Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Sıçanlara Duktal Hücre Naklinden Türetilen Adacık Benzeri Hücreler

465 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/68066

⸱

1 Ağustos 2025

 , 
1Department of Physiology, Ankara Medipol University Faculty of Medicine

Bu makalede

Özet

Duktal hücrelerden türetilen adacık benzeri hücreler, diyabetik sıçanlarda kan şekeri seviyelerini düşürerek ve insülin üretimini artırarak diyabet tedavisi için potansiyel göstermektedir. Bununla birlikte, yeterli hücre fonksiyonu, immünolojik savunma ve güvenliğin sağlanmasında zorluklar devam etmektedir. Bu maddelerin terapötik kapasitesini arttırmak için ek araştırma gereklidir.

Özet

Duktal hücrelerden türetilen adacık benzeri hücrelerin kullanımı, tip 1 diyabetin tedavisi için potansiyel bir yaklaşım olarak ortaya çıkmıştır. Diyabet hastaları, insülin yapımından sorumlu pankreas beta hücrelerinin otoimmün yıkımı nedeniyle vücutlarında yetersiz insülin sentezine sahiptir. Bu çerçevede, adacık hücre naklinin amacı, hastaların insülin üretme yeteneğini eski haline getirmektir. Bununla birlikte, donör pankreaslarından adacık hücrelerinin yetersiz elde edilmesi ve bağışıklık reaksiyonları gibi engeller bu tedavi yönteminin geniş çapta uygulanmasını engellemektedir. Belirli koşullar altında, pankreas duktal hücreleri, insülin üreten hücrelere dönüşme yeteneğine sahiptir. Bu hücreler kontrollü bir ortamda yetiştirilebilir ve insülin salgılama kabiliyetine sahip adacık benzeri hücrelere dönüştürülebilir ve bu da onları nakil için uygun hale getirir. Bu yenilikçi strateji, tip 1 diyabetin ilerlemesini durdurma ve insülin enjeksiyonlarına olan bağımlılığı azaltma potansiyeli sunmaktadır. Bu çalışmada, streptozotosin ile indüklenen diyabetik sıçanlarda, duktal hücrelerden türetilen adacık benzeri hücreler, karaciğerin portal veni yoluyla karaciğere nakledildi. Transplantasyonun ardından, sıçanların kan şekeri seviyelerinde 5. günden başlayarak 15 gün boyunca devam eden önemli düşüşler kaydettik. Ek olarak, bir intraperitoneal glukoz tolerans testi (IPGTT), adacık benzeri hücre nakli alan diyabetik sıçanların kontrol grubundan önemli ölçüde daha fazla insülin ürettiğini gösterdi. Bu sonuçlar, duktal hücrelerden türetilen adacık benzeri hücrelerin diyabet için umut verici bir terapötik yaklaşım olabileceğini düşündürmektedir. Bu çalışma alanındaki başlıca engeller arasında hücreler için yeterli fonksiyonel kapasitenin elde edilmesi, onları bağışıklık sisteminden korumak ve terapötik uygulama için güvenliklerinin sağlanması yer almaktadır. Gelecekteki çalışma çabaları, hem etkinliği hem de güvenliği arttırmaya odaklanarak, bu hücrelerin terapötik ortamlarda kullanımını optimize etmek için önemli bilgiler sağlama potansiyeline sahiptir.

Giriş

Tip 1 diyabet, pankreasta insülin üreten beta hücrelerinin yok edilmesiyle kendini gösteren kalıcı bir otoimmün hastalıktır. Mevcut tedaviler çoğunlukla, kan şekeri seviyelerini kontrol etmede başarılı olmasına rağmen, durum için bir tedavi sağlamayan veya ilerlemesini durdurmayan uzun süreli insülin tedavisini içerir1. Tip 1 diyabet için alternatif tedavilerin araştırılması, insülin tedavisine yapılan mevcut vurgudan daha etkili alternatiflere duyulan gereklilikten kaynaklanmaktadır. Devam eden araştırmalar, vücudun insülin yapma kapasitesini eski haline getirmeyi amaçlayan adacık hücresi nakli gibi alternatif tedavilere odaklanarak teşvik edilmiştir. Yine de, donör adacık hücrelerinin bulunmasının zor olması ve immünolojik olarak reddedilme şansının olması, bu tedavinin yaygın olarak kullanılmasını zorlaştırmıştır. Sonuç olarak, bilim camiası, insülin 1,2,3 üreten alternatif hücre kaynakları bulmakla giderek daha fazla ilgilenmeye başladı.

