Yöntem makalesi

Fare Kulağında Mycobacterium avium'un İntradermal Aşılanması

2.3K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/67675

⸱

3 Temmuz 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Global Infectious Disease Research, Seattle Children's Research Institute, 2Department of Pediatrics, University of Washington School of Medicine, 3Department of Global Health, University of Washington

Bu makalede

Özet

Burada, maruziyet benzeri koşulları yansıtmak için bir fare kulağında düşük dozda Mycobacterium avium'un intradermal inokülasyonunu gerçekleştirmek için bir protokol sunuyoruz.

Özet

Doğal tüberküloz dışı mikobakteriyel (NTM) maruziyetlerin veya patolojisi yavaş çoğalan bir organizma üzerine kurulu enfeksiyonların aksine, bir fare modelindeki aerosol enfeksiyonu, akciğerlerde bakteri üremesinin artmasına neden olabilir. Kronik aerosol ve sistemik enfeksiyonlar, önceki bir maruziyeti de yansıtabilen anti-mikobakteriyel ilaçlarla tedavi edilebilir, ancak bu prosedürler uzundur ve doğal maruziyetleri daha az temsil eder. Bu protokolün amacı, daha translasyonel olan NTM maruziyeti benzeri koşulların daha az invaziv bir fare modelini geliştirmektir. Burada, bir maruziyeti taklit etmek ve belirgin bir hastalık olmaksızın bakterilere karşı bağışıklık tepkilerini sağlamak için Mycobacterium avium (M. avium) kullanarak kulak dokusu yoluyla klinik öncesi farelere intradermal olarak meydan okumak için bir yöntem açıklıyoruz. Bu makalede, intradermal kulak enjeksiyon yöntemini açıklıyoruz ve bu in vivo modelde immün yanıtları sorgulamak için daha fazla fırsat sağlayan sürekli ve kapalı mikobakteriyel enfeksiyonun varlığını doğruluyoruz.

Giriş

Tüberküloz dışı mikobakteriler (NTM), genellikle tedavi edilmesi zor olan bir patojenik bakteri alt kümesini içeren genişleyen bir tür listesidir 1,2. NTM, toprak, su ve su aerosolleri 3,4,5 gibi çevresel kaynaklarda bulunabilir. NTM enfeksiyonlarının arttığını gösteren bildirilen eğilimlere rağmen, bir grup olarak, bunlar ABD genelinde 20'den az eyalette rutin olarak rapor edilmektedir6,7. Kistik fibrozlu kişiler veya immünosupresif ilaç kullanan kişiler de dahil olmak üzere spesifik komorbiditeleri olan bireyler, patojenik NTM türleri2 ile üretken enfeksiyon riski altındadır. Bununla birlikte, sağlıklı bireylerin, sağlam veya kronik enfeksiyonlara yol açmadan çevresel kaynaklar yoluyla NTM'ye tekrar tekrar ve sürekli maruz kaldıkları varsayılmaktadır. NTM maruziyetinin aşılarda8 mikobakteriyel antijenlere karşı genel bağışıklık tepkisini, diğer mikobakterilere maruz kaldıktan sonraki sonuçları ve tanı testlerini9 'önkoşullandırabileceğine' dair bazı kanıtlar vardır, ancak bugüne kadar bu tür maruziyetin klinik öncesi modellemesi zor olmuştur.

