerinin ve hücresel fonksiyonların derinlemesine analizini sağlayan gelişmiş çip üzerinde bağırsak modelinin oluşturulmasını ve kullanımını özetlemektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bağırsak mukozal bağışıklık tepkilerini analiz etmek için immünokompetan çip üzerinde bağırsak modeli
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Epitelyal 3D organotipik, villus benzeri ve kript benzeri yapıları yeniden oluşturan gelişmiş bir çip üzerinde bağırsak modeli geliştirilmiştir. İmmünkompetan model, İnsan Göbek Veni Endotel Hücreleri (HUVEC), Caco-2 bağırsak epitel hücreleri, dokuda yerleşik makrofajlar ve doku içinde kendi kendini organize eden, insan bağırsak mukozasının özelliklerini yansıtan dendritik hücreleri içerir. Bu platformun benzersiz bir yönü, dolaşımdaki insan birincil bağışıklık hücrelerini entegre etme ve fizyolojik alaka düzeyini artırma kapasitesidir. Model, bağırsak bağışıklık sisteminin bakteri ve mantar kolonizasyonu ve enfeksiyonuna tepkisini araştırmak için tasarlanmıştır. Genişletilmiş boşluk boyutu nedeniyle model, geçirgenlik deneyleri, sitokin salınımı ve bağışıklık hücresi infiltrasyonu gibi çeşitli fonksiyonel okumalar sunar ve epitel hücre tabakası tarafından oluşturulan 3D yapıların immünofloresan ölçümü ile uyumludur. Bu vesileyle, hücre farklılaşması ve işlevi hakkında kapsamlı bilgiler sağlar. Çip üzerinde bağırsak platformu, mikrofizyolojik perfüze edilmiş bir biyoçip platformu içinde canlı bir mikrobiyotanın vekilleri ile insan konak dokusu arasındaki karmaşık etkileşimleri aydınlatmadaki potansiyelini göstermiştir.
Giriş
Çip Üzerinde Organ (OoC) sistemleri, geleneksel 2B hücre kültürü ile hayvan modelleri arasındaki boşluğu doldurabilen, gelişmekte olan bir 3B hücre kültürü tekniğini temsil eder. OoC platformları tipik olarak, zarlar veya hidrojeller gibi çok çeşitli iskeleler üzerinde büyütülen dokuya özgü hücreleri içeren bir veya daha fazla bölmeden oluşur1. Modeller, bir veya daha fazla tanımlanmış organotipik fonksiyonu taklit etme yeteneğine sahiptir. Pompalar, hücresel atık ürünlerin uzaklaştırılması, gelişmiş hücresel farklılaşma için beslenme ve büyüme faktörleri sağlanması ve temel in vivo koşulların yeniden oluşturulması için hücre kültürü ortamının sürekli mikroakışkan perfüzyonunu sağlar. Bağışıklık hücrelerinin entegrasyonu ile OoC sistemleri, in vitro 2'de insan bağışıklık tepkisini taklit edebilir. Bugüne kadar çok çeşitli organlar ve fonksiyonel birimler sunulmuştur1. Bu sistemler, ilaç testi 5,7 ve enfeksiyon çalışmaları6,8 için kolaylaştırılabilen vaskülatür 3, akciğer4, karaciğer 2,5 ve bağırsak6 modellerini içerir.
Burada, endotel astarı ve dokuda yerleşik makrofajlarla birleştirilmiş villus benzeri ve kript benzeri yapıların organotipik bir 3D topografyasını oluşturan insan epitel hücrelerini entegre eden bir çip üzerinde insan bağırsağı modeli sunuyoruz. Model, mikroskobik bir slayt formatında mikroakışkan olarak perfüze edilmiş bir biyoçip içinde kültürlenir. Her biyoçip iki ayrı mikroakışkan boşluktan oluşur. Her boşluk, gözenekli bir polietilen tereftalat (PET) zarı ile bir üst ve alt odaya bölünür. Zarın kendisi aynı zamanda hücrelerin her iki tarafta büyümesi için iskele görevi görür. Zarın gözenekleri, hücre katmanları arasında hücresel karışmayı ve hücre göçünü mümkün kılar. Her odaya iki dişi luer kilit boyutunda bağlantı noktası ile erişilebilir. İsteğe bağlı olarak, ek bir mini-luer kilit boyutlu bağlantı noktası, üst veya alt bölmeye erişim sağlayabilir (Şekil 1).
