Burada, klinik ortamlarda uyku sırasında kan örneği almak için duvardan geçen, minimal invaziv bir yöntem sunuyoruz.
Yöntem makalesi
* These authors contributed equally
Burada, klinik ortamlarda uyku sırasında kan örneği almak için duvardan geçen, minimal invaziv bir yöntem sunuyoruz.
Günlük ve sirkadiyen ritimler de dahil olmak üzere fizyolojik ritimler, kardiyovasküler hastalık ve tip 2 diyabet ile giderek daha fazla bağlantılı rahatsızlıklarla sağlıkta kritik bir rol oynamaktadır. Bu ritimler uyku-uyanıklık döngülerine yakından bağlıdır, çünkü uyku zamanlaması veya süresindeki değişiklikler günlük ve sirkadiyen ritimleri değiştirebilir ve böylece fizyolojik homeostazı bozabilir. Yiyecek alımı ve / veya fiziksel aktivite gibi davranışların zamanlaması gibi ek faktörler, sağlığı destekleyen veya kronik hastalık riskini teşvik eden şekillerde 24 saatlik ritimleri modüle edebilir.
Biyolojik ritimlerin öneminin giderek daha fazla tanınmasına rağmen, dolaşımdaki faktörlerdeki kalıpları aydınlatmak için gereken seri kan örneklerinin elde edilmesi klinik araştırmalarda önemli bir zorluk olmaya devam etmektedir. Rutin kan alma yöntemleri uykuyu bozabilir, potansiyel olarak uyku ve biyolojik ritimleri değiştirebilir ve daha sonra ilgilenilen değişkenleri etkileyebilir. Bu, uyku veya biyolojik ritimleri bozmadan 24 saatlik biyolojik süreçlerin değerlendirilmesine izin veren minimal invaziv yaklaşımlara olan ihtiyacın altını çizmektedir.
Bu zorlukların üstesinden gelmek için, birçok klinik ve araştırma grubu "duvardan" kan örnekleme yöntemi olarak bilinen bir teknik kullanır. Bu yaklaşım, bir duvardan veya bölmeden katılımcının odasının dışındaki bir yere geçirilen, kalıcı bir katetere bağlı uzatılmış boru kullanır. Odaya girmek zorunda kalmadan kan alımını mümkün kılan bu yöntem, kesintileri en aza indirir, böylece ilgilenilen dolaşımdaki değişkenlerin 24 saatlik profillerinin bütünlüğünü korur ve uykuyu en aza indirir.
Burada, duvardan kan örnekleme yönteminin ayrıntılı bir tanımını sunuyoruz ve planlanmış uyku fırsatları sırasında kan örnekleri toplamada fizibilitesini ve etkinliğini gösteriyoruz. Klinik bir çalışmadan elde edilen temsili veriler sunulmakta ve zor bir kan alımının uyku mimarisi üzerindeki etkisi de dahil olmak üzere ek hususlar tartışılmaktadır.
Günlük ve sirkadiyen ritimler, 24 saat boyunca fizyolojik, metabolik ve davranışsal süreçlerin düzenlenmesinde yer alan biyolojik döngülerdir. Günlük ritimler, gündüz/gece döngüsünü takip eden ve çevresel veya davranışsal ipuçları tarafından yönlendirilen biyolojik kalıplardır. Buna karşılık, sirkadiyen ritimler, biyolojide, dış ipuçlarından bağımsız olarak, içsel bir moleküler saatler ağı tarafından yönlendirilen 24 saatlik döngülere yakındır (not: sirkadiyen saatlerin ayrıntılı bir açıklaması bu makalenin kapsamı dışındadır; ilgilenen okuyucular daha fazla bilgi için Cox ve ark.1'e ve klinik sirkadiyen protokollerin tartışılması için Broussard ve ark.2'ye yönlendirilir). Hem günlük hem de sirkadiyen ritimler, kardiyovasküler hastalık ve tip 2 diyabet geliştirme risklerinin artmasıyla ilişkili aksaklıklarla birlikte sağlıkta kritik roller oynar 3,4. Bu anlayış, kontrollü laboratuvar koşullarında zaman serisi ölçümlerini içeren onlarca yıllık araştırmalara dayanmaktadır. Bu tür çalışmalardan elde edilen sonuçlar, endojen sirkadiyen etkiler ile biyolojik süreçler üzerindeki dış çevresel veya davranışsal etkiler ve bunların fizyolojik homeostazın sürdürülmesindeki rolleri arasında ayrım yapılmasına yardımcı olmuştur 2,5. Bu çalışma grubu, uyku ve davranışların sirkadiyen zamanlamasının sağlıkla ilgili sonuçlar üzerindeki etkisini araştıran daha yeni translasyonel araştırmaların temelini attı6,7,8,9.
