Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Yer sincaplarında optomotor refleksin kaydedilmesini sağlayan caydırıcı olmayan hayvan kısıtlaması

2.1K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/68335

⸱

25 Temmuz 2025

 ,  ,  ,  ,  , 
1Retinal Neurophysiology Section, National Eye Institute, National Institutes of Health, 2Department of Ophthalmology, Faculty of Medicine, University of Murcia and Biomedical Research Institute of Murcia (IMIB-Pascual Parrilla), 3Striatech GmbH

Bu makalede

Özet

Protokol, insan makulasına benzeyen retina özelliklerine sahip koni baskın bir tür olan 13 çizgili yer sincaplarında optomotor tepkinin nasıl ölçüleceğini açıklar. Platform tasarımı, kullanımı geliştirir ve kaygıyı azaltır, hayvanın yükseltilmiş platformda kalma yeteneğini geliştirir ve görsel işlevdeki değişikliklerin invaziv olmayan bir şekilde değerlendirilmesini sağlar.

Özet

Optomotor refleks (OMR), bir hayvanın kontrast duyarlılığının ve görme keskinliğinin davranışsal bir değerlendirmesini sağlar. Fareler veya sıçanlar tipik olarak doğrudan elle küçük dairesel bir platforma yerleştirilir; Bununla birlikte, hayvanları bu şekilde ele almak, verileri yorumlarken kafa karıştırıcı faktörlere neden olan stres ve kaygıyı uyarabilir. Fareleri veya sıçanları tanıdık bir tünelde / tüpte almak gibi caydırıcı olmayan kullanım yöntemlerinin kaygıyı azaltabileceği gösterilmiştir. Bu, hayvanların yüksek stres, aşırı aktivite veya motor işlev bozukluğu sergilediği ve platformda kalamama ile sonuçlanan çalışmalarda özellikle ilgi çekicidir. Dr. Kiyoharu J. Miyagishima ve Francisco M. Nadal-Nicolás liderliğindeki bir ekip, yarı kapalı muhafaza sağlamak için geleneksel OMR platformunu yeniden tasarladı. Bu, renkleri görebilen birkaç memeliden biri olan 13 çizgili yer sincabında optomotor refleksini ilk kez kaydetmeyi mümkün kılıyor. İnsan makulasına benzer yüksek yoğunluklu konilere sahip görsel bir çizgiye sahiptir ve koni görsel sistemi üzerindeki etkileri incelemek için çekici bir model sağlar.

Giriş

Yer sincapları, günlük yaşam tarzları ve insan görüşünü yakından taklit eden koni baskın retinaları nedeniyle görsel işlevi incelemek için benzersiz ve değerli bir model sunar1. Bu, primatlara kıyasla kullanımlarının pratik avantajları (daha küçük boyut, daha düşük yetiştirme maliyeti) ile birleştiğinde, onları retina yaralanması, hastalık veya ilaçların renk görme değişiklikleri üzerindeki oküler yan etkilerine yönelik translasyonel araştırmalar için ideal bir model haline getirir 2,3,4,5,6. Retina hastalıkları üzerine klinik öncesi araştırmalar, bir hayvanın görüp göremediğini değerlendirme yeteneğine dayanır. Optomotor refleks (OMR), anesteziye ihtiyaç duymadan hayvanlarda görme fonksiyonunu değerlendirmek için klinik olarak ilgili bir yöntem sunar ve görme keskinliğinin doğru bir şekilde ölçülmesini sağlar 7,8. Bu testte, hayvan bakışlarıyla dönen bir şerit deseni takip eder. Dönen şeritler, ortamdaki küresel hareket algısını indükleyerek istemsiz bir kafa hareketini tetikler - OMR. Bu refleks, çevreyi görsel olarak stabilize etmeye hizmet eder ve uyaranın uzamsal frekansını veya kontrastını aşamalı olarak ayarlayarak bir hayvanın ne kadar iyi görebileceğini ölçmek için kullanılabilir. Uyaranın algılanması daha zor hale geldikçe, OMR sonunda tetiklenmez ve görme keskinliği veya kontrast eşiğinin belirlenmesine izin verir. OMR'nin avantajı bir refleks olmasıdır. Bu nedenle, herhangi bir eğitim gerekmez ve baş fiksasyonu veya ameliyat gereksizdir. Refleks çok genç hayvanlarda bile mevcuttur (göz açıldıktan sonra)9,10 bu da erken başlangıçlı hastalıkların incelenmesini mümkün kılar. Ek olarak, noninvaziv olduğu için boylamsal ölçümler yapılarak hastalığın ilerlemesinin izlenmesi sağlanabilir.

