Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Mucoromycete Phycomyces blakesleeanus ile Cinsel Haçlar

839 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/67790

⸱

6 Haziran 2025

Bu makalede

Özet

Burada, P. blakesleeanus çiftleşmesinin indüksiyonu için temel bir protokol sunuyoruz.

Özet

Mucoromycota filumu içindeki ipliksi bir mantar olan Phycomyces blakesleeanus, çevresel algı ve uyarlanabilir tepkiler için olağanüstü kapasitesi ile ayırt edilir. Geçmiş çalışmalar, yerçekimi, ışık, nem ve besin mevcudiyeti dahil olmak üzere çevresel uyaranların büyüme dinamiklerini ve üreme stratejilerini etkilediğini göstermiş olsa da, altta yatan mekanizmalar araştırmanın odak alanı olmaya devam etmektedir. Çevresel ipuçları eşeyli veya eşeysiz üremeyi tetikler. Eşeyli üreme, hifal kemoretraksiyonu tetikleyen feromon sinyallemesi ile başlar ve sonunda bir zigospor oluşumuyla sonuçlanan seri morfolojik geçişlere yol açar.

Laboratuvar ortamında, P. blakesleeanus'un çaprazlanması, farklı aşamalarda cinsel döngüye giren tamamlayıcı misellere neden olur. Çalışmamız, çevresel ipuçlarının P. blakesleeanus miselleri boyunca çiftleşmeyi tetikleyip tetikleyemeyeceğini test etmeyi amaçlıyor. Besin değeri sınırlı ortamlarda yetiştirilen P. blakesleeanu'nin çaprazlamaları, besin yoksunluğuna uygun bir cinsel tepkiyi tetiklemek için besin açısından sınırlı agar'a tabi tutulacaktır. P. blakesleeanus'ta çiftleşmenin başarılı bir şekilde tetiklenmesi, belirli aşamalarda büyük miktarda eşeyli üreyen misel gerektiren gelecekteki çalışmaları kolaylaştıracaktır. Bu araştırmanın sonucu, P. blakesleeanus üreme mekanizmalarının çevresel faktörlerden nasıl etkilendiğine dair anlayışımızı daha da geliştirecek ve filamentli mantarların eşeyli üremesine ilişkin daha geniş bilgi tabanına katkıda bulunacaktır.

Giriş

Laboratuvar koşullarında mantar sistemlerinde çiftleşmenin indüksiyonu, ökaryotik genetik, hücre biyolojisi, evrimsel biyoloji ve biyoteknolojinin anlaşılmasını ilerletmiştir. Dikaryan mantarları, özellikle Ascomycota, laboratuvar ortamında çiftleşme indüksiyonu hakkında en kapsamlı bilgiye sahiptir1. İlginç bir şekilde, eşeyli üremenin önerildiği ilk mantar olan Syzygites megalocarpus, Ascomycota'nın bir üyesi değil, Mucoromycota2 filumunun bir üyesidir. Mucoromycota filumu, daha önce "Zygomycota" olarak sınıflandırılan, ancak şimdi Dikaryan soylarınınkardeşi olarak kabul edilen, erken ayrılan bir gruptur 3,4. Mucoromycota, Zoopagomycota ile birlikte, bu filumlar mantarların karasal ekosistemlere geçişini temsil ettiği için evrimsel olarak önemlidir 4,5. Diğer mantarlar gibi, Mucoromycetes de çevrelerine yanıt olarak eşeysiz ve eşeyli üreme stratejileri kullanır 3,6. Besin açısından sınırlı koşullar altında, mukoromisetler cinsel döngüyebaşlayacaktır 6. Mucoromysetler hem homotalik hem de heterotalik çiftleşme mekanizmaları sergilerler, burada uyumluluk, sırasıyla (-) ve (+) olarak adlandırılan çiftleşme tipi genler sexM ve sexP tarafından belirlenir 7,8,9.

