Çözünür bazal membran ekstraktları, kanser araştırmalarında en yaygın kullanılan biyolojik matrislerdir, ancak karmaşık reolojik davranışları, ticari olarak mevcut biyo-baskı sistemleriyle biyo-baskılarını zorlaştırır. Bu çalışma, hem tek hem de çoklu katmanlarda iyi şekil doğruluğuna sahip saf matris yapıları üretmek için özelleştirilmiş bir biyo-baskı stratejisi sunmaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Translasyonel Araştırma için Çözünür Bazal Membran Ekstraktının Biyobaskısı için Hacimsel Ekstrüzyon Biyoyazıcısının Tasarımı ve Validasyonu
Bu makalede
Özet
Özet
Translasyonel araştırmalarda, 3D in vitro modeller, bilimsel anlayışı ve terapötik geliştirmeyi ilerletmek için gereklidir. Bu amaçla, fare sarkom hücrelerinden türetilen Çözünür Bazal Membran Ekstraktları (SBM'ler), in vivo mikroçevrenin mekanik ve biyokimyasal özelliklerinin kopyalanmasında kilit rol oynamaktadır. Doku mühendisliğinden ilaç testine kadar çeşitli araştırma alanlarında özellikle değerlidirler. Özellikle, bu alanda yaygın olarak kullanılan geleneksel 2D hücre kültürleri, üç boyutlu (3D) yapıyı ve tümör mikro ortamını yakalamadıkları için yanıltıcı bilgi sağlayabildiğinden, kanser araştırmalarında temel hale gelmiştir.
Kanser araştırmalarında, etkili 3D in vitro modeller, kanser evrimini daha iyi anlamak ve ilaç direnç mekanizmaları gibi zorlukları tahmin etmek için çok önemlidir. Organoidler, tümör biyolojisinin daha doğru bir temsilini sunan umut verici 3D in vitro modeller olarak ortaya çıkmıştır. Hücrelerin büyüyebileceği ve 3B yapılar halinde kendi kendini organize edebileceği bir ortam yarattıkları için SBM'lerde büyürler. Bununla birlikte, SBMe, düşük mekanik özellikler ve karmaşık reolojik davranış dahil olmak üzere önemli zorluklar sunar ve ticari olarak temin edilebilen pnömatik-ekstrüzyon biyobaskı sistemleriyle kullanımını engeller.
Bu sınırlamaları ele almak için düşük maliyetli, hacimsel kontrollü bir biyo-baskı sistemi ve SBMe ile yapıları yazdırmak için özel bir protokol geliştirdik. Bu sistem hacimsel bir ekstrüdere dayanır ve geleneksel pnömatik tahrikli yaklaşımların sınırlamalarının üstesinden gelir. Belirli bir g kodu ile bir araya getirildikten ve programlandıktan sonra, sistem hem tek hem de çok katmanlı yapılar elde etmek için hem saf hem de seyreltilmiş SBMe'yi biyolojik olarak yazdırabilir. Bu yaklaşım, 3D hücre kültürü modelleri üretmek için daha güvenilir ve ölçeklenebilir bir yöntem sunarak yeni tedaviler ve ilaç testlerine yönelik daha etkili araştırmaların önünü açıyor.
Giriş
Translasyonel araştırmalarda, in vivo ortamı yakından kopyalayan 3D in vitro modeller oluşturmak, bilimsel anlayışı ve terapötik gelişimi ilerletmek için çok önemlidir1. Bunları oluşturmada önemli bir bileşen, doğal dokuların karmaşıklıklarını daha iyi yansıtan Çözünür Bazal Membran Ekstraktları (SBM'ler) gibi hücre dışı matris (ECM) analoglarının kullanılmasıdır. SBM'ler, doku mühendisliğinden ilaç testine kadar çeşitli araştırma alanlarında özellikle değerlidir 2,3. Özellikle, tümör mikro çevresinin mekanik ve biyokimyasal özelliklerini kopyaladıkları ve tümör büyümesini, metastazı ve tedavi yanıtlarını daha iyi yansıtan modellerin geliştirilmesini sağladıkları için kanser araştırmalarında temel hale gelmişlerdir.
Gerçekten de, son birkaç on yıldaki önemli ilerlemelere rağmen, birçok tedavi başarısız olmaya devam etmekte ve bu da klinik ortamlarda sık sık tedavi başarısızlığına yol açmaktadır. Bu başarısızlık genellikle yüksek seviyelerde hücre heterojenliğininneden olduğu ilaç direnç mekanizmalarına atfedilir 4,5. İnsan tümörlerinin karmaşıklıklarını doğru bir şekilde özetleyebilen etkili in vitro modeller, kanser evrimini daha iyi anlamak ve bu fenomeni tahmin etmek için çok önemlidir.
Geleneksel 2D hücre kültürleri kanser araştırmalarında temel olmuştur, ancak gerçek tümörlerin 3D yapısını ve mikro çevresini yakalayamadıkları için ilaç etkinliği ve tümör davranışı hakkında yanıltıcı bilgilere yol açabilir 6,7,8. Buna karşılık, 3D in vitro modeller, 3D karmaşıklığı taklit ederek tümör mikroçevresinin ve biyolojik davranışın daha doğru bir temsilini sunan umut verici alternatifler olarak ortaya çıkmıştır 9,10.
Kanser araştırmalarında organoidler, insan doku ve organlarının daha doğru ve ilgili modellerini sağladıkları için hastalık ve ilaç etkinliğini incelemek için 3B modeller olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. Engelbreth-Holm-Swarm fare sarkom hücrelerinden türetilen SBMe'nin kullanımı, kanser araştırmalarının ilerlemesinde çok önemli olmuştur11,12. Hücrelerin büyüyebildiği, çoğalabildiği ve organoid yapılar halinde kendi kendini organize edebildiği jel benzeri bir substrat sağlayarak uygun gelişme ve büyümeyi sağlar13,14.
Bununla birlikte, SBMe, benzersiz ve karmaşık özellikleri nedeniyle bir takım zorluklar ortaya çıkarmaktadır. Newtonian olmayan bir akışkan olarak SBMe, kesme inceltme özellikleri sergiler, yani viskozitesi artan kesme gerilimi ile azalır, bu da değişken kuvvetler altında kullanımını ve uygulamasını tutarsız hale getirir. Ek olarak, tiksotropik davranışı, kesme gerilimi giderildiğinde zamanla viskozitesini geri kazanabildiği için karmaşıklığa katkıda bulunur15,16. Bu özellikler, düşük mekanik mukavemet (protein konsantrasyonuna bağlı olarak 10 Pa ila 5.000 Pa arasında değişen depolama modülü değerleri ile) ve ısıya duyarlı davranışla birlikte, bu zorlukları daha da kötüleştirir ve hazırlama ve kullanım sırasında titiz bir kontrol ve ayrıca saf olarak biyo-baskı gerektirir.
Standart pnömatik tahrikli biyo-baskı sistemleri, basınç uygulaması şırıngadan çıkarıldıktan sonra kontrol edilemeyen davranışlara neden olduğundan, SBMe dağıtımını düzgün bir şekilde kontrol edemez. Akış hızının aniden belirli bir kritik basınç değeri17,18,19'un üzerine çıktığı polimerik eriyikler için tarif edilen "sıçrama" etkisine benzer bir fenomenden etkilenir. Önceki çalışmamız16'da bildirildiği gibi, hacimsel kontrol dağıtım stratejisi, matrisin reolojik özelliklerine, çalışma koşullarına ve nozul geometrisine bağlı olarak SBMe ekstrüzyonunun dağıtıcıda üretilen basınçtan ayrılmasına izin verir. Son yıllarda, Corning'in Matribot'unun öncülük ettiği aynı ilkeden yararlanmak için pazarda birkaç girişimde bulunuldu. Kontrollü sıcaklık koşulları sayesinde SBMe ve diğer sıcaklığa duyarlı biyomürekkeplerin işlenmesine ve biriktirilmesine izin verir. Ancak, pahalı olabilir ve daha küçük laboratuvarlar için erişilebilirliği sınırlayabilir.
Önceki makalemizde, düşük maliyetli özel bir alternatif sunduk - hacimsel tahrikli bir biyo-baskı sistemi16. Bu sürüm, özel bir 3D baskılı ekstrüder ile değiştirilmiş bir giriş seviyesi 3D yazıcıya dayanıyordu. Biyo-baskıdaki etkinliğine rağmen, baskı tekrarlanabilirliğinde bazı sınırlamalar getirdi. Giriş seviyesi bir 3D yazıcıdan türetildiği için, Z hareketleri ve otomatik hedef arama ile ilgili bazı sorunları vardı. Bu ihtiyaçları karşılamak için, özel düşük maliyetli hacimsel dağıtım sistemimizin gelişmiş bir sürümünü ve SBMe kullanan biyo-baskı yapıları için özel bir protokol geliştirdik.
Burada, bu sistemin inşası ve kullanımı için protokoller sağlıyoruz. Önceki çalışmamıza16 dayanan özel bir hacimsel kontrollü ekstrüder, bir biyoyazıcı kasası ve bir kontrol sisteminden oluşur. Her modül için üretim ve montaj yapılmaktadır. Belirli bir gcode dosyası ile birleştirildiğinde ve programlandığında, matris işleme için protokol açıklamasını izleyerek, sistem hem tekli hem de çoklu katmanlarda iyi şekil doğruluğuna sahip SBMe'yi kullanarak saf veya seyreltilmiş yapıları biyo-baskı yapabilir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1. 3D Hacimsel biyoyazıcının basılması ve montajı
- Biyoyazıcı bileşenlerini hazırlayın ve 3D yazdırın.
- * dosyasını indirin. Ek Dosya 1'den STL tasarım dosyaları.
- Yük*. Baskı plakasındaki parçaların yönünü ve 3D yazıcı için gereken tüm seçenekleri tanımlamak için tescilli dilimleme yazılımındaki STL dosyası. Parçaları polilaktik asit (PLA) kullanarak orta kalite seçenekleriyle (0,4 mm nozzle boyutu, 1,75 mm filament çapı, 220 °C ekstruder sıcaklığı, 50 °C baskı yatağı plakası sıcaklığı, 0,2 mm katman yüksekliği, 300 mm/s baskı hızı) basın.
NOT: Orta kalite seçenekleri, parçaları yazdırmak için kullanılan yazıcıya göre farklılık gösterebilir. - Yazdırılan parçaları 3D yazıcı yatağından ayırın. Varsa basılı destek yapılarını çıkarın ve gerektiğinde yüzeyleri cilalayın.
- Ekstrüderi monte edin (Şekil 1).
- İtici bloğun dikey deliklerine iki lineer bilyalı rulman (LM4UU) yerleştirin. Ayrıca arka orta deliğe bir kılavuz vida somunu T8 yerleştirin ve dört vidayla (M3x10) sabitleyin.
- Step motora rijit bir şaft kaplini takın ve ardından dört vida (M3x6) kullanarak ekstrüder motor muhafazasına sabitleyin.
NOT: Kablolar için krikonun uygun şekilde konumlandırılmasını sağlamak için step motoru, ekstrüder motor muhafazasındaki oluğa göre yönlendirin. - Adım 1.2.2'de monte edilen step motoru, daha önce takılan rijit şaft kaplinini kullanarak bir T8 kılavuz vidasına (150 mm) sabitleyin. Her bloğun ayar vidalarıyla düzgün şekilde sabitlendiğinden emin olun.
- Ekstrüder tabanının altına iki vidayla (M8x4) bir adet Oynak Flanşlı Rulman (8 mm iç çap) takın.
