Trombositten zengin plazma (PRP), tendinopatiler, desmopatiler, osteoartrit ve laminitis 1,2,3 gibi kronik at kas-iskelet sistemi rahatsızlıklarını tedavi etmek için yaygın olarak kullanılan ortobiyolojik bir üründür. Uzuv yaralarının ve oküler yüzey hastalığının tedavisinde de etkilidir 4,5. Kullanım gerekçesi, esas olarak trombositler6 tarafından salınan yüksek konsantrasyonlarda büyüme faktörlerine (GF'ler) dayanmaktadır. Lökositler ayrıca düzenleyici ve antienflamatuar sitokinleri serbest bırakarak katkıda bulunur7. Dönüştürücü büyüme faktörü beta 1 (TGF-β1) ve trombosit kaynaklı büyüme faktörü BB (PDGF-BB) gibi GF'ler güçlü anabolik, proliferatif, anjiyojenik ve antienflamatuar etkiler gösterir8. Ekzojen veya endojen aktivasyon üzerine PRP, trombositten zengin bir jele polimerize olarak hücre trafiğini, ankrajını ve farklılaşmasını kolaylaştırır 6,9. Bu şekilde PRP, sadece GF'ler ve sitokinler için bir kap olarak değil, karmaşık bir canlı iskele görevi görür10.
Hem insanlarda hem de atlarda kullanılan PRP ürünlerini çeşitli sistemler sınıflandırmaktadır 6,11,12. En basit ve en yaygın sistemlerden biri, bu hemobileşenleri lökosit konsantrasyonunagöre sınıflandırır 11,12. Bu sınıflandırmaya göre, atın tam kanındaki seviyelere göre düşük ila ihmal edilebilir lökosit konsantrasyonlarına ve düşük ila orta trombosit konsantrasyonlarına sahip PRP ürünleri saf PRP (P-PRP)6,11,12 olarak adlandırılır. Buna karşılık, yüksek lökosit konsantrasyonlarına ve orta ila yüksek trombosit konsantrasyonlarına sahip PRP ürünleri, lökosit ve trombositten zengin plazma (L-PRP) olarak adlandırılır6,11,12.
P-PRP ürünleri tipik olarak, sodyum sitrat ve sitrat, fosfat ve dekstroz13 gibi antikoagülanlar içeren tüplerde atlardan tam kanın toplandığı tüpten tüpe santrifüjleme ile elde edilir. Trombositleri diğer bileşenlerden ayırmak için kan iki kez santrifüj edilir14. Buna karşılık, L-PRP ürünleri esas olarak insan kanı için tasarlanmış yarı otomatik kitler kullanılarak hazırlanırve bunların bazıları atlarda kullanım için onaylanmıştır 6,15. Bu yarı otomatik kitler genellikle özel santrifüjler gerektirir ve daha yüksek bir maliyete16 sahiptir, ayrıca klinik ortamlarda pratik kullanımlarını zorlaştırabilecek aseptik kullanımla ilgili potansiyel endişeler17 ile birlikte gelir. Ek olarak, bu kitler, bazı klinik durumlarda zararlı olabilecek istenmeyen aşırı lökosit veya kırmızı kan hücresi konsantrasyonuna neden olabilir18. Örneğin, yüksek lökosit sayıları aşırı iltihaplanmaya neden olabilir ve aşırı miktarda kırmızı kan hücresi iyileşme sürecine müdahale edebilir veya doku tahrişi veya reddi gibi komplikasyonlara yol açabilir15; bununla birlikte, at L-PRP üretmek için yaygın olarak kullanılan bir yöntem, özel ekipman gerektirmeyen bir yerçekimi sürecini içerir19.
Bu sınırlamaların ışığında, PRP hazırlığı için daha basit ve daha uygun maliyetli alternatifler oldukça arzu edilir. Çeşitli in vitro çalışmalar, kas-iskelet sistemi hastalığının deneysel modelleri ve atlarda yapılan gözlemler, hem P-PRP hem de L-PRP ürünlerinin tedavi edilen hücreler ve dokular üzerinde faydalı etkileri olduğunu göstermiştir 1,2,20. Bu ürünler iyileşmeyi destekler, iltihabı azaltır ve doku yenilenmesini artırır6. Bununla birlikte, bir atı tedavi etmek için P-PRP veya L-PRP kullanma kararı, teknik ve ekonomik faktörlerden etkilenebilir.
Yazarlara göre, at kanından bir PRP ürünü elde etmek için geniş çapta doğrulanmış adım adım bir prosedürü tanımlayan ve tam olarak gösteren yayınlanmış bir çalışma yoktur. Bu makale, atlardan güvenli bir şekilde tam kan almak ve hem deneysel hem de klinik kullanıma uygun bir PRP ürünü üretmek için gerekli prosedürleri özetlemektedir. Ayrıca, trombositlerin ve lökositlerin miktar tayini ve terapötik etkilerinin ayrılmaz bir parçası olan TGF-β1 ve PDGF-BB konsantrasyonunun belirlenmesi ile bu ortobiyolojik olanın doğrulanmasını da içerir. Bu çalışma, süreci standartlaştırarak ve ürünün etkinliğini göstererek, at pratisyenlerinin PRP'yi güvenle ve hassasiyetle hazırlamaları için güvenilir ve erişilebilir bir yöntem sağlamayı amaçlamaktadır.
At PRP'si üretmek için çift santrifüjleme yöntemi ilk olarak 2006 yılında Argüelles ve ark.14 tarafından tanımlanmış olsa da, protokol ilk kez bir videoda tam olarak sunulmuştur. Bu video, kas-iskelet sistemi bozuklukları olan atlar için daha karmaşık ve pahalı PRP kitleri kullanmalarını engelleyen teknik sınırlamalar ve bütçe kısıtlamaları ile karşı karşıya kalan at uygulayıcıları için pratik bir kaynak olarak hizmet etmeyi amaçlamaktadır.