Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Tümör Mikroçevresinin PET Görüntülemesi için Bir Sentez Modülünde [68Ga] Ga-3BP-3940'ın Otomatik Hazırlanması

1.7K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/68356

⸱

25 Nisan 2025

 ,  ,  , 
1Nuclear medicine department, Institut régional du Cancer de Montpellier (ICM), University of Montpellier, 2IBMM, University of Montpellier, CNRS, ENSCM

Bu makalede

Özet

Bu araştırma, fibroblast aktivasyon proteininin PET görüntülemesi için GAIA V2 sentezleyici ile [68Ga] Ga-3BP-3940 üretimi için otomatik süreci açıklamaktadır. Üç test partisi üzerinde gerçekleştirilen kalite kontrol testlerinin sonuçları da sunulmaktadır.

Özet

Tümör mikroçevresinin pozitron emisyon tomografisi görüntülemesi için fibroblast aktivasyon proteinini hedefleyen bir moleküler görüntüleme probu olan 3BP-3940'ın otomatik galyum-68 radyo-işaretlemesi için GAIA sentez modülünde hızlı ve verimli bir yöntem geliştirilmiştir. Reaksiyon koşulları, asetat tamponu (nihai konsantrasyon: 0.1 M), bir anti-radyoliz ajanı olarak metiyonin (nihai konsantrasyon: 5.4 mg / mL) ve 30 μg 3BP-3940, 98 ° C'de 8 dakika ısıtma ile içeriyordu. Yüksek saflıkta radyoaktif işaretli bir ürün elde etmek için bir C18 kartuşu üzerinde son bir saflaştırma adımı gerekliydi. Buna karşılık, jeneratör tarafından üretilen 68Ga, bir katyon değişim kartuşu üzerinde bir konsantrasyon adımı olmadan doğrudan kullanıldı. Üç doğrulama partisinin üretimi, yöntemin güvenilirliğini doğruladı ve hem radyo-HPLC (% 99.1 ± % 0.1) ± radyo-TLC (% 99.2 ± 0.1) ile yüksek radyokimyasal saflıkta (RCP) 22.3 0.6 dakikada [68Ga]Ga-3BP-3940'ın sentezine izin verdi. Radyo-HPLC ile ölçülen RCP değerlerine dayanan ortalama radyokimyasal verim %74.4 ± %3.3 idi. Radyoaktif işaretli ürünün stabilitesi, hazırlandıktan sonra 4 saate kadar gösterilmiştir. Bu protokol, klinik bir ortama kolayca aktarılabilen [68Ga]Ga-3BP-3940'ın hazırlanması için güvenilir, hızlı ve verimli bir metodoloji sağlar.

Giriş

Son yıllarda, tümör mikroçevresinin (TME) hedef alınması, tanı ve tedavi uygulamalarında büyük ilgi görmüştür1. TME içindeki hücre tiplerinin, sinyal moleküllerinin ve hücre dışı matris (ECM) makromoleküllerinin bolluğu, çok çeşitli potansiyel moleküler hedefler sunar2. Yerleşik ve sızan konakçı hücreler arasında, kanserle ilişkili fibroblastlar (CAF'ler), normal fibroblastlardan fenotipik olarak farklı olan TME içinde farklı bir fibroblast alt kümesi oluşturur. CAF'ler, benzersiz hücresel ve moleküler özellikler sayesinde tümör ilerlemesi, metastazı, immün kaçış ve tedavi direncinde çok önemli roller oynar3. Bu mezenkimal hücreler, fibroblast aktivasyon proteininin (FAP) ekspresyonu ile işaretlenmiş aktive edilmiş bir fenotip sergiler. Moleküler olarak, CAF'ler karmaşık bir dizi sitokin, kemokin, büyüme faktörü (örneğin, TGF-β, IL-6 ve CXCL12) ve ECM proteinleri (örneğin, kollajen, fibronektin), ECM'yi yeniden şekillendiren ve pro-tümörjenik bir ortamı teşvik eden4.

CAF zarının hücre dışı yüzeyinde aşırı eksprese edilen ve lokalize olan oldukça spesifik bir protein olan FAP, özellikle nükleer tıp ve radyofarmasötik uygulamalar için güvenilir bir moleküler hedefin tüm özelliklerini gösterir5. Bu bağlamda, bir DOTA grubu ile işlevselleştirilen FAP'ın kinolin bazlı küçük moleküllü inhibitörleri (FAPI) geliştirilmiş ve hızlı bir şekilde klinik kullanıma sunulmuştur 6,7,8. Spesifik olarak, pozitron emisyon tomografisi (PET) görüntüleme için FAPI-04 ve FAPI-46, galyum-68 (β+ yayıcı, t1/2 = 68 dakika) ile radyoaktif olarak işaretlenmiştirfibrotik hastalıklar, kardiyoloji ve onkoloji 8,9, özellikle [18 F]florodeoksiglukozun ([18F]FDG) sınırlı faydaya sahip olduğu kanserler için10. Bununla birlikte, onkoloji ve malign olmayan hastalıkların görüntülenmesine katkıları yadsınamaz olsa da, küçük moleküllü FAPI'ler, özellikle sağlıklı dokunun istenmeyen ışınlanmasına yol açabilen suboptimal intratümöral kalma süreleri nedeniyle, hedefe yönelik radyonüklid tedavi (TRT) uygulamaları için belirli sınırlamalar sergilemektedir11. Bu sorunu ele almak için, çok değerlikli ligandların 11,12 tasarımı veya kısa yarı ömürlere sahip terapötik radyonüklidlerinkullanımı 13,14,15 gibi çeşitli stratejiler araştırılmıştır. FAP için yüksek afiniteye sahip ve yüksek oranda hücre içselleştirmesini tetikleyen yeni moleküler iskeleler de geliştirilmiştir.

