Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Miyelin Kalıntılarının Mikroglial Fagositozunun Değerlendirilmesi in vitro Tekrarlanan Manyetik Stimülasyon Altında

1.6K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/67642

⸱

17 Haziran 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Rehabilitation Medicine, The Affiliated Suzhou Hospital of Nanjing Medical University, 2Rehabilitation Medicine Center, The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, 3Department of Children's Rehabilitation, Linyi People's Hospital, 4Department of Endocrinology, People's Hospital of Dongxihu District, 5Department of Rehabilitation, Hengyang Medical School, The First Affiliated Hospital, University of South China

Bu makalede

Özet

Mevcut protokol, tekrarlayan manyetik stimülasyonun mikroglia'nın miyelin kalıntılarını fagositoz etme yeteneği üzerindeki etkisini değerlendirmek için tasarlanmıştır. Bunu yapmak için bir in vitro mikroglia ve miyelin kalıntı ko-kültür sistemi kurulmuştur.

Özet

Merkezi sinir sisteminin (CNS) yerleşik fagositleri olan mikroglia, hasarlı hücreleri, hücresel kalıntıları ve miyelin kalıntılarını uzaklaştırarak CNS bütünlüğünün ve homeostazın korunmasında çok önemli bir rol oynar. Miyelin döküntülerinin birikmesi, multipl skleroz, Alzheimer hastalığı, travmatik beyin hasarı ve omurilik yaralanması dahil olmak üzere bir dizi CNS bozukluğunda rol oynar. Miyelin kalıntılarının varlığı sadece nöroinflamasyonu şiddetlendirmekle kalmaz, aynı zamanda miyelinin rejeneratif potansiyelini de engeller. Bu nedenle, mikroglia'nın fagositoz yoluyla miyelin kalıntılarını temizleme yeteneğinin arttırılması, umut verici bir terapötik stratejiyi temsil eder. Manyetik stimülasyon, CNS hastalıkları için yenilikçi bir tedavi yöntemi olarak ortaya çıkmıştır ve mikroglial fagositozu teşvik etme ve CNS iyileşmesini destekleme potansiyelini gösteren artan kanıtlar vardır. Manyetik stimülasyonun miyelin kalıntılarının mikroglial klerensi üzerindeki etkilerini daha da aydınlatmak için, mikroglia ve miyelin kalıntılarının ko-kültürünü içeren bir in vitro deney tasarladık. Ko-kültür, CNS patolojisi bağlamında mikroglial fagositik aktivite üzerindeki etkisini değerlendirmek için tekrarlayan manyetik stimülasyona tabi tutuldu.

Giriş

Miyelin, merkezi sinir sistemindeki (CNS) oligodendrositler tarafından üretilen aksonları çevreleyen kararlı, boru şeklinde bir zar yapısıdır. Bu miyelin kılıfı, aksiyon potansiyellerinin hızlı ve verimli bir şekilde yayılmasını kolaylaştırmada kritik bir rol oynar1. Bununla birlikte, multipl skleroz (MS), felç ve omurilik yaralanması (SCI) ve travmatik beyin hasarı (TBI) dahil olmak üzere travmatik yaralanmalar gibi çeşitli nörolojik bozukluklar miyelin bütünlüğünün kaybına yol açabilir. Bu, miyelin kılıfının bozulması ve miyelin yapılarının 2,3,4 doğrudan hasar görmesi nedeniyle miyelin kalıntılarının oluşmasına neden olur. Miyelin kalıntılarının birikmesi sadece remiyelinasyonu ve fonksiyonel iyileşmeyi engellemekle kalmaz, aynı zamanda nöroinflamasyonu da şiddetlendirir 5,6. Bu nedenle, miyelin kalıntılarının etkili bir şekilde temizlenmesi, nöroinflamasyonu çözmek, aksonal rejenerasyonu teşvik etmek ve nörolojik hastalıkları takiben sinir sisteminde homeostazı eski haline getirmek için gereklidir.