- İki bilyalı rulmanı (4 x 9 x 4 mm) ekstrüder tabanının üstündeki özel deliklere ve diğer ikisini alt bölümdeki deliklere yerleştirin.
- Monte edilen parçayı (adım 1.2.1) yapının üst kısmındaki boşluktan ekstrüder tabanına yerleştirin. Dört bilyalı rulmanı (adım 1.2.5) her iki taraf için bir tane olmak üzere iki adet 4 mm'lik çubukla bağlayın. Çubukların, adım 1.2.1'de monte edilen parçadaki iki lineer bilyalı rulmandan geçmesine izin verin.
NOT: Çubukları önce üstteki iki bilyalı rulmana yerleştirmek ve daha sonra bunları alt bilyalı rulmana ulaşana ve her şey tanımlanan yuvalara sabitlenene kadar ekstrüder tabanına koymak da mümkündür. - Adım 1.2.3'te monte edilen parçayı ekstrüder tabanının merkezi deliğine yerleştirin. Kılavuz vida somununu geçmek ve kendinden hizalı flanş yatağına ulaşmak için kılavuz vidayı döndürün. Kılavuz vidayı kilitlemek için bileşendeki ayar vidalarını ve ekstrüder motor muhafazasını ekstrüder tabanının üstüne sabitlemek için iki vidayı (M3x8) kullanın.
- Şırınga namlu flanşı tutucusunu ekstrüder tabanının alt kısmına takmak için diğer iki vida (M3x40) ve M3 somunları kullanın, şırınga namlu flanşını kilitlemek için (yukarıdan aşağıya doğru yerleştirme yönü). Piston flanşını kilitlemek için şırınga piston tutucusunu itici bloğun üst deliklerine (aşağıdan yukarıya doğru yerleştirme yönü) takmak için diğer iki vida (M3x30) ve M3 somunları kullanın.
- İki vidayı (M4x80) iki yaya yerleştirin ve ekstrüder tabanının alt kısmında ve şırınga bloğunda bulunan deliklerden geçmelerine izin verin. Şırınga bloğunun kaymasını önlemek için şırınga için boşluk bırakarak somunları vidalayın.
NOT: Vidalar arkadan öne doğru gitmelidir.
- X eksenini birleştirin (Şekil 2).
- Dört adet lineer bilyalı rulman (LM8UU x 24 mm) X_Left_Block ve X_Right_Block parçayı, her biri için iki tane olmak üzere üst ve alt deliklere yerleştirin. Ayrıca iki kayış bloğunu X sağ ve X sol bloğun üzerine vidalarla (M2x10) takın ve kayış için boşluk bırakın.
- İki bilyalı rulman (5 x 16 x 5 mm) X_Right_Block ortasındaki deliklere her iki tarafta birer tane olmak üzere yerleştirin. X_Right_Block'ın iç boşluğuna bir kasnak (Delik 5 mm) yerleştirin ve iki bilyalı rulmanı 5 mm'lik bir çubukla (35 mm uzunluk) bağlayın ve kasnaktan geçmesine izin verin.
NOT: Montajın daha iyi yol tutuşu için daha uzun bir çubuk kullanın. Parçaları yerine yerleştirdikten sonra, istenen uzunlukta çubuğu kesin. - İki vidayla (M3x8) X_motor_housing bir limit anahtarı takın. NEMA 17 motorunu motor gövdesine yerleştirin ve X_block_1 kapağını motor gövdesine ve motora sabitlemek için dört vida (M3x8) kullanın.
- Motora bir kasnak (5 mm Çap) takın ve ayar vidalarıyla kilitleyin ve ardından adım 1.3.3'te monte edilen parçayı dört vidayla (M5x8) X_block_1 vidalayın. Ayrıca X_Left_Block altına iki vidayla (M3x8) bir limit anahtarı takın.
NOT: Adım 1.3.2 ve 1.3.4'teki kasnakların dış çapı aynı olmalıdır. - İki lineer bilyalı rulmanı (LM8UU x 45 mm) X_slider üstündeki ve altındaki deliklere yerleştirin.
- Adım 1.3.2 ve 1.3.4'te monte edilen parçaları iki adet 8 mm çubukla (200 mm uzunluk) bağlayın ve adım 1.3.5'te monte edilen parçadan geçmelerine izin verin.
NOT: Montajdan önce istenen uzunlukta çubukları kesin. - Kayış bloğunu ve iki vidayı (M2x8) kullanarak bir kayış ucunu X_slider_belt_connection kilitleyin. Kayışı, monte edilmiş parça 1.3.4'teki kasnağın etrafından, ardından monte edilmiş parça 1.3.2'deki kasnağın etrafından geçirin ve diğer kayış ucunu ikinci kayış bloğunu ve diğer iki vidayı (M2x8) kullanarak X_slider_belt bağlantısına sabitleyin. Doğru hareketi elde etmek için kayışın uygun şekilde sıkı olduğundan emin olun.
NOT: Bu adım sırasında, paraziti önlemek için X_slider X ekseni yapısının bir ucuna doğru hareket ettirilmelidir. - X_slider_belt_connection bir vidayla (M6x20) X_slider vidalayın.
- Ekstrüderi X_slider bağlayın ve dört vidayla (M5x10) sabitleyin.
- Y eksenini birleştirin (Şekil 3).
- Sabitleme braketini dört vida (M3x10) ve dört somun kullanarak yukarı arka biyoyazıcı parçasına yerleştirin.
NOT: Sabitleme braketinin konumu, kayışın uygun gerginliğini elde etmek ve step motorun yerleştirilmesine izin vermek için uyarlanabilir. - Step motoru sabitleme braketine yerleştirin ve dört vidayla (M3x8) vidalayın. Ardından, krank miline bir kasnak (5 mm delik) yerleştirin ve ayar vidalarıyla sabitleyin.
NOT: Bileşenler arasında bir miktar paraziti önlemek için motoru sabitleme braketine yerleştirmeden önce kasnak krank miline takılabilir. - Ön 8 mm çubuktaki iki kasnağı (8 mm iç çap) bulun ve bunları iki çubuğa (uçtan 2.5 cm uzakta) kilitleyin. Bu işlemi arka çubuk için tekrarlayın ve sağ uçtan 5 cm uzakta başka bir kasnak ekleyin.
- 12 Oynak Flanşlı Rulmanı (8 mm çapında) biyoyazıcının iç üst kısımlarına takın.
- Adım 1.4.3'teki monte edilmiş çubukları kullanarak iki ön biyoyazıcı parçasını ve iki üst arka biyoyazıcı parçasını (sol/sağ yön) bağlayın ve bunları Oynak Flanşlı Rulmanlara (8 mm çap) kilitleyin. Monte edilmiş iki parçayı tüm bağlantı noktalarında vidalarla (M3x8) sabitleyin.
NOT: Arka çubuğu yerleştirirken, step motor üzerindeki kasnağı çubuk üzerindeki iç kasnağa bağlayan kapalı bir kayış yerleştirin.
NOT: Motorun hareket etmemesini ve kayışın uygun şekilde gerilmesini sağlamak için somunları sıkarak step motoru sabitleyin. - Monte edilmiş iki parçayı adım 1.4.5'te dört adet 8 mm'lik çubuk kullanarak bağlayın. Çubukların monte edilmiş parça 1.3'te bulunan lineer bilyalı rulmanlardan geçmesine izin verin ve bunları Oynak Flanşlı Rulmanlara (8 mm çap) kilitleyin. Monte edilmiş iki parçayı tüm bağlantı noktalarında vidalarla (M3x8) sabitleyin.
- Kayış bloğunu kullanarak açık bir kayış ucunu X_block_1 üst kısmına sabitleyin ve bu işlemi X_block_2 için tekrarlayın. Kayışı soldaki arka kasnakların etrafından, ardından ön kasnağın etrafından geçirin ve diğer kayış ucunu başka bir kayış bloğu ile tekrar X_block_1 sabitleyin. İkinci kayış için bu işlemi tekrarlayın.
NOT: Doğru hareketi elde etmek için kayışlar uygun şekilde sıkılmalı ve Y hareketlerinde bükülmeyi veya paraziti önlemek için aynı uzunlukta olmalıdır.
- Sabitleme braketini dört vida (M3x10) ve dört somun kullanarak yukarı arka biyoyazıcı parçasına yerleştirin.
- Z eksenini birleştirin (Şekil 4).
- Alt biyoyazıcı kasası parçalarını (M4x8) vidalayın.
- Adım 8'de monte edilen parçanın tabanının tabanına bir adet Oynak Flanşlı Rulman (1.5.2 mm çapında) takın.
- İki flanşlı lineer bilyalı rulmanı (LMH8UU) Z_slider bulunan dış deliklere ve bir kılavuz vida somununu merkezi deliğe vidalarla (M3x8) sabitleyin.
- İki vidayla (M3x8) Z_plane sol tarafa bir limit anahtarı sabitleyin.
- Step motoru sağlam bir şaft bağlantısına sabitleyin. Dört vidayla (M3x20) Z_block bir step motor ve rijit şaft bağlantısına dişli bir çubuk takın. Her bloğun ayar vidalarıyla düzgün şekilde sabitlendiğinden emin olun.
- Adım 1.5.5'te monte edilen parçayı iki adet 8 mm'lik çubuk kullanarak biyoyazıcı tabanına bağlayın. Adım 1.5.3'te monte edilmiş parçadan geçmelerine izin verin.
- İki vida (M5x8) kullanarak Z_block arka panele sabitleyin.
- Dört vida (M3x25) kullanarak Z_plane Z_slider bağlayın. Bunları yukarıdan aşağıya doğru Z_plane deliklere yerleştirin, yayı Z_plane ile Z_slider arasından geçirin ve somunlarla sabitleyin. Düzlemi düzleştirmek için yay gerginliğini ayarlayın.
- Özel boşlukta biyoyazıcı yapısının altına dört adet ayarlanabilir ayak takın. Ayakları ayarlayarak biyoyazıcıyı düzleştirin.
- Monte edilmiş parçayı sekiz vidayla (M4x12) adım 1.4.6'daki monte edilmiş parçaya bağlayın.
- Yapının ön tarafındaki iki menteşeyi belirli konumlara ve sağ taraftaki bir mıknatısı ilgili noktaya vidalarla (M2x8) takın. Açıklıkları kapatmak için genel yapıyı 2 mm şeffaf pleksiglas levhalara vidalayın.
NOT: Ön pleksiglas paneli menteşelere vidalayın ve bir ön kapı elde etmek için mıknatısa uygun olarak başka bir vida takın.
- Montajı görüntüleyin (Şekil 5A).
- Ekrana bağlı kabloların alt delikten geçmesine izin verin ve ekranı dört vidayla (M3x3) ekran muhafazasına takın.
NOT: Bu geçişin LCD düğme kapağı olmadan yapılması gerekir. Ekran muhafazasına takıldıktan sonra önceden takılmış düğme üzerine yerleştirilebilir. - Dört vida (M2x6) kullanarak muhafazayı kapakla kapatın.
- SD kartı sol yuvaya takın.
- Tellerin yapının üstündeki delikten geçmesine izin verin. Biyoyazıcının üst kısmına monte edilen parçayı iki vidayla (M3x8) vidalayın.
NOT: Tüm kablolar (motorlar, limit anahtarları ve ekran) duvara yakın çalışacak ve sol alttaki delikten çıkacaktır. Mekanik parçalarla etkileşimi önlemek için kablo klipsleri ile sabitlenirler.