OoC platformu, tek bir deneyden elde edilebilecek bir dizi okuma sunar. Çip üzerinde bağırsak, hücre işaretleyici ekspresyonu, metabolizasyon oranları, bağışıklık tepkisi, mikrobiyal kolonizasyon ve enfeksiyonve bariyer fonksiyonunu değerlendirmek için perfüze edilmiş 3D hücre kültürü, atık su analizi ve floresan mikroskobunu birleştirmeye yönelik olarak uyarlanmıştır 3,6,8. Model, dokuda yerleşik bağışıklık hücrelerini ve canlı mikroorganizmaların konakçı doku ile doğrudan temasını içerir, bu da yayınlanan diğer modellere kıyasla bir avantajdır9. Ayrıca, epitel hücreleri, canlı bir mikrobiyota ile kolonizasyon için fizyolojik olarak ilgili bir arayüz sağlayan üç boyutlu yapılar halinde kendi kendini organize eder6.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu protokol, birincil insan monositlerini izole etmek için sağlıklı donörlerden biyoçip başına ~ 20 mL taze kana erişim gerektirir. Tüm bağışçılar, Jena Üniversite Hastanesi etik kurulu tarafından onaylanan bu çalışmaya katılmak için yazılı, bilgilendirilmiş onam verdiler (izin numarası 2018-1052-BO). Malzemelerle ilgili ayrıntılar için Malzeme Tablosu'na bakın. Tüm çözeltilerin ve ortamların bileşimi hakkında ayrıntılar için Tablo 1'e bakın.
1. Genel biyoçip işleme açıklamaları
- Bir rezervuar şeridini dikkatlice ayırın ve tek rezervuarlar ve kapaklar elde etmek için ısıtılmış bir bıçak kullanarak kapakları çıkarın. Silikon borunun tam oturması için kapağın deliğini genişletin.
- Silikon borunun iç çapı 0,5 mm'dir, asimetriktir ve iki peristaltik pompa durdurucu ile daha uzun (20 cm) ve daha kısa (12 cm) kenarlara ayrılmıştır. Bir tüpü bir erkek luer kilit bağlayıcısına ve tüpün karşı tarafındaki kapağa bağlayarak biyoçip başına her simetriden iki tüpü birleştirin. Ayrıca biyoçip başına dört rezervuar monte edin.
NOT: Hortumları ve rezervuarları önceden hazırlayın ve kullanmadan önce otoklavlayarak sterilize edin. Silikon borunun sınırlı bir ömrü olduğundan, 3-5 deneyden sonra boruyu değiştirin. Uyuşturucu testi gibi belirli araştırma ilgi alanları için, her deney için yeni borular hazırlanması tavsiye edilir. Bu protokolün birçok adımı paralel olarak çalışır; Şekil 2'de gösterildiği gibi bir günde gerçekleştirilen farklı adımları vurgulayan genel bakış şekline bakın.
Şekil 1: Çip üzerinde bağırsak modelinin şematik gösterimi. (A) Biyoçip enine kesitsel bir görünümde sunulmaktadır. (B) Tüm biyoçipin yanı sıra düz, çıkarılabilir PET membranın boyutu görülebilir. Dişi luer kilit boyutu portları dahil olmak üzere üst haznenin toplam hacmi, alt hazne için sırasıyla 290 μL ve 270 μL'dir. (C) Bağırsak biyoçipinin şematik bir bileşimi, farklılaşmış bağışıklık hücreleri ve bir mukus tabakası dahil olmak üzere villus benzeri ve kript benzeri yapılara benzeyen üç boyutlu büyüme epiteli görülebilir. PET zarın diğer tarafı endotelyal bir tek tabaka ile kaplıdır. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: Model oluşturma zaman çizelgesine ve deney düzeneğine şematik genel bakış. Bu şekil, sunulan protokolün şematik genel bakışını göstermektedir. Hücrelerin tohumlanması ve LPS ile epitel zorluğu gibi önemli prosedürler oklarla gösterilir. Kısaltmalar: HUVEC'ler = insan umbilikal venöz endotel hücreleri; LPS = lipopolisakkarit. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
2. Biyoçip sterilizasyonu
- 15 cm çapında,% 70 denatüre edilmemiş etanol ile steril bir cam Petri kabını doldurun. Biyoçipi, biyoçipin tüm portları tamamen etanol çözeltisi ile kaplanacak şekilde içine yerleştirin.
