Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Marmosetlerde yumurtalık döngüsündeki evreyi belirlemek için kan örneklemesi ve hormon ölçümü

2.3K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/66691

⸱

5 Temmuz 2024

 , 
1National Center for Child Health and Development

Bu makalede

Özet

Bu protokol, yumurtalık döngüsü aşamasını belirlemek için progesteron/estradiol ve koryonik gonadotropin düzeylerini ölçmek için kan ve idrar örneklemesini tanımlar. Hormon seviyeleri, yumurtlamanın zamanlamasını tahmin etmek ve belirlemek için kullanılır ve yumurtalık döngüsünü ve oosit büyümesini düzenlemek için hormonlar enjekte edilir.

Özet

Ortak marmosetler küçük Yeni Dünya maymunlarıdır. Biyolojik mekanizmalarının çoğu insanlarınkine benzer olduğundan, marmosetler sinirbilim, rejeneratif tıp ve geliştirme gibi çeşitli alanlarda tıbbi ve insan biyolojisi araştırmaları için potansiyel olarak yararlıdır. Bununla birlikte, birçok temel deney ve prosedür için yöntemleri tanımlayan literatür eksikliği vardır. Burada, marmosetlerdeki seks hormonlarının (progesteron, estradiol ve koryonik gonadotropin) seviyelerini belirlemek için ayrıntılı yöntemler açıklanmaktadır. Bu hormonların ölçümü, marmosetlerde tipik olarak 26-30 gün olan yumurtalık döngüsündeki aşamanın tahmin edilmesini sağlar; Oositlerin/zigotların doğru zaman noktasında toplanması ve genetiği değiştirilmiş marmosetlerin üretilmesi için konakçı dişilerin hazırlanması için doğru belirleme şarttır.

Ek olarak, seks hormonu seviyelerinin ölçümü endokrinoloji, etoloji, erken gelişim ve üreme biyolojisi çalışmaları için yararlıdır. Bu protokol, femoral venden kan örneklemesi, hormon ölçümü için plazmanın ayrılması, idrar ve plazma kullanılarak koryonik gonadotropin seviyelerinin ölçülmesi, döngüyü kısaltmak ve senkronize etmek için bir prostaglandin F2α analoğu enjeksiyonları kullanılarak yumurtalık döngüsünün sıfırlanması ve folikül uyarıcı hormon ve koryonik gonadotropin enjekte ederek foliküler büyüme ve yumurtlamanın teşvik edilmesi yöntemlerinin ayrıntılı bir tanımını sağlar. Bu protokoller kullanılarak, oositlerin / zigotların zamanında toplanması için yumurtalık döngüsündeki aşamalar belirlenebilir.

Giriş

Ortak marmoset (Callithrix jacchus), insanlarınkine benzer birçok özelliğe sahip küçük bir Yeni Dünya maymunudur ve yumurtalık döngüsünün süresi 26-30 gündür 1,2. Genetiği değiştirilmiş marmosetlerin erken gelişimi ve üretimi üzerine yapılan çalışmalar, yumurtalık döngüsünün belirli aşamalarında oosit ve zigotların toplanmasını gerektirir. Bu nedenle, evrenin doğru bir şekilde belirlenmesi çok önemlidir ve progesteron (P4) ve estradiol (E2) hormonlarının kan seviyelerinin ölçülmesiyle tahmin edilebilir2,3. Bu hormonlar, implantasyon için gerekli olan endometriyal büyümeyi teşvik eder. P4, yumurtlamadan hemen sonra yumurtalıklarda oluşan korpus luteumdan üretilir. E2, beyindeki hipotalamus-hipofiz kompleksinden folikül uyarıcı hormona (FSH) yanıt olarak yumurtalık folikülleri tarafından salgılanır. Folikül olgunlaştıkça E2 seviyeleri artar ve yumurtlamadan önce zirve yapar3. Yüksek E2 seviyeleri, insanlarda hipotalamus-hipofiz kompleksi yoluyla luteinize edici hormonun (LH) darbeli salınımına neden olur; bu LH dalgalanması yumurtlamaya neden olur. Bununla birlikte, marmosetlerde, LH geni evrim sırasında dejenerasyona uğramıştır ve yumurtlama, bunun yerine LH'lere benzer bir yapıya sahip olan koryonik gonadotropinin (CG) hipofiz bezinden salınmasıyla indüklenir 4,5.