- Ekrana bağlı kabloların alt delikten geçmesine izin verin ve ekranı dört vidayla (M3x3) ekran muhafazasına takın.
- Elektronik montajı (Şekil 5B)
- Soketi iki vidayla (M3x10) elektronik kasanın dış kısmına sabitleyin.
- Anakartı dört vidayla (M3x10) elektronik kasanın iç kısmına takın.
- Güç kaynağının alt kısmını dört vidayla (M3x8) elektronik kasanın iç kısmına takın.
- Kabloları kapaktaki dairesel delikten geçirin ve anakarta bağlayın. Elektronik kasayı dört vida (M3x10) kullanarak kapağıyla kapatın.
NOT: Elektronik kasayı biyoyazıcı yapısına bağlamak veya küçük çalışma alanları olması durumunda masanın üzerine bırakmak mümkündür.
Şekil 6'da tüm elektronik kablo bağlantıları gösterilmektedir. Kullanılan 3D yazıcı anakartına göre biraz farklı olabilirler.
2. Yazılım ayarı ve gcode oluşturma süreci
- Dilimleme yazılım ayarlarının hazırlanması
- Dilimleme yazılımını açın.
NOT: Talimatlar, kullanılan yazılıma veya sürüme bağlı olarak farklılık gösterebilir. - Platforma giriş yapın.
- Ayarlar seçeneklerine gidin. Yazıcıyı seçin ve ardından Ağa bağlı olmayan bir yazıcı ekleyin. Özel FFF yazıcıyı seçin ve Yazıcı adı kutusuna yazıcının adını yazın. Ekle'ye tıklayın.
NOT: İlk yazılım yüklemesiyse, oturum açtıktan sonra Yazıcı ekle paneli otomatik olarak açılacaktır. - Makine Ayarları penceresinde, varsayılan x, y, z ayarlarını 176, 120, 45 mm olarak değiştirin.
- Henüz seçimi kaldırılmamışsa, Isıtmalı yatak seçeneğinin seçimini kaldırın.
- Başlangıç g kodu ve Bitiş g kodu panellerine, Ek Dosya 2'deki 'JoVE_Starting_G-code.txt' ve 'JoVE_Ending_G-code.txt' başlıklı dosyalarda bildirilen metin satırlarını ekleyin.
- Başlangıç g kodu dosyasındaki 'M92 E150' satırındaki 150 değerini, uygulanacak akış hızına göre değiştirin. Aşağıdaki formülü kullanarak uygun değeri tahmin edin:
Q olduğunda istenen akış hızıdır [μL/dak].
NOT: Bu formül tarif edilen sistem ile deneysel olarak elde edilmiştir. Mekanik veya elektrikli bileşenlerde değişiklikler olması durumunda durum farklı olabilir. Olası bir alternatif, değeri kullanılan sisteme göre sabitlemek ve istenen gcode dosyasını oluşturmak için özel bir MATLAB kodu oluşturmak olabilir.
- Başlangıç g kodu dosyasındaki 'M92 E150' satırındaki 150 değerini, uygulanacak akış hızına göre değiştirin. Aşağıdaki formülü kullanarak uygun değeri tahmin edin:
- Extruder 1 panelindeki Uyumlu malzeme çapı değerini 1,75 olarak değiştirin ve ardından kapatın.
- Marketplace'e gidin, Z Ofset Ayarı eklentisini seçin ve yükleyin. İşlemin sonunda, sonlandırmak için yazılımı yeniden başlatın. Yeniden açıldığında Ayarlar | Yazıcı | Araç çubuğundaki Yazıcıları Yönet'i tıklayın. Tercihler penceresinde, Ayarlar'a tıklayın ve Tüm seçeneği kontrol et'i seçerek tüm seçenekleri etkinleştirin ve kapatın.
- Yapılandırma panelini içeren sahne menüsündeki Yazdırma Ayarları'na (üçüncü düğme) tıklayarak kurulumu yapılandırın. Konfigürasyon panelindeki geçerli yazdırma profiline dolgu yüzdesini girin. Geçerli yazdırma ayarlarını değiştirmek için Özel düğmesini ve açılır menüden İnce profilini seçin. Baskı Hızını 10 mm/sn olarak ayarlayın.
- Dilimleme yazılımını açın.
- GCoD Hazırlama
- * dosyasını indirin. Bu makalenin Ek Dosya 2'sinden 'JoVE_Square' başlıklı STL tasarım dosyası.
- Yük. STL dosyasını dilimleme yazılımına yerleştirin.
- Parçayı düz yüzeyde bulun ve 65, 42.5, 0 (X, Y, Z) mm koordinatlarına getirin. üzerine tıklayarak iki kopya oluşturun. STL dosya adını seçin ve çarpma seçili seçeneğini seçin. Bunları şu koordinatlara taşıyın: 16, 42.5, 0 mm ve -33, 42.5, 0 mm (X, Y, Z).
NOT: Doğrudan son gcode dosyasında manuel olarak değiştirilmedikçe yazdırma sırasını otomatik olarak tanımlamak mümkün değildir. Koordinatlar 6 oyuklu bir plaka için tanımlanmıştır. - Aşama menüsündeki Yazdırma Ayarları'na gidin. Duvarlar bölümünde, Duvar satırı sayısı olarak 0 koyun. Üst/Alt bölümünde Üst/Alt kalınlık değeri olarak 0 koyun. Dolgu panelinde şu değerleri girin: Dolgu Deseni: Izgara, Dolgu çizgisi mesafesi: 5 mm, Dolgu çizgisi yönleri: [0].
NOT: X ekseni doğruluğunu artırmak için Print speed (Yazdırma hızı) bölümünde Travel Speed'i azaltmak mümkündür. - Seyahat bölümünde geri çekmeyi ve Soğutma bölümünde baskı soğutmayı devre dışı bırakın.
- Yapı Plakası Yapışması bölümünde, Yapı Plakası Yapışma Türü olarak Yok'u seçin, Özel Modlar'da ise Yazdırma Sırası olarak Her Seferinde Bir seçeneğini belirleyin.
- G kodunu oluşturmak için Dilim düğmesine tıklayın.
- G kodu dosyasını Not Defteri uygulaması ile açın ve 12. satırda yer alan "M104 S200", "M105" ve "M109 S200" satırlarını kaldırın. Cura_SteamEngine 4.9.0" ile oluşturulmuştur.
- Aşağıdaki satırdan önce "G1 Z25" ekleyin "; AĞ: JoVE_Square_rev. STL(6)" ve sonrakini ikiye bölün: (1) G0 F3600 X142.46 Y7.499 ve (2) G1 Z0.3.
NOT: X ve Y koordinatları sadece örnektir. - " ifadesinden sonra gelen her satırda Z değerini Z25 olarak değiştirin; TIME_ELAPSED" her parçanın her son katman talimatını yorumlayın.
NOT: Yalnızca tek bir parça yazdırmak için adım 2.3.10 gerekli değildir.
3. Şişme / bozulma testi
- Hazırlık adımları
- Steril bir 1 mL cam şırınga (TLL terminali) ve steril bir 25 G konik nozul alın. Onları birleştirin ve monte edilmiş şırıngayı buzdolabına koyun.
- Deneyden bir gün önce pipet uçlarını ve SBMe matris şişesini gece boyunca buzdolabına koyun.
- 1 mm x 1 mm dairesel gözenek boyutuna ve bunları kavramak için bir yan dikey direğe sahip üç PLA ızgarası (Φ = 20 mm) yazdırın.
- Yapıları yazdırma
- Monte edilmiş şırıngayı ve SBMe matris şişesini buzdolabından alın. SBMe matrisinden 500 μL'yi aspire edin ve jelleşmeyi sağlamak için 15 dakika inkübatöre koyun.
- Şırıngayı inkübatörden alın ve biyoprinter baskı kafasına yerleştirin. Şırınga pistonunun itici blok ile düzgün şekilde temas ettiğinden emin olun.
- Şırınga sabitleme pistonunu ve şırınga namlu flanşını şırınga piston tutucuları ve şırınga namlusunu şırınga kelepçesi ile sabitleyin.
- Eksenlerin kaynağını otomatik olarak algılamak için biyoyazıcı menüsündeki Otomatik ev ayarını kullanarak sistemi kalibre edin.
- Z0'ı manuel olarak tanımlamak için iğne ucu PLA ızgarasına değene kadar Eksenleri Hareket Ettir komutunu kullanarak ekstrüderi hareket ettirin.
- Biyoyazıcı menüsünde yazdırılacak g kodu dosyasını seçerek yazdırmaya başlayın.
- Ekstrüzyondan sonra SBMe'nin yerleşmesini sağlamak için çok kuyulu plakayı 2 dakika inkübatöre koyun.
- Çok kuyulu plakayı alın ve biyo-baskılı ızgaraları içeren üç oyuğa 2 mL hücre kültürü ortamı koyun. Çok kuyulu plakayı inkübatöre koyun.
- Her zaman noktasında (t0, 1 saat, 2 saat, 3 saat, 4 saat, 1, 3, 7, 10 ve 14 gün), her bir ızgarayı plakadan alın ve bir terazideki ortam ve ağırlığın fazlalığını gidermek için temiz kağıtla kurulayın. Deneye devam etmek için ızgarayı tekrar plakaya ve ardından inkübatöre koyun. Aşağıdaki formülleri kullanarak şişme oranını ve bozulma oranını tahmin edin:
Burada Wt , yapıların her bir zaman noktasındaki ağırlığı ve Wt0 kurutulmuş yapıların ağırlığıdır.
Burada Wi , şişme testinin sonundaki ağırlıktır.
4. SBMe yapılarının biyobaskısı
- Hazırlık adımları
- Steril 1 mL'lik bir cam şırınga (TLL terminali) ve steril bir 25 G konik nozul alın ve bunları biyogüvenlik kabininin altına monte edin. Onları buzdolabında steril bir kutuya koyun.
- Deneyden bir gün önce pipet uçlarını ve SBMe matris şişesini gece boyunca (buz üzerinde 4 °C) buzdolabına koyun.
- 1,5 mL'lik bir santrifüj tüpüne 20 μL tripan mavisi ekleyin.
- Santrifüjü 345 × g, 4 °C'ye ayarlayın ve soğumaya bırakın (~3-4 saat).
- Santrifüj için bir denge olarak 15 mL'lik bir santrifüj tüpüne 5 mL su alın.
- Bir su banyosunda ılık Fosfat Tampon Çözeltisi (PBS) ve Ortam.
NOT: Hücre kültürü ortamı, Fetal Sığır Serumu (FBS), Penisilin-Streptomisin ve L-glutamin ile desteklenmiş tam Dulbecco modifiye Eagle ortamından (DMEM) yapılmıştır. - Biyoyazıcıyı biyolojik güvenlik kabininin altına yerleştirin. UV ışığı altında 20 dakika sterilize edin.
NOT: Biyoyazıcının düzgün çalışmasını sağlamak için, Otomatik ev işlevini yürütün ve her eksenin doğru hareketlerini ve limit anahtarlarının çalıştığını doğrulayın.
- Bioink hazırlama
- Ticari murin prostat kanseri hücrelerinin bulunduğu inkübatördeki matarayı alın ve biyogüvenlik kabininin altına koyun.
- Hücre kültürü ortamını şişeden çıkarın.
NOT: Bu protokolde bildirilen hacimler T25 Hücre Kültürü şişeleri için geçerlidir. - Hücreleri 2 mL PBS ile bir kez yıkayın ve ardından aspire edin.