Blakeslee10, mukoromiset cinsel döngüsünün dış koşullara duyarlılığını vurgulayarak, nemin oluşumları için kritik olduğunu ve substrattaki besin mevcudiyetinin önemli bir rol oynadığını belirtti. Tamamlayıcı çiftleşme türleri, öncü olarak beta-karoten kullanılarak trisporik asitlerin (TA) işbirlikçi sentezi yoluyla cinsel döngüye başlar 11,12,13. TA'nın saptanmasını takiben, yanıt veren vejetatif hifler kalınlaşır ve çok dallı zigoforlar haline gelir 14,15,16. Zigoforlar TA üretimine devam eder ve karşılıklı olarak kemoatrasyon yapar. P. blakesleeanus'ta, zigoforlar substrat içinde farklılaşır ve katı agar ortamında kolayca görülemezler17. Temas kurulduğunda, zigoforlar iç içe geçer ve hava zigoforları haline gelir.

Cinsel döngü devam ettikçe, zigoforların uçları bağlanır ve hücrelerin ortası, tabanda koralloid şişlik ile halka benzeri bir yapı oluşturmak için dışarı çıkar ve progametangiuma geçişi tamamlar. Progametangium'u oluşturan hücrelerin uçları kaynaşmaya ve gametangium'a dönüşmeye başlar. Gametangia aşamasında, zigoforlar diken benzeri süslemeler sergiler. Uçlardaki hücre duvarı çözülür ve zigosporun oluşacağı alanı sınırlayan maceracı septa ortaya çıkar ve zigoforlar maşa benzeri süspansiyonlar gibi davranır18. Zigospor, hücre duvarı kalınlaştıkça pigmentli hale gelir ve ek diken benzeri süslemeler kazanır17,18. Bir kez oluştuğunda, zigospor büyüme döngüsünü yeniden başlatmadan önce bir uyku dönemine girecektir.

Phycomyces blakesleeanus, büyük hücreleri ve çevreye duyarlı sporanjiyoforları ile dikkat çeken heterotalik bir mukoromisettir 6,8,18. Bu organizma laboratuvarda kolayca yetiştirilir ve cinsel döngünün zigospor oluşumuna yol açan kısımları 8-10 gün içinde gözlemlenebilir. Bir model olarak, P. blakesleeanus, çevresindeki ışığı algılama yeteneği açısından incelenmiştir17,19. Yetiştirme kolaylığı ve çiftleşmeyi teşvik etme kapasitesi, onu ışığı algılama yeteneğinin arkasındaki mekanizmayı incelemek için ideal bir model haline getirdi20; Bu bulgular aynı zamanda mantarlarda ışık algılama mekanizmalarının evrimsel korunumunu da vurguladı. P. blakesleeanus'ta ışığın, bu korunmuş ışık algılayıcı proteinler aracılığıyla cinsel üremeyi engellediği gösterilmiştir21. Son evrimsel gelişimsel çalışmalar, P. blakesleeanus cinsel döngüsü6 sırasında hangi genlerin hücre farklılaşmasına katkıda bulunduğunu anlamaya çalışmıştır. Morfogenezin spesifik genlerle ilişkilendirilmesi, gen ekspresyonu çalışmalarını gerçekleştirmek için aynı hücre tiplerinden yeterli dokunun izole edilmesini gerektirecektir.