Bu yöntem, insülin salgılayan hücrelerin sürdürülebilir bir kaynağını oluşturmak için bu hücrelerin yenilenme potansiyelinden yararlanmayı amaçlamaktadır4. İn vitro araştırmalar, bu duktal hücrelerin, glikoz stimülasyonuna yanıt olarak insülin salgılayabilen fonksiyonel beta benzeri hücrelere dönüştürülme kapasitesini göstermiştir5. Bu sorgulama hattı, ilgili karmaşık bağışıklık tepkileri nedeniyle geleneksel adacık nakli ile bağlantılı olumsuz sonuçlar göz önüne alındığında özellikle hayati önem taşımaktadır. Çok sayıda çalışma, duktal türevli hücrelerin sadece insülin üretme konusunda içsel bir yeteneğe sahip olmadığını, aynı zamanda bağışıklık toleransını artırabilecek özellikler gösterebileceğini ve böylece geleneksel transplantasyon teknikleriyle ilişkili bazı zorlukları hafifletebileceğini göstermektedir 5,6,7,8. Bu hücreler vücudun dışında yetiştirilebilir, insülin salgılayabilen adacıklara benzeyen hücrelere dönüştürülebilir ve daha sonra diyabetli bireylere implante edilebilir. Streptozotosin ile indüklenen diyabetik sıçanlarla yapılan deneyleri kapsayan klinik öncesi araştırmalar, bu hücrelerin transplantasyonunun kan şekeri seviyelerini etkili bir şekilde azaltabildiğini ve insülin sekresyonunu artırabildiğini göstermiştir9.

Yaklaşımımız, standart hücre kültürü ortamını İnsülin-Transferrin-Selenyum (ITS) 10,11,12, İzoksazol 9 (ISX-9) 13,14 ve GLP-115 ile artırarak farklılaşma sürecini hızlandırmaya ve insülin üreten hücrelerin işlevselliğini geliştirmeye odaklandı. Bu faktörlerin pankreas farklılaşmasını kolaylaştırmada ve insülin sekresyonunu arttırmada gerekli olduğu bildirilmektedir. Bu bileşenlerin entegrasyonu, fonksiyonel adacık benzeri hücrelerin daha verimli bir şekilde elde edilmesini ve glikoz stimülasyonuna yanıt olarak insülin üretme ve salma yeteneklerini sağlamayı amaçladı 9,10,11,12,13,14.

Adacık transplantasyonunda immün rejeksiyon başarılı sonuçlar elde etmenin önünde önemli bir engel teşkil etmektedir. Allojenik nakledilen adacıklar immün saldırıya karşı savunmasızdır ve reddi önlemek için immünosüpresif tedaviler gerektirir16,17. Adacık nakli sırasında pankreatik duktal hücrelerin immün rejeksiyonda rolü gelişmekte olan bir çalışma alanını temsil etmektedir. Duktal hücrelerin, nakledilen adacıkların hayatta kalma ve düzgün çalışma olasılığını artıracak bağışıklık reddini azaltabilecek özelliklere sahip olabileceği düşünülmektedir. Ilieva ve ark. duktal hücrelerle birlikte kültürlenen adacıkların, immün aracılı hasara karşı koruyucu bir etkiye işaret eden azalmış merkezi nekroz ve apoptoz sergilediğini göstermiştir. Bu etkiye, Marín-Cañas ve ark. (2019)18 tarafından belirtildiği gibi, duktal hücreler tarafından salgılanan insülin benzeri büyüme faktörü 2 (IGF-2) gibi faktörler aracılık edebilir. İmmün rejeksiyon, özellikle Tip 1 diyabette adacık transplantasyonunun başarısı için önemli bir zorluk teşkil ettiğinden, koruyucu etki esastır. Adacık greftlerindeki duktal hücreler, muhtemelen bağışıklık tepkisini hafifleten immünomodülatör faktörleri salgılama kapasitelerine atfedilebilen, gelişmiş greft fonksiyonu ve sağkalımı ile ilişkilendirilmiştir19.

