Burada, gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR (qPCR) teknolojisi kullanılarak Mycobacterium tuberculosis ve ilaç direncini tespit etmek için bir protokol sunulmaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
* These authors contributed equally
Burada, gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR (qPCR) teknolojisi kullanılarak Mycobacterium tuberculosis ve ilaç direncini tespit etmek için bir protokol sunulmaktadır.
Tüberküloz (TB), savunmasız popülasyonları orantısız bir şekilde etkileyen önemli bir sağlık sorunudur. İlaca dirençli tüberkülozun ortaya çıkması ve yayılması küresel halk sağlığı için ciddi bir tehdit oluşturmaktadır. Mycobacterium tuberculosis (MTB) için smear mikroskobu ve kültür gibi geleneksel tanı yöntemlerinin önemli sınırlamaları vardır ve sıklıkla klinik tedavinin gecikmesine neden olur. Bu zorluğun üstesinden gelmek için, gerçek zamanlı floresan PCR'ye dayalı etkili bir tanı şeması geliştirilmiştir. Yüksek kaliteli MTB nükleik asitleri test numunelerinden ekstrakte edilebilir ve direnç durumu, önemli direnç bölgelerinde tanımlanabilir. Geleneksel yöntemlerle karşılaştırıldığında, bu yaklaşım tespit süresini sadece birkaç saate indirerek, hastanın ilk ziyaretinden kısa bir süre sonra enfeksiyon ve direnç durumunun belirlenmesini sağlar. Algılama hassasiyeti %85'i aşıyor ve özgüllük %95'e ulaşıyor. Bu non-invaziv teknoloji sadece hasta rahatsızlığını en aza indirmekle kalmaz, aynı zamanda düşük maliyeti ve yüksek verimliliği nedeniyle tabandan gelen sağlık kurumlarında doğru teşhisi de destekler. Genel olarak, yaklaşım TB teşhisinde önemli bir gelişmeyi temsil etmektedir.
Mycobacterium tuberculosis'in (MTB) neden olduğu kronik bir bulaşıcı hastalık olan tüberküloz (TB), ilk on küresel ölüm nedeni arasında yer almaktadır1. İlaca dirençli tüberküloz (DR-TB), tüberküloz kontrol çabaları için önemli bir zorluk teşkil etmektedir. Çin Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezi (Çin CDC) tarafından yayınlanan Tüberkülozsuz Topluluklar İnşa Etme Eylem Planı (2022-2027), bakteriyolojik olarak doğrulanmış tüm akciğer TB hastalarında erken ilaç direnci taramasına duyulan ihtiyacı vurgulamaktadır2. DR-TB tespit yeteneklerini geliştirmek, tanı zaman çizelgelerini kıs....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu araştırma, Sincan Üretim ve İnşaat Birlikleri Beşinci Bölüm Hastanesi Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır; Etik numarası LLWYH2025001'dir ve etik bir çatışma yoktur. Reaktifler ve kullanılan ekipman Malzeme Tablosunda listelenmiştir.
1. Örnek toplama
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışmada, 17 tüberküloz hastasından alınan balgam örneklerini test etmek için gerçek zamanlı floresan PCR ve erime eğrisi analizi kullanılmıştır. Ek olarak, 30 hastaya rifampisin direnç testi yapıldı ve 20 hastaya izoniazid ve etambutol direnci test edildi. Gerçek zamanlı floresan PCR yöntemi, Mycobacterium tuberculosis
&
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
İlaca dirençli Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) suşlarının küresel ölçekte ortaya çıkması, tüberküloz (TB) hastalarının tedavisini önemli ölçüde zorlaştırmıştır. Özellikle, çoklu ilaca dirençli (MDR) ve yaygın ilaca dirençli (XDR) tüberküloz, TB kontrolü için zorlu zorluklar oluşturmaktadır12. İlaç direncinin hızlı bir şekilde saptanması, uygun tedavi rejimlerinin tasarlanması, terapötik başarısızlığın önlenmesi ve dirençli suşların daha fazla ya.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.
Bu çalışma, Kolordu Tüberküloz Projesi'nden özel bir hibe ile finanse edildi.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Yüksek hızlı santrifüj | |||
| Lizis Tamponu | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| Mycobacterium tuberculosis Etambutol Direnci Mutasyon Tespit Kiti | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| Mycobacterium tuberculosis Isoniazid Direnç Mutasyon Tespit Kiti | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| Mycobacterium tuberculosis Rifampisin Direnci Mutasyon Tespiti Ki | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| SLAN-96P Gerçek Zamanlı PCR Sistemi | Shanghai Hongshi Medical Technology Co., Ltd. | SLAN-96P | |
| Balgam İşleme Çözümü | Xiamen Zhishan Biotechnology Co., Ltd. | ||
| TopPette Pipetleyici |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu makale yayımlandı
Video yakında