Bunlardan biri psödopeptit türevi FAP-2286'dır. Siklize edilmiş ve bir 1,3,5-benzentrimetatiol parçası16 ile bir DOTA şelatörüne bağlanmış bir 7-amino asit dizisi içerir. İnsanlarda yapılan ilk bir çalışma, [68Ga]Ga-FAP-2286'nın [68Ga]Ga-FAPI-46'ya benzer bir biyodağılım profili sergilediğini ve karaciğer, böbrekler ve kalpte biraz daha yüksek fizyolojik alım olduğunu gösterdi17. Bu çalışmada, başta boyun, karaciğer, mide, pankreas, yumurtalık ve yemek borusu kanserleri olan 64 hastaya, kanser evrelemesi veya nüksün tespiti için [68Ga]Ga-FAP-2286 ile PET görüntüleme uygulandı: [68Ga]Ga-FAP-2286 alımı, primer tümörlerde, lenf nodu metastazlarında ve uzak metastazlarda [18F]FDG'den önemli ölçüde daha yüksekti, bu da görüntü kontrastını ve lezyon tespit edilebilirliğini artırdı. Tüm primer tümörler [68Ga]Ga-FAP-2286 PET/BT ile görülebilirken, [18F]FDG PET/BT lezyonların neredeyse 'sini kaçırdı. İlgili lenf nodları için, tespit oranları [68Ga] Ga-FAP-2286 ile ve ayrıca kemik ve viseral metastazlar için daha yüksekti. Çeşitli kanser hastalıkları olan 21 hastadan oluşan daha küçük bir grupta yapılan bir başka çalışmada, [68Ga]Ga-FAP-228618'in tanısal etkinliğini yansıtan bu görüntüleme ajanının mükemmel duyarlılığı da gösterilmiştir. Daha spesifik çalışmalar, ürotelyal veya akciğer kanseri gibi tek bir kanser türüne odaklanmış ve klinik moleküler görüntüleme için [68Ga]Ga-FAP-2286'nın yüksek potansiyelini bir kez daha vurgulamıştır 4,5. Tedavi ile ilgili olarak, bir ön çalışma, çeşitli progresif, metastatik kanserleri olan 11 hastada lutesyum-177 (β-yayıcı, t1/2 = 6.7 d) ile radyoaktif işaretli FAP-2286'nın kullanımını araştırdı19. Çoğu hastaya 8 hafta arayla iki tedavi döngüsü verildi ve döngü başına ortalama uygulanan doz 5.8 ± 2.0 GBq [177Lu]Lu-FAP-2286 idi. İlaç, kemik metastazlarında yaklaşık 44 saatlik etkili bir yarılanma ömrü ile uzun süreli intratümöral retansiyon gösterdi. Kabul edilebilir yan etkiler göz önüne alındığında, bu bulgular daha büyük ölçekli klinik çalışmaların yolunu açtı: [177Lu]Lu-FAP-2286'nın güvenliği ve etkinliği şu anda Novartis (NCT04939610)7,8 tarafından desteklenen faz 1/2 LuMIERE klinik çalışmasında değerlendirilmektedir. Literatürdedaha küçük ölçekli araştırma protokolleri belgelenmiştir 9,20 ve bu TRT'nin etkinliğini ve mükemmel tolere edilebilirliğini gösteren çok sayıda vaka raporu 21,22,23,24,25,26 yayınlanmıştır.

FAP-2286 üzerinde yapılan minimal yapı değişiklikleri, optimize edilmiş analog 3BP-3940'a yol açtı (Şekil 1)27. Bu vektör molekülü ile ilgili bilimsel literatür sınırlı kalmakla birlikte, hem görüntüleme hem de terapötik uygulamalar için erken çalışmalar yapılmıştır. Bir ön rapor, çeşitli son dönem metastatik karsinomları olan 18 hastada [68Ga]Ga-3BP-3940'ın kullanımını açıklar ve bu radyofarmasötikin uygun bir PET görüntüleme ajanı olduğu sonucuna varır, mükemmel tümör-arka plan oranını ve çok düşük böbrek alımını vurgular28. Başka bir çalışmada, karaciğer metastazı olan tek bir pankreas kanseri hastası, PET görüntüleme için 150 MBq [68Ga]Ga-3BP-3940 aldı ve bu da primer tümör ve metastatik lezyonlarda yoğun tutulum gösterdi29. Aynı hasta daha sonra TRT için tek doz 9.7 GBq [177Lu]Lu-3BP-3940 aldı. Tedavi, yaşamsal belirtilerde veya biyolojik parametrelerde önemli bir değişiklik olmaksızın iyi tolere edildi. Farklı bir çalışma, 3BP-3940 kullanılarak teranostik bir yaklaşımın ilk insan sonuçlarını sundu: hastalar [68Ga] Ga-3BP-3940 PET görüntüleme ile seçildi ve daha sonra farklı izotoplarla (177Lu, 90Y veya 225Ac) etiketlenmiş 3BP-3940 aldı, tek başına veya tandem kombinasyonlarda (ör., 177Lu + 225Ac) 1-5 tedavi döngüsünde30. Sonuçlar arasında bir tam remisyon, dört kısmi remisyon, üç stabil hastalık ve 12 hastalık ilerlemesi vardı. Kohortun (n = 28) medyan genel sağkalımı TRT'nin başlangıcından itibaren 9 aydı.