Yumurtalık döngüsü hormon enjeksiyonları ile kontrol edilebilir. İnsanlarda FSH enjeksiyonları, yumurtalık FSH reseptörlerine etki eder ve östrojen sentezini ve folikül büyümesini teşvik etmek için kullanılır6. Foliküler fazın sonunda LH'nin yerine insan CG (hCG) enjeksiyonu, insanlarda yumurtlamayı uyarmak için kullanılır7. CG enjeksiyonları ayrıca insan infertilitesini tedavi etmek için de kullanılır, çünkü CG hamileliğin erken döneminde korpus luteumu uyarır ve bu da P4 üretiminin artmasına neden olur. Prostaglandin F2α (PGF2α) enjeksiyonları yumurtalık döngüsünüsıfırlar 8. Evcil sığırlarda, PGF2α enjeksiyonu, luteal fazı kısaltmak ve üreme yönetimi için kızgınlık döngüsünü senkronize etmek için kullanılır.

Marmosetler ve insanlar benzer biyolojik mekanizmalara sahip olsalar da, onları ideal model hayvanlar haline getirseler de, sık kullanılan birçok teknik için temel yöntemleri tanımlayan literatür eksikliği vardır. Kan örneklemesi en sık kullanılan tekniklerden biridir 9,10,11,12. Ancak, yeni başlayanlar bazen damarı bulmakta zorlanırlar. Bu nedenle, bu çalışmada femoral ven bölgesinin anatomik analizleri yapılmıştır. Anatomik gözlemlere dayanarak, bu protokol femoral üçgenin proksimal bölgesini veniponksiyon için kolay bir bölge olarak tanıtır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Marmosetleri içeren tüm yöntemler yüksek etik ve refah standartları kullandı ve Ulusal Çocuk Sağlığı ve Gelişimi Merkezi'ndeki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylandı. Burada kullanılan hayvanlar, günde 12 saat ışık alan tek barınaklı veya çift barınaklı (bir dişi ve bir erkek) idi.