Umut verici gelişmelere rağmen, klinik kullanım için bu hücre bazlı tedavilerin operasyonel etkinliğini ve güvenliğini garanti altına almak için bazı engellerin çözülmesi gerekmektedir. İndüklenen hücrelerin doğal beta hücreleriyle karşılaştırılabilir fonksiyonel özellikler sergilediğini doğrulamak ve bu hücreleri uzun süreli hayatta kalmalarını ve işlevselliklerini sağlamak için bağışıklık sistemi saldırılarından korumak için etkili teknikler oluşturmak esastır20,21. Bu araştırma alanı ilerledikçe, Tip 1 diyabet tedavisinde duktal hücre kaynaklı insülin üreten hücrelerin vaadinden yararlanmak için bu engellerin kapsamlı bilgisi ve çözümü gerekli olacaktır 22,23,24.

Bu çalışma, streptozotosin ile indüklenen diyabetik sıçan modelinde glisemik kontrolün restorasyonu için optimal koşullar altında geliştirilen duktal hücre kaynaklı adacık benzeri hücrelerin in vivo etkinliğini değerlendirmeyi amaçlamaktadır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu çalışma, araştırmanın tasarımının, yürütülmesinin ve raporlanmasının hayvan refahı ve deneysel bütünlük için yüksek standartları karşılamasını sağlayarak ARRIVE tavsiyelerine bağlı kalmıştır (https://arriveguidelines.org). Ankara Medipol Üniversitesi etik kurul onayı (AMUHADYEK-12- 09.05.2025) ve kurum izni aldı. Tüm yöntemler geçerli yönergelere ve düzenlemelere uygun olarak gerçekleştirildi. Hayvanların çektiği acıyı en aza indirmek ve bilimsel hedeflere ulaşmak için gerekli olan minimum sayıda hayvanı istihdam etmek için tüm önlemler alındı.

1. Çözeltilerin hazırlanması

  1. Enzim çözeltisi: 50 mg toz haline getirilmiş Clostridium histolyticum kollajenaz tip V içeren bir kollajenaz çözeltisi hazırlayın. 1 mg / mL'lik bir konsantrasyon elde etmek için kollajenazı HBSS (Ca-Mg içeren) ile birleştirerek 50 mL'lik bir çözelti hazırlayın. Numune başına 7 mL çözelti kullanın ve kalanını -20 °C'de dondurucuya koyun.
    NOT: Önerilen kollajenaz konsantrasyonu 1 mg / 1 mL'dir. Şırıngalara çekilmeden önce, kollajenaz önceden hazırlanmış HBSS çözeltisi ile 1 mg / mL'lik bir konsantrasyona kadar karıştırılmalıdır.
  2. Yıkama çözeltisi 1: 500 mL fenol kırmızısı içermeyen HBSS'den 62,5 mL çekin. Kalan HBSS'ye çok dikkatli bir şekilde 50 mL FBS ekleyin. 5 mL penisilin / streptomisin (P / S), 5 mL L-glutamin (L-Gln) ve 2.5 mL 1 M HEPES ekleyin. Hacmi 500 mL'ye getirin.