Hormonlar ve metabolik faktörler belirgin 24 saatlik salınımlar sergiler. Örneğin melatonin, biyolojik gece boyunca yükselir ve biyolojik gün boyunca düşük kalır10. Buna karşılık, kortizol ritmi, biyolojik gecenin erken saatlerinde baskılanma ile karakterize edilir, ardından uyanmadanönce bir dalgalanma 11, bu da uyku yoksunluğu12 sırasında değişir. Tiroid uyarıcı hormon (TSH) biyolojik akşamları yükselir ve uyku sırasında baskılanır13. Uyku yoksunluğu sırasında TSH ritmi bozulur ve biyolojik gece boyunca TSH seviyelerinin artmasına neden olur14. Diğer bazı dolaşım faktörlerinin ritmik kalıpları da benzer şekilde uyku-uyanıklık döngülerinden etkilenir. Örneğin, büyüme hormonu (GH) sekresyonu, özellikleerkeklerde uyku başlangıcından kısa bir süre sonra belirgin bir salınım ile yavaş dalga uykusuna (SWS) yakından bağlıdır 15. Ayrıca, uyku sırasında artan glukagon ile birlikte GH sekresyonu, uzun süreli gece orucuna uyum sağlamaya yardımcı olur ve stabil kan şekeri seviyelerini korumak ve hipoglisemiyi önlemek için glikoz kullanımının azalmasına yol açar16. Desen olarak GH'ye benzer şekilde, prolaktin uyku başlangıcından sonra keskin bir şekilde yükselir ve uyku periyodunun ortasında zirve yapar, benzer artışlar gündüz şekerlemeleri sırasında meydana gelir17,18. 24 saatlik ritimler sergileyen ek dolaşım faktörleri arasında adrenokortikotropik hormon, luteinize edici hormon, glikoz ve insülin bulunur (daha kapsamlı bir özet için bakınız Hanlon ve ark.5).
Açlık, iştah düzenlemesi ve enerji dengesi ile ilgili birçok dolaşım faktörü de 24 saatlik süre boyunca dalgalanmalar gösterir. Açlığı uyaran ghrelin, yemeklerden önce zirve yapar ve gece uyku döneminde azalırken, bir tokluk hormonu olan leptin geceleri yükselir ve muhtemelen gece orucu sırasında açlığı bastırır19. Serbest yağ asitleri, endokannabinoidler ve GLP-1 ve PYY gibi tokluk peptitleri gibi diğer metabolik sinyaller, hem uyku hem de yeme düzeninden etkilenen varyasyonlar sergiler 19,20,21,22.
Birlikte ele alındığında, yukarıda özetlenen salınımlar, uyku, sirkadiyen süreçler ve fizyolojik homeostaz arasındaki karmaşık etkileşimi göstermektedir ve bu, ancak ilgili fizyolojik değişkenlerin 24 saatlik dolaşım modellerinin profillenmesiyle tam olarak takdir edilebilir.
Dolaşımdaki faktörlerin 24 saatlik ritimlerinin aydınlatılması, fizyolojik fonksiyondaki günlük dalgalanmaların yanı sıra uyku ve sirkadiyen bozulmanın sağlığı nasıl etkilediğini anlamak için çok önemlidir. Bununla birlikte, geleneksel kan örnekleme yöntemleri, bu ritimleri23 yönlendiren ve düzenleyen süreçlere müdahale edebilir ve 24 saatlik profillere ilişkin doğru içgörülere izin veren minimal invaziv yaklaşımlara olan ihtiyacı vurgular.
