Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Anemi Tedavisi için Geleneksel Bir Bitkisel Şurubun Mekanizmasının Karaciğer Metabolomikleri Kullanılarak Değerlendirilmesi

669 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/67225

⸱

30 Ağustos 2024

 ,  ,  , 
1School of Basic Medical Sciences, Hubei University of Chinese Medicine, 2School of Chinese Materia Medica, Guangdong Pharmaceutical University, 3Xinjiang Uygur Pharmaceutical Co., Ltd.

Bu makalede

Özet

Bu çalışma öncelikle Shi-Liu-Bu-Xue Şurubu'nun anemi tedavisinde etkinliğinin araştırılmasında karaciğer metabolomiklerinin uygulanmasını tanıtmaktadır.

Özet

Tanınmış bir Uygur tıbbı olan Shi-Liu-Bu-Xue Şurubu (SLBXS), 20 yılı aşkın bir süredir Çin'de anemiyi tedavi etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, anemi tedavisinde etkinliğinin altında yatan mekanizmalar belirsizliğini korumaktadır. Bu çalışmada, anemi tedavisinde SLBXS'nin potansiyel düzenleyici mekanizmalarını belirlemek için öncelikle karaciğer metabolomikleri kullanılmıştır. Asetilfenilhidrazin ile indüklenen bir fare anemi modelinde SLBXS'nin etki mekanizmasını karakterize etmek için karaciğer metabolomik profillemesi yapıldı. SLBXS'nin karaciğer indeksini, beyaz kan hücresi sayısını ve trombosit sayısını azalttığı, kırmızı kan hücresi sayısını, hemoglobin ve hematokrit seviyelerini artırdığı gösterilmiştir. Western blotting kullanılarak doğrulama için çekirdek hedefler seçildi. SLBXS, anemik farelerin karaciğer dokularındaki HIF-1α, NOS3, VEGFA ve GLA proteinlerinin aşağı regülasyonu ile gösterildiği gibi, esas olarak galaktoz metabolizmasını ve HIF-1 sinyal yolunu düzenleyerek anemi üzerinde önemli bir terapötik etki göstermiştir. Bu çalışma, anemi tedavisinde SLBXS uygulaması ile karaciğer metabolizmasının potansiyel düzenleyici mekanizmalarını açıklığa kavuşturmaktadır.

Giriş

Anemi, dünya nüfusunun %25'ini ve her yaştan insanı, özellikle ergenleri ve hamile kadınları etkileyen acil ve yaygın bir küresel sağlık sorunudur 1,2,3. Erken doğum ve anne ölümleri riskinin artmasıyla ilişkilidir ve fiziksel gelişimsel bozukluklara ve bozulmuş kardiyovasküler performansa yol açabilir4. Bu durum aynı zamanda ergenlerin sağlık durumunu olumsuz yönde etkileyerek enfeksiyonlara ve kalp yetmezliğine neden olabilir5. Mevcut tedaviler öncelikle kan transfüzyonu, demir takviyesi ve eritropoietin tedavisini içerir. Bununla birlikte, bu tedavilerin anafilaksi, gastrointestinal rahatsızlık, aşırı demir yükü ve kurdeşen gibi dezavantajları ve olumsuz yan etkileri vardır1. Bu nedenle, anemiyi tedavi etmek için daha az yan etkiye sahip etkili ilaçların belirlenmesi çok önemlidir.

