Yöntem makalesi

Davranışsal gözlem için zebra balığı larvalarına uçucu anesteziklerin uygulanması

DOI:

10.3791/67896

⸱

6 Haziran 2025

 ,  , 
1Perelman School of Medicine, Department of Anesthesiology and Critical Care, University of Pennsylvania

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, davranışsal deneyler için larva zebra balıklarına uçucu anestezikler uygulamak için gaz geçirmez bir ortam oluşturmak için erişilebilir bir yöntem sunar.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, davranışsal deneyler sırasında larva zebra balıklarına izofluran ve sevofluran gibi uçucu anesteziklerin uygulanması için benzersiz bir yöntemi açıklamaktadır. Zebra balığı, omurgalı bir model organizma olarak karmaşık davranışlar, genetik izlenebilirlik, şeffaf embriyolar ve hızlı gelişim dahil olmak üzere sayısız avantaj sunarken, uçucu anesteziklerin incelenmesinde kullanımları sınırlı kalmıştır. Uçucu anesteziklerin uygulanması genellikle geniş çapta erişilebilir olmayabilen karmaşık veya hantal aparatlar gerektirir ve bu da sulu model organizmalarda uçucu anesteziklerin farmakolojik çalışmasına engel oluşturur. Bu yöntem, 96 oyuklu cam plakalar üzerinde gaz geçirmez bir sızdırmazlık oluşturmak için yapışkan silikon levhalar kullanan basit bir teknik sunar. Doğrulama, 90 dakikalık bir süre boyunca kapalı ve açık kuyular arasında önemli bir fark göstermeyen spontan hareketin değerlendirilmesi yoluyla gerçekleştirildi. Ek olarak, anestezik konsantrasyon, HPLC ile ölçüldüğü gibi zamanla sabit kalmıştır. Temsili sonuçlar, sevofluran için medyan etkili konsantrasyon (EC50) değerlerinin deneysel olarak belirlenmesini içerir. Bu çalışma, diğer uçucu ajanları ve deneysel uç noktaları incelemek için kolayca uyarlanabilen uçucu anesteziklerin kullanıldığı farmakolojik deneyler için basit ve erişilebilir bir yaklaşım sunmaktadır.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Sucul olmayan hayvan modelleri (solucanlar, sinekler, kemirgenler, tavşanlar, primatlar, vb.) tarihsel olarak anestezik farmakolojiyi incelemek için en yaygın olarak kullanılan modeller olmuştur. Bu türlerin her birinde, uçucu anestezikler (gazın solunması yoluyla uygulanır), intravenöz anesteziklerin uygulanmasından (intravenöz veya intraperitoneal yollarla uygulanır) çok daha az zordur1. İntravenöz ilaçların basitçe uygulanmasının teknik zorluğuna ek olarak, uçucu ajanlarla stabil bir anestezi durumu elde etmek intravenöz ajanlara göre çok daha kolaydır2.

İntravenöz anesteziklerin larva sucul türlere uygulanması, çevrelerindeki sulu ortamdan 3,4 difüzyon yoluyla sağlanabilir ve bu nedenle susuz türler için uçucu anesteziklerin uygulanmasına daha çok benzer. Uzun yıllar boyunca, kurbağa yavruları (Xenopus laevis), ilaç uygulama kolaylığı ve anesteziklerin yapay havuz suyuna basit banyo ilavesiyle elde edilen kararlı durum farmakokinetiği nedeniyle anestezikleri incelemek için tercih edilen modeldi 5,6. Bununla birlikte, genellikle amaca yönelik olarak üretilen ve kullanımı zahmetli olabilen gaz geçirmez aparatların gerekliliği nedeniyle bu modelde uçucu anesteziklerin incelenmesine ilişkin nispeten az sayıda örnek vardır 7,8.