Miyelin kalıntıları öncelikle merkezi sinir sistemindeki (CNS) makrofajlar ve mikroglia gibi fagositler tarafından temizlenir. CNS'nin yerleşik bağışıklık hücreleri olan mikroglia, potansiyel tehditler için çevrelerini sürekli olarak araştırır ve hasarlı miyelin ve miyelin kalıntılarını gidererek CNS'yi korur. Ayrıca, mikroglial fagositoz, enkaz temizleme 7,8 yoluyla nörojenezin teşvik edilmesinde çok önemli bir rol oynar. Artan kanıtlar, miyelin kalıntılarının mikroglial fagositozunun arttırılmasının, iltihabın zararlı etkilerini hafifletebileceğini, CNS hasarını azaltabileceğini ve sinir hasarını takiben aksonal rejenerasyonu destekleyebileceğini düşündürmektedir. 4,9,10.

Non-invaziv bir nöromodülasyon tekniği olan manyetik stimülasyon tedavisi, çeşitli nörolojik bozuklukların tedavisinde yaygın kullanım alanı kazanmıştır11. Özellikle, tekrarlanan transkraniyal manyetik stimülasyon (rTMS), Alzheimer hastalığı (AD), beyin hasarı ve inme için terapötik bir yaklaşım olarak umut vaat etmiştir 12,13,14. Yakın zamanda yapılan bir çalışma, rTMS'nin amiloid-beta (Aβ) ve apolipoprotein E'nin (ApoE) mikroglial fagositozunu artırabildiğini ve böylece hayvan modellerinde AD'nin patolojik ilerlemesini inhibe edebildiğini göstermiştir15. Benzer şekilde, son çalışmamız, tekrarlanan trans-spinal manyetik stimülasyonun (rTSMS), sıçanlarda omurilik yaralanmasını takiben miyelin kalıntılarının mikroglial fagositozunu teşvik ettiğinibuldu 16.

Bununla birlikte, tekrarlayan manyetik stimülasyonun mikroglia üzerindeki etkisi, ağırlıklı olarak hayvanlarda 17,18,19 deneysel modeller aracılığıyla doğrulanmıştır. Gerçekten de, manyetik stimülasyonun, akımların20 indüksiyonu yoluyla nöronal uyarılabilirliği modüle ettiği gösterilmiştir. Sonuç olarak, nöronlar ve mikroglia arasındaki etkileşimin mikroglia fonksiyonunu etkileyebileceği göz ardı edilemez. Sonuç olarak, manyetik stimülasyonun mikroglia üzerindeki etkisinin nöronal uyarılabilirlikteki değişiklikten bağımsız olup olmadığını belirlemek için in vitro deney gereklidir. Son çalışmalar, deneysel modellerde tekrarlayan manyetik stimülasyonun mikroglia üzerinde modülatör bir etkisini tanımlamıştır. Bazı çalışmalar, tekrarlayan manyetik stimülasyonun M2 19,21'e doğru mikroglia polarizasyonunu teşvik edebileceğini göstermiştir. Bununla birlikte, mikroglia işlevine ilişkin daha fazla araştırma aydınlatılmayı beklemektedir. Özellikle, Amelie Eichler ve ark. 10 Hz manyetik stimülasyon kullanarak in vitro beyin dokusu dilimlerine müdahale etti ve 10 Hz manyetik stimülasyonun, nöral uyarılabilirliği ve plastisiteyi etkilemek için mikrogliadan sitokinlerin salınımını teşvik edebildiğini buldu22. Bu çalışma, manyetik stimülasyonun mikroglia üzerindeki etkilerinin anlaşılmasını genişletirken, mekanizmalarını tam olarak aydınlatmak için hücresel düzeyde daha fazla araştırma yapılması gerekmektedir.