Çoğu OMR testi, dönen siyah beyaz şerit desenlerini gösteren dört ekranla çevrili, hayvanın yerleştirildiği yükseltilmiş bir platformdan oluşan özel veya ticari sistemler kullanılarak gerçekleştirilir. Şeritler bir yönde (saat yönünde veya saat yönünün tersine) hareket eder ve hayvandan 10,11,12,13,14,15,16 görsel bir izleme tepkisi ortaya çıkaran bir hareket uyaranı oluşturur. Dönen uyarana yanıt olarak hayvanın görsel olarak uyarılan kafa hareketlerini yakalamak için test alanının üzerine bir kamera monte edilmiştir. Bu kafa hareketleri, hayvanın hareketi algılama ve tepki verme yeteneğini belirlemek için izlenir ve analiz edilir, böylece görme keskinliği değerlendirilir.

OMR, farelerde ve sıçanlarda rutin olarak kullanılmasına rağmen, 13 çizgili yer sincaplarında optomotor tepkinin ölçülmesi, hiperaktiviteleri ve önceden koşullandırılma ile bile yükseltilmiş platformlarda kalamamaları nedeniyle zor olmuştur. Bunu aşmak için, hayvanların arenaya transferini kolaylaştıran, yarı muhafaza sağlayan bir platform geliştirdik. Bu yöntemin amacı, hayvanların deney ortamına uyum sağlama süresini azaltarak, işbirlikçi olmayan davranışlar sergileyen ya da platformda kalmakta zorluk çeken hayvanların kayıt altına alınmasını sağlamak ve hayvanların çalışmalara dahil edilmesini geliştirmektir. Ayrıca, deneysel olarak tanımlanmış bir kontrast ayarı kullanarak sincaplarda görme keskinliğini ölçmek için bir protokol tanımladık ve daha iyi görüntüleme sonuçları için kamera ayarlarını düzenleyerek otomatik analiz ve izlemeyi mümkün kıldık.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Hayvanları içeren prosedürler, Amerika Birleşik Devletleri yasalarına ve Tarım Bakanlığı düzenlemelerine uygun olarak yürütülmüştür. Hayvanlarla yapılan tüm deneyler, Ulusal Sağlık Enstitüleri'ndeki Ulusal Göz Enstitüsü Hayvan ve Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanan protokollere göre gerçekleştirildi. Bu çalışmada kullanılan erkek ve dişi 13 çizgili yer sincapları (6-8 aylık yaşlar) Wisconsin Üniversitesi Oshkosh Sincap Kolonisi'nden satın alındı. Bu çalışmada kullanılan fareler (rd10: 1 ay, CX3CR1GFP/+: 6.5 ay) hayvan tesisimizde yetiştirilmiştir. Hayvanlar ve kafesleri rastgele seçilerek deney gruplarına ayrıldı.

1. Prototip platformun ve modifiye edilmiş taşıma tünelinin hazırlanması

NOT: Yuvarlak düz platformlar, optomotor tepkisini13 ölçmek için tasarlanmış sistemlerde yaygın olarak kullanılır. Bununla birlikte, sincap gibi hiperaktif kemirgen modelleri genellikle bu platformlarda stabiliteyi korumak için mücadele eder. Bu tasarım, hayvanların hızlı bir şekilde alışmasına yardımcı olan ve kaygı benzeri davranışları azaltan yarı kapalı bir alan sağlar. Bu iyileştirme, hayvanın odaklanma yeteneğini geliştirir ve kayıtlar sırasında dengesizlik veya düşme durumlarını en aza indirir.