Son yıllarda, zebra balığı, iyi tanımlanmış karmaşık davranışları ve bu davranışları gözlemlemek için ticari birimlerin mevcudiyeti gibi diğer avantajlara ek olarak, aynı ilaç uygulama kolaylığı nedeniyle intravenöz anesteziklerin incelenmesi için tercih edilen bir model haline gelmiştir9. Son zamanlarda yapılan birçok çalışma, zebra balığı larvalarınındavranışını ölçmek için 96 oyuklu ve 24 oyuklu plaka formatlarını kullanarak, anestezikler de dahil olmak üzere nöroaktif bileşikleri taramak için ticari olarak temin edilebilen bu tür gözlem birimlerini kullanmıştır 4,10,11,12,13,14,15 . Larva evreleri, birçok davranışsal yanıtı değerlendirme yetenekleri, küçük boyutları, yüksek verim uyumlulukları ve iyi karakterize edilmiş nöral devreleri nedeniyle farmakoloji çalışmaları için özellikle uygundur 9,16,17. Bununla birlikte, zebra balığı modelindeki bu anestezik çalışmalarındaki önemli bir sınırlama, uçucu anesteziklerin uygulanmasındaki göreceli zorluktur. Bu sınırlılık, uçucu ve intravenöz ajanlar arasında yetersiz karşılaştırma örneklerine yol açmıştır 4,15,18. Her iki anestezik sınıfını tek bir hayvan modelinde kolayca inceleyebilmek ve karşılaştırabilmek, tüm sınıflarda anestezik farmakoloji çalışmasını kolaylaştırmak için önemli bir araç ekler.

Geleneksel olarak, suda yaşayan bir türde intravenöz anesteziklerin incelenmesi, deney süresince anestezik kaybını önlemek için kullanımı zor olabilen veya yeterince gaz geçirmez olmayabilen özel, genellikle özel ekipman gerektirmiştir. Burada açıklanan prosedür, ticari bir gözlem ünitesi kullanarak larva zebra balığı davranışının gözlemlenmesi için uygun olan bir cam haznede gaz geçirmez bir conta üretmenin kolay erişilebilir bir alternatif yolunu sunar (bkz. Malzeme Tablosu).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm zebra balığı deneyleri, Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanan hayvan kullanım protokollerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Yetişkin zebra balıkları, Üniversite Laboratuvarı Hayvan Kaynakları'nın (ULAR) gözetimi altında Pennsylvania Üniversitesi'nin su tesisinde tutuldu. Tübingen uzun yüzgeçli yabani tip zebra balığı, tüm deneyler için kurum içinde yetiştirildi ve döllenmeden 5 gün sonrasına (dpf) ulaşana kadar 13/11 saatlik bir aydınlık/karanlık döngüsü ile standart yetiştirme koşulları altında tutuldu. Deneyler, yeterli biyolojik çeşitliliği sağlamak için farklı çiftleşme çiftlerinden türetilen kavramalarla biyolojik kopyalar kullanılarak gerçekleştirildi. Bu çalışmada kullanılan reaktiflerin ve ekipmanın ayrıntıları Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

1. Yapışkan silikon levhaların imalatı

NOT: Bu malzemenin eşdeğerleri (silikon levha artı yapıştırıcı) ticari olarak tedarik edilebilir, ancak genellikle daha fazla masraf ve daha az kullanılabilirlik ile.

  1. 0,5 mm'lik silikon levhayı temiz ve düz bir yüzeye yerleştirin.
  2. Çarşaflarda herhangi bir kırışıklık olup olmadığını kontrol edin ve mümkün olduğunda bunlardan kaçının.
    NOT: Kırışıklı silikon levhalar banda yeterince yapışmayabilir ve kuyuların yetersiz sızdırmazlığına ve/veya zebra balığının yetersiz görselleşmesine neden olabilir.
  3. Yağ veya kalıntıları temizlemek ve kurumasını sağlamak için çarşafları %70 alkolle temizleyin.
  4. Boya fırçası gibi bir aplikatör kullanarak, silikon tabakaya ince, eşit bir kat yapışkan astar uygulayın. Aşırı uygulamayı önlemek için, yapışkan motor hızlı bir şekilde kuruduğundan (1-5 sn içinde ayarlanır) daha küçük bölümler halinde çalışın.
    NOT: Bu yapışma motoru olmadan, bant silikon levhaya yeterince yapışmayacaktır.
  5. Yapışkan promotor uygulandıktan sonra, çift taraflı bandı, kağıt desteği yukarı bakacak şekilde silikon levha ile hizalayın.
  6. Yüzeyi düzleştirmek ve hava kabarcıklarını gidermek için bir rulo kullanarak bandı silikona kademeli olarak uygulayın (ilk uygulamadan sonra, silikon tarafı yukarı bakacak şekilde çalışmak hava kabarcıklarını görselleştirmeye ve çıkarmaya yardımcı olacaktır).
  7. Yapıştırıcı promotörün düz bir yüzeyde 24 saat boyunca tamamen kürlenmesine izin verin.
  8. Yapışkan silikonu en az 10 mm genişliğinde şeritler halinde kesin (7,5 mm kuyu çapı artı her iki tarafta üst üste binme).
    NOT: Kuyu plakasının diğer her sırasını kullanırken, şeritlerdeki daha geniş varyans, bitişik sıralardaki kuyuları olumsuz etkilemeyecektir, bu sadece uygulamayı kolaylaştırmakla kalmaz, aynı zamanda kuyunun tüm çevresi etrafında bir sızdırmazlık elde etmek için de gerekli olabilir.
    1. Şeritlerin, kuyu plakasının en azından bir sırasının genişliğini kaplayacak kadar uzun olduğundan emin olun.
      NOT: 24 oyuklu veya 48 oyuklu plaka gibi 96 oyuklu olmayan bir kuyucuk plakası kullanılıyorsa, şerit boyutları, plakanın belirli boyutlarına uyacak şekilde ayarlanabilir veya kesilebilir, bu da plaka boyutundan bağımsız olarak uygun kapsama alanı sağlar.

