Deri lezyonları birçok romatizmal hastalıkta sık görülen ve önemli özelliklerdir ve patolojik inceleme ile biyopsi yapılması tanıda kritik rol oynar. Bu makale, standardize deri biyopsisi prosedürüne ayrıntılı bir genel bakış sunmakta ve örnek olarak diskoid lupus eritematozus kullanarak, romatizmal hastalıkların teşhisinde dermatopatolojinin önemli rolünü vurgulamaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Diskoid Lupus Eritematozus Tanısı için Deri Biyopsisi
Bu makalede
Özet
Özet
Diskoid lupus eritematozus (DLE), kutanöz lupus eritematozusun (CLE) en sık görülen varyantıdır. Tipik olarak kafa derisini, yüzü, kulak kepçesini ve dudakları etkiler. Lezyonlar gövde ve uzuvları içerecek şekilde bu alanların ötesine uzandığında, durum yaygın DLE (DDLE) olarak adlandırılır. Patognomonik deri lezyonları, sıkıca yapışık pullar veya kabuklar, merkezi atrofi, karakteristik skar ve pigment değişiklikleri ile iyi sınırlı diskoid eritematöz plaklar olarak ortaya çıkar ve potansiyel olarak geri dönüşümsüz skar alopesisine yol açar. Deri lezyonlarının histopatolojik ve immünopatolojik incelemesi DLE tanısında etkilidir. Histolojik olarak DLE, hiperkeratoz, foliküler tıkaç, fokal epidermal incelme, dermo-epidermal arayüzde vakuolar değişiklik, epidermal bazal membranın kalınlaşması ve sıklıkla interstisyel müsin ile birlikte yüzeyel ve derin perivasküler ve periadneksiyal lenfositik infiltrasyon ile karakterizedir. Doğrudan immünofloresan (DIF), dermo-epidermal bileşkede (DEJ) immünoglobulin ve kompleman birikintilerini ortaya çıkarabilir. Aşağıdaki makale, klinik hekimlere pratikte yardımcı olmak için kapsamlı, standartlaştırılmış ve tekrarlanabilir bir tanı ve tedavi süreci sağlamak amacıyla DLE lezyon değerlendirmesi, deri biyopsi prosedürleri, histopatolojik ve immünopatolojik analiz ve yönetim seçenekleri için protokolleri özetlemektedir.
Giriş
Deri lezyonları yaygın ve önemli belirtilerdir ve genellikle birçok romatizmal hastalıkta erken belirtiler olarak hizmet eder. Bu lezyonlar tanı ve hastalık takibinde önemli bir rol oynar ve sistemik lupus eritematozus, dermatomiyozit, skleroderma, erişkin başlangıçlı Still hastalığı ve Behçet hastalığı gibi durumlar için sınıflandırma kriterlerinde sıklıkla yer alır1. Cildin kapsamlı bir şekilde incelenmesi, bu durumların erken teşhisine, etkili tedavisine ve izlenmesine yardımcı olarak ciddi komplikasyonların önlenmesine yardımcı olabilir.
Deri biyopsisi, deri bulguları olan romatizmal hastalıklarda en sık uygulanan tanı işlemlerinden biridir. Basit ve uygun maliyetli bir tanı yöntemi olan deri biyopsisi, çıplak gözle görülemeyen morfolojik özelliklerin görüntülenmesine olanak tanır. Histopatoloji, lezyonun cilt yüzeyine dik olarak görüntülenen küçük bir kısmının ayrıntılı bir incelemesini sağlar. Bu süreç bağ dokusu hastalıklarının (KTB) teşhisinde hem klinisyenler hem de patologlar için çok önemlidir.
