Burada, geçici MCA oklüzyonu sırasında kan akışını değerlendirmek için lazer Doppler probunun, sıçanlar ve fareler için uygun bir periorbital konum olan orta serebral arterin (MCA) distal bölgesi üzerine kafatasına yerleştirilmesini içeren minimal invaziv bir cerrahi prosedür gösterilmektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Kemirgen Modellerinde Orta Serebral Arter Oklüzyonu Öncesi Serebral Kan Akışının İzlenmesi için Bir Lazer Doppler Probunun Periorbital Yerleştirilmesi
Bu makalede
Düzeltme bildirimi
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Özet
Özet
Orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO), kemirgenlerde iskemik inmenin preklinik modellemesi için altın standart yöntemdir. Bununla birlikte, başarılı oklüzyon en yetenekli cerrahi eller tarafından bile garanti edilmez. Hatalar öncelikle filament doğru derinliğe yerleştirilmediğinde ortaya çıkar ve ölüme neden olabilecek enfarktüs veya damar delinmesi durumlarını içerir. Lazer Doppler akış metrisi (LDF), MCAO prosedürü sırasında bölgesel serebral kan akışı (CBF) hakkında gerçek zamanlı geri bildirim sağlayan güvenilir bir tekniktir. Burada, hem farelerde hem de sıçanlarda CBF ölçümü için bir lazer Doppler probunun periorbital yerleştirilmesi için hızlı bir teknik gösteriyoruz. Gerekçemiz, LDF uygulamasını basitleştirmek ve daha iyi cerrahi güvenilirlik için yaygın kullanımı teşvik etmekti. Teknik, kafatası inceltme ve özel ekipman ihtiyacını ortadan kaldırır, dorsal yerleştirme yerine periorbital bölgeye yerleştirme ile verimliliği ve benimseme kolaylığını artırır. Burada açıklanan protokol, cerrahi öncesi hazırlıkları, periorbital Doppler prob yerleştirmeyi ve ameliyat sonrası bakımı kapsar. Temsili sonuçlar, komplikasyonlara yol açan başarısız filament yerleştirme örnekleriyle birlikte, başarılı MCAO ameliyatlarını gösteren temsili LDF izlemelerinin yanı sıra prosedürel unsurların görsel tasvirlerini içerir. Protokol, uygun filament yerleşimini onaylamada LDF'yi gösterir ve alternatif yöntemlere kıyasla basitleştirilmiş bir prosedür sunar.
Giriş
Orta serebral arter oklüzyonu (MCAO) yöntemi, 1986'da sıçanlara uygulanmak üzere bilim camiasınatanıtıldığından beri kemirgenlerde yaygın olarak kullanılmaktadır 1 1990'da açıklanan Longa adaptasyonu2 ve hemen ardındanfareler için adaptasyonlar 3. Longa'nın yayınında açıklanmamış olmasına rağmen, filament yerleşimini doğrulamak için lazer Doppler akış ölçer (LDF) sinyalinin kullanılması kısa süre sonra literatürde tanımlanmıştır4. MCAO prosedürü sırasında LDF istihdamı literatürde belirgin bir şekilde yer almaktadır, ancak mevcut İnme Klini....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu protokolü göstermek için yetişkin fareler ve sıçanlar kullanıldı (25 g, C57BL / 6J, Jackson Laboratories; 250 g, Sprague Dawley, Envigo). Hayvan işleme ve deneysel işlemler, Arizona Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi'ne, ulusal yasalara uygun olarak ve laboratuvar hayvanı bakımı ilkelerine göre ve onay ile gerçekleştirilmiştir11. Sıçanlar ve fareler, yiyecek ve su ad libitum ile 12 saatlik bir aydınlık / karanlık programı (7-7 pm) ile barındırıldı.
1. Ameliyat öncesi hazırlık
NOT: Tipik olarak, bir kemirgende....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Lazer Doppler probunun MCA bölgesine yerleştirilmesi, Şekil 1'de görsel olarak tasvir edilmiştir, vaskülatür piktografını sunar ve sagital ve dorsal perspektiflerden görsel bir kılavuz görevi görür. Şekil 2 , farede lazer Doppler probu yerleştirme ve sonuçları için kritik adımları özetlemektedir. Şekil 2A , sonraki lazer Doppler probu yerleştirilmesi için gerekli olan dikey insizyon bölgesinde kesikli bir işaretleme ile uyuşturulmuş.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
MCAO, kemirgenlerde serebral arter oklüzyonu ve reperfüzyonunu modellemek için altın standart prosedürdür ve insan inme patofizyolojisini taklit etmek için kemirgenlerde fokal iskemi indüksiyonunu sağlayan klinik öncesi inme araştırmalarının temel taşı olmuştur. Cerrahlar arası ve hatta cerrah içi önemli değişkenliğe sahip titiz bir cerrahi prosedürdür. LDF uygulamasının değişkenliği azalttığına dair bir kanıt bulunmamakla birlikte, bazı tasarımlarda bilimsel titizliği ve çalışma sonuçla.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.
Teşekkürler
Bu araştırma NINDS 1R41NS124450 tarafından finanse edilmiştir. Biyorender: KT26JWLYF6
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| kavisli yaylı makas | Castroviejo | 1501710 | |
| forseps #5 | Güzel bilim araçları | 11250-20 | |
| forseps #5/45 | Güzel bilim araçları | 1151-35 | |
| Forcepts Koter aracı | Conmed | M18019-01 | |
| Laboratuvar bandı | Fisherbrand Etiketleme Bandı | 15-950 | |
| Lazer Doppler Monitörü | Moore Aletleri | MOORVMS-LDF | |
| LDF yazılımı | Windows veya moorSOFT | NA | |
| Fare makası | Philips Norelco | MG7910 | |
| Periflux System 4000, prob 407 | Perimed | ekipmanı artık mevcut | |
| streç film | Glad | press n seal | |
| Fare makası | oster | A5 veya benzeri | |
| Küçük kemirgen anestezisi | JD Tıbbi | özel sipariş | |
| küçük makas | excelta | 362 Sissors veya benzeri | |
| Problu sıcaklık izleme sistemi | Physitemp | TCAT-2AC Kontrol Cihazı |
Kaynaklar
- Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area. Japanese J Stroke. 20 (1), 84-91 (1986).
- Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
Düzeltme
Formal Correction: Erratum: Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models
Posted by JoVE Editors on 3/18/2025. Citeable Link.
This corrects the article 10.3791/66839