figure-protocol-1







figure-protocol-2

figure-protocol-3




figure-protocol-4

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Işık mikroskobu analizi

Duktal hücrelerin 14. gün incelemeleri sırasında ışık mikroskobu analizi, hücrelerin kümelendiğini ve adacık benzeri bir yapı oluşturduğunu ortaya çıkardı. Bu yapısal değişim, duktal hücrelerin belli bir süre sonra örgütsel bir düzene girerek morfolojik özelliklerini değiştirdiklerini ve adacık benzeri bir görünüm kazandıklarını göstermektedir. Hücrelerin kümelenme eğilimi muhtemelen hücreler arası iletişimin ve mikroçevrenin etkilerinden kay...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Farklı kaynaklardan gelen adacık benzeri hücrelerin fonksiyonel kapasitesinin incelenmesi, diyabet araştırmalarına büyük ilgi çekmiştir. İlk araştırmalar, bu hücrelerin glikoz seviyeleri yükseldiğinde insülin salgılayabildiğini gösteriyor, bu da doğal pankreas adacıklarının işlevlerini taklit edebileceklerini gösteriyor. Araştırmacılar, bu hücrelerde bulunan karakteristik kırmızı boyamanın kanıtladığı gibi, adacık benzeri hücrelerin pankreas adacıklarına fenotipik benzerliğini doğrulamak için ditizon boyamayı kullandılar...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazar(lar) tarafından herhangi bir potansiyel çıkar çatışması bildirilmemiştir.

Teşekkürler

Yazarlar çalışmaya katkılarından dolayı laboratuvar ekibine teşekkür eder.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
% 0.9 Sodyum KlorürSahar PharmaPankreasın çıkarılması ve hücre nakli için
10 mL serolojik pipet - sterilCorning4488İzolasyon için
24 kuyulu plakaCorning353047GSIS için 
25 mL serolojik pipet - sterilCorning4489İzolasyon için
% 70 etanol ve nbsp;ISOLAB64-17-5Sıçanların dezenfeksiyonu için
betadin Baticonol  1186Sıçanların dezenfeksiyonu için
Biocholl 1077SigmaL6715-BCPankreas saflaştırması için
Biocoll, Yoğunluk 1.10 g/mLSigmaL6155-BCPankreas saflaştırması için
Kan şekeri ölçüm cihazları ve glikoz test şeritleriOn Call PlusKan şekeri ölçümü için
BSASigmaA9418Krebs
CaCl2'nin hazırlanması içinSigma57647902Krebs
Kateter bileşiminin hazırlanması için: Polietilen kateter (intravenöz intrakat)  Bıçakçılar24G  ve 14GPankreas ve karaciğer için 
SantrifüjThermoST1R Plusİzolasyon için 
Kollajenaz Tip V, ≥ 1 FALGPA birimi / mg katı, < br / > >125 CDU / mg katı SigmaC9263- 1GPankreas sindirimi için
D- (+) -glikoz ve nbsp;Sigma50-99-7GSIS ve IPGTT
için Dithizone (DTZ)SigmaD5130Adacık tayini için
DMSO SigmaD8779DTZ