Formalinle sabitlenmiş, parafine gömülü teknik yaygın olarak kullanılmaktadır ve numuneleri uzun süreli arşivleme yeteneği ve immünohistokimyasal işleme potansiyeli gibi çeşitli avantajlar sunar. Hematoksilen ve eozin (HE) boyası, hem normal hem de anormal hücresel ve doku bileşenlerini vurgulama kapasitesi nedeniyle histopatoloji için en sık kullanılan boyadır. Hematoksilen bileşeni, DNA ve RNA gibi asidik yapılara bağlanarak onları maviye boyar. Deride bu, hücre çekirdeklerini, kaba endoplazmik retikulumu ve ribozomlarılekeler 2. Eozin, tipik olarak hücre içi veya hücre dışı proteinden (örneğin, sitoplazma ve çoğu bağ dokusu lifi) oluşan eozinofilik yapıları, değişen kırmızı tonlarında boyar. Sonuç olarak, numunedeki tüm ilgili doku yapıları etkili bir şekilde boyanır3.
İmmünofloresan (IF), dokularda veya vücut sıvılarında antijene bağlı antikorları tanımlamaya yardımcı olduğu için otoimmün, vaskülopatik ve kutanöz vezikonlöz hastalık şüphesi olan hastaların değerlendirilmesinde kritik bir tanı aracıdır. İki ana IF testi türü vardır: doğrudan IF (DIF) ve dolaylı IF (IIF). Daha yaygın olarak kullanılan DIF testi, hasta cildinde immünoreaktanların birikimini tespit etmek için florokrom etiketli antikorlar kullanır. İmmünoglobulin (Ig) G, IgA, IgM ve kompleman C3'ü hedefleyen bir antikor paneli kullanılmıştır4.
Diskoid lupus eritematozus (DLE), kutanöz lupus eritematozusun (CLE) en yaygın şeklidir ve tipik olarak kafa derisi, yüz, kulak kepçesi ve dudaklar gibi alanları etkiler. Lezyonlar gövde ve uzuvları içerecek şekilde bu bölgelerin ötesine uzandığında, durum yaygın DLE (DDLE) olarak adlandırılır5. Karakteristik deri lezyonları, genellikle sıkıca yapışık pullar veya kabuklar, merkezi atrofi, karakteristik skar ve pigment değişiklikleri ile birlikte iyi sınırlandırılmış diskoid eritematöz plaklar olarak ortaya çıkar ve bu da kafa derisinde meydana gelirse geri dönüşümsüz skar alopesi ile sonuçlanabilir. Birçok hasta asemptomatik kalsa da, bazıları hafif kaşıntı yaşayabilir 6,7. DLE lezyonları tipik olarak epidermal atrofi, foliküler tıkanma, bazal membran kalınlaşması ve lenfositik infiltrasyon ile işaretlenir. DIF, lupus bant testi8,9 olarak bilinen, hem lezyonel hem de lezyonel olmayan deride bulunan dermo-epidermal bileşke boyunca immünoglobulin ve tamamlayıcıların birikimini gösterir. DLE tanısı primer olarak klinik prezentasyonun yanı sıra histopatolojik ve immünopatolojik bulgulara dayanır. Histopatolojik ve immünopatolojik bilgi gerekli olduğunda, deri biyopsisi gerekli hale gelir.
Biyopsi tipi ve yeri seçimi histolojik değerlendirmeyi önemli ölçüde etkiler. Biyopsinin uygun zamanlamasını, yerini ve tekniğini anlamak, doğru patolojik sonuçlar elde etmek için çok önemlidir. Kesin bir tanı sağlamak için çeşitli faktörler göz önünde bulundurulmalıdır ve hem biyopsinin kalitesini hem de tanının doğruluğunu artırmak için biyopsi sürecindeki potansiyel zorlukların ele alınmasının önemini vurgulamaktadır. Bu makale, DLE'yi örnek olarak kullanarak standartlaştırılmış cilt biyopsisi prosedürüne ayrıntılı bir genel bakış sağlar ve doğru ve etkili tanı sağlamak için önemli hususları vurgular.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu protokol Şanghay Dermatoloji Hastanesi Etik Kurulu tarafından onaylanmış, klinik görüntülerin ve verilerin yayınlanması için katılımcılardan yazılı bilgilendirilmiş onam alınmıştır. Bir deri biyopsisi tipik olarak, cerrahi bir neşter ile fusiform bir teknik kullanılarak cilt lezyonlarının geleneksel eksizyonunu ifade eder. Örnek olarak eksizyonel biyopsiyi kullanarak, aşağıdaki protokol cilt biyopsisi yapmak için cerrahi prosedürün ayrıntılı bir tanımını sağlar (Şekil 1).