Bir laboratuvar ortamında P. blakesleeanus'un çiftleşmesini indüklemek için protokoller daha önce tanımlanmış olsa da, bazıları sadece kullanılacak ortamın türünü ve ilgili suşları belirtir18. Bazı protokol açıklamaları, spesifik ortam formülasyonunu içermez, ancak varsayımsal tamamlayıcı eşleşme tiplerinin bir plaka10 üzerinde nereye yerleştirileceğini açıklar. Daha yeni protokoller, her bir çiftleşme tipinin sporlarını karıştırarak ve karışık spor süspansiyonu21 ile aşılayarak veya çiftleşme tiplerini biraz arayla yerleştirerek ve kültürün 20 gün boyunca kuluçkaya yatmasına izin vererek zigospor üretiminin artmasına izin verir22. Bu yaklaşımlar, özellikle zigosporlar olmak üzere bol miktarda farklılaşmış hücreler oluşturmak için yararlıdır, ancak gelişimsel bir zaman seyrini gözlemlemek veya tek hücreli transkriptomik için zigosporlardan önce oluşan cinsel yapıları seçmek için uygun olmayabilir. Diğer çalışmalar, cinsel döngü başladığında seri morfolojik geçişlerin gözlemlenmesine izin vermek için tamamlayıcı çiftleşme türlerini katı ortamlara birbirinden uzak tutarak bunu ele almıştır 6,22,23. Diğer mantarlarda olduğu gibi, P. blakesleeanus mycelia radyal olarak genişler24,25. Bu nedenle, tamamlayıcı çiftleşme türleri aynı plaka üzerinde yetiştirildiğinde, misellerinin farklı kısımları farklı zamanlarda temas edecektir. Miseller arasındaki temas, P. blakesleeanus cinsel döngüsünün ilk adımlarından biri olduğundan, bu, etkileşen misellerin farklı bölümlerinin cinsel döngünün farklı aşamalarında olacağı anlamına gelir. Bu eşzamansızlık, bir gen ekspresyonu çalışmasının sonucunu etkileyebilir, öyle ki farklılaşmış hücre tipleri karıştırılırsa ve farklı gen ekspresyon programlarına sahiplerse, o zaman bir genin rolünü belirli bir yapıya atfetmek zor olacaktır.

P. blakesleeanus'un cinsel döngü sırasında morfogenezde yer alan genleri incelemek için bir model olarak değerine ek olarak, güçlü büyümesi ve birkaç gün içinde farklılaşma kapasitesi, onu erken ayrılan filamentli mantarlarla ilgilenen öğrencileri eğitmek ve mantarların çeşitliliği ve gelişim süreçleri hakkında bilgi edinmek için bir lisans sınıfı ortamında kullanmak için ideal bir mantar haline getirir. Burada sunulan protokol, besin mevcudiyetinin miselyum görünümü, çiftleşmenin indüksiyonu ve belirli cinsel yapılar için zenginleştirme üzerindeki etkisini, niceliklendirme, gözlem veya potansiyel tek hücreli transkriptomik için göstermek için iki farklı ortam türünün üç konsantrasyonunu kullanır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

1. Medya hazırlığı

  1. Toz mısır unu agar (CMA) veya patates dekstroz agarını (PDA) deiyonize suda askıya alın. % 100 CMA veya PDA için, üreticinin talimatlarına uyun ve 1 L deiyonize suda 17 g CMA'yı veya 1 L deiyonize suda 39 g PDA'yı askıya alın. % N% CMA veya PDA için, üretici tarafından önerilen miktarın 1 / N'sini askıya alın ve% 7.5'lik (a / h) bir agar konsantrasyonu elde etmek için ek agar ile takviye edin.
    NOT: İsteğe bağlı adım: Otoklavlamadan önce, bakteriyel kontaminasyon söz konusuysa 25 μg/mL kloramfenikol ekleyin.
  2. Ortamı otoklavda 121 °C'de 15 dakika sterilize edin.
  3. Ortamı 60 °C'ye ayarlanmış bir su banyosunda 30 dakika bekleterek ~ 60 ° C'ye soğutun.
    NOT: Sıcak medya şişesi çok az rahatsızlık vererek veya hiç rahatsızlık duymadan 6 saniye boyunca tutulabiliyorsa, dökülmeye hazırdır.
  4. Plakaları aseptik koşullar altında laminer akış başlığına veya biyolojik güvenlik kabinine dökün. Medya şişesini açık, boş bir Petri kabının üzerine eğin ve yalnızca altını tamamen kaplayacak kadar dökün.
    1. Alternatif olarak, bir cam serolojik pipet kullanın ve her plakaya 20 mL ortam pipetleyin.
      NOT: Bu yaklaşım, medya şişesinin daha düşük bir sıcaklıkta kalma süresini artırır ve agarın erken katılaşma riskini artırır.
  5. Medyanın yeniden katılaşmasına izin verin. Hemen kullanılmayacaksa plakaları 4 °C'de saklayın.