Uygur tıbbı da dahil olmak üzere geleneksel Çin tıbbı, çok bileşenli formülasyonlar, çok hedefli etkiler, çok bağlantılı etkileşimler ve çok faktörlü hastalıkların önlenmesinde ve tedavisinde daha az yan etki gibi çeşitli avantajlar sunar. Shi-Liu-Bu-Xue Şurubu (SLBXS), Uygur tıbbında kan tonikleri ve kan üretimi için kullanılan dikkate değer bir geleneksel ajandır. Karaciğer ısısını azaltabilen kan düzenleyici bir ilaç olarak kabul edilmektedir ve anemi tedavisi için azınlık ilaçlarının klinik kullanımı için kılavuzlara dahil edilmiştir. Ayrıca Çin Devlet Gıda ve İlaç Dairesi (Z20026094)6,7,8 tarafından lisanslanmıştır. Son yirmi yılda, SLBXS, anemi ile ilgili durumları tedavi etmek için Çin'de yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, anemiyi tedavi etmek için potansiyel mekanizmaları bilinmemektedir ve daha fazla araştırma gerektirmektedir. Biyolojik sistemlerin hastalığa, ilaç müdahalelerine veya çevresel koşullara dinamik metabolik tepkilerini inceleyen metabolomikler9, dış uyaranları takiben biyolojik örneklerdeki metabolik biyobelirteçlerdeki değişiklikleri değerlendirerek geleneksel Çin tıbbının etki mekanizmalarını aydınlatmak için giderek daha fazla kullanılmaktadır 9,10.

Bu doğrultuda, anemi tedavisinde SLBXS'nin altında yatan terapötik mekanizmaları belirlemek için bu çalışmada karaciğer metabolomik yaklaşımı benimsenmiştir. İlk olarak, asetilfenilhidrazin (APH) ile indüklenen bir anemi fare modeli kuruldu. Daha sonra, endojen metabolitlerin metabolik yolakları, SLBXS uygulamasını takiben gaz kromatografisi-kütle spektrometresi (GC-MS) ve çok değişkenli veri yöntemleri ile karaciğer metabolomikleri kullanılarak araştırıldı. Son olarak, SLBXS'nin anti-anemik etkilerini ve moleküler mekanizmalarını aydınlatmak için anahtar hedefler deneysel olarak analiz edildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm deneysel prosedürler Hubei Çin Tıbbı Üniversitesi (HBUCMS201912015) Laboratuvar Hayvanları Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır. Erkek C57BL/6 fareler (ağırlık 20-22 g), bağıl nem oranı %50-%60 ve sıcaklığı 22 °C ± 2 °C olan belirli bir patojen içermeyen odaya yerleştirildi, 12 saat aydınlık/12 saat karanlık döngüsüne tabi tutuldu ve yiyecek ve suya ücretsiz erişim sağlandı. Deney başlamadan önce, tüm farelerin çevreye alışması için bir hafta izin verildi. Fareler rastgele olarak aşağıdaki dört gruptan birine atandı (n = 12): kontrol, model, Fu-Fang-E-Jiao Şurubu (FFEJS, pozitif bir ilaç, intragastrik olarak 7.8 mL / kg'da uygulanır) ve SLBXS (intragastrik olarak 11.7 mL / kg'da uygulanır). Kontrol ve model gruplarındaki fareler eşit miktarda salin aldı. Tüm gruplardaki farelere, 2 hafta boyunca günde bir kez karşılık gelen ilaçların intragastrik uygulaması verildi. Bu çalışmada kullanılan ilaçların, reaktiflerin ve ekipmanların ayrıntıları Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

1. Farelerde anemi modelinin kurulması

  1. Elektronik terazi kullanarak 2 g asetilfenilhidrazin (APH) tartın ve 150 mL'lik bir behere aktarın. 100 mL tuzlu su ekleyin ve APH tamamen eriyene kadar bir cam çubukla karıştırın.
  2. Sırasıyla 200 mg / kg, 100 mg / kg ve 100 mg /kg'lık dozlarda 1., 4. ve 7. günlerde adım 1.1'de hazırlandığıgibi% 2 APH enjekte ederek anemi fare modelini oluşturun11.
    NOT: İlk günden başlayarak, FFEJS (7.8 mL / kg) ve SLBXS (11.7 mL / kg) gruplarındaki farelere 2 hafta boyunca günde bir kez intragastrik uygulama verildi. Kontrol ve model gruplarındaki farelere 2 hafta boyunca günde bir kez eşit miktarda salin verildi.