- 500 μL tripsin ekleyin ve hücrenin plakadan ayrılmasını sağlamak için şişeyi 5 dakika inkübatöre koyun.
- Hücrelerde tripsinizasyon olup olmadığını kontrol edin ve gerekirse şişenin dibine hafifçe vurun.
- Şişeye 4.5 mL orta ekleyin. Ayrılan tüm hücrelerin hücre kültürü ortamında yüzdüğünden emin olmak için plakayı dikkatlice yıkayın.
- Ortamı aspire edin ve 15 mL'lik bir santrifüj tüpüne ekleyin.
- 20 μL'lik bir alikot alın ve tripan mavisi alikot ile karıştırın. Ardından, aşağıdaki formülü kullanarak canlı hücreleri saymak için bu karışımdan 10 μL'yi hücre sayma odasına koyun:
Burada f , tripan mavisi süspansiyonu için seyreltme faktörüdür (1:1 oranı); V , hücre süspansiyon hacmidir [mL]. - Kalan hücre süspansiyonunu 5 dakika (345 × g, 4 °C) santrifüjleyin.
- Süpernatanı çıkarın ve istenen hücre yoğunluğunda (106 hücre / mL) soğuk SBMe matrisine yeniden süspanse edin
- Soğuk şırınga ile 800 μL matris süspansiyonu içeren hücreleri aspire edin.
- Şırıngada sıkışmış olabilecek hava kabarcıklarını çıkarın ve steril bir kutuya koyun. Ardından, jelleşmeye izin vermek için 15 dakika inkübatöre koyun.
- Biyobaskı süreci
- Şırıngayı inkübatörden alın ve biyoprinter baskı kafasına yerleştirin. Şırınga pistonunun itici blok ile düzgün şekilde temas ettiğinden emin olun.
NOT: Model ve hacim, deney için kullanılan şırınga ile aynı olmalıdır. - Şırınga sabitleme pistonunu ve şırınga namlu flanşını şırınga piston tutucuları ve şırınga namlusunu şırınga kelepçesi ile sabitleyin.
- Yay basıncını ayarlamak ve şırıngayı yerine kilitlemek için ekstrüderin alt kısmındaki M4 somunları kullanın.
NOT: 4.3.1 ila 4.3.4 arasındaki adımlar Şekil 7'de gösterilmiştir. - Eksenlerin kaynağını otomatik olarak algılamak için biyoyazıcı menüsündeki Otomatik ev ayarını kullanarak sistemi kalibre edin.
NOT: Bu bölüm, yazdırma için kullandığımız destek türünden bağımsız olarak her zaman uygun başlangıç ayarlarını sağlar. - Baskı düzlemine 6 çok kuyulu bir plaka yerleştirin.
- Z0'ı manuel olarak tanımlamak için iğne ucu kuyunun dibine değene kadar Eksenleri Hareket Ettir komutunu kullanarak ekstrüderi hareket ettirin.
- Biyoyazıcı menüsündeki menü seçeneğinden gcode dosyasını seçin ve yazdırmaya başlayın. Her kuyucuğa kare altı katmanlı bir ızgara (2,6 cm kenar) basılacaktır.
- Biyo-baskı işleminden sonra, baskı işleminin başarılı olduğundan emin olmak için ters çevrilmiş bir mikroskop kullanın ve ekstrüzyondan sonra SBMe'nin yerleşmesini sağlamak için çok kuyulu plakayı 2 dakika inkübatöre koyun.
- Her oyuğa 2 mL hücre kültürü ortamı koyun.
NOT: Birim, yapıları tamamen kapsamalıdır.
- Şırıngayı inkübatörden alın ve biyoprinter baskı kafasına yerleştirin. Şırınga pistonunun itici blok ile düzgün şekilde temas ettiğinden emin olun.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bu makalede, düşük maliyetli, özel yapım, hacimsel bir biyoyazıcı kullanılarak SBMe'den yapılmış biyo-baskı yapıları için bir protokol sunuyoruz. Ayrıntılı bir açıklama ve 3D baskı sağlıyoruz *. Sistemi oluşturmak için STL dosyaları ve tek ve çok katmanlı yapıları yazdırarak kanser araştırmalarında potansiyel kullanımını gösteriyoruz. Her 3D baskılı bileşen, montajdan önce destek yapısından veya istenmeyen baskı kalıntılarından uygun şekilde temizlenmiştir. Şekil 8 , genel montajın farklı gö...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Translasyonel araştırmalarda, SBM'ler doku mühendisliğinden ilaç testine kadar çeşitli araştırma alanlarında özellikle değerlidir 2,3. Özellikle, tümör mikro çevresinin mekanik ve biyokimyasal özelliklerini kopyaladıkları ve tümör büyümesini, metastazı ve tedavi yanıtlarını daha iyi yansıtan modellerin geliştirilmesini sağladıkları için kanser araştırmalarında temel hale gelmişlerdir. SBMe, özellikle 3D organoidler için en yaygın...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların beyan edebilecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Teşekkürler
Bu çalışma kısmen, Cancer Research UK ve Fondazione AIRC (n° 22790) arasındaki bir ortaklık ve Avrupa Birliği - Yeni Nesil AB, Misyon 4, Bileşen 1, CUP D53D23003310006. tarafından finanse edilen "Klinikte tek hücreli kanser evrimi" başlıklı A26815 sayılı Hızlandırıcı Ödülü tarafından finanse edilmiştir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 12 kuyulu plaka | Sigma-Aldrich | CLS351143 | |
| 3D FDM yazıcı | Flashforge | Adventurer 5M Pro | |
| 3D yazıcı Anakart | GEETECH | GT2560 REV A + | |
| 6 çok kuyulu plaka | Sigma-Aldrich | M8687 | |
| AC soketi | HiLetgo | https://www.amazon.it/HiLetgo-Terminal-Socket -Tutucu Anahtarı/dp/B0814PT3YG/ref=sr_1_1?__ mk_it_IT=%C3%85M%C3%85%C5%BD%C3% %95 C3%91& crid=2TRIBP34VJ61A & dib=eyJ2IjoiMSJ9.zW6_VmeiudR I4yMpjJqJm7OdeoctTKW2mrEzml BAyJVa1hkM4PiJT3pLY0mXdxm1 AZQxa2_f5J4q4d5v3vUeqLkjJ6BM kWHAoeEfbEQJNuZaQ3NjmUlqWy _1AfQpnRp4VqJ2m3bkWsChztCa Ok-ZdQJlobGxJaMKg7WbV352 Hyo.0tEw2GYoPQJ4SdNYXO1XM Jrl2yXMvRey55Hj7GhISkk& dib_ etiketi=se& anahtar kelimeler=AC+soket+HiLetgo& nsdOpt OutParam=true& qid=1734702097& sprefix=ac+ soket+hiletgo%2Caps%2C173& sr=8-1 | 15 A 250 V |
| Ayarlanabilir ayaklar | EXIN DEHCEN | https://www.amazon.it/gp/product/ B0CPLTSNQB/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& psc=1 | Yükseklik 27-40 mm |
| Bilyalı rulman 4 mm | QUARKZMAN | 684ZZ | Boyutlar 4 x 9 x 4 mm |
| Bilyalı rulman 5 mm | XiKe | 625-2RS | Boyutlar 5 x 16 x 5 mm |
| Kayış kapalı | Turmberg3D | https://www.amazon.it/gp/product/ B09B2FJQBV/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& psc=1 | Genişlik 6 mm |
| Kemer açık | Fajoeda | https://www.amazon.it/gp/product/ B09QCTVPTH/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& th=1 | Genişlik 6 mm |
| Biyobaskı nozulu | Fisher Scientific | 17780789 | Corning Standart Konik Biyobaskı Nozulları |
| Bü rker Hücre Sayma odası | GLASWARENFABRIK KARL HECHT | ||
| 40443001 Santrifüj | Eppendorf | 5702 R | |
| Santrifüj tüpü | Sigma-Aldrich | CLS431470 | 15 mL |
| Santrifüj tüpü | Sigma-Aldrich | EP0030120086 | 1.5 mL |
| Ekran | Sigma-Aldrich | BR718905 | |
| DMEM | Gibco Thermofisher | 11965092 | |
| FBS | Sigma-Aldrich | F7524 | |
| Flanşlı lineer bilyalı rulman | Kaynak haritası | https://www.amazon.it/gp/product/ B07S6LZHM7/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& psc = 1 | LMF8UU |
| Cam şırınga | Fisher Scientific | 11520062 | Hamilton GasTight 1 mL (TLL terminali) |
| Menteşeler | YASQZ | https://www.amazon.it/gp/product/ B09DNXGDGG/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& psc=1 | |
| Kuluçka | Makinesi Fisher Scientific | 15481374 | Eppendorf Galaxy 48 R CO2 Kuvöz, 48 L, Paslanmaz Çelik |
| Ters mikroskop | Nikon | Eclipse Ti2-U | |