Dulbecco'ya çözmek için s Modifiye Kartal' s Orta (DMEM— düşük glikoz) Gibco11885084Hücre kültürü için
Eppendorf tüpüISOLABHücre yıkama için
Falcon tüpü (50 mL)ISOLABLB. IS.078.02.009İzolasyon için
fetal sığır serumu (FBS)SigmaN4637Pankreas izolasyonu ve kültürü için
İnce iğne ve sütür materyali (boyut 6-0 veya 7-0)PROLENE Mavi 18" P-1 İğnesi | 8697GPankreas ve hücre nakli için
glukagon benzeri peptit 1 (GLP-1) Aladdinrp174144Hücre Kültürü için
Hank'in dengeli tuz çözeltisi (Ca-Mg ile HBSS) Oğlakburcu HBSS-1AEnzim hazırlığı için
HBSS kalsiyum yok, magnezyum yok, fenol yok kırmızıBIOCHROM  L2015Pankreas izolasyonu için
HEPESLonzaHücre kültürü için
İnsülin ElisaAlpco80-INSRT-E01İnsülin için elisa
insülin-transferrin-selenyum (ITS)GibcoITS -GHücre kültürü için
İzoksazol 9 (ISX-9) AladdinI304735-10mgHücre kültürü için
KClSigma329820207Krebs
Ketamin HCl 200 mg / mLNexGen'iniçin Sıçanlar için anestezi
Laminer Akış KabinleriEmek IldamBSC-1100IIA2-Xİzolasyon ve Kültür dönemi için
LansetlerAyset 28 GKan şekeri
ölçümü içinL-glutamin Sigma59202cPankreas izolasyonu ve kültürü için
MgCl2Sigma329759772Krebs
mikroplaka okuyucununBioTek SynergyH1 Çok Modlu Okuyucuİnsülin elisa
mikroplaka çalkalayıcıVWR  444-0270İnsülin elisa
için Mikrocerrahi mikroskobuEMZ-200TR 3.9X Pankreasın çıkarılması ve hücre nakli için
Mikrocerrahi makas ve forsepsAesculapPankreasın çıkarılması ve hücre nakli için
Millicell Asılı Hücre Kültürü Eki, polietilen tereftalat 8.0 ve mikro; m MILLIPOREPIEP30R48 GSIS için 
NaClSigma7647-14-5Krebs
NaHCO3Sigma144-55-8krebs hazırlanması için
Pasteur Pipet 3 MlBIOSIGMAİzolasyon için
penisilin/streptomisin Pankreas izolasyonu ve kültürü içinSigma
Fosfat tamponlu salin çözeltisi (PBS) BİYOKROM&nbsp; L1815Hücre geçişi için
Ekartör (karaciğer ve bağ dokularının stabilizasyonu için)AesculapPankreasın çıkarılması ve hücre nakli için
Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI w/L-Gln)OğlakRPMI-APankreas izolasyonu ve kültürü için
Steril Pamuk UçluDynarexPankreasın çıkarılması ve hücre nakli için
Steril şırınga (10 mL)Ayset32MM 22GCollegenase reaksiyonu için
KronometreKenkoKK613DIPGTT
Streptozotosin (STZ) için Sigma18883-66-4Diyabetik sıçanlar için
Şırınga Sürücü Filtre Ünitesi (GP-0.22 & m-3 mm)MillexSLGP033RSHücre kültürü ortamının sterilizasyonu için
T25 şişesiThermo130189Kültür için
TrypLE Express reaktifleriGibcoHücre geçişi için
su banyosu Emek IldamALB128Kolejnaz reaksiyonu için
Ksilazin% 2 w / v Enjeksiyon ÇözeltisiRompunSıçanlar anestezi için
hazırlanması hazırlanması için