- Bağlantı noktası başına iki kez, çipin tüm odalarından 1 mL p etanol çekin. Oda sıcaklığında (RT) 45-60 dakika inkübe edin.
NOT: Biyoçipin içinde hava sıkışmadığından emin olun. Bu noktadan itibaren biyoçip sistemine hava girmemeli ve boşluklar sıvı ile dolu kalmalıdır. - Petri kabındaki etanolü çıkarın ve tüm portlar tamamen kaplanana kadar steril çift damıtılmış su (ddH2O) ile değiştirin. Yine, port başına iki kez, biyoçip boşluğundan 1 mL ddH2O çekin. Petri kabındaki ddH2O'yu yenileyin ve işlemi tekrarlayın.
- Petri kabındaki tüm sıvıyı çıkarın. Bundan sonra, tamamen sterilize edilmiş biyoçipleri, steril bir ortamın dışında olduklarında kapalı Petri kabının içinde saklayın. Biyoçip içindeki sıvının buharlaşmasını azaltmak için Petri kabına 2-5 mL ddH2O'luk küçük bir rezervuar (örneğin, 50 mL'lik bir tüpün kapağı) ekleyin.
NOT: Biyoçipler kullanılıncaya kadar steril bir ortamda muhafaza edildiği takdirde 3 gün öncesine kadar sterilize edilebilir. Bu, tek bir günde iş yükünde esneklik sağlar.
3. HUVEC'in hasadı ve tohumlanması
NOT: İnsan umbilikal venöz endotel hücreleri (HUVEC'ler),10'dan önce yayınlandığı gibi umbilikal kordlardan izole edildi.
- HUVEC'leri tohumlamadan önce, zarı insan kollajen IV ile kaplayın. Bunun için, Dulbecco'nun magnezyum ve kalsiyum (PBS +/+) içeren fosfat tamponlu tuzlu suyunda bir kollajen stok çözeltisinin (Tablo 1) 1:100 oranında seyreltilmesini hazırlayın. İlgili hazneye 350 μL seyreltilmiş stok çözeltisi ekleyin. RT'de 5 dakika inkübe edin.
NOT: Biyoçipi steril başlıkta tutuyorsanız, fazla ortamı toplamak için altına steril bir doku yerleştirmenizi öneririz. - Kalan kollajen ve asetik asidi yıkamak için tüm odaları 350 μL PBS +/+ ile iki kez yıkayın. Daha sonra, her odaya 350 μL endotel hücre büyümesi (EC) -ortamı ekleyin.
NOT: Buradan biyoçipler hücre tohumlaması için hazırdır ve kullanılana kadar 37 °C'de saklanabilir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bu temsili sonuçlar, çip üzerinde bağırsak modelinin farklı doku katmanlarını gösterir. Protokol bölüm 11'de tarif edildiği gibi immünofloresan lekelidirler. Görüntüler epifloresan veya konfokal floresan mikroskobu ile z-yığınları olarak çekildi ve ortogonal bir projeksiyona işlendi. Mikroskobik kurulum ve yazılım hakkında ayrıntılar için Malzeme Tablosuna bakın. Şekil 5, HUVEC'ler ve makrofajlardan oluşan bariyer oluşturan bir endotelyal tek tabaka olan vasküler tabakayı gö...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Sunulan protokol, çip üzerinde immünokompetan bir bağırsak modeli oluşturmak için gerekli adımları detaylandırır. İmmünofloresan mikroskobu, sitokin ve metabolit analizi, akış sitometrisi, protein ve genetik analiz ve geçirgenlik ölçümü gibi spesifik teknikleri ve olası okuma yöntemlerini tanımladık.