2. Çözeltilerin hazırlanması

NOT: Uçucu anesteziklerin tüm stok ve tahlil çözeltileri, uçucu bileşik konsantrasyonu kaybını önlemek için deneyden hemen önce yapılmıştır.

  1. Her çözelti için (stok veya çalışma çözeltisi), bir HPLC veya sintilasyon şişesine bir hacimde uçucu olmayan çözücü (E3 embriyo suyu, DMSO, vb.) ekleyin, böylece uçucu anestezikin son seyreltilmesi ile birleştirildiğinde, toplam hacim şişeyi minimum üst boşluk bırakarak yeterince dolduracaktır (bkz. Şekil 1A).
  2. Hamilton gaz geçirmez bir şırınga ile uçucu anestezik ekleyin ve şişeyi hızlı bir şekilde kapatın.
    NOT: Septum kapaklı şişelerdeki stok çözeltileri, çözeltinin gaz geçirmez şırıngalarla transferi yoluyla daha fazla seyreltmeyi kolaylaştırmak için kullanılabilir.
  3. Ardından, şişeleri (girdap, sonikasyon) gerektiği gibi karıştırın ve zebra balığı tabakları hazırlarken geçici olarak saklayın.

3. Davranışsal deneyin kurulması

NOT: Protokolün bu adımı biraz pratik gerektirebilir. Tekniğe alışana kadar balık veya değerli malzeme içeren solüsyonlar olmadan çalışılması tavsiye edilir.