2. Mantar sporlarının veya dokularının hazırlanması

  1. Her P. blakesleeanus çiftleşme türünün kültürlerini elde edin (örneğin, NRRL 1555 (-), NRRL 1554 (+), NRRL 1464 (-) ve NRRL 1465 (+)). Melezleri sporlarla aşılamak için, önce her çiftleşme türünü saf kültürde% 100 CMA veya PDA'da büyütün
  2. Mevcut kültürlerden öncü miselin bir kısmını kesin ve eksize edilen miselyumu% 100 CMA / PDA plakasına yerleştirin. Saf kültürleri 12 saatlik bir ışık döngüsü altında 27 ° C'de 1 hafta boyunca inkübe edin.
  3. Sporanjiyoforlar mevcut olduğunda, aseptik teknik kullanılarak sterilize edilmiş, deiyonize edilmiş suda %0.01 Tween 20 ile sporlaşan saf bir kültürü doldurun. Bir P1000 mikropipet ile, plakadan 1.0 mL Tween 20-spor karışımını bir mikrosantrifüj tüpüne çekin.
  4. 30 saniye boyunca mini bir santrifüjde santrifüjleyin, ardından süpernatanı boşaltın.
    1. Daha fazla spora ihtiyaç duyulursa, aynı mikrosantrifüj tüpüne 1.0 mL Tween 20 spor karışımı eklemeye devam edin ve adım 2.4'ü tekrarlayın. Uygun miktarda spor elde ettikten sonra, süpernatanı boşaltın ve 500 μL steril deiyonize su ile değiştirin.
    2. İsteğe bağlı: Sporların konsantrasyonunu tahmin etmek için bir hematitometre kullanın, bu da daha fazla su eklenmesi gerekip gerekmediğini veya sporların yeniden santrifüjlenmesi gerekip gerekmediğini bildirir.
  5. Alternatif olarak, haçları saf kültürlerden gelen öncü misellerle aşılayın.
    1. Dokuyu çıkarmak ve aşıyı hemen plakalamak için sterilize edilmiş bir tıraş bıçağı veya mantar deliği delici kullanın.
  6. Çaprazları 2 çaprazlar, 4 çaprazlar veya 8 çaprazlar olarak ayarlayın (Şekil 1).
    NOT: Transkriptomik çalışma için çarpılar ayarlanıyorsa, gösterge plakaları olarak hizmet etmek için koşul/ortam başına 1-2 ek plaka ayarlanması önerilir. Gösterge plakaları, araştırmacıların deney plakalarına ışık maruziyetini sınırlamasına izin verir, çünkü ışık P. blakesleeanus'ta cinsel üremeyi engeller.
    1. 2 yönlü bir çaprazlama için, tamamlayıcı eşleşme türlerini birbirinin karşısına yerleştirin (Şekil 1A).
      1. (-) çiftleşme tipi NRRL 1555 veya NRRL 1464 misellerini, PDA veya CMA üzerindeki bir Petri kabının kenarından en az 1 cm uzağa yerleştirin.
      2. Aynı plakaya, (-) çiftleşme tipinin yerleştirildiği yerin karşısına ve Petri kabının kenarından 1 cm uzağa, (+) çiftleşme tipini, NRRL 1554 veya NRRL1465 yerleştirin (Şekil 1A).
        NOT: Tamamlayıcı çiftleşme türleri arasındaki mesafe, cinsel döngüye katılan dokunun boyutunu etkileyecektir. Birbirinden daha uzak çiftleşme türleri, miselin daha fazla genişlemesine izin verir ve bu da iki partner arasındaki cinsel etkileşimlerin sayısını artıracaktır.
    2. 4 bir çaprazlama için, çiftleşme türleri gibi birbirinin karşısına, ancak tamamlayıcı bir çiftleşme türüne komşu olacak şekilde yerleştirin (Şekil 1B).
      1. (-) çiftleşme türleri NRRL 1555 ve NRRL 1464'ün sporlarını veya misellerini, PDA veya CMA üzerindeki bir Petri kabının kenarından en az 1 cm uzağa karşılıklı olarak yerleştirin.
      2. Aynı plaka üzerinde, iki (-) çiftleşme türü arasında ve plakanın kenarından en az 1 cm uzakta bir yer seçin ve bölgeyi (+) çiftleşme türü, NRRL 1554 veya 1465 sporları veya miselleri ile aşılayın.
      3. Aynı plakaya, ilk (+) çiftleşme tipinin aşılandığı yerin karşısına ve plakadan en az 1 cm uzağa, diğer (+) çiftleşme tipini yerleştirin.
    3. 8 bir çaprazlama için, Petri kabının çevresi boyunca, her çiftleşme türünden dört tane içeren alternatif çiftleşme türleri (Şekil 1C).
  7. Aşılamadan sonra, plakaları parafilm ile kapatın veya (mühürsüz bırakın) ve karanlıkta 22 ° C'de inkübe etmeden önce ikincil bir kaba koyun. Çiftleşmenin kanıtı için plakaları günlük olarak gözlemleyin, bu süre zarfında plakanın altından fotoğraflar çekin ve kültürler büyüdükçe miselleri izleyin.
    NOT: Aşılamadan 24 saat sonra, miselin tüm medya türlerinde genişlediğini görmeyi bekleyin, ancak bireylerin bu aşamada temas halinde olması muhtemel değildir.
  8. Ortam tipine (PDA veya CMA) ve formülasyona (% 25,% 50,% 100) bağlı olarak, misel temas etmeye başlarsa, çiftleşme kanıtı için bir diseksiyon kapsamı altında temas halinde olan tamamlayıcı çiftleşme tiplerinin misellerini inceleyin. Diseksiyon dürbününe monte edilmiş bir kamera veya akıllı telefon ile etkileşime giren misellerin fotoğraflarını çekin.
    1. Miselin görüntülerini elde edin ve bunları birleştirin (örneğin, Panorama Stitcher uygulamasını kullanarak). Miselin alanını tahmin etmek için ImageJ'yi kullanın (çevrimiçi eğitimlere bakın).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