2. Karaciğer indeksinin belirlenmesi

  1. Deneyin sonunda, her fareyi elektronik bir terazi kullanarak tartın.
  2. % 2 izofluran soluyarak fareleri uyuşturun. Hiperemik ve çıkıntılı hale getirmek için farelerin göz küresini sıkın. Göz küresini forseps ile hızlı bir şekilde çıkarın ve kanı heparinize numune tüplerinde toplayın.
  3. Anestezi uygulanmış fareleri adım 2.2'den bir cerrahi manipülasyon plakasına sabitleyin.
  4. Bir neşter ile karnın orta hattı boyunca tam bir kesi yapın. Sağlam karaciğer dokusunu12 dikkatlice inceleyin ve izole edin, ardından ağırlığını elektronik bir terazi ile ölçün.
    NOT: Her farenin karaciğer indeksi aşağıdaki formül kullanılarak hesaplanır: Karaciğer indeksi = karaciğer ağırlığı/vücut ağırlığı.

3. Hematolojik analiz

  1. Kanın pıhtılaşmasını önlemek için heparinize kan örneğini içeren tüpü adım 2.2'den itibaren hafifçe sallayın.
  2. İğneye tamamen daldırıldığından emin olmak için kan örneğini enjeksiyon iğnesinin altına yerleştirin.
  3. Tam otomatik hemosit analizörü kullanarak kırmızı kan hücresi sayımı (RBC), hematokrit (HCT), beyaz kan hücresi sayımı (WBC), hemoglobin (HGB) seviyeleri ve trombosit sayısını (PLT) ölçmek için Otomatik Algıla düğmesine tıklayın.

4. Karaciğer metabolomik çalışması

  1. Karaciğer örneği hazırlama
    1. Adım 2.4'ten karaciğer dokusu örneklerini (50 mg) 1 mL önceden soğutulmuş metanol ile homojenize edin. Çökeltiyi çıkarmak için 18.759 x g'da 4 ° C'de 10 dakika santrifüjleyin.
    2. 200 μL süpernatantı bir pipet kullanarak bir numune şişesine aktarın ve 2 saat boyunca 35 °C'de dondurarak kurutucuda vakumla kurutun.
    3. Kurutulmuş numuneleri 30 ° C'de 90 dakika boyunca piridin içinde 40 μL 40 mg / mL metoksiyamin hidroklorür çözeltisi ile reaksiyona sokun. Daha sonra,% 1 Trimetilklorosilan (TMCS) ile 80 μL N-Metil-N- (trimetilsilil) trifloroasetamid (MSTFA) ekleyin ve 37 ° C'de 60 dakika inkübe edin.
    4. Türevlendirme reaksiyonunu sonlandırmak için şişeye 10 μL n-heksan ekleyin.
  2. Karaciğer metabolik analizi
    1. Türetilmiş numuneleri (1 μL) bir GC-MS sistemi kullanarak analiz edin. Türevleri bir DB-5MS kılcal kolon (30 m × 0,25 mm × 0,25 μm) kullanarak ayırın.
      NOT: Fırın sıcaklık programı koşulları şu şekilde ayarlanmıştır: 60 dakika boyunca 1 °C; 10 °C/dk hızında 325 °C'ye yükseltin ve 10 dakika koruyun. Enjektör, iyon kaynağı ve MS sıcaklıkları sırasıyla 250 °C, 230 °C ve 150 °C'ye ayarlandı. Taşıyıcı gaz olarak 1.1 mL/dk akış hızında helyum (%99.999) kullanıldı ve ayrılma oranı 10:1 olarak ayarlandı. 70 eV'lik bir elektron ışını enerjisi ve 5.9 dakikalık bir çözücü gecikme süresi kullanıldı.
  3. Veri işleme ve analizi
    1. Uyumlu MassHunter yazılımını kullanarak ham GC-MS verilerini alın ve dönüştürün.
    2. Otomatik Kütle Spektral Evrişim Çözme ve Tanımlama Sistemi (AMDIS) aracını kullanarak spektral analiz yapın12.
    3. NIST ve HMDB veritabanlarını kullanarak tüm metabolitleri tanımlayın (bkz.
    4. Kısmi en küçük kareler-diskriminant analizi (PLS-DA), t-testleri, yol analizi ve ağ analizi12 için verileri MetaboAnalyst aracına aktarın.