Bu nedenle, manyetik stimülasyonun in vitro olarak miyelin kalıntılarının fagositozunu teşvik edip edemeyeceğini doğrulamak için bir protokol oluşturduk. Yaralanmanın bir ürünü olan hastalık veya doku hasarından sonra miyelin kalıntılarının aksine, bu deneyde kullanılan miyelin kalıntısı, miyelin kılıfının parçalandıktan sonraki şeklidir. Ek olarak, miyelin kalıntısı kavramı, miyelin parçalanmasının bir ürünüdür. Beynin birincil fagositik hücreleri olan mikroglia, multipl skleroz ve Alzheimer gibi hastalıklarla ilişkili olan hasarlı hücrelerin ve miyelin kalıntılarının23 temizlenmesinde çok önemli bir rol oynar24,25. Miyelin kalıntılarının birikmesinin nöroinflamasyonu şiddetlendirdiği ve rejenerasyonu engellediği gösterilmiştir26. Çalışmanın amacı, miyelin kalıntılarının mikroglial fagositozunu arttırmak, böylece nöroinflamasyonu azaltmak ve nörodejeneratif ve travmatik durumlarda CNS iyileşmesini desteklemek için manyetik stimülasyon potansiyelini araştırmaktır. Özetle, çalışma, tekrarlayan manyetik stimülasyonun mikroglianın fagositik kapasitesi üzerindeki etkisini doğrulamak için mikrogliaların miyelin kalıntıları ile birlikte kültürlendiği ve tekrarlanan manyetik stimülasyonun gerçekleştirildiği bir ko-kültür yaklaşımı kullanmaktadır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Burada, sükroz gradyan santrifüjleme ile miyelin kalıntılarını çıkarmak için üç SD dişi sıçan (2-3 haftalık yaş) kullanıldı. Tüm sıçanlar, Çin'in Nanjing kentindeki Nanjing Tıp Üniversitesi'nin Hayvan Çekirdeği Tesisinden satın alındı (Hayvan lisansı: SYXK (Su) 2021-0023). Tüm sıçanlar kontrol koşulları altında büyütüldü (sıcaklık 22 ± 2 °C, 12 saat / 12 saat aydınlık / karanlık dönem,% 55 ±% 5 bağıl nem). Tüm hayvan deneyleri Nanjing Tıp Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır (No. IACUC-1903031 ve No. IACUC-2005001) ve acıyı en aza indirmek ve kullanılan hayvan sayısını azaltmak amaçlanmıştır.

1. Miyelin izolasyonu

NOT: Miyelin kalıntıları daha önce tarif edildiği gibi çıkarıldı ve bazı modifikasyonlar yapıldı27. Tüm adımların 4 °C'de ve steril koşullar altında gerçekleştirildiğinden emin olun.

