Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Ultrason Lokalizasyon Mikroskobu Kullanılarak Sıçan Beyin Mikrovaskülatürünün İki Boyutlu Süper Çözünürlüklü Görselleştirilmesi

1.6K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/67813

⸱

28 Mart 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biomedical Engineering, Fudan University, 2Academy for Engineering and Technology, Fudan University, 3School of Information Science and Technology, Fudan University, 4State Key Laboratory of Medical Neurobiology, Fudan University

Bu makalede

Özet

Burada, sıçanlarda beyin mikrovaskülatürünü görüntülemek için 12.5 μm uzamsal çözünürlüğe ulaşan ultrason lokalizasyon mikroskobu (ULM) için bir protokol açıklıyoruz. Kan akış yönünün ve hızının ayrıntılı olarak görselleştirilmesini sağlayarak serebral dolaşım ve vasküler bozukluklarla ilgili çalışmaları ilerletmek için güçlü bir araç sunar.

Özet

Serebral mikrovaskülatür, beyin fonksiyonlarını sürdürmek için gerekli olan karmaşık bir damar ağı oluşturur. İnme, Alzheimer hastalığı, gliomlar ve vasküler demans gibi hastalıklar mikrovasküler sistemi derinden bozabilir. Ne yazık ki, mevcut tıbbi görüntüleme yöntemleri bu ölçekte yalnızca dolaylı gözlemler sunmaktadır. Optik mikroskopiden ilham alan ultrason lokalizasyon mikroskobu (ULM), penetrasyon derinliği ve uzamsal çözünürlük arasındaki klasik dengenin üstesinden gelir. Enjekte edilen mikro kabarcıkları (MB'ler) alt dalga boyu hassasiyetiyle lokalize ederek ve izleyerek, mikrometre ölçeğinde vasküler ve hız haritaları oluşturulabilir. Burada, ticari bir ultrason platformu kullanarak sıçanlarda in vivo olarak beyin mikrovaskülatürünün süper çözünürlüklü görüntülenmesi için sağlam bir protokol sunuyoruz. Bu yöntem, mikrovasküler mimariyi yeniden yapılandırarak ve kan akış yönü ve hızı hakkında ayrıntılı bilgi sağlayarak 12,5 μm uzamsal çözünürlüğe ulaşır ve serebral mikrosirkülasyon anlayışımızı büyük ölçüde geliştirir. Protokol, nörovasküler hastalıkların erken teşhisi ve tedavisi için güçlü bir araç sunan sıçan hastalığı modellerine genişletilebilir.

Giriş

Kılcal damarlar, arteriyoller ve venüllerden oluşan serebral mikrovaskülatür, besin dağıtımını, oksijen değişimini ve atıkların uzaklaştırılmasını kolaylaştırarak beyin fonksiyonunu sürdürmek için gereklidir 1,2. Bu ağdaki bozulmalar, inme3, Alzheimer hastalığı4, gliomlar5 ve vasküler demans6 gibi nörolojik bozukluklarda rol oynar ve beyin fizyolojisinde bozulmalara yol açar. Mikrovasküler değişiklikler sıklıkla klinik semptomların başlamasından önce gelir ve bu da onları tanı ve tedavi müdahaleleri için kritik bir hedef haline getirir 7,8. Hem yapısal hem de fonksiyonel düzeyde vasküler değişikliklerin kapsamlı bir şekilde anlaşılması, araştırma ve tedavi stratejilerini ilerletmenin anahtarıdır.