  1. Bir larva zebra balığını (5 dpf) cam 96 oyuklu plakanın diğer her sırasına aktarın.
    NOT: Diğer her sıranın boş bırakılması, kuyular adım 3.4'te kapatıldığından, bitişik kuyuların yayılmadan kirlenme potansiyelinin azalmasına izin verir.
  2. E3 çözeltisini her kuyucuktan dikkatlice çıkarın. Bu, her seferinde bir sıra veya hızlı bir şekilde çalışabiliyorsa tüm plaka üzerinde yapılabilir.
    NOT: Potansiyel stresi azaltmak için larvaların çözelti dışında kaldığı süre en aza indirilmiştir. Stresi en aza indirmek için ilaç içeren çözeltinin eklenmesinden önce çözeltinin sadece kısmen çıkarılması da dahil olmak üzere farklı deneysel ihtiyaçlara dayalı olarak alternatif prosedürler kullanılabilir. Protokol, herhangi bir potansiyel stresi telafi etmek için hayvanlara verilen dengeleme süresi, çözelti karıştırma verimliliği ve ilaç içeren bir çözeltinin konsantrasyonlarının doğruluğu dahil olmak üzere deneyin ihtiyaçlarına uyacak şekilde uyarlanmalıdır, eğer E3'ün tamamı çalışma çözeltisinin eklenmesinden önce çıkarılır.
  3. Daha sonra, sıradaki her bir kuyucuğu deneysel çözelti ile doldurmak için bir transfer pipeti kullanın. Baloncuk sokmamaya dikkat edin. Her kuyuyu aşırı doldurun (Şekil 1B).
  4. Adım 1'de yapılan yapışkan silikon şeritleri kullanarak şeridi hızlı bir şekilde aşağı doğru bastırın (Şekil 1C). Bu, kabarcık oluşumunu önlemeye yardımcı olur ve balıkların bitişik kuyulara taşmasını önler.
  5. Her bir kuyunun sızdırmaz olduğundan emin olmak için plakanın üstüne sıkıca bastırın.
  6. Çözelti değiştirilene ve kuyu plakasının diğer her sırası için kuyucuklar kapatılana kadar 2-5 arasındaki adımları tekrarlayın (Şekil 1D).
  7. Plakayı yavaşça ters çevirin ve hava kabarcıkları olup olmadığını kontrol edin.
    NOT: Hava kabarcıklarının varlığı, zebra balığı hareketinin görselleştirilmesini engelleyecektir.
  8. Plakayı davranış gözlem ünitesine yerleştirin (silikon yapışkan tarafı aşağı bakacak şekilde) ve davranış deneyini gerçekleştirin (ayrıntılar için Sonuçlar bölümüne bakın).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Geleneksel açık kuyu gözlemi ile karşılaştırma
Yapıştırıcı sızdırmazlığın kendiliğinden hareket üzerinde herhangi bir etkisi olup olmadığını değerlendirmek için, açık ve kapalı kuyulardaki kontroller arasında bir karşılaştırma yapılmıştır. Şekil 2A'da görüldüğü gibi, bu makalede açıklanan deneylerde kullanılan standart ~ 30 dakikalık süre boyunca bu gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir hareket farkı gözlenmemiştir. Diğer deneysel paradigmaların daha uzun dene...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu makale, vahşi tip balıklarda uçucu anestezik potansiyelini ölçmek için kullanılan larva zebra balığına sevofluran gibi uçucu anesteziklerin kolayca uygulanması için bir yöntemi açıklamaktadır. Bu teknik kavramsal olarak basit olsa da, uçucu maddelerin kaybını en aza indirmek için kısa bir zaman diliminde yeterince sızdırmaz, kabarcıksız bir kuyu sırası sağlamak pratik gerektirebilir. Bu yöntem uçucu bileşikler için tasarlandığından, sadece silikon yapıştırıcının kuyu plakasına dikkatl...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların ifşa edecek herhangi bir çatışması yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma Anestezi Eğitim ve Araştırma Vakfı (FAER) tarafından finanse edilmiştir. Şekil 1 , BioRender.com'da oluşturulmuştur.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
96 kuyucuklu cam mikroplakalarZinsser Kuzey Amerika3600500"Bu cam mikroplakalar özel yüksek saflıkta, sıcaklığa dayanıklı borosilikat camdan yapılmıştır ve yüzeyleri asitle parlatılmıştır. Plakalar, standart SBS mikroplaka ayak izinde (85 x 127 mm) dikdörtgen şeklindedir. Bu cam reaktör mikroplakaları, öncelikle kimya uygulamaları için tasarlanmıştır ve 530°'ye kadar sıcaklıklara dayanıklıdır; C. Otoklavlanabilirler. Homojen bir cam levhadan işleniyorlar ve kuyudan kuyuya tutarlı sıcaklıklar sağlamak için tek tip geometri ve şekle sahipler (tipik olarak 0.2 derece C dahilinde)."