5. Batı lekesi analizi

  1. Fare karaciğer dokusundan toplam proteinleri çıkarın
    1. Adım 2.4'ten 50 mg karaciğer dokusu ve 250 μL hücre lizatını 1 mL'lik bir cam homojenizatöre ekleyin ve 5 dakika buz üzerinde öğütün.
    2. Karaciğer dokusu homojenatını adım 5.1.1'den bir pipetleyici kullanarak 1.5 mL'lik bir mikrosantrifüj tüpüne aktarın ve 4 ° C'de 10 dakika boyunca 18.759 x g'da santrifüjleyin. Ardından süpernatanı bir pipetleyici kullanarak 1,5 mL'lik yeni bir tüpe aktarın.
  2. Protein konsantrasyonlarını belirleyin ve protein numunelerini ön işleme tabi tutun
    1. Adım 5.1.2'den 2 μL süpernatan, 18 μL PBS ve 180 μL BCA çalışma çözeltisine 96 oyuklu bir mikrotitre plakasına8 ekleyin.
    2. Plakayı bir osilatör üzerinde 30 saniye boyunca salın, 37 ° C'de 30 dakika bekletin ve bir mikroplaka okuyucu kullanarak 562 nm'de absorbansı belirleyin.
  3. SDS-PAGE kullanarak toplam proteinleri ayırın, poliviniliden florür membranlarına aktarın ve% 5 yağsız süt8 ile bloke edin.
  4. Adım 5.3'ten itibaren membranları HIF-1α (1:1000), VEGFA (1:1000), GLA (1:1000), NOS3 (1:1000) ve β-aktin (1:5000) karşı primer antikorlarla gece boyunca 4 ° C'de inkübe edin.
  5. Adım 5.4'teki membranları bir antikor inkübasyon kutusuna yerleştirin, 10 mL TBST ekleyin ve bağlanmamış primer antikorları her biri 5 dakika boyunca üç kez yıkamak için oda sıcaklığında 111 x g'da yatay olarak çalkalayın.
  6. Adım 5.5'ten itibaren her bir zara 200 μL keçi tavşan önleyici IgG (H + L) -HRP (1:1000) ekleyin ve oda sıcaklığında 2 saat inkübe edin. Ardından, bağlanmamış ikincil antikoru (keçi anti-tavşan IgG (H + L)-HRP) yıkamak için adım 5.5'i tekrarlayın.
  7. Adım 5.6'dan itibaren her bir zarın yüzeyine 200 μL ultra yüksek hassasiyetli ECL kemilüminesan solüsyonu ekleyin ve otomatik bir kemilüminesans görüntüleme analiz sistemi kullanarak protein bantlarını hemen görselleştirin.