Açıklanan model,daha önce tarif edildiği gibi, mukus salgılayan, emici, enteroendokrin ve Paneth hücre benzeri popülasyonların yönlerini temsil eden 3 boyutlu bi...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
M.R., Dynamic42 GmbH'nin CEO'sudur ve şirkette hisse sahibidir. A.S.M., Dynamic 42 GmbH'nin bilimsel danışmanıdır ve şirkette hisse sahibidir.
Teşekkürler
Çalışma, İşbirlikçi Araştırma Merkezi PolyTarget 1278 (proje numarası 316213987) tarafından V.D.W. ve A.S.M. A.F. ve A.S.M. ayrıca Almanya'nın Mükemmeliyet Stratejisi - EXC 2051 - Project-ID 690 390713860. kapsamında "Balance of the Microverse" Mükemmeliyet Kümesi tarafından sağlanan mali desteği de kabul eder. Astrid Tannert ve Jena Biyofotonik ve Görüntüleme Laboratuvarı'na (JBIL) konfokal lazer tarama mikroskobu ZEISS LSM980'e erişim sağladıkları için teşekkür ederiz. Şekil 1C ve Şekil 2 Biorender.com ile oluşturulmuştur.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 96 oyuklu plaka siyah, şeffaf alt | Thermo Fisher | 10000631 | Sarf Malzemeleri |
| Asetik asit | Roth | 3738.4 | Kimyasallar |
| Alexa Fluor 488 AffiniPure, eşek, anti-fare IgG (H + L) | Jackson İmmüno Araştırma | 715-545-150 | İkincil Antikor Vasküler Boyama ve Epitel Boyama |
| Alexa Fluor 647 AffiniPure, eşek, tavşan önleyici IgG (H + L) | Jackson Immuno Research | 711-605-152 | İkincil Antikor Epitel Boyama |
| Alexa Fluor 647, eşek, tavşan önleyici IgG (H + L) | Thermo Fisher Scientific, Invitrogen | A31573 | İkincil Antikor Vasküler Boyama |
| Axiocam ERc5s kamera | Zeiss | 426540-9901-000 | Teknik ekipman |
| Bazal Orta MV, fenol kırmızısı içermeyen | Promocell | C-22225 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Biyoçip | Dinamik 42 | BC002 | Mikroakışkan sarf malzemeleri |
| BSA fraksiyon V | Gibco | 15260-037 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| C2BBe1 (Caco-2 klonu) | ATCC | CRL-2102 | Epitel Hücre Kaynağı |
| Kloroform | Sigma | C2432 | Kimyasallar |
| CO2 İnkübatör | Heracell | 150i | Teknik ekipman |
| İnsan plasentasından kollajen IV | Sigma-Aldrich | C5533 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Lameller (24 x 40 mm; # 1.5) | Menzel-Glä ser | 15747592 | Sarf Malzemeleri |
| Cy3 AffiniPure, eşek, anti-keçi IgG (H + L) | Jackson Immuno Research | 705-165-147 | İkincil Antikor Vasküler Boyama |
| Cy3 AffiniPure, eşek, sıçan önleyici IgG (H + L) | Jackson Immuno Research | 712-165-150 | İkincil Antikor Epitel Boyama |
| Descosept PUR | Dr.Schuhmacher | 00-323-100 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| DMEM yüksek glikoz | Gibco | 41965-062 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| DMEM fenol kırmızısı olmayan yüksek glikoz | Gibco | 31053028 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| DPBS (-/-) | Gibco | 14190-169 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| DPBS (+/+) | Gibco | 14040-133 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| EDTA çözeltisi | Invitrogen | 15575-038 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Endotel Hücre Büyüme Ortamı | Promocell | C-22020 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Endotel Hücre Büyüme Ortamı ek karışımı | Promocell | C-39225 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Etanol %96, denatüre edilmemiş | Nordbrand-Nordhausen | 410 | Kimyasallar |
| Fetal sığır Serumu | invitrojen | 10270106 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Floresein izotiyosiyanat (FITC)-dekstran (3-5 kDa) | Sigma Aldrich | FD4-100MG | Kimyasallar |
| Floresan Montaj Ortamı | Dako | S3023 | Kimyasallar |
| Gentamisin (10mg/mL) | Sigma Aldrich | G1272 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| GlutaMAX Takviyesi (100x) | Gibco | 35050061 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Histopaque | Sigma-Aldrich | 10771 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Hoechst (bisBenzimid) H33342 | Sigma-Aldrich | 14533 | Epitel boyama |