Bununla birlikte, serebral mikrovasküler sistemin görüntülenmesi, beynin küçük boyutu ve kısmen derin konumu nedeniyle özellikle zordur. Manyetik rezonans görüntüleme (MRG)9 ve bilgisayarlı tomografi (BT)10 gibi geleneksel görüntüleme yöntemleri, büyük ölçekli vasküler değişiklikleri yakalamak için yeterli olsa da, küçük damarları görselleştirmek için çok kaba olan bir uzamsal çözünürlük (~100 μm) sunar. İki foton mikroskobu11 gibi optik yöntemler, tek tek kılcal damarları görüntülemek için mükemmel uzamsal çözünürlük (1 μm'ye kadar) sağlar, ancak sınırlı görüş alanı ve penetrasyon derinliği (1 mm'den az) tarafından engellenir ve derin beyin bölgelerini görüntüleme yeteneklerini kısıtlar. Ultrason tabanlı bir teknik olan Doppler12, gerçek zamanlı kan akışı değerlendirmesi sunarken, mikrovasküler detay için yetersiz olan 50-200 μm'lik bir çözünürlükle sınırlı kalır. Genel olarak, şu anda tek bir yöntem, serebral mikrovasküler görüntüleme için gerekli olan yüksek uzamsal çözünürlük ve yeterli beyin penetrasyonu ikili gereksinimini karşılamamaktadır.

Optik mikroskopi 13,14'ten ilham alan ultrasonik lokalizasyon mikroskobu (ULM), tek tek enjekte edilen mikro kabarcıkların (MB'ler) yerini belirleyerek ve dalga boyu altı çözünürlük15 ile yer değiştirmelerini izleyerek ince yapıların mikron ölçeğinde görselleştirilmesine olanak tanır. Ultrason görüntülemede penetrasyon ve çözünürlük arasındaki klasik uzlaşmayı atlar16. Bu çalışma, ULM'yi canlı bir sıçan modelinde uygulamak ve böylece ticari olarak temin edilebilen ultrason platformu aracılığıyla beyin mikrovaskülatürünün süper çözünürlüklü görüntülemesini sağlamak için sağlam bir protokolü detaylandırmaktadır. Protokol sadece mikrovasküler yapının kapsamlı bir rekonstrüksiyonunu sağlamakla kalmaz, aynı zamanda konvansiyonel görüntüleme teknikleri ile mümkün olmayan kan akımının yönü ve hızı hakkında da detaylı bilgi sağlar. Protokol normal sıçanlarda doğrulanmış olmasına rağmen, sıçan hastalığı modellerine genişletilebilir ve farklı patolojik durumlarda özelleştirilmiş çalışmalar için olanaklar sunar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu çalışmada yapılan tüm hayvan deneyleri Fudan Üniversitesi Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır (Onay No: 2022JS-004). Protokol, hayvanlara insancıl muamele edilmesini sağlamak için Fudan Üniversitesi'nin hayvan bakımı yönergelerini sıkı bir şekilde takip eder. Deneye başlamadan önce, sıçanlara çevresel iklimlendirme için 1 haftalık bir süre tanınmalı ve bu süre zarfında yeterli yem ve su sağlanmalıdır. Fotoperiyot, normal fizyolojik durumların korunmasını sağlamak için biyolojik ritimlerine uygun olarak dikkatlice düzenlenir. Deneyin sonunda, ötenazi aşırı dozda inhale izofluran kullanılarak gerçekleştirilir.

NOT: Deney düzeneği Şekil 1A-H'de gösterilmiştir.