6. İstatistiksel analiz

  1. Tek yönlü ANOVA ile istatistiksel ve grafik yazılımı kullanarak verileri analiz edin ve ardından Tukey testi yapın.
  2. Sonuçları ortalama ± standart sapma (SD) olarak sunun ve 0,05 < bir P değerini istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Anemi fare modelinin başarılı bir şekilde kurulduğunu doğrulamak ve SLBXS'nin anemi üzerindeki etkisini analiz etmek için önce karaciğer indeksi ve hematolojik parametreler araştırıldı. Şekil 1 , model grubunun kontrol grubuna kıyasla kırmızı kan hücresi sayısı (RBC), hemoglobin (HGB) ve hematokritte (HCT) önemli bir azalma (P < 0.01) sergilediğini göstermektedir. Tersine, model grubundaki karaciğer indeksi, beyaz kan hücresi sayısı (WBC) ve trombosit sayısı (PLT) belirgin şekild...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Anemi, dünya çapında, özellikle gelişmekte olan ülkelerde birçok insanı etkileyen yaygın bir durumdur1. Çin'de hastalar, aneminin belirti ve semptomlarını hafifletmek için sıklıkla Uygur tıbbı da dahil olmak üzere geleneksel Çin tıbbını kullanırlar. SLBXS, klinik uygulamada uzun yıllardır kullanılan bir Uygur tıbbıdır; Bununla birlikte, anemiye karşı kesin etki mekanizması tam olarak anlaşılamamıştır13. Bu çalışmada, metabolomik analiz yolu...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma, Azınlık Bilim ve Teknoloji Yetenekleri için Özel Eğitim Planı, Sincan Uygur Özerk Bölgesi Doğa Bilimleri Vakfı (2020D03021), Hubei Çin Tıbbı Üniversitesi Geleneksel Çin Tıbbı için Anahtar Program Fonları (2022ZZXZ004) ve Tianshan İnovasyon Ekibi Programı (2020D14030) tarafından desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Asetilfenilhidrazin ŞangayAladdin Biyokimyasal Technology Co., Ltd.
Otomatik kemilüminesans görüntüleme analiz sistemiShanghai Tanon Life Science Co., Ltd.Tanon-5200
Bikinkoninik asit test kitiThermoFisher ScientificQPBCA-1KT
Kılcal kolonAgilent J & W Scientific, Agilent Teknolojileri, Inc.DB-5MS
Hücre lizis tamponuP0013
Klorotrimetilsilan ŞangayAladdin Biyokimyasal Technology Co., Ltd.
Elektronik teraziMettler-Toledo International Inc.ME203E
Elektronik teraziMettler-Toledo International Inc.LE104E
Fu-Fang-E-Jiao ŞurubuDong E Jiao Co., Ltd.
Tam otomatik hemosit analizörüShenzhen Mindray Hayvan Bakım Teknolojisi Co., Ltd.IDEXX ProCyte Dx
GC-MS sistemiAgilent Teknolojileri, Inc.7890B-5977B 
GLA birincil antikoruBioworld TechnologyBS77041
Cam homojenizatörShanghai Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-013001
Cam çubuk Şangay Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-003904
GraphPad Prizma yazılımı  GraphPad, La JollaSürüm 9.0
Heparinize numune tüpleriChangde BKMAM Biotechnology Co., Ltd.B-ACT1P5
HIF-1 ve alfa; birincil antikorBioworld TechnologyBS3514
HMDB veritabanıhttp://www.hmdb.ca/&
İzofluranHebei Jindafu İlaç Co., Ltd.
Erkek C57BL / 6 fareLiaoning Changsheng Biyoteknoloji Co, LtdHayır. SCXK [Liao] 2015-0001
MassHunterAgilent Teknolojileri A.Ş.B.08.00
MetaboAnalyst 5.0https://www.metaboanalyst.ca/—
Metoksiamin hidroklorürŞangay Aladdin Biyokimyasal Technology Co., Ltd.
n-hekzanŞangay Aladdin Biyokimyasal Technology Co., Ltd.
NIST veritabanıhttp://webbook.nist.gov/chemistry/—
NOS3 birincil antikorBioworld TechnologyBS3625
Piridin ŞangayAladdin Biyokimyasal Technology Co., Ltd.
TuzluBIOSHARP YAŞAM BİLİMLERİ
Shi-Liu-Bu-Xue ŞurubuXinjiang Uygur Pharmaceutical Co., Ltd.
Cerrahi manipülasyon plakasıDIXSGZK-JPB-A
VEGFA birincil antikorBioworld TechnologyAP0742
ve beta; -aktinABklonal (Şangay) Trading Co., Ltd.AC026
C13979660Batı ve IP Beyotime Biyoteknoloji için C10481421402003120231202E1818113C14878803C13026996 2308262009 211277 Serisi