| Holotransferrin (5mg/mL) Transferrin, Holo, İnsan Plazma | Kırlangıç | 616397 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| İnsan rekombinant GM-CSF | Peprotech | 300-30 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| İnsan rekombinant M-CSF | Peprotech | 300-25 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Aydınlatma cihazı | Zeiss | HXP 120 C | Floresan Mikroskobu Kurulumu |
| Lazer Tarama Mikroskobu | Zeiss | CLSM980 | Floresan Mikroskobu Kurulumu |
| Lidokain hidroklorür | Sigma-Aldrich | L5647 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Lipopolisakkarit (LPS) | Sigma | L2630 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Loftex Mendil | Loftex | 1250115 | Sarf Malzemeleri |
| Düşük bağlantı tüpleri (PS, 5 mL) | Falcon | 352052 | Sarf malzemeleri |
| Üst kapak için Luer adaptörü (M) | Mo Bi Tec | M3003 | Mikroakışkan sarf malzemeleri |
| Erkek mini luer tapaları, dörtlü sıra, PP, opak | Mikroakışkan yonga atölyesi | 09-0556-0336-09 | Mikroakışkan sarf malzemeleri |
| MEM Esansiyel Olmayan Amino Asitler Çözeltisi | Gibco | 11140 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Metanol | Roth | 8388.2 | Kimyasallar |
| Mikroskobu | Zeiss | Axio Observer 5 | Floresan Mikroskobu Kurulum |
| Mikroskop slaytları | Menzel | MZ-0002 | Sarf Malzemeleri |
| Monoklonal, fare, anti-insan CD68 Antikor ( KP1) | Thermo Fisher Scientific, Invitrogen | 14-0688-82 | Primer Antikor Vasküler Boyama |
| Monoklonal, sıçan, anti-insan E-Cadherin antikoru (DECMA-1) | Sigma-Aldrich, Millipore | MABT26 | Primer Antikor Epitelyal Boyama |
| Multiskan Go plaka okuyucu | Thermo Fisher | 51119300 | Teknik ekipman |
| Normal eşek serumu | Biozol | LIN-END9010-10 | Kimyasal |
| Optik Kesit | Zeiss | ApoTome | Floresan Mikroskobu Kurulumu |
| Penisilin-Streptomisin (10.000 U/mL) | Gibco | 15140-122 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Fişler | Cole Parmer | GZ-45555-56 | Mikroakışkan sarf malzemeleri |
| Poliklonal, keçi, anti-insan VE-Cadherin Antikoru | R& D Systems | AF938 | Primer Antikor Vasküler Boyama |
| Poliklonal, tavşan, anti-insan Von Willebrand Faktör Antikoru | Dako | A0082 | Primer Antikor Vasküler Boyama |
| Poliklonal, tavşan, anti-insan ZO-1 antikoru | Thermo Fisher Scientific, Invitrogen | 61-7300 | Primer Antikor Epitelyal Boyama |
| Güç Kaynağı Mikroskobu | Zeiss | Eplax Vp232 | Floresan Mikroskop Kurulumu |
| Primovert mikroskop | Zeiss | 415510-1101-000 | Teknik ekipman |
| Reglo ICC peristaltik pompa | Ismatec | ISM4412 | Teknik ekipman |
| SAHA (Vorinostat) | Sigma Aldrich | SML0061-25MG | Kimyasallar |
| Saponin | Fluka | 47036 | Kimyasallar |
| S-Monovette, 7.5 mL Z-Jel | Sarstedt | 01.1602 | Sarf malzemeleri |
| S-Monovette, 9.0 mL K3E | Sarstedt | 02.1066.001 | Sarf malzemeleri |
| Sodyum Piruvat | Gibco | 11360-088 | Hücre kültürü sarf malzemeleri |
| Tankı 4.5 mL | ChipShop | 10000079 | Mikroakışkan sarf malzemeleri |
| Tripan mavi lekesi %0.4Invitrogen | T10282 | Hücre kültürü sarf malzemeleri | |
| Tripsin | Gibco 11538876 | Hücre kültürü sarf malzemeleri | |
| Boru | Dinamik 42 | ST001 | Mikroakışkan sarf malzemeleri |
| Cımbız (Prä zisionspinzette DUMONT abgewinkelt Inox08, 5/45, 0,06 mm) | Roth | K343.1 | Sarf malzemeleri |
| Buğday Tohumu Aglütininin (WGA) | Thermo Fisher Scientific, Invitrogen | W32464 | Epitel Boyama |
| X-VIVO 15 | Lonza | BE02-060F | Hücre kültürü sarf malzemeleri, Hematopoetik hücre ortamı |
| Zellkultur Multiwell Platten, 24 Kuyu, steril | Greiner Bio-One | 662 160 | Sarf malzemeleri |
| Zellkultur Multiwell Platten, 6 Kuyulu, steril | Greiner Bio-One | 657 160 | Sarf Malzemeleri |
| Zen Blue Yazılımı | Zeiss | Sürüm 3.7 | Mikroskopi Yazılımı |
Kaynaklar
- Alonso-Roman, R., et al. Organ-on-chip models for infectious disease research. Nat Microbiol. 9 (4), 891-904 (2024).