4 bir çaprazlamayı takiben, her bir suş, miselyum alanındaki değişiklikle belirlendiği gibi büyüme hızında biraz değişmiştir (Şekil 2). İstatistiksel olarak anlamlı olmasa da, NRRL 1555% 25 CMA,% 25 PDA veya% 100 PDA ile kaplandığında alanda daha hızlı bir değişikliğe sahipti. Benzer şekilde, NRRL 1465, P PDA veya CMA'da yetiştirildiğinde alanda daha yüksek bir değişikliğe sahipti. NRRL 1464, 0 CMA ile yetiştirildiğinde alanda en hızlı artışa sahip oldu. 24 saat (1 DPI) sonra, PDA'da büyüyen...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Laboratuvar ortamında P. blakesleeanus'ta eşeyli üremeyi indüklemek için basit bir protokol burada sunulmuştur. Bu protokol için en kritik hususlardan biri besin sınırlamasıdır. Mantarların, besin sınırlaması 6,28,29,30,31,32 gibi zorlu çevresel koşullara bir yanıt olarak eşeyli üremeyi seçtiği varsayılmaktadır.<...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların beyan edebilecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Colorado Koleji Doğa Bilimleri Yürütme Komitesi'ne, Organizma Biyolojisi ve Ekoloji Bölümü'ne ve Hevey Ailesi Öğrenci Araştırmaları Fonu'na bu çalışmayı finanse ettikleri için teşekkür ederiz. Ayrıca teknik destekleri için Alice Keller ve Tia Hutchens'a da teşekkürlerimizi sunarız.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Agar tozuThermoFisher3453PK
kloramfenikolFisherSciBP904-100
Mısır unu agarCarolina742460
Panorama StitcherApple App Store
Phycomyces blakesleeanus (-) NRRL 1555Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı - Tarımsal Araştırma Servisi1555USDA-ARS yalnızca akademik araştırmacılara gönderilecektir; alternatifler için aşağıya bakınız
Phycomyces blakesleeanus (-) NRRL 1564Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı - Tarımsal Araştırma Servisi1564USDA-ARS yalnızca akademik araştırmacılara gönderilecektir; alternatifler için aşağıya bakın
Phycomyces blakesleeanus (-) Tüp KültürüCarolina Biyolojik Tedarik156183Eğitim sınıfı kültür satın alınabilir; NRRL 1555
Phycomyces blakesleeanus (+) NRRL 1554Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı - Tarımsal Araştırma Servisi1554USDA-ARS yalnızca akademik araştırmacılara gönderilecektir; alternatifler için aşağıya bakın
Phycomyces blakesleeanus (+) NRRL 1565Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı - Tarımsal Araştırma Servisi1565USDA-ARS yalnızca akademik araştırmacılara gönderilecektir; alternatifler için aşağıya bakın
Phycomyces blakesleeanus (+) Tüp KültürüCarolina156182Eğitim sınıfı kültür satın alınabilir; NRRL 1554
Patates dekstroz agarFisherSciDF0013-17-6
Sprout Plus Mini SantrifüjHeathrow ScientificSKU 120610
Tween 20Sigma-AldrichP6585-10ML