Kronik akciğer enfeksiyonları10 ve patojene özgü aşı etkinliği çalışmaları için kullanılan tedaviler, nispeten zararsız çevresel maruziyetleri ve muhtemelen farklı sonuçta ortaya çıkan bağışıklık tepkilerini temsil etmemektedir. Örneğin kronik enfeksiyonlar, ciddi şekilde hasar görmüş dokuya ve yaygın hastalığa neden olabilir10. Henao-Tamayo laboratuvarı11'den içme suyu yoluyla NTM'ye maruz kalma sağlayan bir fare modeli de dahil olmak üzere, bu maruziyete karşı bağışıklık tepkisinin daha uzun süre sorgulandığı bu araştırma boşluğunu ele almak için son zamanlarda bir ivme kazanılmıştır. Gizli tüberküloz (TB), preklinik hayvanlarda modellenmesi zor olan mikobakteriyel enfeksiyonun başka bir hastalık durumudur. Kaufmann laboratuvarı, gizli TB enfeksiyonunu taklit etmek, reaktivasyon ve hipoksik granülomların mekanizmalarını karakterize etmek için C57BL / 612 ve NOS2-/-13 farelerinde M. tuberculosis ile intradermal kulak enfeksiyonlarına öncülük etti. Nemeth ve ark. M. tuberculosis'e daha önce maruz kalmayı taklit etmek için içerilen intradermal kulak modelinden yararlandı ve bunun sonraki zorluk sonuçlarını nasıl etkilediğini belirlemek için farklı bağışıklık tepkilerini karakterize etti14. İntradermal kulak modeli, M. tuberculosis suşları H37Rv ve Erdman'ın 104 koloni oluşturan birimi (CFU) kullanılarak başarılı bir şekilde rapor edilmiştir, ancak bugüne kadar NTM izolatları kullanılarak test edilmemiştir.

Bu yöntemin genel amacı, maruziyete karşı bağışıklık tepkisi ile ilgili olarak daha fazla incelenebilecek, diğer meydan okuma yollarının neden olduğu hastalığı sınırlayan, tekrarlanabilir bir NTM kulak meydan okuma modeli oluşturmaktır. Duyarlı C57BL / 6 farelerini içme suyunda yüksek dozda M. avium'a maruz bırakmak, maruziyetlerden daha fazla enfeksiyon benzeri koşullara neden olur11. Bu nedenle, bu tekniği geliştirmenin mantığı, M. tuberculosis'in nispeten daha yüksek bir meydan okuma dozu ile kulak dermisine meydan okuyan bir organizma olarak kullanılmasının önceki başarısını içerir 12,13,14. Burada, modelin daha önce bildirilen bakteri konsantrasyonunun yarısıolan 12,13,14 (10 2 CFU) bir M. avium izolatı için başarılı bir şekilde uyarlanıp uyarlanamayacağını değerlendirmeyi amaçladık. Enfeksiyon değil, NTM'ye maruz kalma konusunda yeni modellerin geliştirilmesinin, sağlık ve gelecekteki enfeksiyon / aşılama dinamikleri üzerindeki bu etki hakkında öne çıkan biyolojik soruların ele alınmasına yardımcı olacağını umuyoruz.

Protokol

Dişi C57BL / 6, 6-7 haftalıkken bir araştırma modeli tedarik laboratuvarından satın alındı. Fareler, Seattle Çocuk Araştırma Enstitüsü (SCRI) biyogüvenlik seviye 2 (BSL-2) hayvan tesisinde patojen içermeyen koşullar altında barındırıldı ve SCRI Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylanan deneysel protokollere uygun olarak ele alındı. Tüm yöntemler, hayvan refahı ile ilgili yönergelere ve düzenlemelere uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Enstitü, USDA Sertifikası #91-R-0061 ve PHS Güvencesi #A4337-01 altında faaliyet göstermektedir. Çalışmada kullanılan reaktiflerin ve ekipmanların detayları Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

