Burada, farelerde elektroakupunktur kullanımı için bir diyabetik kardiyomiyopati fare modeli ve bir fare elektroakupunktur fiksasyon cihazı oluşturmak için bir protokol sunuyoruz, bu da fareleri tedavi sırasında daha nazikçe sabitleyebilir.
Yöntem makalesi
* These authors contributed equally
Burada, farelerde elektroakupunktur kullanımı için bir diyabetik kardiyomiyopati fare modeli ve bir fare elektroakupunktur fiksasyon cihazı oluşturmak için bir protokol sunuyoruz, bu da fareleri tedavi sırasında daha nazikçe sabitleyebilir.
Diyabetik kardiyomiyopati (DCM), kalp yetmezliğine ilerleyebilen ve ilaç kullanımı ile sınırlanan bir diyabet komplikasyonudur. Elektroakupunktur, diyabetik kardiyomiyopatiyi tedavi etmek için geleneksel bir Çin tıbbı harici tedavi yöntemi olarak etkili bir yoldur. Bir fare elektroakupunktur fiksasyon cihazı, elektroakupunktur tedavisi sırasında fareleri kolayca ve nazikçe sabitleyebilir ve farelerin karın ve uzuvlarındaki akupunktur noktalarını ortaya çıkarabilir. Bu makale, kan şekeri gibi kan biyokimyasal indekslerindeki değişiklikleri kapsamlı bir şekilde kaydetmek için kapsamlı ölçümlerle diyabetik kardiyomiyopatinin bir fare modelini oluşturarak, fare elektroakupunktur fiksasyon cihazını tüm adımlar ve önlemlerle birlikte imal etmek için kullanılan yöntemleri açıklamaktadır. Deney 3 grupla yapıldı: bir kontrol grubu, bir model grubu ve her grupta 10 fare bulunan bir ön tedavi grubu. Ön tedavi grubu, her alternatif günde bir olmak üzere toplam 7 seans boyunca Biaoben akupunktur noktaları elektroakupunktur ön tedavisi ile tedavi edildi. Elektroakupunkturdan sonra, ön tedavi grubundaki fareler, diyabet semptomlarında bir azalma ile birlikte kan şekerinde bir azalma gösterdi.
Diyabetik kardiyomiyopati (DCM), spesifik bir lezyonun kardiyak yapısında ve ventriküler diyastolik ve kontraktil fonksiyonunda değişiklikler ile karakterize ve daha sonra kalp yetmezliğine dönüşen diabetes mellitusun yaygın bir komplikasyonudur. Diabetes mellitus hastalarında önde gelen ölüm nedenlerinden biridir 1,2 ve son yıllarda artan prevalansı yaygın olarak dikkat çekmektedir3. Bu hastalığın patogenezinin esas olarak insülin direnci, inflamatuar yanıt, anormal lipid metabolizması, oksidatif stres, mitokondriyal hasarıiçerdiği bulunmuştur 4,5.
Şu anda, diyabetik kardiyomiyopatinin klinik tedavisi esas olarak kan şekerini kontrol etmek ve kalp hastalığının semptomlarını hafifletmek için oral ilaçlara dayanmaktadır, ancak ilaç reaksiyonları, böbrek fonksiyon etkileri ve uzun süreli ilaç bağımlılığı gibi bazı sınırlamaları vardır6. Geleneksel bir Çin tıbbı dış tedavi yöntemi olan akupunktur, diyabetik kardiyomiyopatili hastalarda kan şekeri, kan lipitleri ve inflamatuar yanıt üzerinde daha iyi düzenleyici bir etkiye sahiptir ve klinik etkinliği dikkat çekicidir7. Akupunkturun gastrointestinal ve böbrek fonksiyonları üzerinde olumsuz bir etkisi yoktur ve uzun süreli tedavi bağımlılık yaratmaz. Biaoben akupunktur noktaları teorisi, geleneksel akupunktur teorisinde akupunktur noktalarının seçilmesi ve kullanılması için önemli bir yöntemdir8. Hastalıkların belirtilerini iyileştirebilecek akupunktur noktalarını Biao akupunktur noktaları olarak tanımlar ve hastalıklarla ilgili vücudun temel fonksiyonlarını düzenleyebilen ve hastalıkların kök nedenlerini