  1. CAD çizim yazılımında (örneğin, OpenSCAD veya FreeCAD), platformu (gri) ve muhafazayı (kırmızı) Şekil 1'de gösterildiği gibi tasarlayın.
    1. Sincap platformunun temel boyutlarının uzunluk ve genişlik (U x G): 129 mm x 81 mm, kalınlık: 7 mm ve çevre boyunca uzanan duvarın yüksekliği: 8 mm olarak korunduğundan emin olun. Bu kavram kanıtlama çalışmasında kullanılan prototip platform (sincap) için sağlanan ücretsiz CAD standart belge dosyasını kullanın (Ek Kodlama Dosyası 1).
    2. Çıkarılabilir üst muhafazanın (yukarıdan aşağıya bakan) temel boyutlarının uzunluk (119,5 cm) ve genişlik (76,2 cm), kenarların yüksekliği (50,8 mm) ve parça kalınlığı (3 mm) olarak korunduğundan emin olun. Bu kavram kanıtı çalışmasında kullanılan çıkarılabilir üst muhafazayı (sincap) çoğaltmak için sağlanan ücretsiz CAD standart belge dosyasını kullanın (Ek Kodlama Dosyası 2).
  2. Platformu yükseltmek için kullanılan kaideye uyacak şekilde platformun tabanındaki açık deliğin çapını gerektiği gibi ayarlayın. Resimdeki çap 40 mm'dir.
  3. Platformu beyaz opak bir filament kullanarak yazdırın. Bu, kamera için maksimum kontrast sağlar ve izleme yazılımının hayvanın platformdaki konturunu doğru bir şekilde algılamasını sağlar.
  4. Çıkarılabilir üst muhafazayı opak koyu filamentli (örn. kırmızı) yazdırın. Bu, kemirgenler için bir barınak hissi sağlar, bu da kaldırılmadan ve arenaya aktarılmadan önce onları tünele yönlendirmeyi kolaylaştırır.
  5. Bir makinistin akrilik ekstrüde şeffaf kare boruyu, uzun ucu ~ 101,6 mm uzunluğunda olacak şekilde bir masa testeresi kullanarak kesmesini sağlayın. Ellerinizi olası yaralanmalardan korurken akriliği bıçağın içinden geçirmek için koruyucu gözlük ve itme çubuğu kullandığınızdan emin olun.
  6. Masa testeresini veya aşındırıcı bir kesme diski ile donatılmış el tipi bir döner aleti kullanarak uzun dikdörtgen yüzeylerden birini çıkarın. Bu, yukarıya monte edilen kameranın hayvanın konumunu ve kafa hareketlerini engelsiz bir şekilde göreceği açık bir üst kısım oluşturur.
  7. Tüm kenarları bir el eğesi veya zımpara kağıdı ile temizleyin. Muhafazayı açık yüzün üstüne yerleştirerek, 3D baskılı çıkarılabilir üst muhafaza ile uzunlamasına kesilmiş Akrilik Ekstrüde Şeffaf Kare Boruyu kullanarak modifiye edilmiş taşıma tünelini monte edin.

2. OMR arenasının kurulması

  1. İstenmeyen koku alma ipuçlarını gidermek için platformu ve kare tüp muhafaza tertibatını hayvanlardan önce ve hayvanlar arasında bir temizleyici/dezenfektan ile dezenfekte edin.
    NOT: Hayvanları tutmak ve onlarla doğrudan temas etmek için deri eldivenler kullanılırken, kayıtlar sırasında giyilmezler ve kalıcı veya gözlemlenebilir herhangi bir kafa karıştırıcı etkiye neden olmazlar.
  2. Yaklaşık 50 mm x 50 mm ölçülerinde küçük bir kağıt havlu parçasını yırtın ve kaidenin üst yüzeyini kaplayacak şekilde katlayın. 3D baskılı platformu, kağıt havlu parçası yerindeyken kaide (14 inç yüksekliğinde) üzerine yerleştirin.
    NOT: Kağıt, platformun baskı uyumunu ayarlar, istenmeyen hareketi önler, görüntüleme için tek tip beyaz bir arka plan sağlar (kaidenin yüzeyi beyaz değilse) ve kayıt sırasında hayvanın idrar yapması durumunda emici bir tabaka görevi görerek platformun kaymasını önler.
  3. Deri iş eldivenleri giyerek, hayvanı nazikçe kare boru muhafaza tertibatına yönlendirin.
  4. Muhafaza tertibatını platforma yerleştirerek hayvanı arenaya aktarın (Şekil 1J).
  5. Çıkarılabilir üst muhafazayı dikkatlice çıkarın ve hayvanı platformdaki akrilik ekstrüde şeffaf kare tüpün içinde bırakın. OMR sisteminin kapısını kapatın