1. Aşılama için bakteri stoklarının hazırlanması

  1. Bakteri çalışması için elverişli bir biyogüvenlik kabininde, -80 °C'lik depodan bir Mycobacterium avium (ATCC 25291) stok şişesini çıkarın ve oda sıcaklığında çözdürün.
    NOT: M. avium'un stok konsantrasyonları, tüm stok malzemelerinde en iyi uygulama olarak, 7H10 agar plakaları üzerine seri seyreltmelerin kaplanması ve koloni oluşturan birimlerin (CFU) sayımı ile önceden belirlenir.
  2. 26 G boyutunda, künt uçlu bir iğne kullanarak, düzgün bir süspansiyon oluşturmak için sıvıyı 1.0 mL şırıngada 10 kat veya daha fazla yukarı ve aşağı geçirerek stok numunesini yeniden süspanse edin.
  3. Süspansiyonun 100 μL seri 1:10 dilüsyonlarını 7H10 agar plakaları üzerine kaplayarak M. avium konsantrasyonunu kontrol edin. Plakaları 37 ° C'de 3 hafta boyunca inkübe edin ve aşı konsantrasyonlarının doğru olduğundan emin olmak için kolonileri sayın.
  4. Numuneyi steril PBS ile seyrelterek M. avium konsantrasyonunu tercih edilen doza ayarlayın. Kullanıma hazır olana kadar oda sıcaklığında tutun.
    NOT: Bu deneyde 10 μL doz başına 102 CFU kullanılmıştır.

2. Hayvanların hazırlanması ve uyuşturulması

  1. Anestezi uygulamadan önce, aşılanmış farelerin kafeslerinin iyileşme sırasında vücut ısılarını düzenlemek için tutulabileceği bir ısıtma yastığı gibi sıcak bir yüzey hazırlayın.
  2. Ketamin (100 mg / mL) ve Ksilazin (20 mg / mL) kokteylini intraperitoneal yolla farelere enjekte edin.
  3. Anestezi uygulandıktan sonra, farelerin prosedür manipülasyonları için yeterince uyuşturulduğunu doğrulamak için bir ayak parmağınızı sıkıştırın.
  4. Göz kayganlaştırıcıyı iki taraflı olarak uygulayın.

3. Aşılama platformu ve materyallerinin hazırlanması

  1. Farenin manipüle edilirken stabilize olabileceği bir çıkıntı oluşturmak için bir köpük levha kullanın.
    NOT: Çift taraflı bant, kulağı düz bir yönde platforma tutmaya yardımcı olacaktır. Kulak dokusu sağlığını korumak için yapıştırıcı çok güçlü olmamalıdır.
  2. Platformu görüntülemek için ışıklı bir büyüteç yerleştirin.
  3. Yakınınızda steril bir Hamilton şırıngası ve çalışan bir M. avium preparatı toplayın.

4. Kulak dermisi aşılaması

  1. Fareyi, kulağın çift taraflı bant üzerine yerleştirilebileceği şekilde çıkıntının üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin.
  2. Kulağı bandın üzerine düzleştirmek için hafif bir baskı uygulayın ve kulağın hareket etmediğinden emin olun.
    NOT: Enfeksiyon sonrası çapraz kontaminasyonu ve cilt kommensalleri ile enfeksiyonu sınırlamaya yardımcı olmak için enjeksiyondan önce kulaklarda alkollü mendiller kullanılabilir. Bununla birlikte, alkollü mendil kullanmadan yapılan pilot çalışmalarda bu tür enfeksiyonlar gözlenmemiştir.
  3. Steril Hamilton şırıngasına 100 CFU içeren 10 μL M. avium preparatı çekin.
    NOT: Homojen olduğundan emin olmak için 10 μL hacim çekmeden önce M. avium süspansiyonunu döndürün.
  4. Platformu bir elinizle ve diğer elinizle Hamilton şırıngasını tutun ve iğnenin eğimli tarafının yukarı baktığından emin olun (Şekil 1).
  5. Hamilton şırıngasını çok hafif bir basınç uygulayarak kulak dermisinin altına yerleştirin. İğnenin ince kulak dokusundan tamamen geçmediğinden emin olun.
  6. İğne yerine oturduktan sonra, şırınga pistonuna kademeli ve yavaş bir hızda bastırın.
  7. Uygulama sırasında kulağın rengini gözlemleyin.
    NOT: Başarılı uygulama, enjeksiyon bölgesinde bir baloncuk gibi opak bir yükseklik olarak görünecektir.
  8. Dozaj tamamen uygulandıktan sonra, fare kulağını ve bandını herhangi bir sızıntı belirtisi açısından kontrol edin.
    NOT: Sızıntı meydana gelirse, karşı kulağa tahmini bir kayıp doz uygulanabilir. En azından, hayvan muhtemelen hedef dozun altında bir doz verilmiş olarak işaretlenmeli ve kaydedilmelidir.
  9. Dozaj başarılı olduğunda, farenin anesteziden başarılı bir şekilde uyanana kadar izlenirken sıcak yüzeye maruz kalması için ev kafesine geri yerleştirildiğinden emin olun.