Kaynaklar

  1. Nichols, G. A., Kimes, T. M., Harp, J. B., Kou, T. D., Brodovicz, K. G. Glycemic Response and Attainment of A1C Goals Following Newly Initiated Insulin Therapy for Type 2 Diabetes. Diabetes Care. 35 (3), 495-497 (2012).
  2. Shapiro, A. M. J., et al. Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen. New Engl J Med. 343 (4), 230-238 (2000).
  3. Barton, F. B., et al. Improvement in Outcomes of Clinical Islet Transplantation: 1999-2010. Diabetes Care. 35 (7), 1436-1445 (2012).
  4. Jacobson, A., et al. Biomedical Risk Factors for Decreased Cognitive Functioning in Type 1 Diabetes: An 18-year Follow-Up of the Diabetes Control and Complications Trial (DCCT) Cohort. Diabetologia. 54 (2), 245-255 (2010).
  5. Rovner, A. J., et al. Development and Validation of the Type 1 Diabetes Nutrition Knowledge Survey. Diabetes Care. 35 (8), 1643-1647 (2012).
  6. Knopp, B., Perumareddi, P. An Atypical Presentation of Type 1 Diabetes. Arch Clin Cases. 8 (3), 46-49 (2021).
  7. Low, J. C., et al. Do Obese Children With Diabetic Ketoacidosis Have Type 1 or Type 2 Diabetes. Primary Care Diabetes. 6 (1), 61-65 (2012).
  8. Xu, X., et al. β cells can be generated from endogenous progenitors in injured adult mouse pancreas. Cell. 132 (2), 197-207 (2008).
  9. Dorrell, C., et al. Transcriptomes of the major human pancreatic cell types. Diabetologia. 54 (11), 2832(2011).
  10. Kim, B., et al. Differentiation of human labia minora dermis-derived fibroblasts into insulin-producing cells. Exp Mol Med. 44 (1), 26(2012).
  11. Campbell, S. C., et al. Selenium stimulates pancreatic beta-cell gene expression and enhances islet function. FEBS Lett. 582 (15), 2333-2337 (2008).
  12. Shaer, A., Azarpira, N., Vahdati, A., Karimi, M. H., Shariati, S. Differentiation of Human-Induced Pluripotent Stem Cells Into Insulin-Producing Clusters. Exp Clin Transplantat. 13 (1), 68-75 (2015).
  13. Koh, S. H., et al. Differential Effects of Isoxazole-9 on Neural Stem/Progenitor Cells, Oligodendrocyte Precursor Cells, and Endothelial Progenitor Cells . PLoS One. 10 (9), e0138724(2015).
  14. Tsakmaki, A., Fonseca Pedro, P., Pavlidis, P., Hayee, B., Bewick, G. A. ISX-9 manipulates endocrine progenitor fate revealing conserved intestinal lineages in mouse and human organoids. Mol Metabol. 34, 157-173 (2020).
  15. Khan, S., Sur, S., Newcomb, C. J., Appelt, E. A., Stupp, S. I. Self-assembling glucagon-like peptide 1-mimetic peptide amphiphiles for enhanced activity and proliferation of insulin-secreting cells. Acta Biomaterialia. 8 (5), 1685-1692 (2012).
  16. White, A. M., et al. Engineering Strategies to Improve Islet Transplantation for Type 1 Diabetes Therapy. ACS Biomater Sci Eng. 6 (5), 2543-2562 (2020).
  17. Li, X., Meng, Q., Zhang, L. The Fate of Allogeneic Pancreatic Islets following Intraportal Transplantation: Challenges and Solutions. J Immunol Res. 2018, 1-13 (2018).
  18. Marín-Cañas, S., et al. Pancreatic ductal cells may have a negative effect on human islet transplantation. PLoS One. 14 (7), e0220064(2019).
  19. Webb, M. A., et al. The Impact of Potential Islet Precursor Cells on Islet Autotransplantation Outcomes. Cell Transplant. 22 (6), 1041-1051 (2013).
  20. Vendrame, F., et al. Recurrence of Type 1 Diabetes After Simultaneous Pancreas-Kidney Transplantation, Despite Immunosuppression, Is Associated With Autoantibodies and Pathogenic Autoreactive CD4 T-Cells. Diabetes. 59 (4), 947-957 (2010).
  21. Barron, E., et al. Associations of Type 1 and Type 2 Diabetes With COVID-19-related Mortality in England: A Whole-Population Study. Lancet Diabetes Endocrinol. 8 (10), 813-822 (2020).