3. OMR yazılım parametrelerinin ayarlanması

NOT: Resimdeki OMR sistemi, saniyede 25 kare (fps) hızında küresel deklanşöre sahip IR'ye duyarlı 1/3" CMOS sensöre sahip kompakt bir endüstriyel kamera kullanır. Kamera, arenanın yukarıdan aşağıya eksiksiz bir görünümünü sağlayan bir F1.6 geniş açılı lens ile donatılmıştır. Standart %100 kontrast ayarı kullanılarak sincaplar üzerinde yapılan ön görme keskinliği testleri, sincapların görme keskinliğinin donanımın çözünürlük sınırlarını aştığını ortaya koydu. Kurulumda kullanılan 23,8 inç full HD Düzlem İçi Geçiş ekranları yalnızca 1920 piksel genişliğinde bir çözünürlüğe sahiptir ve bu nedenle yazılım, maksimum 2 cyc/° uzamsal frekansla sabit kodlanmıştır. Karşılaştırma için, C57Bl / 6 farelerin görme keskinliği yaklaşık 0.3-0.5 cyc / ° 'dir. 2 cyc/°'de, her şerit ortalama 5.3 piksel genişliğindedir. 12°/sn dönüş hızı ve saniyede 60 kare hızıyla, desen kare başına 0,2° kayar, bu da tek tip piksel hızı varsayılarak kare başına 4,2 piksele eşdeğerdir. 2 cyc/° yakınındaki uzamsal frekanslarda, şerit deseni, örtüşmenin meydana gelebileceği çözünürlük sınırına yaklaşır ve desenin geriye doğru hareket ediyormuş gibi görünmesine neden olur. Bu artefaktı önlemek için yazılım, uzamsal frekansı 2 cyc/° ile sınırlamak için sabit kodlanmıştır.

Bu nedenle, sincaplar için keskinlik testini çok daha düşük bir kontrastta gerçekleştirdiğimiz bir protokol tasarladık. Sincapların çizgili deseni 2 döngü/°'de göremediği bir kontrast ayarı (%12,78) seçtik.