tedavi edebilen akupunktur noktalarına Ben akupunktur noktaları denir. Akupunktur ile Biao akupunktur ve Ben akupunktur noktalarının aynı anda uyarılması, hastalıkların tedavi edilmesinin yanı sıra vücudun hastalıklara karşı direncini artırma ve hastalıkların alevlenmesini ve tekrarlamasını önleme amacına da ulaşabilir9. Hastalığın şiddetlenmesini ve tekrarlamasını önleyebilir. Modern araştırmalar, Biaoben akupunktur noktaları ile akupunkturun diyabet ve diyabetik kalp hastalığı, diyabetik nefropati, diyabetik retinopati, diyabetik ayak vb. dahil olmak üzere birçok komplikasyonu için etkili olduğunu kanıtlamıştır10,11. Biaoben akupunktur noktaları teorisi ile uyumlu bir akupunktur noktası seçim şeması, kalbin fonksiyonlarını düzenleyebilen ve Biao akupunktur noktası12 gibi inflamatuar yanıtı iyileştirebilen PC6 (Neiguan) ve Ben akupunktur noktası13 olarak kan şekeri ve kan şekeri durumunu iyileştirebilen, insülin direncini iyileştirebilen ve oksidatif stresi azaltabilen ST36'yı (Zusanli) seçmektir.
Hayvan modelleri, diyabetik kardiyomiyopati çalışmasında önemli bir araçtır, çünkü sıçan veya fare modellerinin, diyabetik kardiyomiyopatinin neden olduğu kalbin yapısal anormalliklerini ve fonksiyonel değişikliklerini iyi taklit ettiği ve diyabetik kardiyomiyopatinin biyokimyasal tespit indeksleri için gerekli örnekleri sağladığı deneysel olarak gösterilmiştir14,15. Fareleri indüklemek için Streptozotosin çözeltisi ile birlikte yüksek şekerli ve yüksek yağlı yemlerin kullanılması, 4-5 hafta içinde diyabetik modellerin oluşumuna yol açabilir, modelleme süresini etkili bir şekilde kısaltabilir ve başarı oranını artırabilir ve yetiştirme ortamı için özel bir gereklilik yoktur16,17. Diyabetik kardiyomiyopati, sürekli hipergliseminin kalp yapısında ve fonksiyonunda neden olduğu hasarın neden olduğu bir tür kardiyomiyopatidir. Hastalığın seyrinin uzaması ile diyabetik kalp hastalığı modeli, uzun süreli hiperglisemi altında diyabetik model tarafından doğal olarak geliştirilebilir 18,19,20. Akupunktur ön tedavisi, diyabet oluşumundan sonra ve belirgin miyokard hasarı oluşumundan önce farelerin ön tedavisini ifade eder. Bununla birlikte, tekrarlanan deneysel stimülasyondan sonra, fareler genellikle hareketli hale gelir ve hareketsiz hale getirilmesi zorlaşır ve şiddetli deneysel manipülasyon teknikleri farelerin yaralanmasına neden olabilir veya onları manik veya depresif hale getirebilir21. Bu nedenle, fareleri hareketsiz hale getirmek için uygun bir yönteme ihtiyaç vardır. Yaygın olarak kullanılan fare immobilizasyon yöntemleri arasında anestezi ve çemberleme22 bulunur. Anestezi yöntemi akupunktur noktalarını daha iyi ortaya çıkarabilse de, sinir iletimini etkileyebilir ve sonuçta deneysel sonuçları etkileyebilir. Çemberleme yöntemi fiziksel bir immobilizasyon yöntemidir ve anestezi ile aynı fizyolojik etkileri üretmez, ancak bağlı fareler önemli gerginlik, artan kas tonusu ve gelişmiş dışkılama yaşayacaktır22,23. Ayrıca iğne istenilen pozisyona kolayca ulaşamaz. Burada, elektroakupunktur tedavisinin rahat, güvenli, şiddetsiz ve sekel olmadan yapılabilmesi için elektroakupunktur tedavisi sırasında farelerin hareket etmemesini ve akupunktur noktalarını açığa çıkarmamasını sağlamak için kullanılabilecek bir fare elektroakupunktur fiksasyon cihazını tanıtıyoruz.
