Burada, nörolojik skorlama ile birlikte subaraknoid kanamanın endovasküler perforasyon murin modeli için basitleştirilmiş bir operasyon sunuyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Burada, nörolojik skorlama ile birlikte subaraknoid kanamanın endovasküler perforasyon murin modeli için basitleştirilmiş bir operasyon sunuyoruz.
Endovasküler perforasyon modeli, deneysel çalışmalarda subaraknoid kanamayı (SAK) simüle etmek için yaygın olarak bir yöntem olarak kullanılmaktadır. Kapsamlı ve güvenilir olduğu gibi, karmaşık teknikler gerektirir. Bu protokol, nörolojik puanlama ile birlikte modeli bazı ayrıntılarda basitleştirir. Geleneksel ligasyon dışında kan akışını geçici olarak engellemek için ortak karotis arteri (CCA) ilmek ve çekmek için naylon bir sütür kullanıyoruz, bu da net bir ameliyat alanı sunuyor. Kan damarlarını kaynaştırmak için elektrokoter kaleminin kullanılması kanama riskini azaltır. Ayrıca, delinme derinliğini belirlemeyi kolaylaştırmak için siyah işaretli bir filament kullanıyoruz.
Ana karotis arterin (CCA) internal karotis artere (ICA) ayrıldığı ve minimal dirençle birlikte karotis bifurkasyonunu geçen siyah markörün engelsiz ilerlemesi, filamentin anterior serebral arter (ACA) ve orta serebral arterin (MCA) intrakraniyal bileşkesine başarılı bir şekilde geçtiğini gösterir. Bu fenomen, filamentin kritik bir serebrovasküler yakınsama noktasında konumunu gösterir. Daha sonra, kan damarını delmek için filamenti hafifçe ileri doğru ilerletmek, farelerde endovasküler perforasyon için daha kolay operasyona izin verir, böylece genetiği değiştirilmiş farelerde endovasküler perforasyon modelinin uygulanmasını kolaylaştırır. Bu, moleküler araştırma ve farmasötik araştırma ve geliştirme için çok önemli olabilir.
İnmenin ciddi bir alt tipi olan subaraknoid kanama (SAK), özellikle ellili yaşların ortasındaki insanları etkileyen yüksek morbidite ve mortalite oranlarıyla bağlantılıdır. Spontan SAK esas olarak ağırlıklı olarak Willis 1,2 çemberinde meydana gelen intrakraniyal anevrizmaların yırtılmasından kaynaklanır. Klinik olarak, hastalar sıklıkla gök gürültüsü baş ağrıları, nörolojik disfonksiyon ve bilinçte hızlı bir düşüş ile başvururlar3. Nörokritik bakımdaki gelişmelere rağmen, hastaların yaklaşık %40'ı kanamadan sonraki bir ay içinde ölmektedir
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Spesifik patojenlerden arındırılmış C57BL / 6 erkek fareler (6-8 haftalık), 12 saatlik aydınlık / karanlık döngüsünde tutulan, düzenlenmiş sıcaklık ve iklimlendirme koşullarına sahip bir hayvan tesisinde tutuldu. Farelere standart bir kemirgen diyetine ve sterilize edilmiş musluk suyuna sınırsız erişim sağlandı. Deneylerin başlamasından önce 2 haftalık bir iklimlendirme süresine izin verildi. Hayvanları içeren tüm prosedürler, Longhua Hastanesi Hayvan Etik Komitesi tarafından onaylandı ve Çin Ulusal Bilim ve Teknoloji Komitesi'nin laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımına ilişkin yönergelerine uygun olarak yürütüldü.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Nörolojik skorlar
Her grubun dokuz faresi, SAK'ı değerlendirmek için Sugawara ve ark.11 tarafından bildirilen skorlama sisteminin bir modifikasyonu kullanılarak ameliyat sonrası 24 saat değerlendirildi. Elde edilebilecek maksimum puan 18'dir. Bunlar arasında, sahte gruptaki n = 9 hayvanın tümü 18 puan aldı. SAH grubunda ortalama skor 11 (p < 0.0001) idi (Şekil 2).