figure-introduction-1
Şekil 1: [68Ga]Ga-3BP-3940'ın kimyasal yapısı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

FAP-2286 ve 3BP-3940 gibi deneysel radyofarmasötikler için 68Ga radyoetiketleme işlemi genellikle hazırlama adımını otomatikleştirmek için bir sentez modülü içerir. Özellikle, metot otomasyonu, proses sağlamlığını ve GMP uyumluluğunu sağlar ve manuel hazırlama yöntemlerine kıyasla operatörün radyasyona maruz kalmasını en aza indirir 31,32,33. Çoğu durumda, böyle bir protokol, ilgili deneysel radyofarmasötik34'ü üretmek için bir merkeze yetki vermeden önce, bir araştırma tıbbi ürün dosyasının (IMPD) bir parçası olarak düzenleyici makamlar tarafından beklenir. Bugüne kadar, anti-FAP psödopeptitlerinin otomatik 68Ga radyo-işaretlemesi hakkında çok az ayrıntılı bilgi literatürdemevcuttur 29,35,36,37,38. Ayrıca, rapor edilen veriler genellikle yalnızca belirli bir sentezleyici modeli için geçerlidir. Kullanılan 68Ga jeneratör tipi, ticari olarak mevcut farklı çözümler, otomatik radyoetiketleme koşulları üzerinde doğrudan bir etkiye sahip olabilen HCl'de (genellikle 0,1 M) belirli hacimlerde 68Ga3+ elüat ile karakterize edildiğinden, belirli özgüllükler de getirebilir.

Bu bağlamda, GAIA V2 sentez modülünü kullanarak 68Ga ile psödopeptid 3BP-3940'ın hızlı ve verimli otomatik radyo-etiketlemesi için ayrıntılı bir protokol sunuyoruz. Bu sentezleyici, sıvı akışını kontrol etmek için peristaltik bir pompaya bağlı, her biri beş manifolddan oluşan üç rampadan oluşan bir boru setinin kullanımına dayanır. Ayrıca, reaksiyon ortamı ısıtması için bir flakon fırınına, birkaç radyoaktivite probuna ve sistem içindeki bu parametreleri izlemek için bir basınç sensörüne sahiptir. Diğer bazı modeller kadar yaygın olmasa da, bu otomat merkezimizde rutin olarak kullanılmakta ve giderek artan sayıdatesise kurulmaktadır 31,39,40,41,42,43,44. Bu çalışmada 68Ga elüat ön saflaştırılmadan bir GALLIAD 68 Ge/68Ga jeneratörü kullanılmıştır. Bu yöntem, [68Ga]Ga-3BP-3940 üretimi için sağlam, hızlı ve kullanışlı bir çözüm sunmak üzere tasarlanmıştır ve ayrıca radyoetiketleme sırasında operatörler için radyasyon korumasını optimize eder. Bu aynı zamanda, bu spesifik sentezleyici modelinde ve bu kadar ayrıntılı olarak rapor edilen bu radyofarmasötik için ilk hazırlık protokolüdür.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

NOT: Bu protokol radyoizotoplarla çalışmayı içerir. Bu prosedürü uygulayan herkes, mühürsüz radyoaktif maddelerin kullanımı konusunda uygun şekilde eğitilmiş olmalı ve kurumlarının radyasyon güvenliği görevlisinden onay almalıdır. Otomatik sentezleyici, belirlenmiş korumalı bir sıcak hücreye yerleştirilmelidir. Radyoaktif malzemeleri içeren herhangi bir manuel prosedür de korumalı bir sıcak hücrede veya uygun radyasyon kalkanının arkasında gerçekleştirilmelidir.

1. Reaktiflerin hazırlanması

NOT: [68Ga]Ga-3BP-3940'ın otomatik üretimi için gerekli reaktifler (Malzeme Tablosuna bakınız) bir radyofarmasötik hazırlama ünitesinde (GMP derece C temiz oda) hazırlanmıştır. Reaktifler herhangi bir sırayla ve sentezden 2 saat öncesine kadar hazırlanabilir.