Bu nedenle, bu yöntem makalesinin amacı, duvardan kan örnekleme tekniği kullanarak insan araştırma katılımcılarından 24 saat boyunca güvenilir bir şekilde sık kan örnekleri elde etmek için gereken adımları yeterince ayrıntılı olarak açıklamaktır. Birçok uyku ve sirkadiyen laboratuvarı tarafından kullanılan tarif edilen teknik 20,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36, uyku sırasında kan örneklerinin toplanmasıyla ilgili teknik zorlukları ele alır. İlerleyen bölümlerde, tekniğin kendisi ek bir video gösterimi ile açıklanmaktadır. Ek olarak, yöntemi kullanan bir klinik çalışmadan elde edilen temsili veriler sunulmaktadır. Son olarak, makale, yöntemin klinik araştırmalarda kullanılmasının sınırlamaları, tuzakları ve önemli hususları hakkında bir tartışma ile sona ermektedir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu yazıda açıklanan yöntemler, şu anda Colorado Eyalet Üniversitesi Kurumsal İnceleme Kurulu ve Colorado Çoklu Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından onaylanan protokollerde kullanılmaktadır. Temsili veriler, katılımdan önce yazılı bilgilendirilmiş onam alınan bu tür çalışmalardan elde edilmiştir. Kullanılan tüm sarf malzemeleri ve ekipmanlar Malzeme Tablosunda listelenmiştir. Tartışmada ek yöntem hususları sunulmuştur.
1. Uzatma hattının kurulumu ve takılması
NOT: Herhangi bir klinik prosedürden önce, en az %70 izopropil alkol içeren bir solüsyon kullanılarak uygun el hijyeni yapılmalıdır. Eldivenler, laboratuvar önlükleri ve burnu kapalı ayakkabılar dahil ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere kişisel koruyucu ekipman (KKD) her zaman giyilmelidir.
2. Uzatma hattından kan örneklemesi
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Uyku sırasında duvardan kan örneklemesi kullanan 24 saatlik melatonin
Yukarıda açıklanan yöntem, aksi takdirde tek bir zaman noktası örneği tarafından gözden kaçırılacak olan dolaşımdaki faktörlerin 24 saatlik modellerinin değerlendirilmesine izin verir. Sıklıkla duvardan kan örneklemesi ile ölçülen bir hormon olan melatonin, ön hipotalamusun suprakiazmatik çekirdeğinde (SCN) bulunan merkezi sirkadiyen saatin ritmini değerlendirmek için en yaygın kabul gören vekil ola...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Burada sunulan duvardan kan örnekleme yöntemi, uyku sırasında minimum katılımcı rahatsızlığı ile kan toplamak için uyku ve sirkadiyen araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Uzatma hattının hazırlanması, kurulumu ve kullanımı dahil olmak üzere açıklanan prosedürler hem klinik hem de araştırma ortamlarında geniş uygulamalara sahiptir. Bu tekniği kullanarak, araştırmacılar planlanmış uyku sırasında da dahil olmak üzere 24 saatlik bir süre boyunca başarılı bir şekilde kan örnekleri...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.
Bu araştırma kısmen GSM ve R01DK125653'e T32HL149646 ve JLB'ye R01HL168081 tarafından desteklenmiştir. Ayrıca, Colorado Klinik ve Translasyonel Bilimler Enstitüsü (CCTSI) ve Colorado Üniversitesi Anschutz Tıp Kampüsü Klinik Translasyonel Araştırma Merkezi'nde Profesyonel Araştırma Hemşiresi olan Stephanie Laing RN'ye, BSN'ye, yöntemleri gözden geçirdikleri ve bu makalenin son versiyonuna içgörü ve düzenlemeler sağladıkları için teşekkür ederiz.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 1 mL astarlama hacmi ile 9-inç standart delikli IV uzatma seti, çıkarılabilir SmartSite iğnesiz konnektör, sürgülü kelepçe ve spinli erkek luer kilidi | Medline | IME22059EH | |
| %0,9 Sodyum Klorür enjeksiyonu USP 10 mL 10 mL bir şırıngada ZR | Excelsior Medical | EMZE010001 | |
| Alkol hazırlık pedi | Medline | MDS090737 | |
| BD Insyte Autoguard Kanatlı 20 G kateter | Medline | 381534 | |
| BD Plastipak 3 mL şırınga | Fischer Scientific | 309657 | |
| CoFlexNL | Medline | 5200CP | |
| IV uzatma seti 192 inç, küçük borulu | Yoğun Bakım Tıp | B2202 | Malzeme siparişi vermek için ICU Medical ile hesap açmak gereklidir |
| Dokunmamış gazlı bez süngerleri | Medline | NON25223 | |
| Tegaderm | Medline | 1624W | |
| Ultra(TM) 3 stockcockw/döner erkek luer kilidi | Medline | MX2311L |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste
İzin iste