Katılımcılar, kesin tanı için biyopsi gerektiren, normal pıhtılaşma fonksiyonu gösteren ve amaçlanan biyopsi bölgesinde akut enfeksiyon veya pürülan lezyon belirtisi göstermeyen farklı cilt lezyonları ile başvuruyorlarsa dahil edilmeye uygundu. Dışlama kriterleri, keloid veya hipertrofik skar oluşumu için bilinen bir eğilim, immünosupresanların uzun süreli kullanımı veya yara iyileşmesini bozabilecek diğer durumları içeriyordu. Hamile veya emziren kadınlar potansiyel riskler nedeniyle çalışma dışı bırakıldı. Akıl hastalığı veya diğer faktörler nedeniyle işbirliği yapamayan hastalar da çalışma dışı bırakıldı. Tüm katılımcılar yazılı bilgilendirilmiş onam verdiler ve gönüllü olarak cilt biyopsisi prosedüründen geçmeyi kabul ettiler. Reaktiflerin ve kullanılan ekipmanın ayrıntıları Malzeme Tablosunda listelenmiştir.
1. Hasta hazırlığı
- Adı, tıbbi kayıt numarası ve biyopsi yeri dahil olmak üzere hastanın kimliğini doğrulayın.
- Kanama eğilimleri, hipertansiyon, diyabet, kalp hastalığı ve antikoagülanların veya antiplatelet ilaçların mevcut kullanımı dahil olmak üzere hastanın tıbbi geçmişini kapsamlı bir şekilde gözden geçirin.
- Rutin kan testleri, pıhtılaşma fonksiyonu değerlendirmeleri ve bulaşıcı hastalık göstergeleri için tarama dahil olmak üzere ameliyat öncesi değerlendirmeler yapın10,11.
- Deri biyopsisi ile ilişkili amacı, yöntemi, olası komplikasyonları ve önlemleri hem hastaya hem de ailesine net bir şekilde açıklayın.
- Hastanın bilgilendirilmiş onam formunu imzaladığından emin olun.
2. Ekipman ve malzeme hazırlama
- Neşter, forseps, makas ve diğer gerekli aletler dahil olmak üzere gerekli tüm aletleri içeren steril bir biyopsi kiti hazırlayın. Tüm aletlerin uygun şekilde sterilize edildiğinden emin olun.
- Antiseptik solüsyon hazırlayın (ör., alkol, iyodofor veya klorheksidin), lokal anestezik (ör., lidokain), steril enjeksiyon şırıngası, steril iğneler, steril dikişler, steril eldivenler, steril gazlı bez ve pansuman malzemeleri. Verimliliği en üst düzeye çıkarmak için gerekli tüm aletleri ve ilaçları kolayca erişilebilecek bir yere yerleştirin.
3. Biyopsi yerinin hazırlanması
- Özellikle birden fazla lezyon mevcut olduğunda biyopsi bölgesini dikkatlice seçin. Tedavi edilmemiş, travmatize edilmemiş, belirgin karakteristik özellikler gösteren tam gelişmiş bir lezyon seçin. Biyopsinin epidermis, dermis (özellikle derin dermis) ve kontrol görevi görecek bitişik normal dokunun küçük bir kısmı dahil olmak üzere lezyonun tam kalınlığını yakalayacak kadar derin olduğundan emin olun.
- Hassasiyeti sağlamak için prosedürden önce planlanan eksizyon yolunu işaretleyin. Gerekirse ameliyat bölgesinin etrafındaki kılları tıraş edin.