  1. Tampon çözeltisinin hazırlanması (sodyum asetat 0.8 M)
    1. Aşağıdaki hammaddeyi edinin: sodyum asetat trihidrat EMPROVE API Ph Eur, BP, JP, USP, FCC, E262.
    2. Doğru şekilde tanımlanmış steril bir kapta (örneğin, mikrosantrifüj tüpü, 5 mL), hassas bir terazi kullanarak 544.32 mg'a yakın tam bir sodyum asetat trihidrat kütlesini tartın.
    3. Kalibre edilmiş bir mikropipet ve steril koniler kullanarak, sodyum asetatı 5 mL'ye yakın bir enjeksiyon için su hacminde (WFI) çözündürün, böylece WFI aşağıda açıklandığı gibi olur.
      WFI hacmi = (tartılan tampon kütlesi x 5)/544.32
    4. Çözeltiyi vorteksleyin ve çözündürmeyi kolaylaştırmak için ultrasonik bir banyodan (40 kHz, ~ 1 dakika) geçirin.
    5. 21G iğne ile donatılmış 10 mL'lik bir şırınga kullanarak tampon çözeltisini geri çekin. Şırınga ile yeni bir iğne arasına 0.22 μm'lik bir filtre takın, ardından septumunun dezenfeksiyonundan sonra tampon çözeltisini doğrudan uygun şekilde tanımlanmış steril sızdırmaz bir şişeye (örn., TC-ELU 5) filtreleyin.
  2. Anti-radyoliz bileşik çözeltisinin hazırlanması (metiyonin 10 mg / mL)
    1. Aşağıdaki hammaddeyi elde edin: L-Metionin (Ph. Eur., USP) saf, ilaç sınıfı.
    2. Doğru şekilde tanımlanmış steril bir kapta (örneğin, 5 mL'lik mikrosantrifüj tüpü), hassas bir terazi kullanarak 50 mg'a yakın tam bir L-metiyonin kütlesini tartın.
    3. Kalibre edilmiş bir mikropipet ve steril koniler kullanarak, L-metiyonini 5 mL'ye yakın bir WFI hacminde çözündürün, böylece WFI aşağıda açıklandığı gibi olur.
      WFI hacmi = (tartılan tampon kütlesi x 5)/50
    4. Çözeltiyi vorteksleyin ve çözündürmeyi kolaylaştırmak için ultrasonik bir banyodan (40 kHz, ~ 1 dakika) geçirin.
    5. 21G iğne ile donatılmış 10 mL'lik bir şırınga kullanarak metiyonin çözeltisini geri çekin. Şırınga ile yeni iğne arasına 0,22 μm'lik bir filtre takın, ardından septumunun dezenfeksiyonundan sonra çözeltiyi doğrudan uygun şekilde tanımlanmış steril sızdırmaz bir şişeye (örneğin, TC-ELU 5, Curium) filtreleyin.

2. Kalite kontrolleri için ekipmanın hazırlanması

  1. Nihai ürünün pH kontrolü
    1. Uygun bir koruyucu kalkanın arkasına, nihai ürünün daha sonra kontrol edilmesi için bir pH kağıdı şeridi yerleştirin.
  2. Radyo-TLC ile radyokimyasal saflık kontrolü
    1. Uygun mobil fazları içeren iki TLC geçiş tankı hazırlayın. Mobil faz A: sitrat tamponu 0.1 M pH 4 suda, [68Ga]Ga-3BP-3940 için beklenen Rf = 0-0.2 ve serbest 68Ga3+ için Rf = 0.8-1. Mobil faz B: 1: 1 su ve metanol (v / v) karışımında 1 M amonyum asetat tamponu, [68Ga] galyum kolloidleri için beklenen Rf = 0-0.2 ve [68Ga] Ga-3BP-3940 için Rf = 0.8-1.
    2. Uygun bir koruyucu kalkanın arkasında, nihai ürünün RCP'sinin daha sonraki kontrolü için iki TLC migrasyon tankını iki iTLC-SG plakasının yanına yerleştirin.
    3. Radyokromatografı açın ve ilgili edinme yazılımını işletim bilgisayarında açın. Gerçekleştirilecek ilk analiz için kimlik bilgilerini önceden girin.
  3. Radyo-HPLC ile radyokimyasal saflık kontrolü
    1. Analiz için gerekli olan kolon modelinin (C18 ACE Eşdeğerliği) sistem üzerinde kurulu olduğunu kontrol ediniz.
    2. HPLC için taze mobil faz hazırlayın, yani HPLC +% 0.1 TFA (çözücü A) ve asetonitril +% 0.1 TFA (çözücü B) için su. Solvent A ve solvent B şişelerini radyo-HPLC üzerindeki ilgili hatlara bağlayın.
    3. İşletim bilgisayarını açın ve kontrol yazılımına bağlanın.
    4. Gerekirse, pompa modülündeki tahliye vanasını açın ve analiz için kullanılacak hatları (yani A hattı ve B hattı) boşaltın. Bu işlemden sonra tahliye vanasını kapatın.

figure-protocol-1

figure-protocol-2


  3. figure-protocol-3

figure-protocol-4



Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

GAIA modülünde geliştirilen sentez işlemi, 3BP-3940'ın 21-22 dakikada hızlı bir şekilde 68Ga radyo-etiketlenmesine izin verir. Bu protokol, 0,1M HCl'de 1,1 mL 68 Ga elüat üreten farmasötik sınıf 68Ge/68Ga jeneratör GALLIAD ile çalışmak üzere tasarlanmıştır. Reaksiyon tamponunun hacmi ve molaritesi, optimum radyoetiketleme45 için gerekli olan 3.5 ile 4 arasında bir reaksiyon pH'ı elde etmek için bu asit miktarına göre ince bir şekilde ayarlandı. Bu nedenl...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu çalışma, bir GAIA modülü ve bir GALLIAD jeneratörü kullanarak [68Ga]Ga-3BP-3940'ın sentezi için GMP uyumlu bir otomatik hazırlama protokolü sunmaktadır. Bu yöntem, klinik PET görüntülemesi için PSMA ligandları44 ve diğer FAP inhibitörleri 43,46 gibi vektörlerin galyum-68 radyo-işaretlemesi için merkezimizde kullanılan protokollerden hafif modifikasyonlarla uyarlanmıştır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların, bu çalışmayla ilgili olarak ifşa edilecek gerçek veya algılanan bir çıkar çatışmasına yol açacak hiçbir ticari ortaklığı veya finansman kaynağı yoktur.