  1. Canlı video panelinde, hayvanın yeni ortama iyi uyum sağladığından ve daha az hareket etmeye ve sakinleşmeye başladığından emin olun.
    1. 2 cyc/°'de, her şerit ortalama 5.3 piksel genişliğindedir. Dönüş hızını 12°/s'ye ve saniyede 60 kare kare hızına ayarlayın; Desen, tekdüze piksel hızı varsayılarak kare başına 4,2 piksele eşdeğer olacak şekilde kare başına 0,2° kayar. Uzamsal frekansları 2 cyc/° yakınına ayarlayın, böylece şerit deseni, örtüşmenin meydana gelebileceği çözünürlük sınırına yaklaşır ve desenin geriye doğru hareket ediyormuş gibi görünmesine neden olur. Bu artefaktı önlemek için, yazılımı uzamsal frekansı 2 cyc/° ile sınırlayacak şekilde kodlayın.
      NOT: Sincaplar için, keskinlik testini çok daha düşük bir kontrastta gerçekleştirdiğimiz bir protokol geliştirdik. Sincapların çizgili deseni 2 döngü/°'de göremediği bir kontrast ayarı (%12,78) seçtik.
  2. Ek Kodlama Dosyasını İndirin 3. OptoDrum yazılımını açın.
  3. Ayarlar sekmesi altında, Ayarları İçe Aktar'a tıklayın. Ek kodlama dosyasını yükleyin 3.
  4. Ayarlar sekmesi altında, Arka plan eşiği uzaklığını 17, minimum hayvan boyutunu [px] 30 ve maksimum kuyruk genişliğini [boyutun %'si] 1 olarak ayarlayın.
  5. Kamera ayarları altında, Videoyu Ters Çevir ve Manuel Kamera kontrolünü işaretlemeden ve IR Işığı Kapalı bırakın.
  6. Tüpün açıklığının dışına eğilirse sincabı yerleştirmek için izlenecek ilgili bölgenin konumunu ve boyutunu genişletin. Önerilen değerler şunlardır: Konum: X: 359, Y: 237, Boyut: X: 570, Y: 455. Yanlış pozitiflere yol açabileceğinden, ROI'yi Uyarıcılar ekranının üzerine uzatmayın.
  7. Üst panelden Oturum Yapılandırması'nı seçin (Şekil 2A).
    1. Merdiven için, tahmini uzamsal keskinliği aşağıdaki gibi ayarlayın. Beklenen keskinliği 1.800 cyc / ° (648 döngü) olarak ayarlayın; optimum uyaran çözünürlüğünü 0,5 cyc/° (180 döngü) olarak ayarlayın; Ölçüm Çözünürlüğünü 0.100 Cyc/° (36 döngü) olarak ayarlayın.
    2. Merdiven için gerekli onay sayısını aşağıdaki gibi ayarlayın. Başarısız denemeler için 3 olarak ayarlayın; Başarılı denemeler için 2 olarak ayarlayın.
      NOT: Yanlış pozitif onayların oluşumunu daha da azaltmak için başarılı denemelerin sayısı artırılabilir. Bununla birlikte, bu platformun ve değiştirilmiş işleme tünelinin kullanılmasıyla, hata oranı kabul edilebilir derecede düşük kalmaktadır. Bunun başlıca nedeni, sincapların göreceli durgunluğu ve görsel olarak uyarılan uyaranların ortaya çıkardığı hareketlerin yanı sıra dönme baş hareketlerinin seyrekliğidir.
  8. Merdiven sekmesi altında (Şekil 2B), kenar yumuşatmayı genişliğe 3 piksel olarak ayarlayın ve sinüzoidali işaretlemeden bırakın.
  9. Test kriterleri için Kontrastı %12.78'de kilitleyin ve dönüş hızını 12 °/s'de kilitleyin.
    NOT: %12.78 kontrast ayarında, sincapların uzamsal keskinliği yaklaşık 1.5-1.8 cyc/° ile sınırlıdır. Artık maksimum donanım ayarlarını aşmayan bu yapılandırma, hastalık veya yaralanmaya yanıt olarak uzamsal keskinliğin değerlendirilmesini sağlar.