Kaynaklar

  1. NaranjoOrtiz, M. A., Gabaldón, T. Fungal evolution: diversity, taxonomy and phylogeny of the fungi. Biol Rev Camb Philos Soc. 94 (6), 2101-2137 (2019).
  2. Idnurm, A. Sex determination in the firstdescribed sexual fungus. Eukaryot Cell. 10 (11), 1485-1491 (2011).
  3. Spatafora, J. W., et al. A phylumlevel phylogenetic classification of zygomycete fungi based on genomescale data. Mycologia. 108 (5), 1028-1046 (2016).
  4. Wang, Y., et al. Divergent evolution of early terrestrial fungi reveals the evolution of mucormycosis pathogenicity factors. Genome Biol Evol. 15 (4), evad046(2023).
  5. Gryganskyi, A. P., et al. Sequencing the genomes of the first terrestrial fungal lineages: what have we learned. Microorganisms. 11 (7), 1830(2023).
  6. Peña, J. F. The evolutionary developmental biology of Mucoromycotina [Doctoral dissertation]. , University of California, Riverside. (2022).
  7. Wetzel, J., Burmester, A., Kolbe, M., Wöstemeyer, J. The matingrelated loci sexM and sexP of the zygomycetous fungus Mucor mucedo and their transcriptional regulation by trisporoid pheromones. Microbiology (Reading). 158 (Pt 4), 1016-1021 (2012).
  8. Camino, L. P., Idnurm, A., CerdáOlmedo, E. Diversity, ecology, and evolution in Phycomyces. Fungal Biol. 119 (11), 1007-1021 (2015).
  9. Gryganskyi, A. P., et al. Structure, function, and phylogeny of the mating locus in the Rhizopus oryzae complex. PLoS One. 5 (12), e15273(2010).
  10. Blakeslee, A. F. Sexual reproduction in the Mucorineae. Proc Am Acad Arts Sci. 40, 205-319 (1904).
  11. Sutter, R. P., Grandin, A. B., Dye, B. D., Moore, W. R. (-) mating typespecific mutants of Phycomyces defective in sex pheromone biosynthesis. Fungal Genet Biol. 20 (4), 268-279 (1996).
  12. Sahadevan, Y., RichterFecken, M., Kaerger, K., Voigt, K., Boland, W. Early and late trisporoids differentially regulate βcarotene production and gene transcript levels in the mucoralean fungi Blakeslea trispora and Mucor mucedo. Appl Environ Microbiol. 79 (23), 7466-7475 (2013).
  13. Gooday, G. W., Carlile, M. J. The discovery of fungal sex hormones: III. Trisporic acid and its precursors. Mycologist. 11 (3), 126-130 (1997).
  14. Banbury, G. H. Processes controlling zygophore formation and zygotropism in Mucor mucedo Brefeld. Nature. 173, 499-500 (1954).
  15. Sutter, R. P., Whitaker, J. P. Zygophorestimulating precursors (pheromones) of trisporic acids active in (-)Phycomyces blakesleeanus. Acidcatalyzed anhydro derivatives of methyl 4dihydrotrisporateC and 4dihydrotrisporateC. J Biol Chem. 256 (5), 2334-2341 (1981).
  16. Gooday, G. W. Functions of trisporic acid. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 284, 509-520 (1978).
  17. Bergman, K., et al. Phycomyces. Bacteriol Rev. 33 (1), 99-157 (1969).
  18. O'Donnell, K. L., Hooper, G. R., Fields, W. G. Zygosporogenesis in Phycomyces blakesleeanus. Can J Bot. 54, 2573-2586 (1976).