Teşekkürler

Yazarlar, bu makalede sunulan radyoetiketleme reaksiyonlarının hazırlanmasındaki yardımları için Yasmine Soualy, Stéphane Renaud ve Élodie Gaven'e teşekkür eder.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
0.2 ve mikro filtrelerVWR514-0515Tampon ve antioksidan çözeltilerin ve nihai radyoetiketleme ürününün filtrasyonu için
HPLC için asetonitrilSigma Aldrich34851-2.5LRadyokimyasal saflığın HPLC kontrolü için
Amonyum asetatSigma Aldrich238074TLC kontrolü için mobil fazlardan birinin hazırlanması için
HPLC VWR için C18 kolonuEQV-3C18-1503Radyokimyasal saflığın HPLC kontrolü için
Kalibre edilmiş doz kalibratörü (CRC25)Capintec-Nihaiürünün ve modülün çeşitli bileşenlerinin radyoaktivitesini ölçmek için sentez sonrası
Sitrat tampon çözeltisi, pH 4Thermofisher258585000TLC kontrolleri için mobil faz
Eppendorf tüpü 5 mL BiopurSigma AldrichEP0030119479Tampon ve antioksidan çözeltilerin hazırlanması için
Uzatma hattı (30 cm)Vygon1159.03Jeneratörün boru setine bağlantısı için
Galyum-68 jeneratörIRE Elit-Yerinde[68Ga]galyum klorür üretimi için
Gama sayacı (Hidex AMG)Hidex-Yarıömür ve radyokimyasal saflık değerlendirmesi için
HPLC istasyonuShimadzu-Radyokimyasal saflığın HPLC kontrolü için
iTLC-SG plakalarıAgilentSGI0001Radyokimyasal saflığın TLC kontrolü için
L-metiyoninAppliChemA1340Antioksidan çözelti hazırlama için
Erkek/erkek adaptörVygon893.00Jeneratörün boru setine bağlantısı için
MethanolSigma Aldrich320390-1LTLC kontrolü için mobil fazlardan birinin hazırlanması için
İğneler (21G, Sterican)B Braun4657543BRadyoetiketleme öncesi çözelti transferleri için
pH kağıdıVWR85409.600Radyoetiketleme ürününün pH'ını test etmek için
Pipet 1000 & L (Gilson PIPETMAN)Fisher Scientific12346132-1000Hassas sıvı ölçümü ve transferi için
Pipet 200 & L (Gilson PIPETMAN)Fisher Scientific12326132-200Hassas sıvı ölçümü ve transferi için
Pipet Uçları, 100-1000 μ LCharles RiverD1000IWHassas sıvı ölçümü ve transferi için
Pipet Uçları, 2-200 μ LCharles RiverD200IWHassas sıvı ölçümü ve transferi için
RadyokromatografElysia-Raytest-Radyokimyasalsaflığın TLC kontrolü
için HPLC için RadyosensörElysia-Raytest-HPLCiçin radyokimyasal saflık kontrolü
Reaktifler kitiABXRT-101Etanol% 60, NaCl% 0.9, WFI torba, C18 kartuş, 0.2 ve mikro sağlar; terminal filtre, havalandırma iğneleri, terminal iğnesi ve atık flakon
Korumalı konteynerLemerPaxRadyoetiketleme ürününün radyasyon zayıflaması için
Tek kullanımlık plastik spatulaCorning3005Reaktiflerin hazırlanması için
Sodyum asetat trihidrat EMPROVESigma Aldrich1.28204Reaksiyon tamponu hazırlığı için
Steril sızdırmaz şişeler (cam tipi 1)CuriumTC-ELU-5Tampon, antioksidan ve radyoetiketleme çözeltilerinin son şartlandırılması için
Steril boru setiABXRT-01-H[68Ga]Ga-3BP-3940'ın otomatik sentezi için
B Sulama için steril suBraun0082479ETLC kontrolü için mobil fazlardan birinin hazırlanması için
Sentez modülü (GAIA)Elysia-Raytest-[68Ga]Ga-3BP-3940
Şırınganın otomatik sentezi için (1 mL, düşük ölü hacimli)B Braun9166017VNaCl'de tampon koşullandırma ve metiyonin ilavesinde peptit için %0.9
Şırıngalar (10 mL)Becton Dickinson309649NaCl %0.9 metiyonin ve şartlandırma
Şırıngaları (3 mL)içinBecton Dickinson309658Metiyonin ve etanol için %60 şartlandırma
TLC göç tanklarıFisher Scientific50-212-281Radyokimyasal saflığın TLC kontrolü için
Trifloroasetik asit (HPLC için uygun)Sigma Aldrich302031-100MLRadyokimyasal saflığın HPLC kontrolü için
Gama sayacı için tüpler-Yarı ömür ve radyokimyasal saflık tahlillerinin hazırlanması için
Ultrasonik banyoSelecta3000683Sonikasyon için hazırlanan çözeltiler
Vektör molekülü (3BP-3940)MedChemExpressHY-P10131 ve nbsp;Radyoaktif işaretli vektör molekülü
Cam uçlu HPLC için flakonSigma Aldrich29385-U ve SU860066Radyokimyasal saflığın HPLC kontrolü için
Vorteks karıştırıcıVWR444-5900PHazırlanan çözeltileri karıştırmak için
HPLC için suSigma Aldrich34877-2.5L-MRadyokimyasal saflığın HPLC kontrolü için
Enjeksiyon için su, 10 mL şişelerAguettan34009 370 641 0 1 Çözümleriçin hazırlık