  10. Üç parametreden ikisi kilitlendiğinde, Parametreleri otomatik olarak ayarla seçeneği etkin hale gelir (artık gri renkte değildir). Parametreleri Otomatik Ayarla'nın yanındaki kutuyu işaretleyin.
  11. Görme bozukluğunun bir gözde mi yoksa her iki gözde mi beklendiğine bağlı olarak dönüş yönünü ayarlayın. Her göz için yalnızca temporal-nazal yöndeki hareketin izlemeyi ortaya çıkardığını unutmayın. Sonuç olarak, saat yönünün tersine (CCW) stimülasyonun normal yanıtları ortaya çıkarması beklendiğinden, saat yönünde (CW) stimülasyon kullanarak sol gözdeki yaralanmayı değerlendirin. Her iki gözde beklenen dejenerasyon veya yaralanma için, uyaranın her iki yönde rotasyonu kullanılabilir.
  12. Uyaranın sunumuna başlamak için Denemeyi Başlat'a tıklayın. Yukarıdaki kamera, hayvanların kafa hareketlerini kaydetmeye ve izlemeye başlayacaktır. Uyaran sunulurken, Açısal Hızların (kafa dönüşü), Parça Kalitesinin ve Skor parametrelerinin gerçek zamanlı olarak görüntülenmesi için Analiz Sekmesine tıklayın. Her uyaran sunumunun sonunda, yazılım otomatik olarak bir sonraki Cyc/°'ye ilerleyip ilerlemeyeceğini (yeşil onay işareti ile gösterilir), denemeyi tekrarlayıp tekrarlamayacağını veya Cyc/°'yi (kırmızı X ile gösterilir) azaltıp azaltmayacağını belirleyecektir.
  13. Kayıt sırasında, izleme yazılımı burun (kırmızı) ve kuyruk (yeşil) işaretlerini yanlış bir şekilde çevirirse, baş-kuyruk yönünü düzeltmek üzere manuel geçersiz kılmaya izin vermek için klavyede Ctrl tuşuna basın.
  14. Hayvan platformdan düşerse, Değerlendirmeyi Duraklat'a basarak veya Boşluk Çubuğuna tıklayarak denemeyi duraklatın. Taşıma tünelini platformdan çıkarın ve hayvanı platforma geri yerleştirmek için güvenli bir şekilde taşınması için kapakla birlikte kullanın. Hayvan hazır olduğunda, denemeye devam etmek için Değerlendirmeye Devam Et'e tıklayın.
  15. Tüm denemeler tamamlandıktan sonra, başarılı denemeleri yeşil ve başarısız denemeleri kırmızı olarak göstermek için Özet Sekmesine tıklayın. Yeşil daire içine alınmış deneme, %12.78'lik kontrast kullanılarak sincap için görme keskinliği eşiğini gösterir. Hayvanı dikkatli bir şekilde ev kafesine geri koyun.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Yazılım, mekansal frekans ayrım denemelerinde hayvanın performansı tarafından belirlenen görsel eşiği belirlediğinde OMR başarılı olarak kabul edilir. Spesifik olarak, eşik şu şekilde tanımlanır: belirli bir uzamsal frekansta (cyc/° cinsinden ölçülür) iki başarılı deneme, ardından bir sonraki yüksek uzamsal frekansta üç başarısız deneme. OMR, 13 çizgili yer sincapları (6-8 aylık) üzerinde, caydırıcı olmayan platform ve taşıma tüneli (Şekil 3B) ile karşılaştırmak için standart yuvarlak düz pl...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Kritik adımlar