  1. Ham miyelin izolasyonu
    1. Beyin dokusu ekstraksiyonu
      1. Pentobarbital (50 mg / kg, intraperitoneal enjeksiyon) ile anesteziyi takiben, anestezi derinliğini ayak parmağı sıkışma tepkisi ile değerlendirin. Dişi sıçanların başını kes. Beyni tamamen ortaya çıkarmak ve tüm beynin çıkarılmasını kolaylaştırmak için kafasının tamamını buz üzerinde inceleyin ve kafatasını makasla ikiye bölün.
      2. Beyin dokusu sükroz karışımının kontaminasyonunu önlemek için zarları, beyinciği ve hipokampusu makas ve forseps ile titiz ve aseptik bir şekilde eksize edin. Kalan kan veya dokuyu çıkarmak için beyni 3 kez PBS ile temizleyin.
      3. Temizlenmiş beyinleri 10 mL 0.32 M steril sükroz solüsyonuna aktarın ve beyin dokusunu mikrocerrahi makasla 5 mm3 parçaya keserek beyin dokusu sükroz karışımı elde edin.
    2. Beyin dokusu homojenizasyonu
      1. Beyin dokusu sükroz karışımını 50 mL steril homojenizatöre aktarın ve 30 mL 0.32 M steril sükroz çözeltisi ekleyin. Pürüzsüz bir beyin dokusu homojenatı elde etmek için 50 mL'lik bir cam homojenizatör kullanarak 2 dakika homojenize edin.
      2. Beyin dokusu homojenatını 0.32 M steril sükroz çözeltisi ile 90 mL'ye seyreltin, karıştırın ve 20 mL 0.83 M steril sükroz çözeltisi içeren altı adet 38.5 mL steril ince duvarlı polipropilen ultrasantrifüj tüpünün üst kısmına yavaşça dağıtın. Her santrifüj tüpüne 15 mL homojenat ekleyin ve ardından 0,32 M steril sükroz çözeltisi ile düzleştirin.
    3. Ham miyelin kalıntısı toplama
      1. Bir ultrasantrifüj rotorunu 4 °C'de önceden soğutun ve numuneyi 45 dakika boyunca 75.000 x g'da santrifüjleyin. Santrifüjleme işleminin ardından, steril bir Pasteur tüpü kullanarak iki sükroz yoğunluğu arasındaki arayüzden miyelin kalıntılarını toplayın.
        NOT: Toplama işlemi sırasında dikkatli olmak ve kontamine numunenin diğer bileşenlerini yanlışlıkla toplamaktan kaçınmak zorunludur.
  2. İlk izotonik ayırma ve saflaştırma
    1. Toplanan miyelin kalıntı çözeltisini 50 mL'lik bir santrifüj tüpüne aktarın ve önceden soğutulmuş steril fosfat tamponlu salin (PBS) tamponu ile hacmi 35 mL'ye ayarlayın. Çözeltiyi yeni bir 50 mL steril homojenizatöre aktarın ve homojen bir homojenat elde etmek için 2 dakika homojenize edin.
    2. Miyelin kalıntılarını homojenatı altı adet 38,5 mL steril ince duvarlı polipropilen ultrasantrifüj tüpüne eşit olarak dağıtın ve steril PBS tamponu ekleyin. Tüpleri 4 ° C'de 45 dakika boyunca 75.000 x g'da santrifüjlemeye tabi tutun.
  3. İkinci izotonik ayırma ve saflaştırma
    1. Santrifüjlemeyi takiben, süpernatanı atın ve bir miyelin kalıntısı süspansiyonu elde etmek için katı beyaz peleti 10 mL önceden soğutulmuş steril PBS tamponunda yeniden süspanse edin. Süspansiyonu iki adet 38,5 mL steril ince duvarlı polipropilen ultrasantrifüj tüpüne eşit olarak dağıtın, hacim steril PBS tamponu ilavesiyle dengelenir.
    2. Numuneleri 4 °C'de 75.000 x g'da 45 dakika santrifüjleyin.
  4. Saflaştırılmış miyelin koleksiyonu
    1. Santrifüjlemeyi takiben, süpernatanı atın ve katı beyaz peleti 6 mL steril PBS tamponunda yeniden süspanse edin. Miyelin kalıntı süspansiyonunu altı adet 1.5 mL santrifüj tüpüne bölün ve ardından 10 dakika boyunca 4 ° C ve 12.000 x g'de santrifüjlemeye tabi tutun.
    2. Santrifüjlemeyi takiben, süpernatanı atın ve katı beyaz peleti 100 μL önceden soğutulmuş steril fosfat tamponlu salin (PBS) içinde yeniden süspanse edin.
  5. Miyelin kalıntılarının miktarının belirlenmesi
    1. Bir BCA protein miktar tayin kiti kullanarak protein içeriğinin nicelleştirilmesi için 3 μL miyelin kalıntı süspansiyonu alın. Kalan miyelin kalıntısı süspansiyonunu -80 °C'de saklayın.

2. Miyelin kalıntılarının floresan etiketlemesi

  1. Karboksifloresein diasetat N-süksinimidil esterin inkübasyonu
    1. Gerekli miyelin kalıntılarını 4 ° C'de veya buzlu suda çözün ve 12,000 x g'da 4 ° C'de 10 dakika santrifüjleyin. Süpernatanı atın ve miyelin kalıntısını 200 μL Karboksifloresein diasetat N-süksinimidil ester çözeltisi (CFSE; 50 μM) içinde yeniden süspanse edin.
    2. Karanlıkta oda sıcaklığında 30 dakika inkübe edin. Kuluçka süresinin ardından, 4 ° C'de 10 dakika boyunca 12.000 x g'da santrifüjleyin.
    3. Süpernatanı atın ve numuneleri 3x 500 μL steril PBS tamponu ile yıkayın. Yıkama işleminden sonra, -80 °C'de saklanabilen floresan etiketli miyelin kalıntılarının bir süspansiyonunu elde etmek için miyelin kalıntılarını 100 μL önceden soğutulmuş steril PBS tamponunda yeniden süspanse edin.