1. ULM görüntüleme için hayvan hazırlığı

  1. Anestezi
    1. 3 L / dk'lık bir akış hızında% 3.5 izofluran ve% 100 oksijen karışımı uygulayarak sıçanda anesteziyi indükleyin. Yaklaşık 4 dakika sonra, hayvanı hazneden çıkarın ve yüzüstü olarak önceden 37 °C'ye ısıtılmış bir görüntüleme platformuna yerleştirin. Anestezi derinliğini, sıçanın arka bacağının sert ayak parmağı tutamında bir geri çekilme refleksinin olmamasıyla onaylayın.
    2. Farenin burnunu anestezi sistemine bağlı bir solunum maskesine yerleştirin. 1,5 L / dak'lık bir akış hızında% 1.5 izofluran ve% 100 oksijen karışımı uygulayarak stabil bir sedasyon sağlayın.
      NOT: Anestezi yöntemleri ve dozajları kesinlikle üreticinin yönergelerine uygundur.
  2. Ameliyat öncesi hayvan hazırlığı
    1. Farenin üst kesici dişlerini, alt çeneyi çubuğun altına yerleştirerek kesici çubuğun çentiğine sabitleyin. Sıçanın kafasını stabilize etmek için kulak çubuklarını, kulak kanalının biraz önünde ve üstünde (elle ele geçirilebilir) kemik girintisine yerleştirerek ve tüm kraniyal yüzeyin yatay kalmasını sağlayarak kullanın (Şekil 1A).
    2. Başın farklı kısımlarına az miktarda basınç uygulayarak fiksasyonun stabilitesini nazikçe araştırın. Orijinal konumundan herhangi bir hareket veya kayma olmadığından emin olun.
    3. Görüntüleme platformunun yüksekliğine ince ayar yapın ve engelsiz nefes almayı sağlamak için kesici çubuk çentiğini kaldırarak veya alçaltarak sıçan kafasının açısını titizlikle ayarlayın.
    4. Cerrahi ışıklara uzun süre maruz kalmaktan kaynaklanan hasarı önlemek ve anestezi altında gözleri nemli tutmak için farenin gözlerine eritromisin merhem veya% 30 gliserin solüsyonu uygulayın. Ek olarak, ameliyat sırasında boğulmayı önlemek için farenin dilini ağzın bir tarafına nazikçe çekmek için yuvarlak uçlu cımbız kullanın.
    5. Elde taşınan bir elektrikli kesme makinesi kullanın ve farenin kafasını tüylerin büyüme yönüne karşı (arkadan öne), tipik olarak kulakların arasında, gözlerden boynun başlangıcına kadar tıraş edin (Şekil 1B). Cerrahi kesiye hazırlanmak için traş edilen bölgeyi %1 iyot solüsyonu ile temizleyin.
  3. Sıçan kraniyotomisi
    1. Sıçanın kafatasının sagital sütürü boyunca, oksipital kemiğin hemen arkasından başlayarak ve öne doğru yaklaşık 4 cm uzanan bir kesi yapın. Her iki taraftaki cildi geri çekmek için hemostatlar kullanın (Şekil 1C). İsteğe bağlı olarak, daha fazla cerrahi erişim sağlamak için kafatasının üzerindeki cildi tamamen çıkarın, ancak bu enfeksiyon riskini artırabilir.
    2. Periosteumu kafatasından çıkarmak için küçük bir makas kullanın ve sert kemik tabakasını tamamen açığa çıkarın.
    3. Kraniotomiyi, küresel bir matkap ucu ile donatılmış el tipi bir mini kraniyal matkap kullanarak gerçekleştirin (Şekil 1D). Kaba bir matkap ucuyla (2,5 mm çap) başlayın ve matkabı her seferinde 2-3 saniye uygulayarak kemiği aşındırmak için hafifçe vurun. Orta alandan başlayın ve yanlardaki daha kalın alanlara doğru ilerleyin.
      NOT: Kraniyotomi sırasında aşırı kanama kan dolaşımını etkiler ve kortikal alanlarda vasküler rekonstrüksiyon eksikliğine neden olur (Şekil 1H).
    4. Aşırı ısınmayı önlemek için her 2-3 saniyede bir duraklayın ve her 2 dakikada bir, kalıntıları soğutmak ve durulamak için bir şırınga kullanarak delme alanına yaklaşık 1 mL %0.9 NaCl enjekte edin.
    5. Beyaz kemik dokusu artık tutarlı bir şekilde bağlı görünmediğinde, daha ince bir matkap ucuna (1 mm çap) geçin. Merkezi ana kan damarları koyu kahverengi olarak net bir şekilde görünene ve çevresindeki alan pembe görünene ve mikro damarlar hafif kırmızımsı olarak görünene kadar delmeye devam edin (Şekil 1F).
      NOT: Son kraniyotomi aralığı Bregma +3 mm'den Lambda ön-arka ve kafatasının orta hattı boyunca her iki yanda 7 mm'dir (Şekil 1E). Ameliyatı tamamladıktan sonra, veri toplamaya başlamadan önce nispeten stabil fizyolojik koşulları sağlamak için farenin yaklaşık 10 dakika dinlenmesine izin verin.

