Burada, otolog yağ dokusunu farklı fizikokimyasal özelliklere ve fonksiyonlara sahip çeşitli yağ bileşeni maddelere dönüştürebilen bir protokol sunuyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Burada, otolog yağ dokusunu farklı fizikokimyasal özelliklere ve fonksiyonlara sahip çeşitli yağ bileşeni maddelere dönüştürebilen bir protokol sunuyoruz.
Geleneksel otolog yağ dokusu grefti, hacim büyütme ve doku rejenerasyonu için yaygın olarak kullanılır. Bununla birlikte, yağ greftlerinin tek tip fiziksel ve biyolojik özellikleri, genellikle çeşitli hasta senaryolarında ve çok yönlü gereksinimlerde optimal olmayan performansa yol açar. Otolog yağ naklinin temelleri üzerine genişleyerek, otolog yağ bileşeni transplantasyonu olarak adlandırılan öncü bir yaklaşımı tanıtıyoruz. Bu yenilikçi konsept, otolog yağ dokusunu, her biri çeşitli klinik bağlamlarda belirli uygulamaları ele almak için uyarlanmış benzersiz fizikokimyasal özelliklerle karakterize edilen çok çeşitli yağ bileşenlerine dönüştürmeyi amaçlayan titizlikle tasarlanmış bir protokolü entegre eder. Bir dizi fiziksel yöntemle, yağ dokusu yeterli rijit destek sağlayan bir Yağ Matriks Kompleksine (AMC), daha fazla doldurma için Yüksek Yoğunluklu Yağa (HDF), küçük ve/veya hassas enjeksiyonlar için Stromal Vasküler Fraksiyon (SVF)-jeline ve ince kırışıklıklar ve/veya yüz gençleştirme ihtiyaçları için Yağ Kollajen Fragmanına (ACF) dönüştürülebilir. Bu farklı yağ bileşenleri, bireysel hasta ihtiyaçlarının incelikli taleplerini karşılayan, kesin ve hedefe yönelik transplantasyon stratejilerine uygun doğal özelliklere sahiptir. Yeni yağ dokusu fraksiyonlama protokolü, yağ dokusu greftlemesinde devrim yaratmada büyük potansiyel göstermektedir. Daha rafine ve özel transplantasyon için yeni bir bakış açısı ve metodoloji sunar.
Otolog yağ dokusu grefti, donör bölge hazırlığı, yağ ekstraksiyonu, işleme ve implantasyondaki ilerlemeler tarafından yönlendirilen hacimsel büyütme ve doku rejenerasyonu için yaygın olarak kullanılan bir tekniktir 1,2,3,4. Bununla birlikte, geleneksel yağ greftlerinin tek tip fiziksel ve biyolojik özellikleri, genellikle çeşitli klinik ihtiyaçların karşılanmasındaki etkinliklerini sınırlar5. Bu sınırlamaların üstesinden gelmek için araştırma ekibimiz, otolog yağı farklı fizikokimyasal özelliklere ve işlevlere sahip özel bileşenlere dönüştüren yenilikçi bir yağ dokusu fraksiyonlama protokolü geliştirmiştir.
Protokolün birincil amacı, otolog yağ dokusunu, her biri belirli klinik zorlukları ele almak için tasarlanmış Adipoz Matriks Kompleksi (AMC), Stromal Vasküler Fraksiyon (SVF)-jel ve Adipoz Kollajen Fragmanı (ACF) gibi özel bileşenlere ayırmaktır. Protokol, gelişmiş sertlik, yüksek hücre yoğunluğu ve kollajen açısından zengin formülasyonlar gibi benzersiz özelliklere sahip bileşenler sağlayarak, kesin ve hedefli transplantasyon stratejilerisağlar 6,7,8,9,10,11.
Geleneksel yağ grefti, hacim artırma için etkili olsa da, genellikle karmaşık klinik senaryoların incelikli taleplerini karşılayamıyor. Öngörülemeyen yağ emilimi, kararsız hacim restorasyonuna yol açar. Ayrıca, geleneksel yağ greftlerinin tek tip fiziksel ve biyolojik özellikleri nedeniyle, yapısal destek, hassas küçük alanlı enjeksiyonlar gerçekleştirme ve hedeflenen kollajen stimülasyonuna ulaşma gibi özel nakil gereksinimleri olan alanlar için hedefli dolgu sağlayamazlar. Bu sorunlar sıklıkla birden fazla ameliyatı gerektirmekte, bu da hastaların ağrılarını ve maddi yüklerini artırmaktadır 1,2,5. Bu fraksiyonasyon protokolü, yağ dokusunu geleneksel yağ dokusundan belirli bir değere sahip içerikle spesifik olarak zenginleştirerek bu sınırlamaları ele alır. Bu süreç sayesinde, kişiye özel özelliklere sahip yağ dokusu bileşenleri oluşturuyoruz, böylece klinisyenlere kişiselleştirilmiş tedavi için çok yönlü bir araç seti sunuyoruz. Sentetik dolgu maddeleri veya geleneksel yağ grefti ile karşılaştırıldığında, yaklaşım otolog dokuyu kullanarak bağışıklık reddi riskini ortadan kaldırır ve biyouyumluluğu sağlar3. Ek olarak, fraksiyonlama işlemi, yapısal destek sağlayan ve düşük bir emilim oranına sahip AMC gibi benzersiz özelliklere sahip bileşenler oluşturur; Hassas enjeksiyonlar sağlayan ve yüksek yoğunluklu stromal vasküler fraksiyon hücreleri ile karakterize edilen SVF-jel; ve cilt gençleştirmede klinik uygulamalar için potansiyel gösteren, yağ faktörlerinin kontrollü salınımını yapabilen bir kollajen protein iskelesiolan ACF 7,9,11. Bu yaklaşım aynı zamanda greft retansiyonunu ve hasta memnuniyetini artırarak tekrarlanan prosedürlere olan ihtiyacı da azaltır10,12.