3. Mikroglia kültürü

  1. Dulbecco'nun modifiye edilmiş Eagle ortamında (DMEM) 37 °C'de nemlendirilmiş% 5 CO 2 hücrelerinde% 10 (h / h) FBS, penisilin (100 U / mL) ve streptomisin (100 U / mL) ile desteklenmiş kültür BV-2 hücreleri. Daha fazla test için 12 oyuklu plaka ve 24 oyuklu plakada yaklaşık% 50 Bv-2 hücresi tohumlayın.

4. İn vitro tekrarlanan manyetik stimülasyon

  1. Aşağıdaki ayarla in vitro tekrarlanan manyetik stimülasyon müdahalesini gerçekleştirin: 20 Hz tedavi frekansı, maksimum çıkış yoğunluğunun %1'i kadar tedavi yoğunluğu (ör.0.035 Tesla), 5 s stimülasyon süresi, 20 s dinlenme süresi. 2,5 dakikalık tek bir tedavi süresi ile 600 bakliyat uygulayın.
  2. Manyetik stimülasyon sırasında, bobinin merkezini kültür plakasının merkezi ile aynı hizada konumlandırın ve bobinin kültür plakasının altına sıkıca oturduğundan emin olun.
    1. Manyetik stimülasyon parametrelerini önceden belirleyin ve manyetik stimülasyon bobininin yönünü yere dik ve yukarı yönde yönlendirilecek şekilde sabitleyin. Hücrelerden kontaminasyonu önlemek için manyetik stimülasyon bobinini alkolle sterilize edin.
    2. Bunu takiben, hücre kültürü plakasını inkübatörden alın ve manyetik stimülasyon için manyetik stimülasyon bobininin üzerine yerleştirin. Plakayı üzerine alkol püskürterek sterilize edin ve ardından inkübatöre geri koyun. İşlem boyunca plakayı kapalı tutun.