2. Veri toplamadan önce kurulum

  1. Kontrast madde hazırlama ve enjeksiyon
    1. Kontrast maddeyi (59 mg SF6 gazı ve 25 mg liyofilize toz içeren bir şişe) resmi yönergelere göre 5 mL% 0.9 NaCl içinde çözün. Bir MB süspansiyonu oluşturmak için karışımı kuvvetlice çalkalayın. Süspansiyondaki SF6'nın son konsantrasyonu 8 μL/mL'dir.
    2. MB süspansiyonunun 0.8 mL'sini 1 mL'lik bir şırıngaya çekin ve 100 μL / dk'da demlenmeye programlanmış bir mikroenjeksiyon pompasına sabitleyin.
    3. Sıçanın kuyruk damarına bağlı bir kateter ile 26 G'lik bir kalıcı iğne yerleştirin (Şekil 1G).
  2. Görüntüleme düzleminin seçilmesi
    1. Beyin stereotaksik aletinin manipülatör koluna, bir kelepçe ile donatılmış merkezi frekansı 15.625 MHz olan bir prob monte edin (hareket aralığı: dikey, yatay ve 80 mm'ye kadar ön-arka; okuma hassasiyeti: 0.1 mm).
    2. Ultrason probunu doğrudan açıkta kalan sıçan beyninin üzerine yerleştirin. Optimum sinyal iletimini sağlamak için açıkta kalan beyin yüzeyine kuplaj jeli uygulayın.
    3. Yazılımın ana arayüzünü açın, bu da bir sıçan beyin atlasını motor hareket kontrol programlarıyla entegre eder.
    4. Bregma noktasını başlangıç noktası olarak ayarlayın. Yazılım arayüzü, probun yörüngesinin ve karşılık gelen sıçan beyin dilimi konumunun gerçek zamanlı bir görüntüsünü sağlar. Hedef görüntüleme düzlemini seçin; örneğin, Bregma -1 mm.

3. Veri toplama (Zamanlama ~ 20 dk)

NOT: Verasonics (ultrason sistemi), Vantage sistemi ile kullanım için orijinal MATLAB komut dosyalarını sağlar ve değiştirilmemiştir.

  1. Yazılım başlatma
    1. MATLAB 2021a yazılımını başlatın.
    2. MATLAB 2021a'da veri toplama komut dosyasını girin.
    3. Kök dizinde, çalışma zamanı ortamını etkinleştirmek için komut satırı penceresine activate yazın.
  2. Parametre konfigürasyonu ve RF sinyallerinin toplanması
    1. İlgilenilen bölgeyi etkili bir şekilde yakalamak için veri toplama başlangıç ve bitiş derinliklerini sırasıyla 5 ve 120 dalga boyunda ayarlayın.
      NOT: Ayarlamalar, görüntüleme düzlemine ve incelenen belirli hayvana göre yapılmalıdır.
    2. Görüntü çözünürlüğünü ve kontrastı artırmak için düzlem dalgası iletim direksiyon açılarını 2,5°'lik artışlarla -5° ila 5° arasında ayarlayın.
      NOT: Bu ayarları belirli görüntüleme gereksinimlerine ve hedef özelliklerine göre ayarlayın.
    3. İlgilenilen bölge için yeterli penetrasyon ve optimum sinyal-gürültü oranı sağlamak için iletim voltajını 20 V'a ayarlayın.
    4. Veri toplamayı başlatmak ve radyo frekansı (RF) sinyallerini .mat dosya biçiminde kaydetmek için Çalıştır düğmesine tıklayın.
      NOT: Sıçanın vücudunda düzgün ve stabil MB dağılımı sağlamak için mikroenjeksiyon pompasını başlattıktan 30 saniye sonra veri toplamaya başlayın.