  19. Delbrück, M., Reichardt, W. I. System analysis for the light growth reactions of Phycomyces. Cellular Mechanics in Differentiation and Growth. Rudnick, D. , Princeton University Press. 3-44 (1957).
  20. Idnurm, A., et al. The Phycomyces madA gene encodes a bluelight photoreceptor for phototropism and other light responses. Proc Natl Acad Sci USA. 103 (12), 4546-4551 (2006).
  21. Shakya, V. P. S., Idnurm, A. The inhibition of mating in Phycomyces blakesleeanus by light is dependent on the MadAMadB complex that acts in a sexspecific manner. Fungal Genet Biol. 101, 20-30 (2017).
  22. Yamazaki, Y., Miyazaki, A., Kataoka, H., Ootaki, T. Effects of chemical components and nitrogen sources on zygospore development in Phycomyces blakesleeanus. Mycoscience. 42 (1), 11-17 (2001).
  23. Idnurm, A., Walton, F. J., Floyd, A., Heitman, J. Identification of the sex genes in an early diverged fungus. Nature. 451 (7175), 193-196 (2008).
  24. Agrios, G. N. Plant pathogens and disease: general introduction. Encyclopedia of Microbiology. Schaecter, M. , Elsevier. 613-646 (2009).
  25. Valle, M., et al. Impact of water activity on the radial growth of fungi in a dairy environment. Food Res Int. 157, 111247(2022).
  26. Heo, Y. M., et al. Investigation of filamentous fungi producing safe, functional watersoluble pigments. Mycobiology. 46 (3), 269-277 (2018).
  27. Wickham, H. ggplot2 elegant graphics for data analysis. , Springer International Publishing. Cham, Switzerland. (2016).
  28. Lubkowitz, M. A., et al. Schizosaccharomyces pombe isp4 encodes a transporter representing a novel family of oligopeptide transporters. Mol Microbiol. 28 (4), 729-741 (1998).
  29. Nelson, M. A., Metzenberg, R. L. Sexual development genes of Neurospora crassa. Genetics. 132 (1), 149-162 (1992).
  30. Sato, S., Suzuki, H., Widyastuti, U., Hotta, Y., Tabata, S. Identification and characterization of genes induced during sexual differentiation in Schizosaccharomyces pombe. Curr Genet. 26 (1), 31-37 (1994).
  31. Grishkan, I., Korol, A. B., Nevo, E., Wasser, S. P. Ecological stress and sex evolution in soil microfungi. Proc Biol Sci. 270 (1510), 13-18 (2003).
  32. Bernstein, H., Byers, G. S., Michod, R. E. Evolution of sexual reproduction: importance of DNA repair, complementation, and variation. Am Nat. 117 (4), 537-549 (1981).
  33. Heitman, J., et al. The fungal kingdom. , ASM Press. (2017).
  34. Heitman, J., et al. Sex in fungi molecular determination and evolutionary implications. , ASM Press. (2007).
  35. Wang, Z., LópezGiráldez, F., Wang, J., Trail, F., Townsend, J. P. Integrative activity of mating loci, environmentally responsive genes, and secondary metabolism pathways during sexual development of Chaetomium globosum. mBio. 10, (2019).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Filamanöz FunguslarEşeyli ÜremeÇiftleşme TipiZigospor OluşumuBesinle Sınırlı OrtamHifasal KemotaksiPatates Dekstroz AgarGen Ekspresyonu