1. Femoral venin kan örneklemesi

  1. 1 mL'lik bir şırınga hazırlayın (kısa tipin kullanımı kolaydır) 25 G'lık bir iğne bıçak tarafı yukarı bakacak şekilde takılı. Kanın tıkanmasını önlemek için, şırıngaya 200 μL seyreltilmemiş heparin sodyum çözeltisi çekerek şırıngayı heparine edin. Şırınganın içini birkaç kez yukarı ve aşağı çekerek eşit şekilde kaplayın; Ardından, heparin çözeltisini şırıngadan çıkarın.
    NOT: Genellikle yeni bir şırıngaya geçmek gerektiğinden, birkaç ek heparinize şırınga hazırlayın.
  2. Emici pamuklu ve alkollü bezler hazırlayın. Kan örneklemesi için marmosetin yerleştirileceği alanı aydınlatmak için ayarlanabilir bir lamba açın.
  3. Piyasada bulunan emniyet cihazını (420 x 85 x 85 mm, Şekil 1A) hazırlayın (ayrıntılar için Malzeme Tablosuna bakın). Cihazın içine bir marmoset yerleştirmek için, marmosetleri sabitleyen sünger kayış ile tutma kısmını açın. Marmoseti yukarı bakacak şekilde emniyet cihazına yerleştirin.
    NOT: Marmosetler genellikle kısıtlama cihazlarında sakindir, bu da kısıtlama alıştırma veya eğitim ihtiyacını ortadan kaldırabilir.
  4. Marmoseti yakalayın; marmoseti silindirik parçaya yerleştirin; ve sünger kayışı aşağı bastırarak sabitleyin. Kanın alınacağı bacağı üst üste yerleştirin (Şekil 1A). Baskın olmayan elinizi kullanarak bacakları tutun; Sabitlemek için orta ve yüzük parmaklarını her bacağın içine yerleştirin ve diğer parmakları sabitlemek için her bacağın dışına yerleştirin.
    NOT: Marmosetleri çekerken ısırık eldivenleri önerilir. Bir kısıtlama cihazı yoksa, anestezi altında veya marmoseti kısıtlayan başka bir kişiyle kan alma işlemini gerçekleştirin.
  5. Femoral venin uyluğun tabanına yakın bir yerde görünüp görünmediğini kontrol edin. Değilse, nabız atan arteri bulmak için palpe edin ve damarın içinden geçip geçmediğini kontrol etmek için bir dönüm noktası olarak kullanın (Şekil 1B-D).
    NOT: Görünürlüğü artırmak için masa aydınlatması ve saç tıraşı önerilir. Görünürlük, alkollü bezlerle ovuşturularak da artırılabilir. Üçgen içindeki lenf bezleri genellikle damara yakın bulunur ve toplardamar olarak koyu mavi bir renk gösterir. Bunların nasıl ayırt edileceği Temsili Sonuçlar bölümünde açıklanmıştır.
  6. Alkollü bir bez kullanarak delinme bölgesini dezenfekte edin. İğne bıçağını yukarı bakacak şekilde 15°-20° açıyla yerleştirin. Kan alma sırasında iğnenin kan damarından kaymasını önlemek için, örneğin şırıngayı tutan eli diğer yandan dinlendirerek sabitleyin.
  7. Negatif basınç uygulamak için pistonu yavaşça geri çekin (Şekil 1E). İğne ucunu ileri doğru itin. Şırıngaya kan girdikten sonra, gerekli hacim (500-700 μL) toplanana kadar iğne ucunun konumunu koruyun.
    1. Şırıngaya kan girmediğinde, delinme bölgesini değiştirin. İğneyi çekerken kan çıkarsa, delinme bölgesine 3 dakika boyunca baskı uygulayarak kanamayı durdurun. Kanamayı durdurduktan sonra damar delinmesini yeniden başlatın.
    2. Çekme işlemi sırasında şırıngaya çekilen kanın akışı durursa, iğne ucunu yavaşça ileri doğru itin ve ardından kan damarını bulmak için geri çekin. Bu, şırıngaya kan akışını geri yükleyebilir. Değilse, iğneyi dışarı çekin ve yeni bir şırınga kullanarak damar delme işlemi yapın.
      NOT: Aynı taraftan kan almanın zor olduğu durumlarda uyluğu diğer bacağınızda kullanın.
  8. Küçük parmağınızı kullanarak delinme bölgesine hafifçe bastırırken iğneyi dikkatlice dışarı çekin. Ardından, emici bir pamuklu çubuk kullanarak, kanamayı durdurmak için delinme bölgesine hemen 3 dakika boyunca baskı uygulayın. Kan ve heparini karıştırmak için şırıngayı ters çevirin.
    NOT: Arteriyel kan alındığında soğurken daha uzun süre (5 dakika) basınç uygulayın ve bazen ölümcül bir sonuçla sonuçlanabilen hematom oluşumunu önlemek için kanamanın durduğunu dikkatlice onaylayın.
  9. Kanamanın durduğunu onayladıktan sonra, sünger kayışı çıkarın, bir elinizle hayvanın belini tutun ve hayvanı, hayvanın koltuk altını arkadan başka bir elinizle tutabilecek şekilde döndürün.
  10. Marmoseti kafesine geri koyun. Stresi azaltmak ve tekrarlanan kan örneklemesini kolaylaştırmak için marmosete en sevdiği yiyecekleri (örneğin bisküvi, marshmallow veya pandispanya) sağlayın. Ara sıra hematom oluşumunu kontrol edin.
    NOT: Hematom erken evrede bulunduğunda, hematomun ilerlemesini önlemek için basınçlı bir bandaj uygulayın. Uzun bir süre sonra bulunduğunda, femoral arterin bağlanması ve kan transfüzyonu ile hematomun cerrahi olarak çıkarılması gerekebilir 9,13.
  11. Hemolizi önlemek için iğneyi şırıngadan çıkarın. Ardından, toplanan kanı 1.5 mL'lik bir mikrotüpün iç duvarı boyunca yavaşça dışarı atın.
    NOT: Toplanan kan, P4 / E2 seviyelerini ölçmek için plazma ayrılmasından önce 24 saate kadar 4 °C'de saklanabilir.