5. Miyelin kalıntılarının mikroglial fagositozunun test edilmesi

  1. LPS+rMS grubu için tekrarlanan manyetik stimülasyon tedavisi
    1. Fagositozu değerlendirmek için miyelin kalıntılarını etiketlemek için CFSE (50 μM) kullanın. Plaka 1 x 104 BV-2 hücreleri, gece boyunca 24 oyuklu plakalarda. Ortamı serumsuz ortama değiştirin ve hücreleri 12 saat boyunca lipopolisakkarit (LPS; 1 μg / mL) ile tedavi edin. Eski ortamı bir pipet kullanarak nazikçe aspire edin ve ardından pipeti kullanarak yeni serumsuz ortamı hemen ekleyin.
    2. 12 saatlik bir LPS müdahalesi periyodundan sonra, miyelin kalıntılarını (100 μg / mL) karanlık koşullar altında ko-kültür için ortama ekleyin. Hücreleri, adım 4.2'de açıklandığı gibi tekrarlanan manyetik stimülasyon müdahalelerine tabi tutun.
  2. İmmünofloresan ve Görüntüleme
    1. Adsorbe edilmemiş miyelin kalıntılarını PBS ile nazikçe yıkayın ve hücreleri 15 dakika boyunca% 4 PFA ile sabitleyin. % 10 eşek serum albümini ve% 0.3 Triton X-100 içeren PBS ile hücreleri oda sıcaklığında 1 saat bloke edin, daha sonra PBS ile yıkayın ve gece boyunca 4 ° C'de birincil antikor (IBA-1, 1:200) ile inkübe edin.
    2. Hücreleri ikincil antikorlarla (1: 300, fare) oda sıcaklığında 2 saat inkübe edin. 40x ve 20x'te konfokal mikroskop kullanarak görüntü yakalayın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Bu çalışmada, başlangıçta BV-2 mikroglia hücrelerini in vitro olarak besledik ve beyin kaynaklı miyelin kalıntılarını çıkararak ve fagositik kapasitelerini arttırmak için tekrarlayan manyetik stimülasyon kullanarak. Daha sonra, BV-2 mikroglia hücreleri kültürlendi ve manyetik stimülasyondan önce LPS müdahalesine tabi tutuldu, böylece titiz nörolojik doğrulama altında in vivo mikroglia durumunu taklit etti. Daha sonra, LPS stimülasyonunu takiben rMS müdahalesi uygulandı. Hücrelerin fagositozunu doğrulama...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Tekrarlayan manyetik stimülasyon (rMS), bilişsel bozukluklar, Alzheimer hastalığı (AD), felç, beyin hasarı ve omurilik yaralanması (SCI) dahil olmak üzere çeşitli nörolojik ve psikiyatrik bozuklukların tedavisinde yaygın olarak uygulanan, invaziv olmayan bir nörostimülasyon tekniğidir. rMS, nöronların zar potansiyelini modüle etmek için darbeli bir manyetik alan kullanır ve sinir sistemi11 içindeki nöral uyarılabilirliği seçici olarak etkiler. Nöronlar üzerindeki ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82302877, 82172541), Hunan Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı'ndan (2023JJ30549) alınan hibelerle desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
DAPI ile Antifade Montaj OrtamıBeyotime, ÇinP0131
BCA KitiThermoFisher Scientific, Amerika23227
Bv-2 hücreliATCCCBP60922
Hücre kültürü 12 oyuklu plakalarBiofil, Çin
Hücre kültürü 24 oyuklu plakalarBiofil, Çin
Konfokal Lazer Tarama MikroskopZeiss, Almanya800
Sabit sıcaklık inkübatörüThermoFisher Scientific, Amerika
CFSEMedChemExpress, AmerikaHY-158820
DMEM-Kültür ortamıKeyGen, ÇinKGL1202-500
FBSGibco, Amerika16250078
Iba1Abcam, Amerikaab48004
Manyetik stimülasyon aparatıYiruide, ÇinCCY-IA
Manyetik stimülasyon bobiniYiruide, Çin
ParaformaldehitBioSharp, Çin
PBSKeyGen, ÇinKGL2210-500
Penisilin-StreptomisinGibco, Amerika15140-122
SükrozMedChemExpress, AmerikaHY-B1779
Tripsin KeyGen, ÇinKGL2107-100
UltrasantrifüjBeckman, AmerikaL-100XP