  22. Rezania, A., et al. Maturation of human embryonic stem cell-derived pancreatic progenitors into functional islets capable of treating pre-existing diabetes in mice. Diabetes. 61 (8), 2016-2029 (2012).
  23. Blum, B., et al. Functional β-cells maturation is marked by an increase in the glucose threshold for insulin secretion and by expression of urocortin3. Nat Biotechnol. 30 (3), 261-264 (2012).
  24. Karimi, N., Ozcan, G. B. Rat Ductal Cell-Derived Differentiation into Islet-Like Cells. Methods Mol Biol. , 1-15 (2024).
  25. Dagli Gul, A. S., Fadillioglu, E., Karabulut, I., Yesilyurt, A., Delibasi, T. The effects of oral carvacrol treatment against H2O2-induced injury on isolated pancreas islet cells of rats. Islets. 5 (4), 149-155 (2013).
  26. Noguchi, H., et al. Evaluation of Osmolality of Density Gradient for Human Islet Purification. Cell Transplant. 21 (2-3), 493-500 (2012).
  27. Boyuk, G., Yigit, A. A., Aydogan, I. Co-culture of rat luteal cells with islet cells enhances islet viability and revascularization. In Vitro Cell Dev Biol Animal. 54, 640-647 (2018).
  28. Karimi, N., Boyuk Ozcan, G. Isolation Procedure for Rat Pancreatic Ductal Cells. Methods Mol Biol. , (2024).
  29. Karakose, M., et al. Comparison of the Ovary and Kidney as Sites for Islet Transplantation in Diabetic Rats. Transplant Proc. 48, 2216-2220 (2016).
  30. Gou, W., Cui, W., Cui, Y., Wang, H. Minimizing post-infusion portal vein bleeding during intrahepatic islet transplantation in mice. J Vis Exp. (171), e62530(2021).
  31. Geiger, M. C., et al. Evaluation of Metabolic Control Using a Continuous Subcutaneous Glucose Monitoring System in Patients with Type 1 Diabetes Mellitus who Achieved Insulin Independence after Islet Cell Transplantation. Cell Transplant. 14 (2-3), 77-84 (2005).
  32. Farina, M., et al. 3D Printed Vascularized Device for Subcutaneous Transplantation of Human Islets. Biotechnol J. 12 (9), 1700169(2017).
  33. Biancone, L., et al. Platelet-Activating Factor Synthesis and Response on Pancreatic Islet Endothelial Cells: Relevance for Islet Transplantation. Transplantation. 81 (4), 511-518 (2006).
  34. Lee, Y. S., Lee, C., Choung, J. S., Jung, H. S. Glucagon-Like Peptide 1 Increases Β-Cell Regeneration by Promoting Α- To Β-Cell Transdifferentiation. Diabetes. 67 (12), 2601-2614 (2018).
  35. Akinci, E., Banga, A., Greder, L. V., Dutton, J. R., Slack, J. M. W. Reprogramming of pancreatic exocrine cells towards a beta (β) cell character using Pdx1, Ngn3 and MafA. Biochem J. 442 (3), 539-550 (2012).
  36. Kalwat, M. A., et al. Isoxazole Alters Metabolites and Gene Expression, Decreasing Proliferation and Promoting a Neuroendocrine Phenotype in Β-Cells. Acs Chem Biol. 11 (4), 1128-1136 (2016).
  37. Kroon, E., et al. Pancreatic endoderm derived from human embryonic stem cells generates glucose-responsive insulin-secreting cells in vivo. Nat Biotechnol. 26 (4), 443-452 (2008).
  38. García-Ocaña, A., et al. Transgenic Overexpression of Hepatocyte Growth Factor in the β-Cell Markedly Improves Islet Function and Islet Transplant Outcomes in Mice. Diabetes. 50 (12), 2752-2762 (2001).
  39. Vegas, A. J., et al. Long-term glycemic control using polymer-encapsulated human stem cell-derived beta cells in immune-competent mice. Nat Med. 22 (3), 306-311 (2016).
  40. Zhang, W. J., et al. Evaluation of islets derived from human fetal pancreatic progenitor cells in diabetes treatment. Stem Cell Res Ther. 4 (6), 141(2013).
  41. El-Kersh, A. O. F. O., El-Akabawy, G., Al-Serwi, R. H. Transplantation of human dental pulp stem cells in streptozotocin-induced diabetic rats. Anat Sci Int. 95 (4), 523-539 (2020).