5. Bakteri yükü değerlendirmesi

  1. Hayvanları Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi onaylı protokollere göre ötenazi yapın.
    1. Burada kurban başına en az iki yöntemle ötenazi tamamlanır. Bu prosedür için seçilen iki yöntem CO2 asfiksisi ve servikal çıkık kullanımıdır.
    2. İlk olarak, CO2 gazını farelerin ev kafesine dağıtmak için bir tüp uzatın ve farelerden daha fazla hareket belirtisi kalmayana kadar gazı uygulayın. Gazın dışarı sızmasına izin vermeyecek bir kafes kullanmaya dikkat edin.
    3. Daha sonra, manuel manipülasyon yoluyla servikal omurları yerinden çıkarın.
  2. Maruziyetten dört hafta sonra M. avium'a meydan okunan hayvanların kulaklarını inceleyin (28 gün, önceki çalışmalarlaeşleşiyor 12). Steril aletler kullanarak 2 farenin kulaklarını inceleyin. Kulakları CFU tamponu (PBS +% 0.05 Tween80) içeren konik tüplere yerleştirin ve homojen bir süspansiyon oluşana kadar homojenize etmek için bir doku homojenizatörü kullanın. Rakipsiz kulaklar da işlenir ve kontrol görevi görür.
    NOT: Maruz kalma sonrası herhangi bir zaman noktası ve ilgilenilen organlar kullanılabilir. Bu deney için akciğer, dalak, drene yapan lenf bezi ve beyin organları da toplandı.
  3. 1/8 kat seyreltme olarak derin bir kuyu bloğunda 700 μL CFU tamponuna 100 μL homojenat ekleyin. En az 5 seri seyreltme oluşturulacak şekilde blok boyunca tekrarlayın. 7H10 agar tri-plakalarına 50-100 μL saf homojenat veya seri seyreltme (burada 0'dan 5'e kadar olan seyreltmeler) ekleyin, T-yayıcılar kullanarak eşit şekilde yayın ve 2-3 hafta boyunca %5 CO2 ile 37 °C'de inkübe edin.
  4. Koloni oluşturan birimleri (CFU) sayın ve bunları elektronik tablo yazılımında analiz amacıyla günlük10'a dönüştürün.

Sonuçlar

Kulak dermisini bir enfeksiyon veya maruz kalma yolu olarak kullanan tekrarlanabilir bir NTM zorluk modelinin oluşturulup oluşturulamayacağını belirlemek için yukarıda ayrıntıları verilen protokolü kullandık. Kulaklar, meydan okuma sonrası 28 Günlük zaman noktasında iki hayvandan toplandı, homojenize edildi ve mikobakteri seçici 7H10 ortamında tarif edildiği gibi kaplandı. M. avium'un intradermal olarak zorlanan kulaklarda 28 güne kadar devam ettiğini ve itiraz edilmeyen kulakta M. avium yokluğu olduğunu gözlemledik (Şekil 2).