- Tıbbi karar verme ve tedavi planlamasında ileride başvurmak üzere hem lezyonların hem de biyopsi bölgesinin fotoğraflarını çekin.
- Biyopsi bölgesinin iyi bir şekilde açığa çıktığından ve zemine paralel olarak hizalandığından emin olarak hastayı uygun şekilde konumlandırın.
4. Biyopsi işlemi
- Biyopsi alanını dezenfekte edin
- Biyopsi alanını uygun bir antiseptik solüsyonla iyice dezenfekte edin. En az 15 cm çapında bir örtün. Cerrahi kesi bölgesinden başlayarak ve dışa doğru hareket ederek dairesel hareketlerle temizleyin. Antiseptiğin tamamen kurumasını bekleyin.
NOT: Bilinen alerjisi olan hastalar için iyot içermeyen bir antiseptik kullanın.
- Biyopsi alanını uygun bir antiseptik solüsyonla iyice dezenfekte edin. En az 15 cm çapında bir örtün. Cerrahi kesi bölgesinden başlayarak ve dışa doğru hareket ederek dairesel hareketlerle temizleyin. Antiseptiğin tamamen kurumasını bekleyin.
- Steril bir cerrahi örtü uygulayın
- Dezenfeksiyondan sonra, cerrahi alanı izole etmek için steril bir cerrahi örtü uygulayın.
- Lokal anestezi uygulayın
- Lokal anestezi için %1-2'lik bir lidokain solüsyonu kullanın. Biyopsi bölgesine ince bir iğne ile deri altına enjekte edin (kurumsal olarak onaylanmış protokolleri izleyerek). Tam etki için 2-3 dakika bekleyin. Ağrı olmadığını doğrulamak için bölgeyi nazikçe palpe edin.
NOT: Çocuklar veya endişeli hastalar için, enjekte edilebilir anesteziklere ek olarak veya onun yerine topikal bir anestezik düşünün.
- Lokal anestezi için %1-2'lik bir lidokain solüsyonu kullanın. Biyopsi bölgesine ince bir iğne ile deri altına enjekte edin (kurumsal olarak onaylanmış protokolleri izleyerek). Tam etki için 2-3 dakika bekleyin. Ağrı olmadığını doğrulamak için bölgeyi nazikçe palpe edin.
- İnsizyon ve doku eksizyonunu gerçekleştirin
- Derin dermise veya deri altı yağına uzanan dikey, mekik şeklinde bir kesi yapmak için steril bir neşter kullanın. Dokuyu nazikçe stabilize etmek veya kaldırmak için biyopsi forsepsleri kullanın.
- Kapsamlı histopatolojik değerlendirme için çevredeki normal dokunun küçük bir kenarı da dahil olmak üzere lezyonun temsili bir kısmını eksize edin. 3-5 mm'lik bir doku boyutu hedefleyin.
- Steril gazlı bez ile 2-3 dakika veya kanama tamamen durana kadar sabit basınç uygulayın.
- Gerektiğinde daha büyük damarlar için emilebilir dikişler veya elektrokoter kullanın12.
NOT: Yüksek riskli hastalar için hemostatik aletleri önceden hazırlayın.
- İyileşmeyi desteklemek ve enfeksiyon riskini azaltmak için eksizyon bölgesini dikin. Yüz veya boyun yaraları için 6-0 monofilament emilmeyen dikişler kullanın. Gövde veya uzuv yaraları için 5-0 emilmeyen dikişler kullanın. İğneyi dikey olarak yerleştirin, giriş noktası ile yara kenarı arasında yara derinliğine eşit bir mesafe bırakın.
- Biyopsi bölgesinin üzerine steril bir pansuman yerleştirin ve yapışkan bantla sabitleyin.
- Hastaya yarayı 24-48 saat kuru tutmasını tavsiye edin. Pansuman değişiklikleri ve aktivite kısıtlamaları için yönergeler de dahil olmak üzere ayrıntılı işlem sonrası bakım talimatları sağlayın.