2.0 mL Şeffaf, Büyük Açıklık, 9 mm Dişli Şişeler Chemglass Yaşam BilimleriCV-1150-1232"%40 daha büyük bir açıklığa sahip olan bu şişeler, robotik kollu otomatik numune alma cihazlarında çalışmak üzere özel olarak tasarlanmıştır. Ayrıca, sınırlı hacimli bir ek parçayı şişenin boynunda tam olarak ortalayan benzersiz Step Vial tasarımını da içerirler. "
3M Çift Taraflı Bant 9490LEAbbVie A.Ş.24WG90"3M Laminasyon Yapıştırıcısı 300LSE ile 3M Çift Taraflı Bant 9490LE, polipropilen ve toz boyalar gibi birçok düşük yüzey enerjili plastik dahil olmak üzere çoğu yüzeye yüksek yapışma mukavemeti sağlar. Akrilik yapıştırıcı ayrıca, tipik olarak makine parçalarında kullanılan yağ ile hafifçe kirlenmiş yüzeylere mükemmel yapışma sağlar. 3M çift taraflı bant 9490LE, çeşitli köpük ve kumaş malzemelerine (6 inç x 5 yd) mükemmel yapışma gücü sağlamak için bir tarafta 3M Laminasyon Yapıştırıcısı 300MP'nin ek özelliğini sunar.
DanioVision Gözlem OdasıNoldusDVOC-0041 Serisi"DanioVision, zebra balığı larvalarının çok kuyulu plakalarda yüksek verimli testleri için tasarlanmış eksiksiz bir sistemdir. Gözlem Odası ve ünlü EthoVision XT video izleme yazılımını içerir."
DanioVision Sıcaklık Kontrol ÜnitesiNoldusDVTCU-0011"DanioVision Sıcaklık Kontrol Ünitesi bir akış sistemidir: su, kuyu plakasının altından seçtiğiniz sıcaklıkta eşit olarak akar. Sıcaklık kuyu plakasının tamamında aynı."
Ethovision XT16 yazılımıNoldusNSE-EV-TABANI"EthoVision XT, Noldus'un ticari markası olan, herhangi bir hayvanın davranışını, hareketini ve aktivitesini izleyen ve analiz eden en yaygın uygulanan video izleme yazılımıdır"
İzofluranPiramal Yoğun BakımNDC # 66794-017-10İnhalasyon sıvısı, 100 mL izofluran içeren, yanıcı olmayan, patlayıcı olmayan bir inhalasyon anestezik. Kontrollü oda sıcaklığında 20º 25º'ye; C
Scotch-Weld Anında Yapıştırıcı Primer AC79 Şeffaf3 milyon"62-3916-0860-1 (Ürün Kimliği) C2103N (Lot)""3M Scotch-Weld Instant Adhesive Primer AC79, EPDM, silikon ve diğer kauçuklar gibi yapıştırılması zor düşük yüzey enerjili elastomerlerde kullanılmak üzere tasarlanmıştır. Yüzey hazırlığı ve uygulaması basittir ve yapışkan astar, işlerin hızlı ilerlemesini sağlamak için hızlı kurur."
Silikon Levhalar 0,5 mm kalınlığındaÇeşitli tedarikçilerYOKYarı saydam silikon levhalar birden fazla tedarikçiden satın alındı
Speedball Pop-in Sert Kauçuk Brayer Plastik Çerçeve, 4 İnç"Speedball793728"Speedball Pop-In Hard Brayer, kolay temizlik için dışarı çıkan bir silindire sahiptir. Plastik, tek parça çerçeve ile çıkarılabilir 4 inç genişliğinde rulo. Saf doğal sakız kauçuktan yapılmıştır ve zemin kaplaması vardır. Sert kauçuk brayer, sağlam bir plastik çerçeve ile 4 inç genişliğindedir ve tutkal uygulaması için mükemmeldir"
SureSTART 9 mm Vidalı Kapaklar, Seviye 2 Yüksek Verimli Uygulamalar, Tip: AVCS Vidalı Kapak Siyah PP, Beyaz Silikon/KIRMIZI PTFE Septa 1,0 mmTermo Bilimsel6ASC9ST1B"Thermo Scientific SureSTART 9 mm Vidalı Kapakları 9 mm açıklığa sahip vidalı şişelerle kullanın. Performans Seviye 2 kapakları, rutin GC-MS ve LC-MS analizleri için düşük kanama, sağlamlık ve sonuçların tekrarlanabilirliğini sağlamak üzere üretilmiş ve test edilmiştir. Otomatik numune alma cihazı iğne sorunlarını azaltmak için tasarlanmış çeşitli sertlik değerlerine sahip çok amaçlı silikon/PTFE septalı polipropilen kapaklar arasından seçim yapın. AVCS kapaklarımız, bir şişeyi kapatırken optimum sızdırmazlık sıkıştırması sağlamak için Gelişmiş Flakon Kapatma Sistemi teknolojisini içerir."
Ultan SevofluranAbbVie A.Ş.NDC # 0074-4456-04İnhalasyon için Uçucu Sıvı, 250 mL sevofluran içeren amber renkli şişelerde paketlenmiştir. Kontrollü oda sıcaklığında 15º 30º'ye; C
Wheaton Sıvı Scintillation Şişeleri, Kapaklar Şişelere Takılı, Cam, Metal Folyo / Hamur, 24-400, 20 mL DWK Yaşam Bilimleri986561Tip I borosilikat cam boru, PET veya HDPE'den dönüştürülmüş 20 mL sintilasyon şişeleri. Kapak takılı olarak mevcuttur.