Enfeksiyondan 28 gün sonra rakipsiz kulağa yayılma gözlemlemezken, gizli TB modellemesi için bu kulak dermisi modelini kullanan diğerleri, diğer distal organ bölgelerine yayılmayı gözlemledi14. Daha düşük bir meydan okuma dozunun ve M. avium izolatının kullanılmasının, kronik enfeksiyona karşı maruziyeti daha iyi yansıtabilecek daha sonraki zaman noktalarına yayılmayı azaltabileceğini varsaydık. Bu nedenle, enfeksiyondan 28, 56, 90 ve 132 gün sonra n = 5 M. avium meydan okuyan farelerden oluşan kohortlarda ötenazi yapıldı. Aşağıdaki organlar, kulak dokuları için tarif edilenle aynı protokolle homojenize edildi: akciğer, dalak, drenaj lenf nodu (DLN) ve beyin. Bu zorluk yolu, zaman içinde sporadik bir yayılma ile sonuçlandı, burada hayvanların yarısından daha azı enfeksiyondan 56 veya 90 gün sonra test edilen organlarda sayılabilir CFU gösterdi (Tablo 1). Meydan okumadan 132 gün sonra, tüm farelerin dalaklarında tespit edilebilir M. avium vardı (n = 5/5 hayvan değerlendirildi), ancak bu zaman noktasına kadar diğer organlarda minimal (DLN'de n = 1/5) veya hiç (akciğerlerde veya beyinde n = 0/5) bakteri barındırıyor gibi görünüyordu (Tablo 1).

figure-results-1
Şekil 1: Eğimli tarafı yukarı bakacak şekilde bir iğnenin yönü. İğnenin yerleştirilmesinden önce, aşılamayı düzgün bir şekilde uygulamak için eğim tarafı yukarı bakmalıdır. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-2
Şekil 2: Meydan okumadan 28 gün sonra M. avium tarafından kulak dokusu kolonizasyonu. Dişi C57BL / 6 fareler, 102 CFU Mycobacterium avium ile kulakta zorlandı. Meydan okunan kulak (+), 28 günde, her hayvan farklı bir renk ve sembolde olmak üzere, gösterilen tek bir deneyden n = 2 bireysel hayvan, rakipsiz kulak (-) ile karşılaştırıldı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Zaman (gün)Organ Kütüğü10 CFU
AkciğerDalakDLN (İngilizce)Beyin
283.08, ND, ND, ND, ND2.81, ND, ND, ND, NDND, ND, ND, ND, ND0.78, 0.90, ND, ND, ND
562.30, ND, ND, ND, ND1.53, 3.43, ND, ND, ND2.78, ND, ND, ND, ND1.20, ND, ND, ND, ND
90ND, ND, ND, ND, ND0.60, 3.35, 3.26, ND, NDND, ND, ND, ND, ND0.60, ND, ND, ND, ND
132ND, ND, ND, ND, ND4.03, 3.58, 3.58, 4.03, 3.692.41, ND, ND, ND, NDND, ND, ND, ND, ND
DLN = drenaj lenf nodu, ND = tespit edilmedi

Tablo 1: M. avium'un meydan okuma sonrası zamanla kulaktan yayılması. Akciğerler, dalak, drenaj lenf nodu (DLN) ve beyin, meydan okuma sonrası zaman noktası başına n = 5 fareden toplandı. Homojenize dokular kaplandı ve bakteri üremesi açısından değerlendirildi. Organ CFU, bakterilerin sayıldığı ve tespit edilmediği (ND) log10 dönüştürülmüş değerler olarak sunuldu, burada herhangi bir konsantrasyonda CFU gözlenmedi. Zaman seyri verileri bir deneyin temsilcisidir.

Tartışma

Burada, içerilen bir intradermal kulak modelinde mikobakterilerle farelere nasıl tekrarlanabilir şekilde meydan okunacağını gösterdik. Bu prosedürü uygularken sterilite önlemlerine uymak ve iğne batması yaralanmalarını önlemek hayati önem taşır. Bu aşılama yöntemiyle, dermis boşluğunun hedeflendiğinden ve kulaktan tamamen delinmediğinden emin olmak için uygun bir kurulum istasyonuna ve iyi bir aydınlatmaya sahip olmak çok önemlidir. Böyle bir durumda, çalışmaya bağlı olarak, diğer kulakta ikinci bir deneme yapılabilir. Aynı fare içindeki tedavi edilmemiş kulaklar da fare başına kontrol olarak kullanılabilir. Bu yöntem, minimum ekipman veya zaman ihtiyacı olan araştırmacılar için erişilebilir olmalıdır. Fareleri ve eğitimi için zaman ayırmak, protokolün aşılama başarı oranına yardımcı olur. Bu teknikteki en yaygın hatalar, şırınga ile intradermal boşluğa girmemek (ve kulaktan delmek) veya şırıngaya çok hızlı bir şekilde bastırmaktır, bu da iğnenin intradermal boşluktan tutarsız bir şekilde verilmesine veya kaymasına neden olur. İyi aydınlatma ve büyütme, aşılama için iğnenin uygun şekilde konumlandırılmasına yardımcı olabilir.