| Jumper telleri | Iverntech | https://www.amazon.it/Iverntech-XH2 -54-Terminale-Stampante-Stepper/dp/ B07Q12B6K5/ref=pd_ci_mcx_mh_ mcx_views_0_image?pd_rd_w=cb2r J& content-id=amzn1.sym.57a351cf- ba07-47e8-b302-aa2aa1a3f209%3 aamzn1.symc.ca948091-a64d-450e- 86d7-c161ca33337b& pf_rd_p=57a3 51cf-ba07-47e8-b302-aa2aa1a3f209 & pf_rd_r=YHY9RFYZJK7PYAY2RXX D & pd_rd_wg=7WkXB& pd_rd_r=8239 66cb-4977-48ce-b095-0dcedf8c372f& pd_rd_i=B07Q12B6K5& th=1 | |
| LCD ünitesi | Paradisetronic.com | https://www.amazon.it/Display-controller -conduttori-adattatore-stampante/dp/B01 DUR4064/ref=sr_1_9?__mk_it_IT=%C3 %85M%C3%85%C5%BD%C3%95%C3 %91& crid=1OAHVIIRA16X3& dib=eyJ2Ij oiMSJ9.07V2Jf7RzJjTUlIuFobUJFjUzG4 8633KkdcMXSEfnWLRX41d5vAF7xPBJ maniVxDoXecfihZzzOXlP3v-e29cUjoGLf GDyv5DoDVwp7ndohNTYvYzoi3gWkF- HsvDoDVwp7ndohNTYvYzoi3gWkF-br/ Hsv5DoDVwp7ndohNTYvYzoi3gWkF-br/ Hsv5DoDVwp7ndohNTYvYzoi3gWkF-br/ Hsv5DoDVwp7ndohNTYvYzoi3gWkF-br/ Hsvd2YbT7tjb1Dra1afqSn26CbFdEvJ84y qyX7Gi3-7DHh8yMwdd6_7quiuW_mjsm w1nu0YQG68GZ0XM7unOsvyddQ__R_ 3dndxb3mOjgGjklEgu_KEbZJPOZDIdSo oU3nrrKHj56hCfk9ACwYpB80QGCbTPK 0p-fE0g9h02WPmtHV38UU3m5AdZsTQ HqvnVlJg703qGT-8ze8fQItw2rtbgl_J86H RMReJOhVLQBkqNwxh57CQ.yNbeFmZ ZBEUhadz2dQa8NxpZD9g4P6ighRU_97 yxgnw& dib_tag=se& anahtar kelimeler=display% 2B3D%2Bprinter%2Bprusa%2Bi3& nsdO ptOutParam=doğru& qid=1734714093& S = < / > Endüstriyel & sprefix=display%2B3d%2B yazıcı%2Bprusa%2Bi3%2Cindustrial% 2C143& sr=1-9& th=1 | Eski Prusa i3 LCD ünitesi. Piyasada bulunan alternatif |
| Kılavuz vida M8 | RS PRO | 280-408 | |
| Kılavuz somun M8 | Comioke | https://www.amazon.it/dp/B0C7QB13C4? ref=ppx_yo2ov_dt_b_fed_asin_title& th=1 | M8 vidalar için |
| Kurşun vida somunu T8 | Aipaide | https://www.amazon.it/gp/product/B086QJCX1M/ref =ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie=UTF8& psc=1 | T8 vidalar için |
| Kurşun vida T8 | VBESTLIFE | https://www.amazon.it/gp/product/B07CXRB52Y/ref =ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie=UTF8& th=1 | Uzunluk 15 mm |
| L-Glutamin | Sigma-Aldrich | G7513 | |
| Limit anahtarı | CESFONJER | https://www.amazon.it/gp/product/B07SPX492J/ref =ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie=UTF8& psc=1 | |
| Lineer bilyalı rulman (LM4UU) | A ABSOPRO | https://www.amazon.it/gp/product/B0CB3M5GHJ/ref =ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie=UTF8& psc=1 | Boyutlar 4 x 8 x 12 mm |
| Lineer bilyalı rulman (LM8LUU) | Fdit | https://www.amazon.it/LM8LUU-Linear -Motion-cuscinetti-stampante/dp/B07N 58W3GZ/ref=sr_1_1_sspa?__mk_it_IT =%C3%85M%C3%85%C5%BD%C3% %95C3%91& crid=33VNCCCSIFJRP& dib=eyJ2IjoiMSJ9._JJ2doXI33C2JagX 8x6E2Bz2ILo10852tBi1erWqGn363ku zbcvknbMtsK6wm5jdR1P5XwC6Ovui at3kGIJPpYFOG_FiIBYT8xLkkbiphhR 4ncR6R9tPPyeN--_3RxFgKMh5tMO_ jesAcu7Anp87Qb91ruM85CKqduV-y6 HQJtAvVSXmfG4yE4N7d4_dDVKsR7 UkEmDIznJE0HIhvvI2R6vX2tMN5yMc _ZrUbUB0gPF6SgXHVJmKRizCRqL7J 64WRD-XnMSpVHY_LUVJ7gn9kJQ35 _zQw8vLD-_kRyvxwvE.. 4IVMdKzF1Ax mQHQhWEi6LH12UI4CmMgi288_g3zG CPY & dib_tag=se& anahtar kelimeler=LM8LUU+ Fdit& nsdOptOutParam=true& QID = 17347 < / > 04494 & S=ENDÜSTRİYEL& sprefix=lm8luu+fdit+ %2Cendüstriyel%2C136& sr=1-1-spons& sp _csd=d2lkZ2V0TmFtZT1zcF9hdGY& psc=1 | Boyutlar 8 x 15 x 45 mm |
| Lineer bilyalı rulman (LM8UU) | ARCELI | https://www.amazon.it/gp/product/ B07BV3YBP2/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& psc=1 | Boyutlar 8 x 15 x 24 mm |
| Mıknatıslar | OCEUMAOA | https://www.amazon.it/gp/product/ B0CB6C2RF4/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& th=1 | 8 x 3 mm |
| Matrigel | Gibco Thermofisher | LOT 0202003 | SBMe |
| Motor sürücüsü | Longruner | https://www.amazon.it/gp/product/ B071P41ZBW/ref=ppx_yo_dt_b_search _asin_title?ie=UTF8& psc = 1 | Sürücü A4988 |
| PBS | MicroGem, VWR | TL1006-500ML | |
| Penisilin-Streptomisin | Gibco Thermofisher | 15070063 | |
| Pipet uçları | Sigma-Aldrich | Z740058 | MARKA filtre uçları, raflı, TipBox (hacim 50-1000 & mu; L) |
| Pleksiglas levhalar | MVQPER | https://www.amazon.it/MVQPER-trasparenti- pleksiglas-trasparente-decorazione/dp/B0CF Q4BHQZ/ref=sr_1_14?dib=eyJ2IjoiMSJ9.bf7 Mp7I5m2qAR1Fp1V6DoYF2erUlNQUK_NuF ZLz9A7uJKGa_RNeni6NiO4YQfAjVHBtZgdzI 356XVc3BIuKVpV8Pfg0rImqNXgxG-kfklAYrb rXv4tV6RL1ShFwgLzfQh8R0sEoFJPcLF2f2E EcGMlvEwOuCv6qRnS1MQ-VaA0sLPnM0ts wdL4sLVxsonWcfSrHAUrgWh4fpVNMA4Kwh 0UaeQhfexFY0dNWhPYftXvvz9LLj1uMID2E Gi_ScmYqY5LahbYOmKVVPPiPIgCVdLjaM8 yqNp2ZJGV9Fge2xa6OAHxmMeaQUqGkoQ 88x9GkX7UN ewuOwYO0dEUYSzHCdGONWo eZLfSJOR3C6-knjzKrOQ0ziouJfo-ktbak7v3A H53BtIOiXbT57cKqh-uc9wI_j_lHN-8okAe2yO 6upc61MoydZujuxnfLG7hwytqHQG2.ApKq8 MVs8Xihn_zcA39nML-2lpjnagGhXIx0clcJN_ E& dib_tag=se& Anahtar Kelimeler=Lastra+Pleksiglas+ 2+mm& nsdOptOutParam=true& qid=1734702823& sr=8-14 | 2 mm kalınlık, şeffaf levha, 21 x 32,5 cm |
| Pleksiglas levhalar | MVQPER | https://www.amazon.it/MVQPER-trasparenti -pleksiglas-trasparente-decorazione/dp/B0C FQ4BHQZ/ref=sr_1_14?dib=eyJ2IjoiMSJ9.b f7Mp7I5m2qAR1Fp1V6DoYF2erUlNQUK_N uFZLz9A7uJKGa_RNeni6NiO4YQfAjVHBtZ gdzI356XVc3BIuKVpV8Pfg0rImqNXgxG-kfk lAYrbrXv4tV6RL1ShFwgLzfQh8R0sEoFJPc LF2f2EEcGMlvEwOuCv6qRnS1MQ-VaA0s LPnM0tswdL4sLVxsonWcfSrHAUrgWh4fpV NMA4Kwh0UaeQhfexFY0dNWhPYftXvvz9 LLj1uMID2EGi_ScmYqY5LahbYOmKVVPP iPIgCVdLjaM8yqNp2ZJGV9Fge2xa6OAHx mMeaQUqGkoQ88x9GkX7EWuOwYO0dE UYSzHCdGONWoeZLfSJOR3C6-knjzKrO Q0ziouJfo-ktbak7v3AH53BtIOiXbT57cKqh- uc9wI_j_lHN-8okAe2yO6upc61MoydZujux nfLG7hwytqHQG2.ApKq8MVs8Xihn_zcA3 9nML-2lpjnagGhXIx0clcJN_E ve dib_tag=SE & Anahtar Kelimeler=Lastra+Pleksiglas+2+mm& nsd OptOutParam=doğru& qid=1734702823& sr=8-15 | 2 şeffaf levha, 2 mm kalınlık, 20 x 20 cm |
| Pleksiglas levhalar | MVQPER | https://www.amazon.it/MVQPER-trasparenti -pleksiglas-trasparente-decorazione/dp/B0C FQ4BHQZ/ref=sr_1_14?dib=eyJ2IjoiMSJ9. bf7Mp7I5m2qAR1Fp1V6DoYF2erUlNQUK_ NuFZLz9A7uJKGa_RNeni6NiO4YQfAjVHB tZgdzI356XVc3BIuKVpV8Pfg0rImqNXgxG- kfklAYrbrXv4tV6RL1ShFwgLzfQh8R0sEoFJ PcLF2f2EEcGMlvEwOuCv6qRnS1MQ-VaA 0sLPnM0tswdL4sLVxsonWcfSrHAUrgWh 4fpVNMA4Kwh0UaeQhfexFY0dNWhPYft Xvvz9LLj1uMID2EGi_ScmYqY5LahbYO mKVVPPiPIgCVdLjaM8yqNp2ZJGV9Fge 2xa6OAHf xmMeaQUqGkoQ88x9GkX7E WuOwYO0dEUYSzHCdGONWoeZLfSJO R3C6-knjzKrOQ0ziouJfo-ktbak7v3AH53B tIOiXbT57cKqh-uc9wI_j_lHN-8okAe2yO6 upc61MoydZujuxnfLG7hwytqHQG2.ApKq 8MVs8Xihn_ zcA39nML-2lpjnagGhXIx0clcJ N_E& dib_tag=se& Anahtar Kelimeler=Lastra+Pleksigl Ass+2+mm& nsdOptOutParam=true& qid=1 734702823& sr=8-16 | 2 şeffaf levha, 2 mm kalınlık, 20 x 30 cm |
| Polilaktik asit (PLA) filament | Flashforge | Black 100102 | |