4. Veri işleme ve analizi (Zamanlama ~ 8 saat)

  1. Bilgi işlem
    1. RF verilerini MATLAB 2021a'ya aktarın ve Faz İçi ve Dörtlü (I/Q) veriler oluşturmak için demodüle edin (bkz. Malzeme Tablosu).
    2. I/Q verilerinde hüzmeleme için Gecikme ve Toplam (DAS) algoritmasını kullanmak için Çalıştır düğmesine tıklayın (Malzeme Tablosuna bakın).
      NOT: Toplam 120.000 kare ile 800 Hz bileşik sonrası kare hızı.
  2. ULM görüntüleme
    1. Arka plan gürültüsünü ve karmaşayı ortadan kaldırmak için Tekil Değer Ayrıştırması (SVD) uzay-zamansal filtreleme algoritmasını17 IQ verilerine uygulayın. Her 800 kare bir veri bloğu olarak saklanır ve SVD eşiği [15.800] olarak ayarlanır.
    2. Gauss uydurma algoritmasını18 kullanarak her MB'nin merkezini bulun.
    3. Konumlarına göre ardışık çerçeveler boyunca MB yörüngelerini izlemek için Kuhn-Munkres algoritmasını kullanın (bkz. Malzeme Tablosu).
    4. MB yörüngelerinin sayısını görüntülemek için sıcak bir renk haritası ve mikro damar sistemi içindeki her bir konumda hesaplanan hızı haritalayarak akış hızını kodlamak için bir jet renk haritası kullanarak MB yörüngelerini 8x yukarı örneklenmiş bir ızgaraya eşleyin.
    5. Yukarı ve aşağı akış yönlerini ayırt etmek için özel bir renk şeması uygulayın ve gelişmiş görselleştirme için yüksek çözünürlüklü görüntüler elde edin.
    6. İki alt görüntü oluşturmak için orijinal MB yörüngelerini rastgele iki gruba ayırın, her birinde bir Fourier dönüşümü gerçekleştirin ve Fourier Halkası Korelasyonunu (FRC) spektrumlarının normalleştirilmiş korelasyonu olarak hesaplayın. Çözünürlüğü, FRC'nineşik 19'un altına düştüğü uzamsal frekansın tersi olarak tanımlayın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Şekil 1, sıçanlarda in vivo beyin mikrovasküler ULM görüntüleme için ayrıntılı kurulumu göstermektedir ve her bir eleman deneysel değişkenliği en aza indirmek ve güvenilir süper çözünürlüklü görüntüleme sonuçları için doğru veri toplamayı sağlamak için dikkatlice tasarlanmıştır.