Kaynaklar

  1. Munoz, M., Gomez-Ramirez, S., Bhandari, S. The safety of available treatment options for iron-deficiency anemia. Expert Opin Drug Saf. 17 (2), 149-159 (2018).
  2. Soliman, A. T., De Sanctis, V., Yassin, M., Wagdy, M., Soliman, N. Chronic anemia and thyroid function. Acta Biomed. 88 (1), 119-127 (2017).
  3. Pivina, L., Semenova, Y., Dosa, M. D., Dauletyarova, M., Bjorklund, G. Iron deficiency, cognitive functions, and neurobehavioral disorders in children. J Mol Neurosci. 68 (1), 1-10 (2019).
  4. Lumbiganon, P., et al. Indirect causes of severe adverse maternal outcomes: a secondary analysis of the WHO Multicountry Survey on Maternal and Newborn Health. BJOG. 121 (Suppl 1), 32-39 (2014).
  5. Shaddy, R. E., et al. Systematic literature review on the incidence and prevalence of heart failure in children and adolescents. Pediatr Cardiol. 39 (3), 415-436 (2018).
  6. China Medical Association of Minorities. Guidelines for clinical use of minority drugs. , Chinese Press of Traditional Chinese Medicine. Beijing. (2018).
  7. Yu, W. Q. Clinical efficiency of Pomegranate blood-enriching syrup in the treatment of iron deficiency anemia. J Med Pharm Chin Minor. 26 (11), 11-12 (2020).
  8. Zhang, D. N., et al. Mechanism of Shiliu Buxue Syrup for anemia using integrated metabolomics and network pharmacology. Anal Biochem. 653, 114774(2022).
  9. Nielsen, J. Systems biology of metabolism. Annu Rev Biochem. 86, 245-275 (2017).
  10. Wang, M., et al. Metabolomics highlights pharmacological bioactivity and biochemical mechanism of traditional Chinese medicine. Chem Biol Interact. 273, 133-141 (2017).
  11. Ben, C. N. Establishment and experimental research of "Blood Deficiency" animal model. Lab Animal Sci. (03), 5-10 (1994).
  12. Cao, S., et al. Integrative transcriptomics and metabolomics analyses provide hepatotoxicity mechanisms of asarum. Exp Ther Med. 20 (2), 1359-1370 (2020).
  13. Yang, H. Y., Liu, M. L., Luo, P., Yao, X. S., Zhou, H. Network pharmacology and metabolomics in the study of traditional Chinese medicine for cardiovascular diseases. Phytomedicine. 104, 154268(2022).
  14. Croci, S., Pedrazzi, G., Passeri, G., Piccolo, P., Ortalli, I. Acetylphenylhydrazine induced haemoglobin oxidation in erythrocytes studied by Mossbauer spectroscopy. Biochim Biophys Acta. 1568 (1), 99-104 (2001).
  15. Liebowitz, J., Cohen, G. Increased hydrogen peroxide levels in glucose 6-phosphate dehydrogenase deficient erythrocytes expose to acetylphenylhydrazine. Biochem Pharmacol. 17 (6), 983-988 (1968).
  16. Tarasenko, T. N., McGuire, P. J. The liver is a metabolic and immunologic organ: A reconsideration of metabolic decompensation due to infection in inborn errors of metabolism (IEM). Mol Genet Metab. 121 (4), 283-288 (2017).
  17. Topalovic, A., Knezevic, M., Gacnik, S., Mikulic-Petkovsek, M. Detailed chemical composition of juice from autochthonous pomegranate genotypes (Punica granatum L.) grown in different locations in Montenegro. Food Chem. 330, 127261(2020).
  18. Legua, P., et al. Total phenols and antioxidant capacity in 10 Moroccan pomegranate varieties. J Food Sci. 77 (1), C115-C120 (2012).
  19. Rodrigo, R., Miranda, A., Vergara, L. Modulation of endogenous antioxidant system by wine polyphenols in human disease. Clin Chim Acta. 412 (5-6), 410-424 (2011).
  20. Hussain, T., et al. Oxidative stress and inflammation: What polyphenols can do for us. Oxid Med Cell Longev. 2016, 7432797(2016).
  21. Sudheesh, S., Vijayalakshmi, N. R. Flavonoids from Punica granatum--potential antiperoxidative agents. Fitoterapia. 76 (2), 181-186 (2005).
  22. Riaz, A., Khan, R. A. Anticoagulant, antiplatelet and antianemic effects of Punica granatum (pomegranate) juice in rabbits. Blood Coagul Fibrinolysis. 27 (3), 287-293 (2016).