Kaynaklar

  1. Osso, L. A., Hughes, E. G. Dynamics of mature myelin. Nat Neurosci. 27 (8), 1449-1461 (2024).
  2. Gao, R., et al. Myelin debris phagocytosis in demyelinating disease. Glia. 72 (11), 1934-1954 (2024).
  3. Kopper, T. J., Gensel, J. C. Myelin as an inflammatory mediator: Myelin interactions with complement, macrophages, and microglia in spinal cord injury. J Neurosci Res. 96 (6), 969-977 (2018).
  4. Yu, F., et al. Phagocytic microglia and macrophages in brain injury and repair. CNS Neurosci Ther. 28 (9), 1279-1293 (2022).
  5. Filbin, M. T. Myelin-associated inhibitors of axonal regeneration in the adult mammalian CNS. Nat Rev Neurosci. 4 (9), 703-713 (2003).
  6. Sen, M. K., Mahns, D. A., Coorssen, J. R., Shortland, P. J. The roles of microglia and astrocytes in phagocytosis and myelination: Insights from the cuprizone model of multiple sclerosis. Glia. 70 (7), 1215-1250 (2022).
  7. Jia, J., et al. The role of microglial phagocytosis in ischemic stroke. Front Immunol. 12, 790201(2021).
  8. Kettenmann, H., Hanisch, U. K., Noda, M., Verkhratsky, A. Physiology of microglia. Physiol Rev. 91 (2), 461-553 (2011).
  9. Shen, S., et al. Neutrophil nanovesicle protects against experimental autoimmune encephalomyelitis through enhancing myelin clearance by microglia. ACS. 16 (11), 18886-18897 (2022).
  10. Cignarella, F., et al. TREM2 activation on microglia promotes myelin debris clearance and remyelination in a model of multiple sclerosis. Acta Neuropathol. 140 (4), 513-534 (2020).
  11. Dufor, T., Lohof, A. M., Sherrard, R. M. Magnetic stimulation as a therapeutic approach for brain modulation and repair: Underlying molecular and cellular mechanisms. Int J Mol Sci. 24 (22), 16456(2023).
  12. Martin, D. M., McClintock, S. M., Forster, J. J., Lo, T. Y., Loo, C. K. Cognitive enhancing effects of rTMS administered to the prefrontal cortex in patients with depression: A systematic review and meta-analysis of individual task effects. Depress Anxiety. 34 (11), 1029-1039 (2017).
  13. Kamo, T., et al. Repetitive peripheral magnetic stimulation for impairment and disability in people after stroke. Cochrane Database Syst Rev. 9 (9), CD011968(2022).
  14. Wang, Y., Wang, L., Ni, X., Jiang, M., Zhao, L. Efficacy of repetitive transcranial magnetic stimulation with different application parameters for post-stroke cognitive impairment: A systematic review. Fron Neurosci. 18, 1309736(2024).
  15. Chu, F., et al. Transcranial magneto-acoustic stimulation attenuates synaptic plasticity impairment through the activation of Piezo1 in alzheimer's disease mouse model. Research. 6, 0130(2023).
  16. Zhai, C., et al. Repeated trans-spinal magnetic stimulation promotes microglial phagocytosis of myelin debris after spinal cord injury through LRP-1. Exp Neurol. 379, 114844(2024).
  17. Qin, T., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation ameliorates cognitive deficits in mice with radiation-induced brain injury by attenuating microglial pyroptosis and promoting neurogenesis via BDNF pathway. Cell Comm Signal. 22 (1), 216(2024).
  18. Qian, F., et al. Microglia and astrocytes responses contribute to alleviating inflammatory damage by repetitive transcranial magnetic stimulation in rats with traumatic brain injury. Neurochem Res. 49 (9), 2636-2651 (2024).
  19. Luo, J., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation improves neurological function and promotes the anti-inflammatory polarization of microglia in ischemic rats. Front Cell Neurosci. 16, 878345(2022).
  20. Jannati, A., Oberman, L. M., Rotenberg, A., Pascual-Leone, A. Assessing the mechanisms of brain plasticity by transcranial magnetic stimulation. Neuropsychopharmacol. 48 (1), 191-208 (2023).
  21. Luo, L., et al. Intermittent theta-burst stimulation improves motor function by inhibiting neuronal pyroptosis and regulating microglial polarization via TLR4/NFκB/NLRP3 signaling pathway in cerebral ischemic mice. J Neuroinflammat. 19 (1), 141(2022).
  22. Eichler, A., et al. Microglial cytokines mediate plasticity induced by 10 Hz repetitive magnetic stimulation. J Neurosci. 43 (17), 3042-3060 (2023).
  23. Kent, S. A., Miron, V. E. Microglia regulation of central nervous system myelin health and regeneration. Nat Rev Immunol. 24 (1), 49-63 (2024).
  24. Yong, V. W. Microglia in multiple sclerosis: Protectors turn destroyers. Neuron. 110 (21), 3534-3548 (2022).
  25. Sarlus, H., Heneka, M. T. Microglia in Alzheimer's disease. J Clin Invest. 127 (9), 3240-3249 (2017).
  26. Cantuti-Castelvetri, L., et al. Defective cholesterol clearance limits remyelination in the aged central nervous system. Science. 359 (6376), 684-688 (2018).
  27. Norton, W. T., Poduslo, S. E. Myelination in rat brain: Method of myelin isolation. J Neurochem. 21 (4), 749-757 (1973).
  28. Gordon, S. Phagocytosis: An immunobiologic process. Immunity. 44 (3), 463-475 (2016).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

İn Vitro Ko-KültürMerkezi Sinir SistemiBV-2 MikrogliaKonfokal MikroskopiLipopolisakkarit UygulamasıMiyelin Artığı İzolasyonuNöroinflamasyon
Miyelin Kalıntılarının Mikroglial Fagositozunun Değerlendirilmesi in vitro Tekrarlanan Manyetik Stimülasyon Altında
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.