Şekil 2A , Bregma noktasından -1 mm'de konumlandırılmış, 12 mm'ye yaklaşan bir görüntüleme derinliği ile sıçan beynindeki mikrovaskülatür sisteminin ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu protokol, in vivo sıçan beyin mikrovaskülatürünün süper çözünürlüklü görüntülemesini gerçekleştirmek için ULM'yi başarıyla kullandı. Diğer görüntüleme modaliteleriyle karşılaştırıldığında, ULM aynı anda hem uzamsal çözünürlüğü hem de penetrasyon derinliğini barındırır. Açıkta kalan sıçan beyni, kafatasından ziyade görüntülendi ve kemik varlığının neden olduğu zayıflama ve bozulmadan kaçınıldı. Merkezi frekansı 15.625 MHz olan bir dönüştürücü altında, 12.5 μm'ye kadar uzamsal çözünürlü...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma kısmen 2023YFC2410903 Hibesi kapsamında Çin Ulusal Anahtar Araştırma ve Geliştirme Programı, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (Hibe 12274092, 12034005), Şanghay Kaşif Programı (Hibe 21TS1400200), Şanghay Uluslararası Bilim ve Teknoloji İşbirliği Programı (Hibe 24490710400) ve Fudan Üniversitesi Bilim için Yapay Zeka Vakfı (Grant FudanX24AI016) tarafından desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
AlkolDICHANGhttps://www.dehsm.com/goods-17187.html%75Hüzmeleme
programıMontreal Üniversitesi Biyomedikal Mühendisliği EnstitüsüMatlab Ultrason Araç Kutusu 3.4 versiyonu
Vücut ısısı bakım cihazıRWD Life Science Co., Ltd.69026
Beyin stereotaksik aletRWD Life Science Co., Ltd.71000-RSolunum maskesine uyarlanabilir
Kraniyal Mikroenjeksiyon Cerrahi Alet KitiRWD Life Science Co., Ltd.SP0005-R
Dijital mikroskopRWD Life Science Co., Ltd.DOM-1001
İlaç dağıtım kateteriRWD Life Science Co., Ltd.
Eritromisin merhemRenhe PharmaH36020018%1 x 15 g
Gaz anestezi makinesiRWD Life Science Co., Ltd.R500IESolunum maskesi içerir
El tipi elektrikli kesme makinesiGUAZHOUMUMJD-DTJ02
El tipi mini kraniyal matkapRWD Life Science Co., Ltd.78001
Konut iğnesiKindly EnterpriseDevelopment Group Co., LTDPozitif Basınç Modeli 26 gr
İyot çözeltisiHYNAUThttps://www.hainuocn.com/index/detail/524.html4.5– 5.5 g/L
IQ demodülasyon programıMontreal Üniversitesi Biyomedikal Mühendisliği EnstitüsüMatlab Ultrason Araç Kutusu 3.4 versiyonu
IsofluranRWD Life Science Co., Ltd.R510-22-10
MATLAB yazılımıMathWorksSürümü R2021a
Mikroenjeksiyon pompasıRWD Life Science Co., Ltd.R462
Sodyum klorür enjeksiyonuSHENG'AO hayvanlar pharmaceutical Co., Ltd.270071460%0,90
SonoVueBraccohttps://www.bracco.com/en-se/product/sonovue
Küresel matkap ucuRWD Life Science Co., Ltd.HM1027/HM1010
Konumlandırma Yazılımını DestekleyenRWD Life Science Co., Ltd.V2.0.0.30400
ŞırıngaNazik EnterpriseDevelopment Group Co., Ltd.RWLB1 mL
İzleme programıJean-Yves Tinevez2016 versiyonu
Ultrason jeliJunkang Medical Equipment Co., Ltd.Model DS-1
Ultrason probuVERASONICS, INC.L22-14vX LF
Verasonics Ultrason SistemiVERASONICS, INC.Vantage-256ultrason platformu
https://www.rwdls.com/product-solutions/life-sciences/administration/draw-blood