NOT: Yara iyileşmesini izlemek için yüksek riskli hastalar için takip randevuları planlayın.
5. Numune işleme
- Örneği uygun taşıma ortamına yerleştirmeden önce eksize edilen dokuyu steril bir neşter veya makas kullanarak iki parçaya bölün. Her kabı hastanın kimlik bilgileri ve biyopsi yeri ile net bir şekilde etiketleyin. Patoloji istem formunu eksiksiz doldurun.
- Dokunun yarısını bir fiksatif (örneğin,% 10 formalin çözeltisi) içeren bir kaba koyun ve hematoksilen ve eozin (HE) boyaması için patoloji laboratuvarına gönderin.
- Diğer yarısını, hemen işlem için buz gibi fizyolojik tuzlu suya batırılmış gazlı bez üzerinde taşıyın veya gecikmeli işlem için Michel'in ortamına yerleştirin. Numuneyi mümkün olan en kısa sürede doğrudan immünofloresan (DIF) analizi13 için hazırlayın.
NOT: Bu seçenekler arasında hızlı dondurma en sık kullanılan yöntemdir. Deri biyopsi örneklerini tuzlu suya batırılmış gazlı bezde 24 saatten fazla veya 4-8 ° C'de Michel ortamında bir aydan fazla saklamayın14.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Histolojik olarak DLE, hiperkeratoz, foliküler tıkaç, epidermal sırtların düzleşmesi, fokal epidermal incelme, dermo-epidermal arayüzün vakuoler değişikliği, epidermal bazal membranın kalınlaşması ve sıklıkla interstisyel müsin 5,15 ile birlikte yüzeysel ve derin perivasküler ve periadneksiyal lenfositik infiltrat ile karakterizedir (Şekil 2
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Deri biyopsisi, çeşitli durumların erken tespiti ve tedavisi için önemli tanısal kanıtlar sağlayan histolojik özelliklerin incelenmesini sağladığından, tanıları doğrulamak ve farklı durumları ayırt etmek için gereklidir. Doğru bir teşhis, doktorların etkili tedavi planları formüle etmelerini sağlar ve böylece yanlış teşhisten kaynaklanabilecek uygunsuz tedavileri önler. Önemi nedeniyle, biyopsi protokolünde dikkat edilmesi gereken birçok kritik adım, potansiyel değişiklik ve sınırlama va...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
İfşa edilecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Teşekkürler
Tongji Üniversitesi Tıp Fakültesi, Şanghay Cilt Hastalıkları Hastanesi Romatoloji Bölümü'nden Lili Ma, Ke Xue, Jiaping Qi ve Ruilian Lin'e video prodüksiyon sürecindeki yardımları ve katkıları için içtenlikle teşekkür ederiz.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Enjeksiyon şırıngası 1 mL | Şangay Mishawa Medikal Sanayi A.Ş., Ltd | www.misawa-medical.co.jp/products.html | 1 mL |
| Nötr formalin fiksatif %10 | Pekin Solaibao Teknoloji Co, Ltd | G2163 Serisi | 10% |
| Fizyolojik salin solüsyonu 10 mL | Çin Otsuka İlaç Co, Ltd | www.chinaotsuka.com.cn/class/1 | 10 milyon L |
| Primakain adrenalin (Primakain) | Fransız Bi Lan Şirketi | CIP: 3400956469710 | 1.7 mL: 17 g Epinefrin Tartarat (epinefrin olarak) ile 68 mg Artikain Hidroklorür |
| Steril eldivenler | Yingke Tıbbi Teknoloji Co, Ltd | www.made-in-china.com/showroom/b7976b8c634a372c/ | |
| Cerrahi Bıçak | Şangay Pudong Jinhuan Tıbbi Malzemeler Co, Ltd | www.sh-jinhuan.com | |
| Cerrahi Örtüler ve Gazlı Bezler | Genecome Tıbbi Teknoloji Co, Ltd | www.made-in-china.com/manufacturers/surgical-drapes.html | |
| Cerrahi Aletler (Neşter sapı, Forseps, Makas) | Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Cerrahi Alet Fabrikası | www.smicc.com/en/index.aspx | |
| Cerrahi İğneli Dikişler | Şangay Pudong Jinhuan Tıbbi Malzemeler Co, Ltd | www.sh-jinhuan.com | 1/2radyan, 5&kez; 12, 19mm, 4-0 Sütür, |
| Topikal iyodofor %1 | Qingdao Hainuo Biyoloji Mühendisliği Co, Ltd | www.shopshipshake.com/product-detail/haishi-hainuo-iodophor-disinfection-solution-656601234155 | 1% |
Kaynaklar
- Ashrafzadeh, S., Fedeles, F. What the rheumatologist needs to know about skin biopsy. Best Pract Res Clin Rheumatol. 37 (1), 101838(2023).