| Güç kaynağı | SQUADO | https://www.amazon.it/SQUADO-Alimentatore -stabilizzato-dissipatore-efficienza /dp/B0DMTG6SJD/ref=sr_1_6?dib =eyJ2IjoiMSJ9.1vVze6Zt6fhKCvFb eAOSiRe57N6a1mlBnkLdHiEym4 ugHzueF6_FdOodb3sftCXb5raTg< br/> eerMMUbL5KcaI_SDa_2j7s2XohI B01QMJDyq0xQ5Gp3KLIZozDHV fGBdSrvwgyOl-BXSDy_ocZlj2TL5 e21p3K6qpvSaT5yo8WA5tngS93 Eqe8s8D6mjpnnPFrb9RpQpj299Y nNRYgr_YF3NCt3mH0r0FocKcCa LNpKtfGLCbnz_yB-360tp5SAi7A7 cgBf5I4NzQ5iQTTXAG727x0Hml mG-eaFBSJv6M1LPooZiT2aT7dx o_7tzyU6MQ9vAEozXkLTaTTMX RA_svPp96sxp93NRLReI64xpFd S3Zh1y_JPQijbMAIuvuYflhh6JlPB W6-fpW6QXl9v5wNEs_YwjzP9Sf RKxRmchzZhgsK-34XJeaEmjbRq H3piM0Zx.MfPYUNvCEhDBqLDh C-iqBEu-vjIVgsrQmOjeLuGo9YQ& dib_tag=SE& anahtar kelimeler = güç + sup kat + AC + GİRİŞ% 3A + 110-220V% 2 C + DC + ÇIKIŞ% 3A + 12V + 15A & n sdOptOutParam=doğru& QID=173471 4722& sr=8-6 | Eski Prusa i3 güç kaynağı (AC GİRİŞİ: 110-220 V, DC ÇIKIŞI: 12 V 15 A). Piyasada bulunan alternatif |
| Kasnak 5 mm | VooGenzek | https://www.amazon.it/gp/product/ link B0B8H16KWX/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& psc=1 | Delik 5 mm, Genişlik kayış aralığı 6 mm |
| Kasnak 8 mm | Yxtaii | https://www.amazon.it/gp/product/ B07X852RFN/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& th=1 | Delik 8 mm, Genişlik kayış aralığı 6 mm |
| Şerit kablolar | QUARKZMAN | https://www.amazon.it/sspa/click?ie =UTF8& spc=MTo0NDgyNTkwNzU wNjM5NzM5OjE3MzQ3MTQ1OTE6 c3BfbXRmOjMwMDEyMjk4NTMzN TYzMjo6MDo6& url=%2FQUARKZM AN-connettore-Lunghezza-Comput er-confezione%2Fdp%2FB0CQRM DQNG%2Fref%3Dsr_1_15_sspa% 3F__mk_it_IT%3D%25C3%2585M %25C3%2585%25C5%25BD%25 C3%2585%25 595%25C3%2591%26crid%3 D3BZ8Q05YA50TX%26dib%3Dey J2IjoiMSJ9.zoYnL2ViiarlDS_7165D ldxu-TTbVbWUVAP3pCybFB-bjGl wSgrpnkMhhsJj3NRo8Mvht8ev5H vGQ-UUpPom12OcOcwyRVXLAR UvMyTm8mpAdZSaOritwHRgwu2 JuW9UoS4jlCbA-gzP2FEAAH47K fFOWN6FEhc5r0YGBcSIsA6_QV6 _LA1k_ifj3c2BFm2Fj8YjW-auz7Yiy ULfZusvGX28S1K5kJdTa_YOwJY YC0Y__s-CCchHKiZgDhFjtFogUz0 Tonob4HQZiO_hkrnm3ixpNj9rgE- hvVq1FK1uD9M.kkP89x1SJ0SLxZ sv3YomYEfmkhpvP4WQf2TtC76K YAE%26dib_tag%3Dse%26anahtar kelimeler %3DCavo%2Bflessibile%2Ba%2Bna stro%2Bpiatto%2Bper% 2Bstampant e%2B3D%2Ba%2B10%2Bpin%26n sdOptOutParam%3Dtrue%26qid% 3D1734714591%26s%3Dindustrial %26sprefix%3Dcavo%2Bflessibile %2Ba%2Bnastro%2Bpiatto%2Bper <> %2Bstampante%2B3d%2Ba%2B10 %2Bpin%252Cendüstriyel%252C170 %26sr%3D1-15-spons%26sp_csd% 3Dd2lkZ2V0TmFtZT1zcF9tdGY%26psc%3D1 | şerit kablo 2651 28AWG 10 pin |
| Sert şaft kaplini | Gwolf | https://www.amazon.it/gp/product/ B088R8CW5Z/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& psc=1 | 5 ila 8 mm arası kaplin |
| Çubuklar 4 mm | RS bileşenleri | 682-810 | Çap 4 mm |
| Çubuklar 5 mm | Sourcingmap | a14010200ux0214 | Çap 5 mm |
| Çubuklar 8 mm | RS bileşenleri | 682-078 | Çap 8 mm |
| Vidalar | Bnnrjia | 281-984 | M2x6 - Düz başlı |
| Vidalar | INCREWAY | https://www.amazon.it/INCREWAY- assortite-portatili-accessori- riparazione/dp/B07KN37M5J/ ref=sr_1_20?__mk_it_IT=%C %3%85M%C3%85%C5%BD% C3%95%C3%91& crid=12BH MAWD8SK4Z& dib=eyJ2IjoiM SJ9. SjXKoxV0NYqENPoUeS4 2-rj1Af398uiCLXDxFs0C9HfS 8vwEPmsfAMPwIMfllkAfWNY TIEU4KXhJRgRHInNI3U_aow 0EPyfufQKlA4wHz1eOJBvYO ND-5obbXfRPn7VXQ8kzBXXn7VXQ8kzBXXn8EPyfufQKlA4wHz1eOJBvYObr/ ND-5obbXfRPn7VXQ8kzBXXn7VXQ8kzBXXn7 M VfUHLAIFlJhTO8AXclkwgjB-z pRvQ6oE5Fr_1sO7lFnzURtD1 YBf65O58M3hrDXf5r_8MIz1c Asct-2P8AyWWBZAB1buYoyP gnnOiBL5EBS7twJWqcDU86m h1ywyufiUitm6kIwNuMx32D0h 0jkHna481aaYP_Q7kHgDxxrR _ fFXj5gV2XqEesqGkxPCmHfF WVMqvB_YBdEAuTeL08EP_p TY50uT4UeWgdJuT58kB7Gv- Y5fPMPRS_JEQdO-oJ9DlO9n 0OszkmYwrPh-AivwVN6xh4hN 2pseXannS_on9aiNv1lh3x-f2PZ 0R.jCyNdxQiJSAsGVm7ZPhDK eFxQGBAu-M_42ZLTSSBiDg& d ib_tag=SE& anahtar kelimeler=viti+M3x3& nsdOptOutParam=true& QID = 1734 < / > 711519 & sprefix=viti+m3x3%2Cap s%2C169& sr=8-20 | M2x8 - Düz başlı |
| Vidalar | INCREWAY | https://www.amazon.it/INCREWAY -assortite-portatili-accessori-ripara zione/dp/B07KN37M5J/ref=sr_1_2 0?__mk_it_IT=%C3%85M%C3%85 %C5%BD%C3%95%C3%91& crid= 12BHMAWD8SK4Z& dib=eyJ2IjoiM SJ9. SjXKoxV0NYqENPoUeS42-rj1 Af398uiCLXDxFs0C9HfS8vwEPms fAMPwIMfllkAfWNYTIEU4KXhJRg RHInNI3U_aow0EPyfufQKlA4wHz 1eOJBvYOND-5obbXfRPn7VXQ8 kzBXMVfUHLAIFlJhTO8AXclkwgjB -zpRvQ6oE5Fr_1sO7lFnzURtD1YB f65O58M3hrDXf5r_8MIz1cAsct-2P8 AyWWBZAB1buYoyPgnnOiBL5EBS 7twJWqcDU86mh1ywyufiUitm6kIwN uMx32D0h0jkHna481aaYP_Q7kHg DxxrR_fFXj5gV2XqEesqGkxPCmHf FWVMqvB_YBdEAuTeL08EP_pTY50 uT4UeWgdJuT58kB7Gv-Y5fPMPRS _JEQdO-oJ9DlO9n0OszkmYwrPh- AivwVN6xh4hN2pseXannS_on9aiN v1lh3x-f2PZ0R.jCyNdxQiJSAsGVm 7ZPhDKeFxQGBAu-M_42ZLTSSB iDg& dib_tag=se& anahtar kelimeler=viti+M3 x3& nsdOptOutParam=true& qid=17 34711519& sprefix=viti+m3x3%2Ca ps%2C169& sr=8-20 | M2x10 - Düz başlı |
| Vidalar | INCREWAY | https://www.amazon.it/INCREWAY- assortite-portatili-accessori-riparazi one/dp/B07KN37M5J/ref=sr_1_20? __mk_it_IT=%C3%85M%C3%85% C5%BD%C3%95%C3%91& crid=12 BHMAWD8SK4Z& dib=eyJ2IjoiMSJ 9.SjXKoxV0NYqENPoUeS42-rj1Af3 98uiCLXDxFs0C9HfS8vwEPmsfAM PwIMfllkAfWNYTIEU4KXhJRgRHIn NI3U_aow0EPyfufQKlA4wHz1eOJB vYOND-5obbXfRPn7VXQ8kzBXMV fUHLAIFlJhTO8AXclkwgjB-zpRvQ6 oE5Fr_1sO7lFnzURtD1YBf65O58 M3hrDXf5r_8MIz1cAsct-2P8AyWW BZAB1buYoyPgnnOiBL5EBS7twJ WqcDU86mh1ywyufiUitm6kIwNuM x32D0h0jkHna481aaYP_Q7kHgDx xrR_fFXj5gV2XqEesqGkxPCmHfF WVMqvB_YBdEAuTeL08EP_pTY5 0uT4UeWgdJuT58kB7Gv-Y5fPMPRS _JEQdO-oJ9DlO9n0OszkmYwrPh-Ai vwVN6xh4hN2pseXannS_on9aiNv1l h3x-f2PZ0R.jCyNdxQiJSAsGVm7Z PhDKeFxQGBAu-M_42ZLTSSBiDg & dib_tag=se& anahtar kelimeler=viti+M3x3& n sdOptOutParam=doğru& QID=1734711 519& sprefix=viti+m3x3%2Caps%2 C169& sr=8-20 | M3x3 - Düz başlı |
| Vidalar | RS bileşenleri | 281-978 | M3x6 - Düz başlı |
| Vidalar | RS bileşenleri | 281-978 | M3x10 - Düz başlı |
| Vidalar | RS bileşenleri | 281-978 | M3x20 - Düz başlı |
| Vidalar | Faankiton | https://www.amazon.it/Faankiton-600- M3-Incassato-Cilindrica/dp/B0CFY6V 3HV/ref=sr_1_3_sspa?crid=29NMQZ B1QM7EW& dib=eyJ2IjoiMSJ9., aiGS- zo819G6hZmghT7TFDH1TL5lzRsjT R5PBvqoHbKOBLipyX-kuevmqqPpW m_7Ngng-Wa6aLoDuXMtoqexgeNpr Qn2cISsCatqzhc8fxhJ0yIN4s3YEpD KzIroWWVNzswptkWthnGkLXwHck m4wqLr1sf0qyK9oYYlZdKo_Ypa9RQ s3aYPNd_f-DWpT5rdsG1GL3rd3b9c fLSqXxMd8QnnK3hDcg10Uz9otPwo zJC2QAQFce__CkNwDfBp5Vvgmy1 DLX4a7PolnNePrJiObgjHMJLlfwizGx fie28RAYQ.03Epc_ RrVWlBUqUbHU TPDcoDUxaKBHep1CuTOhFj-fI& dib _tag=SE& anahtar kelimeler=m3x25%2Bviti& n sdOptOutParam=doğru& qid=17347118 59& S=ENDÜSTRİYEL& sprefix=M3x25%2Ci endüstriyal%2C185& SR=1-3-Süngerler& sp_ csd=d2lkZ2V0TmFtZT1zcF9hdGY& th=1 | M3x25 - Düz başlı |
| Vidalar | Faankiton | https://www.amazon.it/Faankiton-600 -M3-Incassato-Cilindrica/dp/B0CFY6 V3HV/ref=sr_1_3_sspa?crid=29NMQ ZB1QM7EW& dib=eyJ2IjoiMSJ9., aiG S-zo819G6hZmghT7TFDH1TL5lzRsj TR5PBvqoHbKOBLipyX-kuevmqqPp Wm_7Ngng-Wa6aLoDuXMtoqexgeN prQn2cISsCatqzhc8fxhJ0yIN4s3YEp DK zIroWWVNzswptkWthnGkLXwHc km4wqLr1sf0qyK9oYYlZdKo_Ypa9R Qs3aYPNd_f-DWpT5rdsG1GL3rd3b9 cfLSqXxMd8QnnK3hDcg10Uz9otPwo zJC2QAQFce__CkNwDfBp5Vvgmy1D LX4a7PolnNePrJiObgjHMJLlfwizGxfie 28RAYQ.03Epc_ RrVWlBUqUbHUTPD coDUxaKBHep1CuTOhFj-fI& dib_tag=S E& anahtar kelimeler=m3x25%2Bviti& nsdOptO utParam=doğru& qid=1734711859& S=IND ABD& sprefix=M3x25%2Cendüstriyel%2 C185& SR=1-3-Süngerler& sp_csd=d2lkZ2V 0TmFtZT1zcF9hdGY& th=1 | M3x30 - Düz başlı |