Kaynaklar

  1. Sweeney, M. D., Ayyadurai, S., Zlokovic, B. V. Pericytes of the neurovascular unit: Key functions and signaling pathways. Nat Neurosci. 19 (6), 771-783 (2016).
  2. Wardlaw, J. M., Smith, C., Dichgans, M. Mechanisms of sporadic cerebral small vessel disease: Insights from neuroimaging. Lancet Neurol. 12 (5), 483-497 (2013).
  3. Fang, J., Wang, Z., Miao, C. -Y. Angiogenesis after ischemic stroke. Acta Pharmacol Sin. 44 (7), 1305-1321 (2023).
  4. Zlokovic, B. V. Neurovascular pathways to neurodegeneration in Alzheimer's disease and other disorders. Nat Rev Neurosci. 12 (12), 723-738 (2011).
  5. Kane, J. R. The role of brain vasculature in glioblastoma. Mol Neurobiol. 56 (9), 6645-6653 (2019).
  6. Iadecola, C. The pathobiology of vascular dementia. Neuron. 80 (4), 844-866 (2013).
  7. Ren, B., et al. Cerebral small vessel disease: Neuroimaging features, biochemical markers, influencing factors, pathological mechanism and treatment. Front Neurol. 13, 843953(2022).
  8. Bradley, C. P., Berry, C. Microvascular arterial disease of the brain and the heart: A shared pathogenesis. QJM. 116 (10), 829-834 (2023).
  9. Baltes, C., Radzwill, N., Bosshard, S., Marek, D., Rudin, M. Micro MRI of the mouse brain using a novel 400 MHz cryogenic quadrature RF probe. NMR Biomed. 22 (8), 834-842 (2009).
  10. Brancaccio, R., Bettuzzi, M., Morigi, M. P., Casali, F., Ragazzini, L. Image quality and dose assessment in inner ear computed tomography imaging with a flat panel-based system. J Comput Assist Tomogr. 39 (2), 232-239 (2015).
  11. Svoboda, K., Yasuda, R. Principles of two-photon excitation microscopy and its applications to neuroscience. Neuron. 50 (6), 823-839 (2006).
  12. Osmanski, B. -F., et al. Ultrafast Doppler imaging of blood flow dynamics in the myocardium. IEEE T Med Imaging. 31 (8), 1661-1668 (2012).
  13. Rust, M. J., Bates, M., Zhuang, X. Sub-diffraction-limit imaging by stochastic optical reconstruction microscopy (storm). Nat Methods. 3 (10), 793-796 (2006).
  14. Hess, S. T., Girirajan, T. P., Mason, M. D. Ultra-high resolution imaging by fluorescence photoactivation localization microscopy. Biophys J. 91 (11), 4258-4272 (2006).
  15. Christensen-Jeffries, K., et al. Super-resolution ultrasound imaging. Ultrasound Med Biol. 46 (4), 865-891 (2020).
  16. Couture, O., Hingot, V., Heiles, B., Muleki-Seya, P., Tanter, M. Ultrasound localization microscopy and super-resolution: A state of the art. IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control. 65 (8), 1304-1320 (2018).
  17. Demené, C., et al. Spatiotemporal clutter filtering of ultrafast ultrasound data highly increases Doppler and fUltrasound sensitivity. IEEE Trans Med Imaging. 34 (11), 2271-2285 (2015).
  18. Errico, C., et al. Ultrafast ultrasound localization microscopy for deep super-resolution vascular imaging. Nature. 527 (7579), 499-502 (2015).
  19. Banterle, N., Bui, K. H., Lemke, E. A., Beck, M. Fourier ring correlation as a resolution criterion for super-resolution microscopy. J Struct Biol. 183 (3), 363-367 (2013).
  20. Lowerison, M. R., et al. Super-resolution ultrasound reveals cerebrovascular impairment in a mouse model of Alzheimer's disease. J Neurosci. 44 (9), e1251232024(2024).
  21. Zhang, G., et al. ULM-MBCNRT: In vivo ultrafast ultrasound localization microscopy by combining multi-branch CNN and recursive transformer. IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control. , (2024).
  22. Zhang, G., et al. In vivo ultrasound localization microscopy for high-density microbubbles. Ultrasonics. 143, 107410(2024).
  23. Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Lab Anim. 48 (1), 6-14 (2014).
  24. Lenz, C., Rebel, A., Van Ackern, K., Kuschinsky, W., Waschke, K. F. Local cerebral blood flow, local cerebral glucose utilization, and flow-metabolism coupling during sevoflurane versus isoflurane anesthesia in rats. Anesthesiology. 89 (6), 1480-1488 (1998).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Süper Çözünürlüklü GörüntülemeSıçan Beyni GörüntülemeMikrobaloncuk TakibiKan Akış DinamiğiKraniyotomi ProsedürüHız HaritalamaMikrovasküler MimariNörovasküler Hastalık Modelleri
Ultrason Lokalizasyon Mikroskobu Kullanılarak Sıçan Beyin Mikrovaskülatürünün İki Boyutlu Süper Çözünürlüklü Görselleştirilmesi
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.