Kaynaklar

  1. Xiao, Y., Yu, D. Tumor microenvironment as a therapeutic target in cancer. Pharmacol Ther. 221, 107753(2021).
  2. Zhang, L., et al. Targets of tumor microenvironment for potential drug development. MedComm Oncol. 3 (1), e68(2024).
  3. Fouillet, J., Torchio, J., Rubira, L., Fersing, C. Unveiling the Tumor Microenvironment Through Fibroblast Activation Protein Targeting in Diagnostic Nuclear Medicine: A Didactic Review on Biological Rationales and Key Imaging Agents. Biology. 13 (12), 967(2024).
  4. Chen, Y., McAndrews, K. M., Kalluri, R. Clinical and therapeutic relevance of cancer-associated fibroblasts. Nat Rev Clin Oncol. 18 (12), 792-804 (2021).
  5. Lindner, T., et al. Targeting of activated fibroblasts for imaging and therapy. EJNMMI Radiopharm Chem. 4 (1), 16(2019).
  6. Jansen, K., et al. Extended structure-activity relationship and pharmacokinetic investigation of (4-quinolinoyl)glycyl-2-cyanopyrrolidine inhibitors of fibroblast activation protein (FAP). J Med Chem. 57 (7), 3053-3074 (2014).
  7. De Decker, A., et al. Novel Small Molecule-Derived, Highly Selective Substrates for Fibroblast Activation Protein (FAP). ACS Med Chem Lett. 10 (8), 1173-1179 (2019).
  8. Van Rymenant, Y., et al. In Vitro and In Situ Activity-Based Labeling of Fibroblast Activation Protein with UAMC1110-Derived Probes. Front Chem. 9, 640566(2021).
  9. Lindner, T., et al. Development of Quinoline-Based Theranostic Ligands for the Targeting of Fibroblast Activation Protein. J Nucl Med. 59 (9), 1415-1422 (2018).
  10. Guglielmo, P., et al. Head-to-Head Comparison of FDG and Radiolabeled FAPI PET: A Systematic Review of the Literature. Life. 13 (9), 1821(2023).
  11. Ora, M., et al. Fibroblast Activation Protein Inhibitor-Based Radionuclide Therapies: Current Status and Future Directions. J Nucl Med. 64 (7), 1001-1008 (2023).
  12. Zhao, L., et al. Synthesis, Preclinical Evaluation, and a Pilot Clinical PET Imaging Study of FAPI Dimer. J Nucl Med. 63 (6), 862-868 (2022).
  13. Ferdinandus, J., et al. Initial clinical experience with radioligand therapy for advanced stage solid tumors: a case series of nine patients. J Nucl Med. 63 (5), 727-734 (2021).
  14. Rathke, H., et al. Two Tumors, One Target: Preliminary Experience With 90Y-FAPI Therapy in a Patient With Metastasized Breast and Colorectal Cancer. Clin Nucl Med. 46 (10), 842-844 (2021).
  15. Fendler, W. P., et al. Safety and Efficacy of 90Y-FAPI-46 Radioligand Therapy in Patients with Advanced Sarcoma and Other Cancer Entities. Clin Cancer Res. 28 (19), 4346-4353 (2022).
  16. Zboralski, D., et al. Preclinical evaluation of FAP-2286 for fibroblast activation protein targeted radionuclide imaging and therapy. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 49 (11), 3651-3667 (2022).
  17. Pang, Y., et al. PET Imaging of Fibroblast Activation Protein in Various Types of Cancer Using 68Ga-FAP-2286: Comparison with 18F-FDG and 68Ga-FAPI-46 in a Single-Center, Prospective Study. J Nucl Med. 64 (3), 386-394 (2023).
  18. Banihashemian, S. S., et al. [68Ga]Ga-FAP-2286, a novel promising theragnostic approach for PET/CT imaging in patients with various type of metastatic cancers. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 51 (7), 1981-1988 (2024).
  19. Baum, R. P., et al. Feasibility, Biodistribution, and Preliminary Dosimetry in Peptide-Targeted Radionuclide Therapy of Diverse Adenocarcinomas Using 177Lu-FAP-2286: First-in-Humans Results. J Nucl Med. 63 (3), 415-423 (2022).
  20. Loktev, A., et al. Development of Fibroblast Activation Protein-Targeted Radiotracers with Improved Tumor Retention. J Nucl Med. 60 (10), 1421-1429 (2019).
  21. Banihashemian, S. S., et al. The complete metabolic/molecular response to chemotherapy combined with [177Lu]Lu-FAP-2286 in metastatic breast cancer. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 51 (13), 4185-4187 (2024).
  22. Rao, Z., Zhang, Y., Liu, L., Wang, M., Zhang, C. [177Lu]Lu-FAP-2286 therapy in a case of right lung squamous cell carcinoma with systemic metastases. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 50 (4), 1266-1267 (2023).
  23. Yang, H., Liu, H., Zhang, Y., Zhang, Y., Chen, Y. Metastatic Lung Adenocarcinoma Received Combined 177Lu-FAP-2286 Radiation Therapy and Targeted Therapy. Clin Nucl Med. 49 (6), 569-571 (2024).