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wasilczuk, A. Z., Maier, K. L., Kelz, M. B. The mouse as a model organism for assessing anesthetic sensitivity. Methods Enzymol. 602, 211-228 (2018).
  2. Shortal, B. P., et al. Development and validation of brain target-controlled infusion of propofol in mice. PLoS One. 13, 1-14 (2018).
  3. Halbach, K., et al. Yolk sac of zebrafish embryos as backpack for chemicals. Environ Sci Technol. 54 (16), 10159-10169 (2020).
  4. Bedell, V. M., Meng, Q. C., Pack, M. A., Eckenhoff, R. G. A vertebrate model to reveal neural substrates underlying the transitions between conscious and unconscious states. Sci Rep. 10, 1-10 (2020).
  5. Stetter, M. D., et al. Isoflurane anesthesia in amphibians: Comparison of five application methods. In American Association of Zoo Veterinarians. , Puerto Vallarta, Mexico. 255-257 (1996).
  6. Woll, K. A., Eckenhoff, R. G. High-throughput screening to identify anesthetic ligands using Xenopus laevis tadpoles. Methods Enzymol. 602, 177-187 (2018).
  7. Meyer, H. Zur Theorie der Alkoholnarkose. Arch Exp Pathol Pharmakol. 46, 338-346 (1901).
  8. Downes, H., Courogen, P. M. Contrasting effects of anesthetics in tadpole bioassays. J Pharmacol Exp Ther. 278, 284-296 (1996).
  9. Kalueff, A. V., et al. Towards a comprehensive catalog of zebrafish behavior 1.0 and beyond. Zebrafish. 10, 70-86 (2013).
  10. Abramova, V., et al. Effects of pregnanolone glutamate and its metabolites on GABAA and NMDA receptors and zebrafish behavior. ACS Chem Neurosci. 14, 1870-1883 (2023).
  11. Germann, A. L., et al. Comparison of behavioral effects of GABAergic low-and high-efficacy neuroactive steroids in the zebrafish larvae assay. ACS Chem Neurosci. 15, 909-915 (2024).
  12. Hoyt, H., et al. Photomotor responses in zebrafish and electrophysiology reveal varying interactions of anesthetics targeting distinct sites on gamma-aminobutyric acid type A receptors. Anesthesiology. 137, 568(2022).
  13. Li, F., et al. Characterization of the locomotor activities of zebrafish larvae under the influence of various neuroactive drugs. Annals Trans Med. 6, 173(2018).
  14. McCarroll, M. N., Gendelev, L., Kinser, R. Zebrafish behavioural profiling identifies GABA and serotonin receptor ligands related to sedation and paradoxical excitation. Nat Commun. 10, 4078(2019).
  15. Plasencia, D. M., Rodgers, L. H., Knighton, A. R., Eckenhoff, R. G., White, E. R. Antagonism of propofol anesthesia by alkyl-fluorobenzene derivatives. Sci Rep. 14, 15943(2024).
  16. Dash, S. N., Lipika, P. Flight for fish in drug discovery: A review of zebrafish-based screening of molecules. Biology Lett. 19, 20220541(2023).
  17. Nelson, J. C., Michael, G. Zebrafish behavior as a gateway to nervous system assembly and plasticity. Development. 149, 177998(2022).
  18. Zhang, L., et al. Sevoflurane postconditioning ameliorates cerebral hypoxia/reoxygenation injury in zebrafish involving the Akt/GSK-3β pathway activation and the microtubule-associated protein 2 promotion. Biomed Pharmacother. 175, 116693(2024).
  19. Abdallah, S. J., Thomas, B. S., Jonz, M. G. Aquatic surface respiration and swimming behaviour in adult and developing zebrafish exposed to hypoxia. J Exp Biol. 218, 1777-1786 (2015).
  20. Targ, A. G., Yasuda, N., Eger, E. I. Solubility of I-653, sevoflurane, isoflurane, and halothane in plastics and rubber composing a conventional anesthetic circuit. Anesth Analg. 69, 218-225 (1989).
  21. Yang, X., et al. Drug-selective Anesthetic insensitivity of zebrafish lacking γ-aminobutyric acid Type A receptor β3 subunits. Anesthesiology. 131, 1276-1291 (2019).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Anestezik FarmakolojiSevofluran Uygulamaszofluran UygulamasSilikon Tabaka ile M h rlemeCam Kuyucuklu PlakaSpontan HareketMedyan Etkili Konsantrasyon

İlgili makaleler