Terapötik sonuçları optimize etmek için biyolojik dokuların fraksiyonlanması kavramı, hedefe yönelik tıbbi uygulamalar için kanın plazmaya, kırmızı kan hücrelerine ve trombositlere ayrılmasında görüldüğü gibi iyi bilinmektedir. Son yıllarda yağ dokusu bileşenleri ile ilgili araştırma ve klinik uygulamalar da giderek ilerlemektedir 13,14,15,16,17,18. Bu yağ fraksiyonlama protokolü, özel klinik kullanım için farklı özelliklere sahip bileşenleri izole ederek bu prensip üzerine kuruludur. Klinisyenler, hastanın anatomik ihtiyaçlarını, istenen sonuçları (örn. hacim büyütme, yapısal destek veya cilt gençleştirme) ve mevcut ekipmanı göz önünde bulundurarak bu yöntemin uygunluğunu belirleyebilir. Bu protokol özellikle yüz gençleştirme, yara izi revizyonu veya karmaşık rekonstrüktif prosedürler gibi greft özellikleri üzerinde hassas kontrol gerektiren durumlar için etkilidir 7,10,12.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu araştırma, Çin'in Guangzhou kentindeki Nanfang Hastanesi'ndeki Etik İnceleme Kurulu tarafından onaylanmıştır. Çalışmaya katılmak için yazılı bilgilendirilmiş onam veren sağlıklı donörlerden yağ dokusu toplandı. Tüm hayvan deneyleri, Nanfang Hastanesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı ve Ulusal Sağlık ve Tıbbi Araştırma Konseyi'nin (Çin) yönergelerine göre gerçekleştirildi.
1. Yağ hazırlama
2. Bileşen çıkarma
3. Yağ bileşenlerinin test edilmesi
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Cerrahi işlem sırasında gerçekleştirilen çeşitli mekanik işlemlerle yağ dokusunu başarılı bir şekilde farklı özelliklere sahip farklı yağ bileşenlerine dönüştürdük. Bunlar, sırasıyla, bol miktarda sağlam destek sağlayan AMC (Şekil 1A), daha fazla doldurma için HDF (Şekil 1B), küçük alanlarda hassas enjeksiyonlar için SVF jeli (Şekil 1C) ve ince kırışıklıkları veya yüz restorasyon ihtiyaçlarını ele almak için ACF'dir (
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu yağ dokusu fraksiyonlama protokolü, özel bileşenlerin başarılı bir şekilde izole edilmesini sağlayan birkaç kritik adımı içerir. İlk olarak, hasat edilen yağ dokusunun santrifüjlenmesi, onu her biri farklı hücresel ve hücre dışı matris (ECM) bileşimlerine sahip yüksek yoğunluklu yağ (HDF) ve düşük yoğunluklu yağ (LDF) olarak ayırır23,24. Canlı adipositler ve stromal vasküler fraksiyon (SVF) hücreleri açısından zengin olan HDF,...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı tarafından desteklenmiştir (hibeler 81801932, 81901976, 81971852, 81772101 ve 81901975).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| % 0.001 Epinefrin | Sigma-Aldrich | E4375 | |
| 0.06% Lidokain | Sigma-Aldrich | L5647 | |
| 3 mm Çok Noktalı Kanül | Lale Tıbbi Ürünler, San Diego, CA, ABD | / | |
| 50 ml Santrifüj Tüpleri | Corning | 430829 | |
| BOSE ElectroForce Yük Test Cihazı | Bose Corporation | / | |
| Kollajenaz | Worthington Biyokimyasal | LS004176 | |
| Dişiden Kadına Luer-Lok Konektörü | BD Biosciences | 309628 | |
| Kılıflı ve Elekli | Özel Yapım Filtreleme Cihazı (Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd.) | / | |
| Gazlı Bez | Medline Industries | MDS093944 | |
| Hematoksilen/Eozin Boyama Kiti | Sigma-Aldrich | HT110116 | |
| Masson'un Trikrom Boyama Kiti | Sigma-Aldrich | HT15 | |
| Çıplak fareler | Güney Mdical Üniversitesi | / | |
| Fosfat Tamponlu Salin (PBS) | Thermo Fisher Scientific | ||
| Yuvarlak Paslanmaz Çelik Filtre Süzgeci (0,15 mm) | Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd. | / | |
| Yuvarlak Paslanmaz Çelik Filtre Süzgeci (0,25 mm) | Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd. | / | |
| Sterilize 100 Mesh Filtre Torbası | Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd. | / | |
| Stromal Vasküler Fraksiyon (SVF)-Jel Çıkarıcı | Şangay Tiangong Instruments Co., Ltd. | / | |
| Tripsin | Thermo Fisher Scientific | 25200056 | |
| Western Blot Analiz Kiti | Bio-Rad | 1705061 |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.