  24. Wan, Z., Wang, W., Chen, Y., Zheng, W., Huang, Z. 177Lu-FAP-2286 Therapy in a Patient With Metastatic Rhabdoid Meningioma. Clin Nucl Med. 49 (9), 879-881 (2024).
  25. Yang, H., Liu, H., Li, H., Zhang, Y., Chen, Y. 177Lu-FAP-2286 Therapy in a Metastatic Bone Malignant Solitary Fibrous Tumor. Clin Nucl Med. 49 (5), 472-474 (2024).
  26. Li, L., Yang, J., Peng, D., Zhang, Y., Chen, Y. 177 Lu-FAP-2286 Therapy in a Case of Recurrent Bladder Cancer With Multiple Metastatic Lesions. Clin Nucl Med. 48 (11), 1012-1014 (2023).
  27. Compounds comprising a fibroblast activation protein ligand and use thereof. US Patent. , US20230212549A1 https://patents.google.com/patent/US20230212549A1/en (2023).
  28. Jakobsson, V., et al. First-in-human study of a novel radiolabeled fibroblast activating protein (FAP)-targeted peptide 68Ga-FAP-3BP-3940 for PET/CT imaging in patients with solid tumors. J Nucl Med. 64 (supplement 1), P1615-P1615 (2023).
  29. Greifenstein, L., et al. 3BP-3940, a highly potent FAP-targeting peptide for theranostics - production, validation and first in human experience with Ga-68 and Lu-177. iScience. 26 (12), 108541(2023).
  30. Baum, R. P., et al. FAP-Targeted Radiopeptide Therapy using 177Lu-, 225Ac- and 90Y-labeled 3BP-3940 in Diverse Advanced Solid Tumors: First-in-Humans Results (Abstract P1612). J Nucl Med. 64 (supplement 1), P1612-P1612 (2023).
  31. Meisenheimer, M., Kürpig, S., Essler, M., Eppard, E. Manual vs automated 68Ga-radiolabelling-A comparison of optimized processes. J Labelled Comp Radiopharma. 63 (4), 162-173 (2020).
  32. Kleynhans, J., et al. Production of [68Ga]Ga-PSMA: Comparing a manual kit-based method with a module-based automated synthesis approach. J Labelled Comp Radiopharma. 63 (13), 553-563 (2020).
  33. le Roux, J., Rubow, S., Ebenhan, T. A comparison of labelling characteristics of manual and automated synthesis methods for gallium-68 labelled ubiquicidin. Appl Radiation Isotopes. 168, 109452(2021).
  34. Todde, S., et al. EANM guideline for the preparation of an Investigational Medicinal Product Dossier (IMPD). Eur J Nucl Med Mol Imaging. 41 (11), 2175-2185 (2014).
  35. Mueller, D., et al. Radiolabeling and Stability of FAP- Seeking Radiopharmaceuticals for Radio-Molecular Imaging and Therapy. J Nucl Med. 61 (supplement 1), 1129-1129 (2020).
  36. Greifenstein, L., et al. Radiolabeling of 3BP-3940 with 68Ga, 90Y, 177Lu and 225Ac for imaging and Peptide Targeted Radiotherapy (PTRT) (Abstract 2532). J Nucl Med. 63 (supplement 2), 2532-2532 (2022).
  37. Greifenstein, L., et al. Radiolabeling of 3BP-3940 with 68Ga, 90Y, 177Lu and 225Ac for imaging and Peptide Targeted Radiotherapy (PTRT) (Abstract P61). Nuklearmedizin. 62, P61(2023).
  38. Hörmann, A. A., et al. 68Ga]Ga-FAP-2286-Synthesis, Quality Control and Comparison with [18F]FDG PET/CT in a Patient with Suspected Cholangiocellular Carcinoma. Pharmaceuticals. 17 (9), 1141(2024).
  39. Lütje, S., et al. Optimization of Acquisition time of 68Ga-PSMA-Ligand PET/MRI in Patients with Local and Metastatic Prostate Cancer. PLoS One. 11 (10), e0164392(2016).
  40. Haendeler, M., et al. Biodistribution and Radiation Dosimetric Analysis of [68Ga]Ga-RM2: A Potent GRPR Antagonist in Prostate Carcinoma Patients. Radiation. 1 (1), 33-44 (2020).
  41. Daniel, T., Balouzet Ravinet, C., Clerc, J., Batista, R., Mouraeff, Y. Automated synthesis and quality control of [68Ga]Ga-PentixaFor using the Gaia/Luna Elysia-Raytest module for CXCR4 PET imaging. EJNMMI Radiopharm Chem. 8 (1), 4(2023).
  42. Rusu, T., et al. Fully automated radiolabeling of [68Ga]Ga-EMP100 targeting c-MET for PET-CT clinical imaging. EJNMMI Radiopharm Chem. 8 (1), 30(2023).
  43. Rubira, L., et al. 68Ga]Ga-FAPI-46 synthesis on a GAIA® module system: Thorough study of the automated radiolabeling reaction conditions. Appl Radiation Isotopes. 206, 111211(2024).
  44. Fouillet, J., et al. "One Method to Label Them All": A Single Fully Automated Protocolfor GMP-Compliant 68Ga Radiolabeling of PSMA-11, Transposable toPSMA-I&T and PSMA-617. Curr Radiopharm. 17 (3), 285-301 (2024).
  45. Nelson, B. J. B., Andersson, J. D., Wuest, F., Spreckelmeyer, S. Good practices for 68Ga radiopharmaceutical production. EJNMMI Radiopharm Chem. 7 (1), 27(2022).
  46. Rubira, L., Torchio, J., Fouillet, J., Vanney, J., Fersing, C. GMP-Compliant Automated Radiolabeling and Quality Controls of [68Ga]Ga-FAPI-46 for Fibroblast Activation Protein-Targeted PET Imaging in Clinical Settings. Chem Pharma Bullet. 72 (11), 1014-1023 (2024).