Tünel Girişinin Kolaylaştırılması - Dikkate alınması gereken önemli bir nokta, sincapların akrilik dikdörtgen tünel için geçici bir kapak görevi görmesi için 3D baskılı muhafaza tertibatına ihtiyaç duymasıdır; onsuz, kolayca giremezler. Tesisimizde, 13 çizgili yer sincapları düzenli olarak kırmızı sıçan büyüklüğünde bir silindir (Uzunluk: 15.24 cm, Çap: 7.62 cm) ile barındırılmaktadır. 3D baskılı muhafazanın amacı, zenginleştirm...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Kiyoharu Miyagishima, Francisco Nadal-Nicolás, John Ball ve Wei Li, rekabet eden hiçbir finansal çıkar beyan etmediler. Thomas Munch, Striatech GmbH'nin Sahibi ve Araştırma ve Geliştirme Direktörüdür. Boris Benkner, Striatech GmbH'nin Kurucusu ve İcra Kurulu Başkanıdır.

Teşekkürler

Bu araştırma [kısmen] NIH, Ulusal Göz Enstitüsü'nün Intramural Araştırma Programı tarafından desteklenmiştir. Bu çalışma aynı zamanda Sağlık İşlerinden Sorumlu Savunma Bakan Yardımcısı Ofisi ve Savunma Sağlık Ajansı J9, Araştırma ve Geliştirme Direktörlüğü tarafından Ödül No'lu Vizyon Araştırma Programı aracılığıyla desteklenmiştir. (CDMRPL-18-0-VR180205). Görüşler, yorumlar, sonuçlar ve tavsiyeler yazara aittir ve Savunma Bakanlığı tarafından onaylanması gerekmez. Yazarlar, rd10 ve CX3CR1GFP/+ farelerini sağladığı için Dr. Wenxin Ma'ya, OMR ile kapsamlı tartışma ve teknik yardım için Dr. Haohua Qian'a (Görsel İşlev Çekirdeği, NEI, NIH), bileşen imalatında yardım için NIMH/NINDS/NICHD makine atölyesine ve 3D baskıya yardımcı olduğu için Charles King'e (NIH Kütüphanesi) teşekkür eder.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
12V Max Lityum-iyon Akülü Döner Alet TakımıDremel 8220 SerisiF0138220JAAkrilik Kare Tüpü kesmek ve cilalamak için.
https://www.dremel.com/us/en/p/8220-1-28-f0138220aa
6-0 KAPLI VİKRİL (polyglactin 910) SütürEtik SimgeJ670GGöz kapağını dikmek için.
https://www.ethicon.com/na/epc/code/j670g?lang=en-default
Şeffaf Renksiz Akrilik Kare Tüp (2" x 12")Kanal Plastik MerkeziRT-300161 SerisiŞeffaf dikdörtgen tünel (fare için).
https://www.canalplastic.com/products/clear-colorless-acrylic-square-tube
Şeffaf Renksiz Akrilik Kare Tüp (3" x 12")Kanal Plastik MerkeziRT-300168 SerisiŞeffaf dikdörtgen tünel (sincap için).
https://www.canalplastic.com/products/clear-colorless-acrylic-square-tube
DREMEL EZ SpeedClic: Plastik Kesme DiskleriDremelSC476 SerisiAkrilik Kare Boruyu kesmek için
F270 3D yazıcıStratasysPlatformların mühendislik sınıfı 3D modellerini yazdırmak için.
https://support.stratasys.com/en/printers/fdm-legacy/uprint
Fluriso (İzofluran)VetOne 502017Genel anestezi. İnhalasyon için Sıvı.
http://vetone.net/Default/GetFile?id=7dda0c60-45fa-e711-bf2e-0024e8785118
Ücretsiz CAD 1.0 Açık kaynaklı parametrik 3D modelleyici
Igor Pro yazılımı Sürüm 6.3.7.2WaveMetrics, IncGrafikleri çizmek için. https://www.wavemetrics.com/
Geleneksel Buharlaştırıcılar için Düşük Profilli Anestezi Maskeleri
  SomnoFlo için. Ekstra Büyük (300 g üzeri hayvanlar) 		Kent Bilimsel şirketiSOMNO-0804Genel anestezi sağlamak için.
https://www.kentscientific.com/products/low-profile-anesthesia-masks-for-somnosuite/
Windows için MakerBot Print sürüm 4.10.1.2056MakerBot Endüstrileri, LLCBaskı için parçaları yönlendirmek için yazılım
MakerBot Replicator Masaüstü 3D Yazıcı (5. nesil)MakerBot Endüstrileri, LLCMP05825Platformların 3D baskı prototip versiyonları için.
https://www.rnd-tech.com/product/makerbot-replicator-desktop-3d-printer-5th-gen/
Microsoft ExcelMicrosoftVerileri analiz etmek için elektronik tablo yazılımı. microsoft.com/en-us/microsoft-365/excel
Çok amaçlı deri iş eldivenleriSteiner EndüstrileriSPC02Sincapları idare etmek için.
https://www.steinerindustries.com/leather-palm/product/steiner-spc02-leather-palm-work-glove
OptoDrum ArtıSTRIA. TEKNOLOJİOptomotor refleksi (görme keskinliği ve kontrast duyarlılığı) ölçmek için ticari cihaz https://stria.tech/products/optodrum/ 
OptoDrum yazılımı Sürüm 1.7.3STRIA. TEKNOLOJİOptomotor refleksin otomatik ölçümlerini gerçekleştirmek için yazılım.
Peroxigard Hazır Kullanım (temizleyici/dezenfektan) PeroksigardPRTU242101Deneyler arasında platformu ve akrilik kare tüpü temizlemek/dezenfekte etmek için.
https://peroxigard.com/product-information/rtu/
Pureline M6000 Anestezi Makinesi
O2 Konsantratörlü		Penn Veteriner Tedarik A.Ş.SUPM6000Hayvan anestezisi için.
https://www.pennvet.com/customer/portal/catalog/home?urile=wcm:path%3APennVet+Catalog/Product+Catalog/SUPM6000/Pureline+M6000+Anesthesia+Mach+w_O2+Conc
uPrint SE Plus 3D yazıcıStratasysPlatformların mühendislik sınıfı 3D modellerini yazdırmak için.
https://www.makerbot.com/makerbot-print/
Beyaz opak MakerBot PLA Filament,
Replicator+ için Büyük Makara (0.9kg, 2lb)		MakerBot Endüstrileri, LLCMP05780Platformları 3D yazdırmak için filament.
https://store.ultimaker.com/3d-printer-materials/replicator-series-materials/makerbot-pla-material-large-spool-for-replicator
Farmakolojik tedavi
Neomisin ve Polimiksin B Sülfatlar
ve Basitrasin Çinko Oftalmik Merhem, USP		Bausch & LombRX-0069 SerisiOküler enfeksiyonları önlemek için üçlü oftalmik antibiyotik
Proparakain Hidroklorür %0,5Akorn17478-263-12Oftalmik damlatma için lokal anestezik