- Fahrner, R., Groger, M., Settmacher, U., Mosig, A. S. Functional integration of natural killer cells in a microfluidically perfused liver on-a-chip model. BMC Res Notes. 16 (1), 285(2023).
- Raasch, M., et al. Microfluidically supported biochip design for culture of endothelial cell layers with improved perfusion conditions. Biofabrication. 7 (1), 015013(2015).
- Deinhardt-Emmer, S., et al. Co-infection with Staphylococcus aureus after primary influenza virus infection leads to damage of the endothelium in a human alveolus-on-a-chip model. Biofabrication. 12 (2), 025012(2020).
- Kaden, T., et al. Generation & characterization of expandable human liver sinusoidal endothelial cells and their application to assess hepatotoxicity in an advanced in vitro liver model. Toxicology. 483, 153374(2023).
- Maurer, M., et al. A three-dimensional immunocompetent intestine-on-chip model as in vitro platform for functional and microbial interaction studies. Biomaterials. 220, 119396(2019).
- Hoang, T. N. M., et al. Invasive aspergillosis-on-chip: A quantitative treatment study of human aspergillus fumigatus infection. Biomaterials. 283, 121420(2022).
- Kaden, T., et al. Modeling of intravenous caspofungin administration using an intestine-on-chip reveals altered Candida albicans microcolonies and pathogenicity. Biomaterials. 307, 122525(2024).
- Shah, P., et al. A microfluidics-based in vitro model of the gastrointestinal human-microbe interface. Nat Commun. 7, 11535(2016).
- Jaffe, E. A., Nachman, R. L., Becker, C. G., Minick, C. R. Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins. Identification by morphologic and immunologic criteria. J Clin Invest. 52 (11), 2745-2756 (1973).
- Mosig, S., et al. Different functions of monocyte subsets in familial hypercholesterolemia: Potential function of cd14+ cd16+ monocytes in detoxification of oxidized ldl. FASEB J. 23 (3), 866-874 (2009).
- Peterson, M., Mooseker, M. Characterization of the enterocyte-like brush border cytoskeieton of the c2bbe clones of the human intestinal cell line, caco-2. J Cell Sci. 102, Pt 3 581-600 (1992).
- Shin, W., Hinojosa, C. D., Ingber, D. E., Kim, H. J. Human intestinal morphogenesis controlled by transepithelial morphogen gradient and flow-dependent physical cues in a microengineered gut-on-a-chip. iScience. 15, 391-406 (2019).
- Kim, H. J., Ingber, D. E. Gut-on-a-chip microenvironment induces human intestinal cells to undergo villus differentiation. Integr Biol (Camb). 5 (9), 1130-1140 (2013).
- Kim, H. J., Huh, D., Hamilton, G., Ingber, D. E. Human gut-on-a-chip inhabited by microbial flora that experiences intestinal peristalsis-like motions and flow. Lab Chip. 12 (12), 2165-2174 (2012).
- Karra, N., Fernandes, J., James, J., Swindle, E. J., Morgan, H. The effect of membrane properties on cell growth in an 'airway barrier on a chip'. Organs-on-a-Chip. 5, 10025(2023).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