Bu makale, fare elektroakupunktur fiksasyon cihazının imalatını ve diyabetik kardiyomiyopatinin bir fare modelinin kurulmasını ayrıntılı olarak açıklamaktadır. Diyabetik kardiyomiyopatiyi Biaoben akupunktur elektroakupunktur ön tedavisi ile tedavi ettik, operasyonunun fare fiksasyon cihazında nasıl gerçekleştirildiğini gösterdik ve Biaoben akupunktur elektroakupunktur ön tedavisinin diyabetik kardiyomiyopati üzerindeki terapötik etkisini glikolipid metabolizması ile ilgili indeksleri ölçerek değerlendirdik.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tüm hayvan deneyleri, hayvan etiğinin 3R ilkesine uygundur ve Hubei Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Hayvan Deneyleri Etiği Komitesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır (Etik izin numarası HUCMS00309300). Burada, Hubei İl Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezi'nden 30 SPF dereceli fare elde edildi (Kalite sertifikası NO.42010200009690).
1. Elektroakupunktur fiksasyon cihazının imalatı
2. Diyabetik kardiyomiyopatinin bir fare modelinin oluşturulması
3. Hematoksilen-eozin (HE) boyaması
4. Fareler üzerinde gözlemler
5. İstatistiksel analiz
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yukarıda açıklanan prosedürü takip ettik ve diyabetik kardiyomiyopatinin bir fare modelini oluşturduk. HE ile boyanmış resimlerde (Şekil 4) görülebileceği gibi, kontrol grubundaki fareler sağlam miyokard doku yapısına, düzenli kardiyomiyosit düzenine sahipti ve belirgin bir lezyon yoktu. Model grubunda, miyokard hücreleri düzensiz olarak düzenlenmiş, bazı miyokard hücreleri hasar görmüş ve parçalanmış (siyah ok) ve interstisyumda (sarı ok) belirgin inflamatuar hücre infiltrasyonu gözlenmişti...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışmada, yüksek kan şekeri olan ve diyabet belirtileri gösteren fareler, etkili ve tanınmış bir modelleme yöntemi olan Streptozotosin çözeltisinin intraperitoneal enjeksiyonu ile elde edilmiştir27. Biaoben akupunktur noktaları28 teorisine göre PC6, Biao noktası olarak ve ST36 Ben noktası olarak seçildi. Bu noktaların tümü farenin uzuvları üzerindedir, bu nedenle karnı açığa çıkarabilen ve uzuvları hareketsiz hale getirebilen akrilik tü...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.
Bu çalışma, Hubei Doğa Bilimleri Vakfı ortak projesi 2022CFD024'ten bir hibe ile desteklenmektedir; Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı, No. 81704142; Hubei Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi 2023 çift birinci sınıf inşaat anahtarı özel bilimsel araştırma projesi,2023ZZXT005; Hubei Geleneksel Çin Tıbbı İl İdaresi'nin anahtar projesi kapsamında miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarı (MIRI) olan sıçanlarda miyokardiyal hücrelerin ferroptozunun düzenlenmesinde Biaoben akupunktur noktaları, elektroakupunktur ön koşullandırmasının mekanizmasını incelemek, ZY2025D001; Wuhan Bilim ve Teknoloji Bürosu Bilgi İnovasyon Projesi, No. 2023020201010172; Hubei Shi Zhen Yetenek Mühendisliği Projesi, E Wei Han [2024]256.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| akrilik içi boş plastik | Henan Zhike | ZK-GDQ | |
| akupunktur iğnesi | Hwato | 0.3 mm x 13 mm | |
| C57BL / 6 & nbsp; fareler | Hubei İl Hastalık Kontrol ve Önleme | ||
| sitrik asit monohidrat | Sigma | C1909 | |
| elektroakupunktur tedavi aleti | Hwato | SDZ-V | |
| elektronik denge | Henan Zhike | ZK-DST | |
| glikoz ölçüm cihazları | LifeScan | OneTouch VerioVue | |
| glikoz test şeridi | LifeScan | OneTouch Verio | |
| streptozotosin | Sigma | S0130 | |
| trisodyum sitrat dihidrat | Sigma | W302600 | |
| cımbız | Labshark | 130302001 |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste
İzin iste