  47. Mueller, D., et al. Radiolabeling of DOTA-like conjugated peptides with generator-produced 68Ga and using NaCl-based cationic elution method. Nat Protoc. 11 (6), 1057-1066 (2016).
  48. Bauwens, M., Chekol, R., Vanbilloen, H., Bormans, G., Verbruggen, A. Optimal buffer choice of the radiosynthesis of 68Ga-Dotatoc for clinical application. Nucl Med Comm. 31 (8), 753-758 (2010).
  49. Kulprathipanja, S., Hnatowich, D. J. A method for determining the pH stability range of gallium radiopharmaceuticals. Int J Appl Radiation Isotopes. 28 (1-2), 229-233 (1977).
  50. Martins, A. F., et al. Spectroscopic, radiochemical, and theoretical studies of the Ga3+-N-2-hydroxyethyl piperazine-N'-2-ethanesulfonic acid (HEPES buffer) system: evidence for the formation of Ga3+ - HEPES complexes in (68) Ga labeling reactions. Contrast Media Mol Imaging. 8 (3), 265-273 (2013).
  51. European Directorate for the Quality of Medicines & Healthcare (EDQM). Gallium (68Ga) PSMA-11 injection. Eur Pharma 11.0. 3044, 1276-1277 (2021).
  52. European Directorate for the Quality of Medicines & Healthcare (EDQM). Gallium (68Ga) edotreotide injection. Eur Pharma 11.0. 2482, 1274-1276 (2022).
  53. Li, D., et al. Development of a fibroblast activation protein-targeted PET/NIR dual-modality probe and its application in head and neck cancer. Front Bioeng Biotechnol. 11, 1291824(2023).
  54. Koshkin, V. S., et al. Initial Experience with 68Ga-FAP-2286 PET Imaging in Patients with Urothelial Cancer. J Nucl Med. 65 (2), 199-205 (2024).
  55. De Blois, E., Sze Chan, H., Konijnenberg, M., De Zanger, R. A. P., Breeman, W. Effectiveness of Quenchers to Reduce Radiolysis of 111In- or 177Lu-Labelled Methionine-Containing Regulatory Peptides. Maintaining Radiochemical Purity as Measured by HPLC. Curr Topics Med Chem. 12 (23), 2677-2685 (2013).
  56. Larenkov, A., Mitrofanov, I., Pavlenko, E., Rakhimov, M. Radiolysis-Associated Decrease in Radiochemical Purity of 177Lu-Radiopharmaceuticals and Comparison of the Effectiveness of Selected Quenchers against This Process. Molecules. 28 (4), 1884(2023).
  57. Baudhuin, H., et al. 68Ga-Labeling: Laying the Foundation for an Anti-Radiolytic Formulation for NOTA-sdAb PET Tracers. Pharmaceuticals. 14 (5), 448(2021).
  58. Kaczorowska, K., Kolarska, Z., Mitka, K., Kowalski, P. Oxidation of sulfides to sulfoxides. Part 2: Oxidation by hydrogen peroxide. Tetrahedron. 61 (35), 8315-8327 (2005).
  59. Breeman, W. A. P., et al. Optimised labeling, preclinical and initial clinical aspects of CCK-2 receptor-targeting with 3 radiolabeled peptides. Nucl Med Biol. 35 (8), 839-849 (2008).
  60. Haskali, M. B. Automated preparation of clinical grade [68Ga]Ga-DOTA-CP04, a cholecystokinin-2 receptor agonist, using iPHASE MultiSyn synthesis platform. EJNMMI Radiopharm Chem. 4, 23(2019).
  61. Chen, J., et al. Synthesis, stabilization and formulation of [177Lu]Lu-AMBA, a systemic radiotherapeutic agent for Gastrin Releasing Peptide receptor positive tumors. Appl Radiation Isotopes. 66 (4), 497-505 (2008).
  62. Chatalic, K. L. S., et al. In Vivo Stabilization of a Gastrin-Releasing Peptide Receptor Antagonist Enhances PET Imaging and Radionuclide Therapy of Prostate Cancer in Preclinical Studies. Theranostics. 6 (1), 104-117 (2016).
  63. De Zanger, R. M. S., Chan, H. S., Breeman, W. A. P., De Blois, E. Maintaining radiochemical purity of [177Lu]Lu-DOTA-PSMA-617 for PRRT by reducing radiolysis. J Radioanal Nucl Chem. 321 (1), 285-291 (2019).
  64. Hörmann, A. A., et al. Automated Synthesis of 68Ga-Labeled DOTA-MGS8 and Preclinical Characterization of Cholecystokinin-2 Receptor Targeting. Molecules. 27 (6), 2034(2022).
  65. Breeman, W. A. P., Jong, M., Visser, T. J., Erion, J. L., Krenning, E. P. Optimising conditions for radiolabelling of DOTA-peptides with 90Y, 111In and 177Lu at high specific activities. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 30 (6), 917-920 (2003).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Galyum 68 RadyoetiketlemeOtomatik Sentez Mod lT m r Mikro evresi G r nt lemeFibroblast Aktivasyon ProteiniPET G r nt leme SondasRadyokimyasal Safl kC18 Kartu Safla t rmasRadyo HPLCRadyo TLCMetiyonin Stabilizasyonu
Tümör Mikroçevresinin PET Görüntülemesi için Bir Sentez Modülünde [68Ga] Ga-3BP-3940'ın Otomatik Hazırlanması
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.