Kaynaklar

  1. Ferguson, R., Miyagishima, K. J., Nadal-Nicolas, F. M., Li, W. Characterizing the rod pathway in cone-dominated thirteen-lined ground squirrels. Front Ophthalmol. 3, 1271882(2023).
  2. Nadal-Nicolas, F. M., Miyagishima, K. J., Li, W. In search for the "idyllic" animal model to evaluate ocular pathologies and translate new therapies to improve human health. Neural Regen Res. 17 (12), 2697-2699 (2022).
  3. Xiao, X., et al. Establishing the ground squirrel as a superb model for retinal ganglion cell disorders and optic neuropathies. Lab Invest. 101 (9), 1289-1303 (2021).
  4. Yanoga, F., et al. Sildenafil citrate induced retinal toxicity-electroretinogram, optical coherence tomography, and adaptive optics findings. Retin Cases Brief Rep. 12 (Suppl 1), S33-S40 (2018).
  5. Drug-induced colour vision disorders. Prescrire Int. 21 (127), 126-128 (2012).
  6. Widengard, I., Mandahl, A., Tornquist, P., Wistrand, P. J. Colour vision and side-effects during treatment with methazolamide. Eye. 9 (Pt 1), 130-135 (1995).
  7. Benkner, B., Mutter, M., Ecke, G., Munch, T. A. Characterizing visual performance in mice: An objective and automated system based on the optokinetic reflex. Behav Neurosci. 127 (5), 788-796 (2013).
  8. Chang, K., Chen, J., Rajagopalan, A., Chen, D. F., Cho, K. S. Testing visual function by assessment of the optomotor reflex in glaucoma. Methods Mol Biol. 2858, 219-227 (2025).
  9. Mui, A. M., et al. Daily visual stimulation in the critical period enhances multiple aspects of vision through bdnf-mediated pathways in the mouse retina. PLoS One. 13 (2), e0192435(2018).
  10. Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system. Invest Ophthalmol Vis Sci. 45 (12), 4611-4616 (2004).
  11. Shi, C., et al. Optimization of optomotor response-based visual function assessment in mice. Sci Rep. 8 (1), 9708(2018).
  12. Kretschmer, F., Tariq, M., Chatila, W., Wu, B., Badea, T. C. Comparison of optomotor and optokinetic reflexes in mice. J Neurophysiol. 118 (1), 300-316 (2017).
  13. Kretschmer, F., Kretschmer, V., Kunze, V. P., Kretzberg, J. Omr-arena: Automated measurement and stimulation system to determine mouse visual thresholds based on optomotor responses. PLoS One. 8 (11), e78058(2013).
  14. Kretschmer, F., Sajgo, S., Kretschmer, V., Badea, T. C. A system to measure the optokinetic and optomotor response in mice. J Neurosci Methods. 256, 91-105 (2015).
  15. Abdeljalil, J., et al. The optomotor response: A robust first-line visual screening method for mice. Vision Res. 45 (11), 1439-1446 (2005).
  16. Thaung, C., Arnold, K., Jackson, I. J., Coffey, P. J. Presence of visual head tracking differentiates normal sighted from retinal degenerate mice. Neurosci Lett. 325 (1), 21-24 (2002).
  17. Jecrois, E. S., et al. Treatment during a developmental window prevents nf1-associated optic pathway gliomas by targeting erk-dependent migrating glial progenitors. Dev Cell. 56 (20), 2871-2885.e6 (2021).
  18. Kandoi, S., Martinez, C., Merriman, D. K., Lamba, D. A. Characterization of retinal development in 13-lined ground squirrels. Transl Vis Sci Technol. 11 (11), 17(2022).
  19. Kryger, Z., Galli-Resta, L., Jacobs, G. H., Reese, B. E. The topography of rod and cone photoreceptors in the retina of the ground squirrel. Vis Neurosci. 15 (4), 685-691 (1998).
  20. Savignac, H. M., Dinan, T. G., Cryan, J. F. Resistance to early-life stress in mice: Effects of genetic background and stress duration. Front Behav Neurosci. 5, 13(2011).
  21. Hulliger, E. C., Hostettler, S. M., Kleinlogel, S. Empowering retinal gene therapy with a specific promoter for human rod and cone on-bipolar cells. Mol Ther Methods Clin Dev. 17, 505-519 (2020).
  22. Zhao, L., et al. Microglial phagocytosis of living photoreceptors contributes to inherited retinal degeneration. EMBO Mol Med. 7 (9), 1179-1197 (2015).
  23. Wang, T., et al. The pde6 mutation in the rd10 retinal degeneration mouse model causes protein mislocalization and instability and promotes cell death through increased ion influx. J Biol Chem. 293 (40), 15332-15346 (2018).
  24. Hwang, C. K., et al. Circadian rhythm of contrast sensitivity is regulated by a dopamine-neuronal pas-domain protein 2-adenylyl cyclase 1 signaling pathway in retinal ganglion cells. J Neurosci. 33 (38), 14989-14997 (2013).
  25. Merriman, D. K., Lahvis, G., Jooss, M., Gesicki, J. A., Schill, K. Current practices in a captive breeding colony of 13-lined ground squirrels (Ictidomys tridecemlineatus). Lab Anim. 41 (11), 315-325 (2012).
  26. Li, W. Ground squirrel - a cool model for a bright vision. Semin Cell Dev Biol. 106, 127-134 (2020).
  27. Gudapati, K., et al. Behavioral assessment of visual function via optomotor response and cognitive function via y-maze in diabetic rats. J Vis Exp. (164), e61806(2020).
  28. Stojcev, M., Radtke, N., D'amaro, D., Dyer, A. G., Neumeyer, C. General principles in motion vision: Color blindness of object motion depends on pattern velocity in honeybee and goldfish. Vis Neurosci. 28 (4), 361-370 (2011).
  29. Sajdak, B. S., et al. Noninvasive imaging of the tree shrew eye: Wavefront analysis and retinal imaging with correlative histology. Exp Eye Res. 185, 107683(2019).
  30. Okawa, H., et al. Optimal processing of photoreceptor signals is required to maximize behavioural sensitivity. J Physiol. 588 (Pt 11), 1947-1960 (2010).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

G rme Keskinli iKontrast Duyarl lAversif Olmayan TutuG rsel E ikKonu G rsel SistemiDavran sal De erlendirmeBa Takibi
Yer sincaplarında optomotor refleksin kaydedilmesini sağlayan caydırıcı olmayan hayvan kısıtlaması
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.