NTM'nin 'maruz kalma benzeri' koşulları için metodolojiden yararlanıyoruz. M. avium'un büyük çoğunluğu kulak veya DLN içinde bulunur. Bununla birlikte, bu metodolojinin bir sınırlaması, meydan okumadan 132 gün sonra değerlendirilen tüm hayvanlarda sistemik organlara, yani dalağa yayılmanın gözlenmesidir. Bir titrasyon çalışması ile gerçekleştirilebilecek yayılma miktarını veya sıklığını azaltabilecek bir bakteri aşılama eşiği olabilir. Bu prosedür, araştırma sorusuna bağlı olarak hem organizmayı, örneğin diğer NTM türlerini hem de verilen dozu değiştirmek için uygundur.

İnsan davranışı (uygun içme suyu arıtımının olmaması, kirlilik, sigara kullanımı),15 yaş ve diğer komorbiditeler nedeniyle sağlığı bozulan insan sayısının artması, uygun tanı testlerinin yapılmaması ve iklim değişikliği16 NTM enfeksiyonlarının artan oranlarında rol oynayabilir ve bu eğilimin yakın gelecekte artması muhtemeldir. Farelerde içme suyu11 yoluyla mukozal iletim veya NTM ile intradermal içerimli kulak enfeksiyonları gibi modellerin, bu artan maruziyetin sonraki aşılama ve aşı etkinliği üzerinde ne gibi bir etkisi olacağını belirleme fırsatı sağladığını öneriyoruz. Her ne kadar bu kapalı kulak modeli metodolojisini M. avium için uyarlamış olsak da, bunun diğer NTM türleri için bir maruz kalma tekniği olarak başarılı bir şekilde kullanılabileceğini öneriyoruz.

Açıklamalar

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.

Teşekkürler

Yazarlar, bu çalışma boyunca hayvanlara gösterdikleri olağanüstü özen için kendini işine adamış vivaryum personeline minnettarlıklarını ifade etmektedir. Yazarlar ayrıca, bu çalışmada kullanılan M. avium türünü paylaştığı için Colorado Eyalet Üniversitesi'ndeki Henao-Tamayo Laboratuvarı'na teşekkür etmek isterler. Yazarlar, Seattle Çocuk Araştırma Enstitüsü'ndeki Aderem ve Urdahl laboratuvarlarının üyelerine orijinal metodoloji eğitimi için teşekkür eder. Bu proje, Ulusal Alerji ve Bulaşıcı Hastalıklar Enstitüsü, Ulusal Sağlık Enstitüleri, Sağlık ve İnsan Hizmetleri Departmanı'ndan federal fonlarla tamamen veya kısmen finanse edilmiştir, Sözleşme No. 75N93021C00029 (RNC'ye) ve Hibeler R01AI125160 ve R01AI183642 (RNC ve SLB'ye).