Beyindeki patolojik değişiklikler
.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuç olarak, bu çalışma, endovasküler filament yerleştirilmesinin neden olduğu subaraknoid kanamanın (SAK) basitleştirilmiş ve güvenilir bir murin modelini sunarak uygun ve etkili bir yaklaşım sunmaktadır. Mevcut endovasküler perforasyon modeli ile karşılaştırıldığında, bu protokol perforasyon basamağında aynıdır: Filament dış karotis artere (ECA) sokulur, ortak karotis arter (CCA) boyunca ilerletilir ve daha sonra iç karotis artere yönlendirilir (ICA), burada anterior serebral arteri (.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların beyan edebilecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Bu çalışma, Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (CJM'ye 82305281), Şangay'daki Bilim ve Teknoloji İnovasyon Eylem Planı (23YF1447900'den CJM'ye), Şanghay Eğitim Geliştirme Vakfı'nın Chenguang Programı ve Şanghay Belediye Eğitim Komisyonu (23CGA53'ten CJM'ye) tarafından finanse edilmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| C57BL/6 fare | Şangay Jiesjie Laboratuvar Hayvanları A.Ş., LTD & | ||
| nbsp; elektrokoter kalemi | Zhuoyu Angel Medical Equipment Co., Ltd | GermanV50 | Yüzeysel küçük ameliyatlarda, doku pıhtılaşmasında ve bitki örtüsünün koterizasyonunda kullanıma uygundur. |
| İzoflümans | RWD | R650-IE | Isoflurane, solunan bir genel anesteziktir. Küçük bir kan/gaz bölme katsayısına sahiptir. Hayvan anestezisi için kullanıldığında, hızlı bir iyileşme, iyi kas gevşemesi ve sempatik sinir sistemi üzerinde uyarıcı bir etki olmadan anesteziyi sorunsuz, hızlı ve rahat bir şekilde indükleyebilir. Karaciğerdeki izofluranın metabolik hızı düşüktür, bu nedenle karaciğer için çok az toksisitesi vardır ve tekrarlanan kullanımda bile belirgin bir yan etkisi yoktur. Anestezik atık gazın çevre ve laboratuvar personeli üzerindeki olumsuz etkilerini önlemek için, gaz geri kazanım sistemi ile birlikte kullanılması tavsiye edilir. |
| MACO filament | Beijing Cinontech Co.LTD | 1620-A2 | Çoğunlukla 20-25 g ağırlığındaki fareler için kullanılan sütür ucu, polilisin veya silikon kaplama olmadan yarım küre şeklinde eritilir, uçtan 9-10 mm uzakta işaretlenir, dezenfekte edilir ve doğrudan kullanılabilir. Bu modelin üç ambalaj özelliği vardır. Uygun modeli belirlemek için resmi deneyden önce bir ön deney yapılması önerilir. |
| mikroskop | Olympus | BX61VS | Yüksek çözünürlüklü ve yüksek hassasiyetli görüntüleme için tasarlanmış, UIS2 optik sistemi ile donatılmış tam motorlu dik mikroskop. Özellikler arasında motorlu burunluk, sahne ve odaklamanın yanı sıra numunelerin büyük, yüksek çözünürlüklü dijital görüntülerini oluşturmak için sanal slayt yetenekleri bulunur. Patoloji, hücre biyolojisi, sinirbilim ve malzeme bilimindeki ileri araştırma uygulamaları için uygundur. |
| naylon sütür | Huawei Tıbbi Malzemeler Co, Ltd | & nbsp; J1110 | Yüksek mukavemetli, biyouyumlu malzemelerden üretilmiş, emilmeyen bir cerrahi iplik. |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu makale yayımlandı
Video yakında