Bu protokol, bir sıçan poşit modeli oluşturma yöntemini açıklar. İleal poş modeli, mikrocerrahi teknikler kullanılarak ileal poş-anal anastomoz (IPAA) ameliyatı yapılarak oluşturuldu. Ameliyattan sonra, sıçan 4 gün boyunca% 4 dekstran sülfat sodyum (DSS) ile tedavi edildi.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Dekstran sülfat sodyum kullanılarak proktokolektomi ve ileal poş-anal anastomoz sonrası bir sıçan kroşe modeli
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Ülseratif kolit (ÜK), tüm kolon ve rektumu etkileyen, nüks ve düzelme şeklinde seyreden, yaşam boyu morbiditeye neden olan kronik immün aracılı bir hastalıktır. Tıbbi tedavi etkisiz olduğunda, özellikle masif gastrointestinal kanama, perforasyon, toksik megakolon veya karsinogenez vakalarında, cerrahi UC'yi tedavi etmek için son savunma hattı haline gelir. Total kolorektal rezeksiyon ve ileal poş-anal anastomoz (IPAA) uzun süreli tedavi için en iyi şansı sunar. Pouchitis ameliyat sonrası en sık görülen ve en sıkıntılı komplikasyondur. Bu araştırmada, IPAA cerrahisi ile deneysel sıçanlarda bir ileal poş modeli oluşturmak için mikrocerrahi kullanılmıştır. Daha sonra, ileal kesenin dekstran sülfat sodyum (DSS) ile iltihaplanmasını indükleyerek sürekli bir sıçan poşit modeli oluşturulur. Sıçan poşitinin başarılı bir şekilde kurulması, postoperatif genel durum, kilo, yiyecek ve su alımı, dışkı verilerinin yanı sıra kese dokusu patolojisi, immünohistokimya ve inflamatuar faktör analizi ile doğrulanmıştır. Bu deneysel hayvan poşeit modeli, durumun patogenezini ve tedavisini incelemek için bir temel sağlar.
Giriş
Torba iti, ileal poşu etkileyen spesifik olmayan bir iltihaptır ve ülseratif kolitli (UC) bireylerde total proktokolektomi ve ileal poş-anal anastomoz (IPAA) sonrası yaygın bir komplikasyondur1,2,3. Bu durum% 50'ye kadar nispeten yüksek bir görülme oranına sahiptir ve ishal, karın ağrısı, dışkı kan kaybı ve ateş gibi çeşitli klinik belirtilere neden olabilir. Bazı araştırmacılar kese florasındaki bir değişimin bağışıklık aktivasyonunu ve ardından iltihabı tetikleyebileceğine inansa da, pouchitis'in kesin nedeni belirsizliğini korumaktadır
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm hayvan deneyleri, Tianjin Tıp Üniversitesi Genel Hastanesi etik kurullarının politikalarına uygun olarak gerçekleştirildi. Bu çalışma için 9 ila 12 haftalık yaşları arasında, yaklaşık 320-360 g ağırlığında erkek Sprague-Dawley sıçanları kullanıldı. Kullanılan reaktiflerin ve ekipmanın ayrıntıları Malzeme Tablosunda listelenmiştir.
1. Hayvan seçimi ve bakımı
- Sağlıklı bir hayvan seçin (vücut ağırlığı ~ 220-240 g).
- Spesifik patojen içermeyen (SPF)15 seviye kriterlerini karşıladıklarından ve yeterli havalandırma (saatte 8 ila 12 h....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
İleal poş modeli sıçanların kuruluş sonrası genel durum değerlendirmesi
Operatör IPAA cerrahi öğrenme eğrisini geçtikten sonra, sıçanlar ameliyatı iyi tolere etti, cerrahi süre 192.94 dakika ± 27.15 dakika idi ve daha az postoperatif komplikasyon meydana geldi. Ameliyat sonrası erken dönemde, sıçanlar diyet alımında bir azalma yaşadılar, ancak ameliyat öncesi iştahları ameliyattan 10 gün ila 14 gün sonra geri geldi. Ameliyat sonrası erken aktivite biraz azaldı ve gözlerden ve burundan belirgin sekresy.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Ülseratif kolit (ÜK), tekrarlayan epigastrik ağrı, ishal ve mukuslu kanlı dışkı ile karakterize kronik bir bağırsak iltihabıdır. Öncelikle rektumu etkiler ve ilerleyen kolonu değişen derecelerde tutabilir. Cerrahi, UC 17,18,19'un yönetiminde çok önemli bir rol oynar. Parks ve ark.20'nin 1978 yılında altere olmuş dokuyu çıkarmak ve barsak sürekliliğini sağlamak için ileal .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Hiç kimse.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Susuz etanol | Tianjin Fengchuan Kimyasal Reaktif Technology Co, Ltd | Çin | Hematoksin-eozin Boyama |
| Dekstran Sülfat Sodyum & nbsp; | Evet | 60316ES76 | Kese iltihabını indüklemek için kullanılır |
| Formaldehit çözeltisi | Tianjin Zhiyuan Reaktif Şirketi | Çin | Hematoksin-eozin Boyama |
| Gazlı Bez | Jiangxi Zhonggan Tıbbi Ekipman Şirketi | Çin | Hayvan mikrocerrahisi için kullanılır |
| Hematoksilen | Pekin Zhongshan Jinqiao Şirketi | Çin | Hematoksin-eozin Boyama |
| İnterferon ve gama; Algılama reaktif kiti | Bulut klonu | SEA049Ra | Enflamatuar faktörlerin tespiti |
| İnterlökin-10 tespit kiti | Bulut klonu | SEA056Ra | Enflamatuar faktörlerin tespiti |
| İnterlökin-17 tespit kiti | Bulut klonu | SEA063Ra | Enflamatuar faktörlerin tespiti |
| İnterlökin-6 tespit kiti | Bulut klonu | SEA079Ra | Enflamatuar faktörlerin tespiti |
| Iodophor | Tangpai Medical Equipment Co., Ltd | Çin | Hayvan mikrocerrahisi için kullanılır |
| Mikroskobik manipülasyon aletleri | Aesculap | Almanya | Hayvan mikrocerrahisi için kullanılır |
| Occludin | abcam | ab216327 | İmmünohistokimyasal test |
| Dikiş iğnesi | Yangzhou Fuda Medical Equipment Co., Ltd | Çin | Hayvan mikrocerrahisi için kullanılır |
| tümör nekroz faktörü ve alfa; Algılama reaktif kiti | Bulut klonu | SEA133Ra | Enflamatuar faktörlerin saptanması |
| İki kişilik binoküler cerrahi mikroskop | OPTON | Almanya | Hayvan mikrocerrahisi için kullanılır |
| Ksilen | Tianjin Yingda Nadir ve Değerli Reaktif Fabrikası | Çin | Hematoksin-eozin Boyama |
Kaynaklar
- Yang, M. L., Brar, M. S., Kennedy, E. D., De Buck Van Overstraeten, A. Laparoscopic versus transanal IPAA for ulcerative colitis: A patient-centered treatment trade-off study. Dis Colon Rectum. 67 (1), 107-113 (2024).
- Aktas, M. K., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