| Vidalar | AERZETIX | https://www.amazon.it/AERZETIX- carbonio-fissaggio-cacciavite-mont aggio/dp/B0BDYZZ8LQ/ref=sr_1_4 ?__mk_it_IT=%C3%85M%C3%85 %C5%BD%C3%95%C3%91& crid= 217010XNB7ZXP& dib=eyJ2IjoiMSJ 9.e5QjA-q9hEvlleIzwY3ssA3x7vIBF Hpcg73tKkBJu9QbDwMwlC5L9-9u 7my7ZG5hZij0WyaijakqAoX4rIZ3rv EgvlPtN6bwKTBgqAK-3uu3GBy6K EPQ2iIEUWx_U73nonJy5IzmTDH Xijn-kRg1iCOMiJn-kRg1iCOM6bwKTBgqAK-3uu3GBy6Kbr/br/ Xijn-kRg1iCOMiCOM6bwKTBgqAK-3uu3GBy6Kbr/br/ Xijn-kRg1iCOMiCOM6bwKTBgqAK-3uu3GBy6Kbr/br/ Xijn-kRg1iCOM. 99S5upSWbmmazg 8lctsyXlg_tmXHjHn63WsIo7WcBuL rtVpPW8oMsZCndwh33pNQXBnk1 iStT81spopzrw3gScK1Wdz6RttH6j YL611rNBdkd-PEP2CYhDKeSKHE AqmABjHGLyG6p40k20npHqkg8g- 9Msl3fZZiS4rRxNFOHBjEdVTLBrn PjRjxTspBfZSEKQnqsGm1WPlz8cS khCs.ujWHAL4y-RNahay-1AJl34uN hUj-f6mZ7X1_KZaACvU& dib_tag=S E& anahtar kelimeler=m3x50%2Bviti& nsdOp tOutParam=true& qid=1734711964& S=Endüstriyel& sprefix=m3x50%2Bviti %2Cendüstriyel%2C136& sr=1-4& th=1 | M3x50 - Düz Başlı |
| Vidalar | JOCAHULFX | https://www.amazon.it/Incassato- Esagonale-Rondelle-Esagonali- Inossidabile/dp/B0DF7P5CC2/ref=sr_ 1_6?__mk_it_IT=%C3%85M%C3%8 5%C5%BD%C3%95%C3%91& crid=2 7B231M7SRJ3R& dib=eyJ2IjoiMSJ9., 3 bij8nHLQAebjY8LHQS6V1GsAE07H cFGUpHAh7jA1oQIxjoTJmxjNuwg0y H14oz-YUvzD0eqVRASqAZTK2spiQ saX0pug7rWgGfENeGhztno5lMcJDT XQfe9H6ocLZANpAFv_p0dRbO6ggA vZN0TfyiuR4focFMAjr6VFGVbprEQO EaS1KRs8loF3FgL0rsmP81K806Gv5 zeSurK_sp8GEelqtm1G3J059zUdPaJ z7zJQEFPSH0TXv3lml5u9lnvnAbM0j ClF03nG5ZjB-6WUPfS41Os5DgzTpS zUTR-YZc1HnRUxy6l5grDPFmDiNZn 0Ie9MrlkcPI2A8dubQZm3d8pYVpg6Y 2OqzifmZzNsQM.Zuh5Ko4bf20Bz46c NFRHJvcyPfJyglpcvN1uM16-yOI& dib _tag=SE& Anahtar Kelimeler=M4+Viti+Testa+SV ASATA& nsdOptOutParam=true& QID=17 34712054& S=ENDÜSTRİYEL& sprefix=m4+v iti+testa+svasata%2Cindustrial%2C12 8& sr=1-6 | M4x8 - Düz başlı |
| Vidalar | JOCAHULFX | https://www.amazon.it/Incassato-Esagonale -Rondelle-Esagonali-Inossidabile/dp/B0DF 7P5CC2/ref=sr_1_6?__mk_it_IT=%C3%85 M%C3%85%C5%BD%C3%95%C3%91& c sürmek=27B231M7SRJ3R& dib=eyJ2IjoiMSJ9., 3bij8nHLQAebjY8LHQS6V1GsAE07HcFG UpHAh7jA1oQIxjoTJmxjNuwg0yH14oz-YU vzD0eqVRASqAZTK2spiQsaX0pug7rWgG fENeGhztno5lMcJDTXQfe9H6H6 ocLZANpAF v_p0dRbO6ggAvZN0TfyiuR4focFMAjr6VF GVbprEQOEaS1KRs8loF3FgL0rsmP81K8 06Gv5zeSurK_sp8GEelqtm1G3J059zUdP aJz7zJQEFPSH0TXv3lml5u9lnvnAbM0jCl F03nG5ZjB-6WUPfS41Os5DgzTpSzUTR - YZc1HnRUxy6l5grDPFmDiNZn0Ie9Mrlkc PI2A8dubQZm3d8pYVpg6Y2OqzifmZzNs QM. Zuh5Ko4bf20Bz46cNFRHJvcyPfJyglp cvN1uM16-yOI& dib_tag=se& Anahtar Kelimeler=M4 +viti+testa+svasata& nsdOptOutParam=tru e& qid=1734712054& S=ENDÜSTRİYEL& sprefix= m4+viti+testa+svasata%2Cindustrial%2C1 28& sr=1-6 | M4x12 - Düz başlı |
| Vidalar | Globstar | https://www.amazon.it/testa-svasata- impronta-Phillips-acciaio/dp/B083RH 5JYL/ref=sr_1_9?__mk_it_IT=%C3% 85M%C3%85%C5%BD%C3%95%C %3%91& crid=XEVGIE9R1K2F& dib=ey J2IjoiMSJ9.sYNfljBDPU1N2px8nueT zi6D61Z46HD98MSuIwqXNKrfkSOM GYgywNTC8-dsYqNXiZEMS42kGB4 QdBtz_TVFLvgLCFQVl9W5n7Bo4fQS _VKHh9VLmA_RjdF75wPsSbRPIdSA nidi0pehfkRoBIrEtYVn-cUq4TXH0P1D pGLc_4J88tU02ieLVee-YarMxZLKeLYt kK6B2CmM6d_AE0K7UJofwnOCOLp 3R72KpMTltjkJutf0WxBFsNQhYG8Wz 0q1o_3uRs_aNM0wJtGeSohS3fABN8C z-kYxdfOikF1zi4nE1wn8YUw8lfsCxeUI ioUp4Lz0GaXhHkkXxC5jssOsuOyW_6 CeDYrx0AOAy1URHBY.4xc_PNzUrZe FFz0FV9hV7uu_-Es6f3jhi6koImPVcgw & dib_tag=se& anahtar kelimeler=m4x70%2Bvi ti%2Btesta%2Bsvasata& nsdOptOutPa ram=doğru& qid=1734712182& S=Industri AL& sprefix=m4x70%2Bviti%2Btesta%2 Bsvasata%2Cindustrial%2C134& sr=1-9& th=1 | M4x70 - Düz başlı |
| Vidalar | Aerzetix | https://www.amazon.it/AERZETIX-cilin drica-impronta-intaglio-montaggio/dp/B 0BLNJ9PTX/ref=sr_1_8?__mk_it_IT=% C3%85M%C3%85%C5%BD%C3%95 %C3%91& crid=3AESCF6VKG6B6& di b=eyJ2IjoiMSJ9.3HlweLtFpKk8huuM4 tfcAbDSl2biH6iWGO7PXpXKxzQnVM cKVrvCI0CkZanzuaduqvaeCs8DLxlFs c_s4-qvSDCE8dvXDhuO4nHPwIhPAl BnL5G6tLMycq0ZS0ZN83GAj_VOUc GVLq4fdcfeurabYdPzrWf3PpwM6_-y OlEOLV vlzzBKgQWO7fiMSCFuGA6 X4j8xVlNzobgrSfsnDNqZpEgH289rp AslvAA9D2YEmvJSm0CRqWecsKPJ iB8yNhelz01McT-qy3s6utg4_Thec18s iTwIY2bFdQ5XYhkTzBxAF86lr6VMXZ 3Ym26ZiedQE1_7ceB7jYcyQ5mOMR fx0d8pYVpg6Y2OqzifmZzNsQM._rEh uS8xCOyhS7xqQQe9H3kwn-ppl22Rf VmzFpFpyW0& dib_tag=se& anahtar kelime s=m4x80%2Bviti%2Btesta%2Bsvasat a& nsdOptOutParam=true& QID = 17347 < / > 12214 & S=ENDÜSTRİYEL& sprefix=m4x80% 2Bviti%2Btesta%2Bsvasata%2Cindu deneme%2C141& sr=1-8& th=1 | M4x80 - Düz başlı |
| Vidalar | Globstar | https://www.amazon.it/testa-svasata- impronta-Phillips-acciaio/dp/B083RJ S9NT/ref=sr_1_30?__mk_it_IT=%C3 %85M%C3%85%C5%BD%C3%95% C3%91& crid=15MBBIPYCF06S& dib =eyJ2IjoiMSJ9.wHpVBrZH8GsdSIko N0T0-2663KN2Tr-H4orSaQtmYf64T nTN15zshBEbfwlrPNyJaD4F1cXZvO Evle2B5qQb_Un-tR8WzVwAxQFWe SMPaYKjM5ZgpbhFaaS6Zj0BQntEIA hyTnvnLg4IBEE9y-4jQ66ZIkmXcWFo zXK-eTFnle6uFI4nXhbCXTWjM5MP_ sNolDP0O4HS7Bnxk_wanuwC9zEuH ZeVNsejl6gwYR0IlJK5iu0V9Y-bgFcr1- iTBhrARDKG7-0Nc5188TSaN9snT7K 6yO2J3ctfC24PTGnaZAFYKMvrNqz< br/> OAihVBKIW8xOhIx0ZRipPa9ggsMs _pe1VgY2dCXtUrE_bo1dd4oGlUuw .v5iiMZ2rMQlZlZs2WDyqM_mo1utvu PD71Jyb-O7BY1Y& dib_tag=se& Anahtar kelimeler=m5x8+viti+testa+svasata& ns dOptOutParam=doğru& qid=17347123 79& S=ENDÜSTRİYEL& sprefix=m5x8+viti+ testa+svasata%2Cindustrial%201 & sr=1-30 | M5x8 - Düz başlı |
| Vidalar | Globstar | https://www.amazon.it/testa-svasata- impronta-Phillips-acciaio/dp/B083RH M4BY/ref=sr_1_30?__mk_it_IT=%C3 %85M%C3%85%C5%BD%C3%95% C3%91& crid=15MBBIPYCF06S& dib= eyJ2IjoiMSJ9., wHpVBrZH8GsdSIkoN 0T0-2663KN2Tr-H4orSaQtmYf64Tn TN15zshBEbfwlrPNyJaD4F1cXZvO Evle2B5qQb_Un-tR8WzVwAxQFW eSMPaYKjM5ZgpbhFaaS6Zj0BQnt EIAhyTnvnLg4IBEE9y-4jQ66ZIkmX cWFozXK-eTFnle6uFI4nXhbCXTW jM5MP_sNolDP0O4HS7Bnxk_wan uwC9zEuHZeVNsejl6gwYR0IlJK5iu 0V9Y-bgFcr1-iTBhrARDKG7-0Nc5 188TSaN9snT7K6yO2J3ctfC24PTG naZAFYKMvrNqzOAihVBKIW8xOhI x0ZRipPa9ggsMs_pe1VgY2dCXtUr E_bo1dd4oGlUuw.v5iiMZ2rMQlZlZs 2WDyqM_mo1utvuPD71Jyb-O7BY 1Y& dib_tag=se& anahtar kelimeler=m5x8% 2Bviti%2Btesta%2Bsvasata& nsdOpt OutParam=true& qid=1734712379& S =Endüstriyel& sprefix=m5x8%2Bviti%2 Btesta%2Bsvasata%2Cindustrial%2 C201& SR=1-30& th=1 | M5x10 - Düz başlı |
| Vidalar | Globstar | https://www.amazon.it/testa-svasata- impronta-Phillips-acciaio/dp/B083RH 9SYZ/ref=sr_1_30?__mk_it_IT=%C3 %85M%C3%85%C5%BD%C3%95% C3%91& crid=15MBBIPYCF06S& dib =eyJ2IjoiMSJ9., wHpVBrZH8GsdSIko N0T0-2663KN2Tr-H4orSaQtmYf64T nTN15zshBEbfwlrPNyJaD4F1cXZv OEvle2B5qQb_Un-tR8WzVwAxQF WeSMPaYKjM5ZgpbhFaaS6Zj0BQ ntEIAhyTnvnLg4IBEE9y-4jQ66ZIkm XcWFozXK-eTFnle6uFI4nXhbCXT WjM5MP_sNolDP0O4HS7Bnxk_w anuwC9zEuHZeVNsejl6gwYR0IlJK5 iu0V9Y-bgFcr1-iTBhrARDKG7-0Nc5 188TSaN9snT7K6yO2J3ctfC24PTG naZAFYKMvrNqzOAihVBKIW8xOhIx 0ZRipPa9ggsMs_pe1VgY2dCXtUrE _bo1dd4oGlUuw.v5iiMZ2rMQlZlZs2 WDyqM_mo1utvuPD71Jyb-O7BY1Y & dib_tag=se& anahtar kelimeler=m5x8%2Bvi ti%2Btesta%2Bsvasata& nsdOptOutP aram=doğru& qid=1734712379& S=Indus Deneme& sprefix=m5x8%2Bviti%2Btesta% 2Bsvasata%2Cendüstriyel%2C201& SR= 1-30& th=1 | M6x20 - Düz kafa |