- Chan, J. K. C. The wonderful colors of the hematoxylin-eosin stain in diagnostic surgical pathology. Int J Surg Pathol. 22 (1), 12-32 (2014).
- Kleczek, P., et al. A novel method for tissue segmentation in high-resolution H&E-stained histopathological whole-slide images. Comput Med Imaging Graph. 79, 101686(2020).
- Reimann, J. D. R., et al. Assessment of clinical and laboratory use of the cutaneous direct immunofluorescence assay. JAMA Dermatol. 157 (11), 1343-1348 (2021).
- Worm, M., et al. S2k guideline: Diagnosis and management of cutaneous lupus erythematosus-Part 1: Classification, diagnosis, prevention, activity scores. J Dtsch Dermatol Ges. 19 (8), 1236-1247 (2021).
- Walling, H. W., Sontheimer, R. D. Cutaneous lupus erythematosus: Issues in diagnosis and treatment. Am J Clin Dermatol. 10 (6), 365-381 (2009).
- Eastham, A. B., Vleugels, R. A. Cutaneous lupus erythematosus. JAMA Dermatol. 150 (3), 344(2014).
- Ali, T., et al. Prevalence and clinical assessment of skin lesions in systemic lupus erythematosus. Cureus. 16 (12), e76404(2024).
- Monroe, E. W. Lupus band test. Arch Dermatol. 113 (6), 830-834 (1977).
- Ah-Weng, A., et al. Preoperative monitoring of warfarin in cutaneous surgery. Br J Dermatol. 149 (2), 386-389 (2003).
- Grayson, W. The HIV-positive skin biopsy. J Clin Pathol. 61 (7), 802-817 (2008).
- Dicker, T. Skin procedures in general practice. Aust J Gen Pract. 53 (8), 529-532 (2024).
- Greenwood, J. D., et al. Skin biopsy techniques. Prim Care. 49 (1), 1-22 (2022).
- Chhabra, S., et al. Immunofluorescence in dermatology. Indian J Dermatol Venereol Leprol. 78 (6), 677-691 (2012).
- Kuhn, A., et al. Lupus erythematosus revisited. Semin Immunopathol. 38 (1), 97-112 (2016).
- Weigand, D. A. Lupus band test: Anatomic regional variations in discoid lupus erythematosus. J Am Acad Dermatol. 14 (3), 426-428 (1986).
- al-Suwaid, A. R., et al. Cutaneous lupus erythematosus: Comparison of direct immunofluorescence findings with histopathology. Int J Dermatol. 34 (7), 480-482 (1995).
- Wark, K. J., et al. How to perform a skin biopsy. Med J Aust. 212 (4), 156-158.e1 (2020).
- Lallas, A., et al. Dermoscopy of discoid lupus erythematosus. Br J Dermatol. 168 (2), 284-288 (2013).
- Yu, H., et al. Clinical and immunological biomarkers for systemic lupus erythematosus. Biomolecules. 11 (7), 928(2021).
- Fasano, S., et al. Precision medicine in systemic lupus erythematosus. Nat Rev Rheumatol. 19 (6), 331-342 (2023).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