2. Plazmanın ayrılması ve hormonal seviyelerin belirlenmesi

  1. Kanı 1.5 mL'lik bir tüpte 1.100 × g'da 4 ° C'de5 dakika santrifüj edin.
  2. Ayrılan plazmayı (süpernatant) 1.5 mL'lik tüpten yeni bir tüpe / bardağa aktarın ve kan hücrelerinin (tortu) dahil edilmesini dikkatlice kaçının.
  3. P4 ve E2 seviyelerini bir ELISA kiti veya otomatik analizör kullanarak ölçün. Plazma miktarı otomatik analizör için yeterli değilse, bir numune seyreltme çözeltisi kullanın.
    NOT: Otomatik analizör kullanılarak yapılan ölçüm için, sadece bir P4 seviyesini belirlemek için >175 μL plazma gereklidir ve hem P4 hem de E2'yi belirlemek için >250 μL plazma gereklidir.

3. Yumurtlama ve hamileliği tespit etmek için idrar CG ölçümü

NOT: Marmosetlerdeki CG seviyeleri, hem yumurtlama hem de hamilelik için bir immünokromatografik kit testi kullanılarak ölçülebilir. Yumurtlama durumunda yumurtlamadan 0-2 gün önce olumlu bir sonuç alınabilir. Hamilelik durumunda, hamileliğin 15-20. gününden yaklaşık 100. gününe kadar pozitif bir sonuç tespit edilir. Test az miktarda (90 μL) idrar gerektirir (bir damla idrar ~ 30 μL'dir).

  1. Tepsi yöntemi: Aynı kafeste ikiden fazla hayvan varsa, hedef marmoseti (veya diğer hayvanları) bir gün önce başka bir kafese taşıyın. Aydınlatmadan bir gece önce veya daha önce kafesin altına temiz bir tepsi yerleştirin. Gece boyunca mesaneden idrar boşaltılmaz. Bu nedenle, idrar genellikle aydınlatmadan kısa bir süre sonra mesaneden salınır.
    NOT: Sabahları aydınlatmadan önce odaya girmek, kohortun uyku döngüsünü bozabilir. İdrar genellikle ışıktan yaklaşık 30 dakika sonra toplanabilir.
  2. Sıkma yöntemi: Yıkanmış tepsileri idrar toplama için hazırlayın. Marmosetin mesanesini bulduktan sonra, parmaklarınızın tüm uzunluğunu kullanarak önden ve her iki yandan dikkatlice sıkın (Şekil 1F). Sabahları odayı aydınlatmadan hemen önce idrarı toplayın.
    NOT: Mesanede idrar olmaması nedeniyle idrar toplama işlemi başarısız olursa bir süre bekleyin ve tekrar deneyin. Aşırı güç kullanmamaya dikkat edin çünkü bu hayvana zarar verir.
  3. Toplandıktan hemen sonra, idrar örneğini immünokromatografik test kitinin kuyusuna yerleştirin. Sonucu, üreticinin talimatlarına göre 10 dakika sonra okuyun.