  42. Lee, D. Y., Park, S. J., Nam, J. H., Byun, Y. Optimal aggregation of dissociated islet cells for functional islet-like cluster. J Biomater Sci Pol Ed. 19 (4), 441-452 (2008).
  43. Brissova, M., et al. Intraislet Endothelial Cells Contribute to Revascularization of Transplanted Pancreatic Islets. Diabetes. 53 (5), 1318-1325 (2004).
  44. Maxwell, K. G., Kim, M. H., Gale, S. E., Millman, J. R. Differential function and maturation of human stem cell-derived islets after transplantation. Stem Cells Transl Med. 11 (3), 322-331 (2022).
  45. Brissova, M., et al. Pancreatic Islet Production of Vascular Endothelial Growth Factor-A Is Essential for Islet Vascularization, Revascularization, and Function. Diabetes. 55 (11), 2974-2985 (2006).
  46. Chow, L. W., Wang, L., Kaufman, D. B., Stupp, S. I. Self-assembling Nanostructures to Deliver Angiogenic Factors to Pancreatic Islets. Biomaterials. 31 (24), 6154-6161 (2010).
  47. Assady, S., et al. Insulin Production by Human Embryonic Stem Cells. Diabetes. 50 (8), 1691-1697 (2001).
  48. Homma, J., Sekine, H., Shimizu, T. Tricultured Cell Sheets Develop into Functional Pancreatic Islet Tissue with a Vascular Network. Tissue Engineering Part A. 29 (7-8), 211-224 (2023).
  49. Loganathan, G., et al. Culture of Impure Human Islet Fractions in the Presence of Alpha-1 Antitrypsin Prevents Insulin Cleavage and Improves Islet Recovery. Transplaxt Proc. 42 (6), 2055-2057 (2010).
  50. Hilderink, J., et al. Controlled aggregation of primary human pancreatic islet cells leads to glucose-responsive pseudoislets comparable to native islets. J Cell Mol Med. 19 (8), 1836-1846 (2015).
  51. Choi, H., Shinohara, M., Ibuki, M., Nishikawa, M., Sakai, Y. Differentiation of Human-Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Endocrine Progenitors to Islet-like Cells Using a Dialysis Suspension Culture System. Cells. 10 (8), 2017(2021).
  52. Ding, Y., Xia, S., Zhang, H., Chen, Q., Niu, B. Loureirin B Activates GLP-1R and Promotes Insulin Secretion in Ins-1 Cells. J Cell Mol Med. 25 (2), 855-866 (2020).
  53. O'Mara, B. A., Liehuaa, L., Ahrén, B. Stromal Derived Factor 1 Alpha (SDF-1a) in a Dual Therapy With the DPP-4 Inhibitor 1 Vildagliptin Does Not Enhance Beta Cell Function but Improves Glucose Clearance After Oral Glucose in Streptozotocin Diabetic Mice. J Chem Biol Ther. 1, 110(2016).
  54. Caporarello, N., Parrino, C., Trischitta, V., Frittitta, L. Insulin Receptor Signaling and Glucagon-Like Peptide 1 Effects on Pancreatic Beta Cells. Plos One. 12 (8), e0181190(2017).
  55. Schwenk, R. W., et al. GLP-1-oestrogen Attenuates Hyperphagia and Protects From Beta Cell Failure in Diabetes-Prone New Zealand Obese (NZO) Mice. Diabetologia. 58 (3), 604-614 (2014).
  56. He, Y., et al. Reversal of Early Diabetic Nephropathy by Islet Transplantation under the Kidney Capsule in a Rat Model. J Diabetes Res. 2016, 1-12 (2016).
  57. Yun, F., Zhaorigen, B., Han, X., Li, X., Yun, S. Islet-Like Cells Induced from Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells with Neonatal Bovine Pancreatic Mesenchymal Exosomes for Treatment of Diabetes Mellitus. Hormone Metabolic Res. 56 (06), 463-470 (2024).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Tip 1 Diyabetİnsülin ÜretimiPankreatik Beta HücreleriAdacık Hücresi TransplantasyonuKan Glikozunun Düşürülmesiİntraperitoneal Glikoz ToleransıStreptozotosin Diyabetik Sıçanlarİmmün Koruma

Bu makale yayımlandı

Video yakında

Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.