| SD kart | SanDisk | https://www.amazon.it/SanDisk-Ultra- Scheda-memoria-classe/dp/B08GYG6 T12/ref=sr_1_8?crid=3ETH6HJL8VKD A& dib=eyJ2IjoiMSJ9., 5omqicizrizfHo8r pPQ6sWJ_C0sfwUqPQv6VrziwK-SCX 4-aSgFGois1pfvTwB0SuDxdNjByo2zU fBonWwUKAf3clazXEIGNl0GhojQmvj Bt_6RS31QcAM5Y50BpAdndMXIHy9 iGTswgYEwnbt9uj56G_soC6OdPiTvr W3M8jwtTxQDUl8UcHZ eRMPq0T8sd v4hskHGmipFItAzE1lyDiy0otrqUhz-ph OggXBAM6gMyGf0qBtU1AFwfj81Shl HS2qojCiRq_JLKyBkc_Y4P_V1YtsGc MxnoG6YzYowwEYbX7uTFWJB-Wvc B_ vYw-D5s0B-HDSYRSl-C60yhtqhrUw grg9w6PN5U5s01vos4bauIgIN6lOez1 tz2OHwL5YL3QCHKxNnJV0IM42cH0 du8fIEIbUwYC5jRLqowx1UyaQKQ4W WaGozdZ9l5qUoeQ7KU.iOPo2BYLK STjqjB8BevaVgPa5QD7BuP9CieN6u 4_Qeo& dib_tag=se& anahtar kelimeler=sd% 2Bcard%2Bsandisk& nsdOptOutParam =doğru& qid=1734704871& sprefix=SD% 2Bcard%2Bsan%2Caps%2C141& SR=8-8& th=1 | SanDisk 32 GB Extreme PRO SD kart, UHS-I |
| Oynak Flanşlı yatak | Brateuanoii | KFL08 | 8 mm iç çap |
| Dilimleme yazılımı | Ultimaker Cura | https://ultimaker.com/it/software/ ultimaker-cura/?gad_source=1& gclid=CjwKCAiAyJS7BhBiEiwAy S9uNUjnbkNIYNUco6YaZYHcFT 2tqBac23MU4Qx3FaMXjl_UifJ_ k8as3BoCeVkQAvD_BwE | Ultimaker Cura 4.9.0 |
| Yaylar | YIXISI | https://www.amazon.it/sspa/click?ie =UTF8& spc=MTo4NDAzNDQ1MzM 0OTUyODQzOjE3MzQ3MDQ4MD c6c3BfYXRmOjMwMDM5MDQzMz kzODAzMjo6MDo6& url=%2FYIXIS I-Assortimento-Estensione-Compre ssione-Dispositivi%2Fdp%2FB0DD T3KTBF%2Fref%3Dsr_1_1_sspa% 3F__mk_it_IT%3D%25C3%2585M %25C3%2585%25C5%25BD%25 C3%2595%25C3%2591%26crid% 3D1NT7CA1YJGWK4%26dib%3D eyJ2IjoiMSJ9.IhFmevq0fXTGGwE cGvfUxxLOudQqQcPjSGXlWklXO HY2Ahr2XxWSg6MaNBgZ71N1pQ h9Wkp5c2ary4Hm2xVi4dTH8Ny4 4- OhlcrTn0G8emvX66Zu7U0LGm xGYKyKCGxzlhwYC4EnlmTSH_O JnA5oG-BQzuxFBdCrce0txErCEm S40xONaaYp2R5yMiPDw2PqsPP jLmoSCYs4XctxEvAwn_5rp71t0U QsZNku6-jDiiuh5klpC9DsnjipLFP unRCbITWnw6wslENLdJtPDOGF 8vbO5WFf7PnUy4BZ7tUPt7I.B6j eUKwx1_t0sPaxmSHYVbRd1MG w-kosEYkHuKlPtpQ%26dib_tag% 3Dse%26keywords%3Dmolle%2B YIXISI%26nsdOptOutParam%3Dtr ue% 26qid%3D1734704807%26spr efix%3Dmolle%2Byixisi%252Caps %252C137%26sr%3D8-1-spons%2 6sp_csd%3Dd2lkZ2V0TmFtZT1zcF 9hdGY%26psc%3D1 | |
| Step motor | Twotrees 1234 | 17HS4401 | Step motor bipolar NEMA 17 42 Ncm 1.5 A |
| Step motor | STEPPERONLINE | UL1007AWG6 | Step motor bipolar NEMA 17 42 Ncm 1.5 A |
| Step motor sabitleme braketi | YOTINO | https://www.amazon.it/gp/product/ B07D7XH97T/ref=ppx_yo_dt_b_ search_asin_title?ie=UTF8& psc = 1 | |
| Dişli somun M2 | RS bileşenleri | 281-984 | |
| Dişli somun M3 | RS bileşenleri | 281-984 | |
| Dişli somun M4 | RS bileşenleri | 281-984 | |
| Dişli somun M5 | RS bileşenleri | 281-984 | |
| Dişli somun M6 | RS bileşenleri | 281-984 | |
| TRAMP - C1 hücre hattı | ATCC | CRL-2730 | Adenokarsinomlu yetişkin bir erkek transgenik farenin prostatından izole edilen epitel hücre hattı |
| Tripan mavisi | Gibco Thermofisher | 15250061 | |
| Tripsin | Gibco Thermofisher | 15400054 | Steril |
Kaynaklar
- Patel, T., et al. Multicellular tumor spheroids: A convenient in vitro model for translational cancer research. Life Sci. 358, 123184(2024).
- Tanaka, M., et al. Emerging translational research in neurological and psychiatric diseases: From in vitro to in vivo models. Int J Mol Sci. 24 (21), 15739(2023).
- De Maria Marchiano, R., et al. Translational research in the era of precision medicine: Where we are and where we Will Go. J Pers Med. 11 (3), 216(2021).
- Knowlton, S., et al. Bioprinting for cancer research. Trends Biotechnol. 33 (9), 504-513 (2015).
- McGranahan, N., et al. Biological and therapeutic impact of intratumor heterogeneity in cancer evolution. Cancer Cell. 27 (1), 15-26 (2015).
- Van Zundert, I., et al. From 2D to 3D cancer cell models-The enigmas of drug delivery research. Nanomaterials. 10 (11), 2236(2020).
- Hoarau-Véchot, J., et al. Halfway between 2D and animal models: Are 3D cultures the ideal tool to study cancer-microenvironment interactions. Int J Mol Sci. 19 (1), 181(2018).
- Yamada, K. M., et al. Modeling tissue morphogenesis and cancer in 3D. Cell. 130 (4), 601-610 (2007).
- Manduca, N., et al. 3D cancer models: One step closer to in vitro human studies. Front Immunol. 14, 1175503(2023).
- Wang, L., et al. The 3D revolution in cancer discovery. Cancer Discov. 14 (4), 625-629 (2024).
- Benton, G., et al. Multiple uses of basement membrane-like matrix (BME/Matrigel) in vitro and in vivo with cancer cells. Int J Cancer. 128 (8), 1751-1757 (2011).
- Benton, G., et al. Matrigel: From discovery and ECM mimicry to assays and models for cancer research. Adv Drug Deliv Rev. 79-80, 3-18 (2014).
- Rawal, P., et al. Prospects for 3D bioprinting of organoids. Bio-Design Manuf. 4 (3), 627-640 (2021).
- Hou, S., et al. Advanced development of primary pancreatic organoid tumor models for high-throughput phenotypic drug screening. SLAS Discov Adv Sci Drug Discov. 23 (6), 574-584 (2018).
- Kane, K. I. W., et al. Determination of the rheological properties of Matrigel for optimum seeding conditions in microfluidic cell cultures. AIP Adv. 8 (12), 125332(2018).
- De Stefano, P., et al. Bioprinting of Matrigel scaffolds for cancer research. Polymers. 13 (12), 2026(2021).
- Hatzikiriakos, S. G., et al. Role of slip and fracture in the oscillating flow of HDPE in a capillary. J Rheol. 36 (5), 845-884 (1992).
- Kalika, D. S., et al. Wall slip and extrudate distortion in linear low-density polyethylene. J Rheol. 31 (8), 815-834 (1987).
- Molenaar, J., et al. Modeling polymer melt-flow instabilities. J Rheol. 38 (1), 99-109 (1994).
- Valot, L., et al. Chemical insights into bioinks for 3D printing. Chem Soc Rev. 48 (15), 4049-4086 (2019).
- Sundaramurthi, D., et al. 3D bioprinting technology for regenerative medicine applications. Int J Bioprinting. 2 (2), 9-26 (2016).
- Maloney, E., et al. Immersion bioprinting of tumor organoids in multi-well plates for increasing chemotherapy screening throughput. Micromachines. 11 (2), 208(2020).
- Snyder, J. E., et al. Bioprinting cell-laden Matrigel for radioprotection study of liver by pro-drug conversion in a dual-tissue microfluidic chip. Biofabrication. 3 (3), 034112(2011).
- Patil, L. S., et al. Toward measuring the mechanical stresses exerted by branching embryonic airway epithelial explants in 3D matrices of Matrigel. Ann Biomed Eng. 50 (9), 1143-1157 (2022).
- Lai, V. K., et al. Swelling of collagen-hyaluronic acid co-gels: An in vitro residual stress model. Ann Biomed Eng. 44 (10), 2984-2993 (2016).
- Lam, N. T., et al. Fabrication of a Matrigel-collagen semi-interpenetrating scaffold for use in dynamic valve interstitial cell culture. Biomed Mater. 12 (4), 045013(2017).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