4. Oosit, zigot ve embriyoların toplanması için yumurtalık döngüsü aşamasının kontrolü ve belirlenmesi

  1. Germinal vezikül (GV) yumurtalıklardan oosit toplanması
    1. Luteal fazın sonunda yumurtalık döngüsünü sıfırlamak için 150 μL salin14 (Şekil 2) içinde seyreltilmiş 3 μL 0.263 mg / mL kloprostenol (sentetik bir PGF2α analogu) intramüsküler enjeksiyonu uygulayın (ör., luteal fazın başlamasından ≥ 10 gün sonra).
      NOT: Seyreltilmiş kloprostenol +4 ° C'de en az birkaç hafta stabil kaldığından, seyreltilmiş çözeltinin daha büyük bir hacimde yapılması uygun olabilir.
    2. Ertesi gün (1. gün), P4 seviyesinin düştüğünü kontrol ederek foliküler fazın başladığını onaylayın.
      NOT: Kloprostenol enjeksiyonunun 24 saat içinde P4 seviyelerini (genellikle <10 ng / mL) önemli ölçüde azalttığı bildirilmiştir3.
    3. 1. günden itibaren, FSH'yi (25 IU, kas içi) her 2 günde bir toplam 5x (1, 3, 5, 7 ve 9. günler) enjekte edin. 10. günde, öğleden sonra hCG (75 IU, kas içi) enjekte edin.
    4. Literatüre göre anestezi altında foliküler aspirasyon ile 11. günde yumurtalıklardan GV'leri toplayın15,16.
      NOT: Bazen yumurtlama beklenenden daha erken gerçekleşir. Bu nedenle, CG seviyelerinin 8. günden itibaren kontrol edilmesi önerilir. CG testi pozitifse, bu gün GV toplaması yapın.
  2. Metafaz II (MII) oositleri, zigotları ve erken embriyoların toplanması
    1. Adım 4.1.1'de açıklandığı gibi cloprostenol kullanarak yumurtalık döngüsünü sıfırlayın.
    2. Ertesi gün (1. gün), P4 seviyesinin düştüğünü kontrol ederek foliküler fazın başladığını onaylayın.
    3. Zigot ve embriyoların toplanması için, 6. günden itibaren çiftleşme için dişi marmosetleri erkek marmosetlerle birlikte barındırın.
    4. 7. günden itibaren, kadınların kan P4 / E2 seviyelerini ve idrar CG seviyelerini kontrol edin. CG'nin saptanması, birkaç gün içinde (genellikle ertesi gün) yumurtlamanın bir göstergesidir. Bir önceki güne göre P4 düzeylerinin arttığı ve E2 düzeylerinin azaldığı gün, yumurta kanallarındanMII oositleri veya embriyonik gün 0 (E0) zigotları toplayın 17,18.
    5. Embriyo toplama için, literatürde anlatıldığı gibi, hedeflenen aşamaya bağlı olarak uygun zaman noktasında yumurta kanallarından (E1-E3, 1-8 hücreli)17,18 veya uterustan (E5-E10, 8 hücreli blastosist)19,20,21,22 yıkama işlemi gerçekleştirin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Bu çalışmada kullanılan hayvanlarla ilgili detaylar Tablo 1'de listelenmiştir.

Femoral venin anatomik analizleri
Femoral venin anatomik analizleri, ötenazi uygulanan 2 yaşında bir erkek ortak marmoset (I 7713M) kullanılarak yapıldı. Femoral venler ve arterler femoral üçgende bulunur. Femoral üçgen, karın duvarı ile uyluk kasları arasındaki sınırlarda oluşur (Şekil 1B-D). Uyluğun tabanında, ters...