  23. Balasubramani, S. P., Varghese, R. K., Vishnuprasad, C. N., Venkatasubramanian, P. Pomegranate juice enhances iron dialysability and assimilation in in-vitro cell-free and cell-based models. Plant Foods Hum Nutr. 75 (2), 272-278 (2020).
  24. Jilani, T., Iqbal, M. P. Does vitamin E have a role in treatment and prevention of anemia. Pak J Pharm Sci. 24 (2), 237-242 (2011).
  25. Farrell, P. M., Bieri, J. G., Fratantoni, J. F., Wood, R. E., di Sant'Agnese, P. A. The occurrence and effects of human vitamin E deficiency. A study in patients with cystic fibrosis. J Clin Invest. 60 (1), 233-241 (1977).
  26. Ukab, W. A., Sato, J., Wang, Y. M., van Eys, J. Xylitol mediated amelioration of acetylphenylhydrazine-induced hemolysis in rabbits. Metabolism. 30 (11), 1053-1059 (1981).
  27. Ahuja, V., et al. Biological and pharmacological potential of xylitol: A molecular insight of unique metabolism. Foods. 9 (11), 1592(2020).
  28. Nikas, I. P., Paschou, S. A., Ryu, H. S. The role of nicotinamide in cancer chemoprevention and therapy. Biomolecules. 10 (3), 477(2020).
  29. Katayoshi, T., Yamaura, N., Nakajo, T., Kitajima, N., Tsuji-Naito, K. Porcine placental extract increases the cellular NAD levels in human epidermal keratinocytes. Sci Rep. 12 (1), 19040(2022).
  30. Bartoszewski, R., et al. Primary endothelial cell-specific regulation of hypoxia-inducible factor (HIF)-1 and HIF-2 and their target gene expression profiles during hypoxia. Faseb J. 33 (7), 7929-7941 (2019).
  31. Lee, S. H., Golinska, M., Griffiths, J. R. HIF-1-independent mechanisms regulating metabolic adaptation in hypoxic cancer cells. Cells. 10 (9), 2371(2021).
  32. Sato, T., Takeda, N. The roles of HIF-1α signaling in cardiovascular diseases. J Cardiol. 81 (2), 202-208 (2023).
  33. Ratcliffe, P. J. Oxygen sensing and hypoxia signalling pathways in animals: The implications of physiology for cancer. J Physiol. 591 (8), 2027-2042 (2013).
  34. Li, L. J., Huang, Q., Zhang, N., Wang, G. B., Liu, Y. H. miR-376b-5p regulates angiogenesis in cerebral ischemia. Mol Med Rep. 10 (1), 527-535 (2014).
  35. Tejero, J., Shiva, S., Gladwin, M. T. Sources of vascular nitric oxide and reactive oxygen species and their regulation. Physiol Rev. 99 (1), 311-379 (2019).
  36. Fujii, J., et al. Erythrocytes as a preferential target of oxidative stress in blood. Free Radic Res. 55 (5), 562-580 (2021).
  37. Huang, J. W., et al. High expression of HIF-1α alleviates benzene-induced hematopoietic toxicity and immunosuppression in mice. Environ Pollut. 311, 119928(2022).
  38. Zhang, Z., Yao, L., Yang, J., Wang, Z., Du, G. PI3K/Akt and HIF-1 signaling pathway in hypoxia-ischemia (Review). Mol Med Rep. 18 (4), 3547-3554 (2018).
  39. Del Balzo, U., et al. Nonclinical characterization of the hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor roxadustat, a novel treatment of anemia of chronic kidney disease. J Pharmacol Exp Ther. 374 (2), 342-353 (2020).
  40. Bhatia, S., Singh, A., Batra, N., Singh, J. Microbial production and biotechnological applications of α-galactosidase. Int J Biol Macromol. 150, 1294-1313 (2020).
  41. Conte, F., van Buuringen, N., Voermans, N. C., Lefeber, D. J. Galactose in human metabolism, glycosylation and congenital metabolic diseases: Time for a closer look. Biochim Biophys Acta Gen Subj. 1865 (8), 129898(2021).
  42. Wang, Y. Y. Investigate the effect of galacto-oligosaccharide supplementation on intestinal absorption of iron in rats. [Master's Thesis]. , Southern Medical University. (2019).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Shi-Liu-Bu-XueHIF-1 Sinyal YolağıGalaktoz MetabolizmasıWestern BlotFare ModeliHepatik MetabolizmaProtein Ekspresyonunun Azalması

Bu makale yayımlandı

Video yakında

Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.