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
% 0.05 Tween80SigmaP6224
1 mL şırıngaFisher15-823-434
7H10 agar triplateMoltox21-40S234
26G künt iğneFisherNC0981254
Biyogüvenlik kabiniNuaireNU-543-400
CO2 inkübatörFisher Scientific15-103-0513
Çift taraflı bantScotch3136
Hamilton 701N mikrolitre şırıngaFisher14-824-16
Sert doku omni uçlarıFisher15-340-102
Isıtma yastığıKent ScientificHTP-1500
İnsülin iğnesiFisherNC1551333
KetaminPatterson Veteriner07-890-8598
Işıklı büyüteçBrightechB07MMZ27QK
PBSThermoFisher10010072
Doku homojenizatörüOmniTH115
Doku homojenizatör standıOmniS1000
KsilazinPatterson Veteriner07-808-1947

Kaynaklar

  1. Abdelaal, H. F. M., et al. Mycobacterium abscessus: It's Complex. Microorganisms. 10 (7), (2022).
  2. Baldwin, S. L., et al. The complexities and challenges of preventing and treating nontuberculous mycobacterial diseases. PLoS Negl Trop Dis. 13 (2), p. e0007083(2019).
  3. Falkinham, J. O. 3rd Environmental sources of nontuberculous mycobacteria. Clin Chest Med. 36 (1), 35-41 (2015).
  4. Honda, J. R. Environmental sources and transmission of nontuberculous mycobacteria. Clin Chest Med. 44 (4), 661-674 (2023).
  5. Pfaller, S., et al. Occurrence revisited: Mycobacterium avium and Mycobacterium intracellulare in potable water in the USA. Appl Microbiol Biotechnol. 106 (7), 2715-2727 (2022).
  6. Mercaldo, R. A., et al. Environmental risk of nontuberculous mycobacterial infection: Strategies for advancing methodology. Tuberculosis (Edinb). 139, 102305(2023).
  7. Marshall, J. E., et al. Nontuberculous mycobacteria testing and culture positivity in the United States. BMC Infect Dis. 24 (1), 288(2024).
  8. Ghasemi, F., et al. Effects of non-tuberculous mycobacteria on BCG vaccine efficacy: A narrative review. J Clin Tuberc Other Mycobact Dis. 36, 00451(2024).
  9. Njagi, L. N., et al. Attenuated tuberculin skin test responses associated with Mycobacterium intracellulare sputum colonization in an adolescent TB prevalence survey in Western Kenya. Tuberculosis (Edinb). 147, 102514(2024).
  10. Larsen, S. E., et al. Subunit vaccine protects against a clinical isolate of Mycobacterium avium in wild type and immunocompromised mouse models. Scientific Reports. 11 (1), 9040-9040 (2021).
  11. Dutt, T. S., et al. Mucosal exposure to non-tuberculous mycobacteria elicits B cell-mediated immunity against pulmonary tuberculosis. Cell Rep. 41 (11), 111783(2022).
  12. Kupz, A., et al. A Mouse Model of Latent Tuberculosis Infection to Study Intervention Strategies to Prevent Reactivation. PLoS One. 11 (7), e0158849(2016).
  13. Reece, S. T., et al. Serine protease activity contributes to control of Mycobacterium tuberculosis in hypoxic lung granulomas in mice. J Clin Invest. 120 (9), 3365-3376 (2010).
  14. Nemeth, J., et al. Contained Mycobacterium tuberculosis infection induces concomitant and heterologous protection. PLoS Pathogens. 16 (7), e1008655(2020).
  15. Jarchow-MacDonald, A., et al. Changing Incidence and Characteristics of Nontuberculous Mycobacterial Infections in Scotland and Comparison With Mycobacterium tuberculosis Complex Incidence (2011 to 2019). Open Forum Infect Dis. 10 (1), ofac665(2023).
  16. Thomson, R. M., et al. Influence of climate variables on the rising incidence of nontuberculous mycobacterial (NTM) infections in Queensland, Australia 2001-2016. Sci Total Environ. 740, 139796(2020).

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Fare Kulak ModeliTüberküloz Dışı MikobakterilerKulak Enjeksiyon Yöntemiİmmün Yanıt AnaliziSeri Dilüsyon EkimiDoku HomojenizasyonuKoloni Oluşturan BirimlerKronik Mikobakteriyel Enfeksiyon
Fare Kulağında Mycobacterium avium'un İntradermal Aşılanması
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.