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Damarın yerinin belirlenmesi kan alımında en kritik adımdır. Anatomik gözlemlere dayanarak, bu protokol femoral üçgendeki proksimal alanı marmosetlerde kan alımı için kolay bir bölge olarak tanıtmaktadır. Bu bölge kullanılarak büyük bir damardan kan örneği alınması kolaylıkla gerçekleştirilebilir. Bununla birlikte, bu protokolü kullansanız bile, bazen bir arterde yaralanma meydana gelir. Bir arteri yaralarken, hematomu önlemek için >5 dakika boyunca basınç uygulayarak kanamanın tamamen d...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların beyan edebilecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Chunshen Shen, Hiroko Akutsu, Fumiyo Sugiki, Yuuna Hashimoto, Hina Naritomi, Yuuki Sakamoto ve Mikiko Horigome'ye bu protokolün oluşturulmasında ve marmosetlerin günlük bakımında verdikleri destek için teşekkür ederiz; El yazması hakkındaki yorumları için Takayuki Mineshige; Yukiko Abe ve Aiba laboratuvarı üyeleri, zigot toplama tekniklerini paylaştıkları için; CIEA, 40 yılı aşkın bir süredir geliştirdikleri marmosetler, konutlar ve deneyler hakkındaki bilgileri paylaştığı için. Bu araştırma, JP19gm6310010, JP20gm6310010, JP21gm6310010 ve JP22gm6310010 (AMED), JPMJPR228B (JST), 20H05764, 20H03177 ve 22K18356 (KAKENHI) hibe numaraları altında AMED, JST ve KAKENHI tarafından desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
AIA-360Tosoh Corporation0019945Hormon ölçümü (P4/E2)
AIA-PACK SEYRELTICI KONSANTRESITosoh Corporation0020956Hormon ölçümü (P4/E2)
AIA-PACK SUBSTRAT SETI IITosoh Corporation0020968Hormon ölçümü (P4/E2)
AIA-PACK YIKAMA KONSANTRESİTosoh Corporation0020955Hormon ölçümü (P4/ E2)
CMS-1CLEA JaponyaMarmoset gıda
EstrumateMSD Hayvan SağlığıPGF2alpha analog (cloprostenol)
Gonal-f Deri Altı Enjeksiyon 150Merck Biopharma Co., Ltd.
Kas içi enjeksiyon için FSH Gonatropin 1000ASKA Pharmaceutical Co., Ltd.872413hCG
Heparin sodyum enjeksiyon çözeltisi 5.000 birim / 5 mLMochida Pharmaceutical Co., Ltd.224122458Kan alma
Ortak Marmoset Koryonik Gonadotropinin Tespiti için İmmünokromatografik Test Kiti (Çift Denetleyici)CLEA Japan, Inc.CG seviyesinin belirlenmesi
Düşük profilli çift kollu mikroskop aydınlatması LPF-SDSHIOKAZE GIKENKan alma için masa lambası
Marmoset kan alma kısıtlama cihazıJIC JaponyaJM-1006Kan alma
http://www.jic-japan.jp/prd/marmoset/prd016.html
e-posta: vi@jic-japan.jp
Metacam %0,05Boehringer Ingelheim Hayvan Sağlığı Japan Co., ve Tic. Ltd. ŞtiHematom tedavisi
Örnek Kabı, 3 mL, PS, Tosoh 360 ve AIA-600 için II, 1000/TorbaKüre Bilimsel110913Hormon ölçümü (P4/E2)
ST AIA-PACK iE2Tosoh Corporation0025224Hormon ölçümü (P4/E2)
ST AIA-PACK iE2 KALIBRATÖR SETİTosoh Corporation0025324Hormon ölçümü (P4/E2)
ST AIA-PACK iE2 NUMUNE SEYRELTME ÇÖZELTİSİTosoh Corporation0025524Hormon ölçümü (P4/E2)
ST AIA-PACK PROGIIITosoh Corporation0025240Hormon ölçümü (P4/E2)
ST AIA-PACK PROGIII KALIBRATÖR SETITosoh Corporation0025340Hormon ölçümü (P4/E2)
ST AIA-PACK PROGIII NUMUNE SEYRELTME ÇÖZELTİSİTosoh Corporation  0025540Hormon ölçümü (P4/E2)
25 G (0,50 x 25 mm) iğneli şırıngaTERUMOSS-01T2525Kan alma
Tensolvet 5.000 IE jel.Dechra İlaç14033492Hematom tedavisi
TOSOH ÇOKLU KONTROL SETITosoh Şirketi0015965Hormon ölçümü (P4/E2)

Kaynaklar

  1. Kholkute, S. D. Plasma progesterone levels throughout the ovarian cycle of the common marmoset (Callithrix jacchus). Primates. 25 (1), 123-126 (1984).
  2. Harding, R. D., Hulme, M. J., Lunn, S. F., Henderson, C., Aitken, R. J. Plasma progesterone levels throughout the ovarian cycle of the common marmoset (Callithrix jacchus). J Med Primatol. 11 (1), 43-51 (1982).
  3. Gilchrist, R. B., Wicherek, M., Heistermann, M., Nayudu, P. L., Hodges, J. K. Changes in follicle-stimulating hormone and follicle populations during the ovarian cycle of the common marmoset. Biol Reprod. 64 (1), 127-135 (2001).
  4. Gromoll, J., et al. A new subclass of the luteinizing hormone/chorionic gonadotropin receptor lacking exon 10 messenger RNA in the New World monkey (Platyrrhini) lineage. Biol Reprod. 69 (1), 75-80 (2003).
  5. Müller, T., et al. Chorionic gonadotrophin beta subunit mRNA but not luteinising hormone beta subunit mRNA is expressed in the pituitary of the common marmoset (Callithrix jacchus). J Mol Endocrinol. 32 (1), 115-128 (2004).
  6. Pacchiarotti, A., et al. Ovarian stimulation protocol in IVF: an up-to-date review of the literature. Curr Pharm Biotechnol. 17 (4), 303-315 (2016).
  7. Ezcurra, D., Humaidan, P. A review of luteinising hormone and human chorionic gonadotropin when used in assisted reproductive technology. Reprod Biol Endocrinol. 12, 95(2014).
  8. Lopez-Gatius, F. Ovarian response to prostaglandin F(2alpha) in lactating dairy cows: A clinical update. J Reprod Dev. 68 (2), 104-109 (2022).
  9. Marini, R. P., Wachtman, L. M., Tardif, S. D., Mansfield, K., Fox, J. G. The Common Marmoset in Captivity and Biomedical Research. , Elsevier Science. (2018).
  10. Schultz-Darken, N. J. Sample collection and restraint techniques used for common marmosets (Callithrix jacchus). Comp Med. 53 (4), 360-363 (2003).
  11. Hopper, J. Common marmosets. Handbook of Exotic Pet. Kubik, M. , 27-42 (2020).
  12. Harlow, C. R., Hearn, J. P., Hodges, J. K. Ovulation in the marmoset monkey: endocrinology, prediction and detection. J Endocrinol. 103 (1), 17-24 (1984).
  13. Ludlage, E., Mansfield, K. Clinical care and diseases of the common marmoset (Callithrix jacchus). Comp Med. 53 (4), 369-382 (2003).
  14. Summers, P. M., Wennink, C. J., Hodges, J. K. Cloprostenol-induced luteolysis in the marmoset monkey (Callithrix jacchus). J Reprod Fertil. 73 (1), 133-138 (1985).
  15. Takahashi, T., et al. Birth of healthy offspring following ICSI in in vitro-matured common marmoset (Callithrix jacchus) oocytes. PLoS One. 9 (4), e95560(2014).
  16. Tomioka, I., Takahashi, T., Shimada, A., Yoshioka, K., Sasaki, E. Birth of common marmoset (Callithrix jacchus) offspring derived from in vitro-matured oocytes in chemically defined medium. Theriogenology. 78 (7), 1487-1493 (2012).
  17. Abe, Y., et al. Efficient marmoset genome engineering by autologous embryo transfer and CRISPR/Cas9 technology. Sci Rep. 11 (1), 20234(2021).
  18. Summers, P. M., Shephard, A. M., Taylor, C. T., Hearn, J. P. The effects of cryopreservation and transfer on embryonic development in the common marmoset monkey, Callithrix jacchus. J Reprod Fertil. 79 (1), 241-250 (1987).
  19. Thomson, J. A., Kalishman, J., Hearn, J. P. Nonsurgical uterine stage preimplantation embryo collection from the common marmoset. J Med Primatol. 23 (6), 333-336 (1994).
  20. Hanazawa, K., et al. Minimally invasive transabdominal collection of preimplantation embryos from the common marmoset monkey (Callithrix jacchus). Theriogenology. 78 (4), 811-816 (2012).
  21. Ishibashi, H., et al. Efficient embryo transfer in the common marmoset monkey (Callithrix jacchus) with a reduced transfer volume: a non-surgical approach with cryopreserved late-stage embryos. Biol Reprod. 88 (5), 115(2013).
  22. Kishimoto, K., et al. Establishment of novel common marmoset embryonic stem cell lines under various conditions. Stem Cell Res. 53, 102252(2021).
  23. Diehl, K. H., et al. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).
  24. Daskalaki, M., Drummer, C., Behr, R., Heistermann, M. The use of alfaxalone for short-term anesthesia can confound serum progesterone measurements in the common marmoset: a case report. Primate Biol. 9 (2), 23-28 (2022).
  25. Hodges, J. K., Cottingham, P. G., Summers, P. M., Liang, Y. N. Controlled ovulation in the marmoset monkey (Callithrix jacchus) with human chorionic gonadotropin following prostaglandin-induced luteal regression. Fertil Steril. 48 (2), 299-305 (1987).
  26. Barrett, J., Abbott, D. H., George, L. M. Extension of reproductive suppression by pheromonal cues in subordinate female marmoset monkeys, Callithrix jacchus. J Reprod Fertil. 90 (2), 411-418 (1990).
  27. Barrett, J., Abbott, D. H., George, L. M. Sensory cues and the suppression of reproduction in subordinate female marmoset monkeys, Callithrix jacchus. J Reprod Fertil. 97 (1), 301-310 (1993).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Marmoset ÜremesiSeks Hormon SeviyeleriProgesteron ÖlçümüEstradiol ÖlçümüKorionik GonadotropinFemoral Ven ÖrneklemesiGenetiği Değiştirilmiş Marmosetler
Marmosetlerde yumurtalık döngüsündeki evreyi belirlemek için kan örneklemesi ve hormon ölçümü
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.